EFFECTS OF GLUTAMATE ON SODIUM CHANNEL IN ACUTELY DISSOCIATED HIPPOCAMPAL CA1 PYRAMIDAL NEURONS OF RATS

Objective To observe the effects of glutamate on sodium channel in acutely dissociated hippocampal CA1 pyramidal neurons of rats.Methods Voltage-dependent sodium currents (INa) in acutely dissociated hippocampal CA1 pyramidal neurons of neonate rats were recorded by whole-cell patchclamp of the brain slice technique when a series of doses of glutamate (100-1000μmol/L) were applied.Results Different concentrations of glutamate could inhibit INa,and higher concentration of glutamate affected greater inhibitio...     

卵母细胞双电极电压钳技术的建立及其记录到的内源性外向电流*

目的：建立卵母细胞双电极电压钳记录技术。方法：建立双电极电压钳技术平台，并应用此平台，在去除滤泡膜的中国四川牛蛙卵母细胞上，记录内源性的外向离子电流。结果：卵母细胞孵育在正常ND96溶液中，将细胞膜钳制在-80 mV膜电位，给予一系列的去极化刺激可诱发出一个外向电流。在细胞外液中加入10 mM的TEA可阻断该电流80%以上，洗脱后电流幅值恢复至90%左右。将正常ND96溶液替换为无钙ND96溶液后，电流没有变化。结论：成功建立了卵母细胞双电极电压钳记录技术。去极化刺激在牛蛙卵母细胞上诱发出的外向电流为钾电流。     

试论精细化管理模式在高等院校实验室管理中的应用

随着科学技术的发展和高等教育办学规模的扩大,如何加强实验室的管理,运用科学手段进行管理,使之在新形势下与高等教育工作任务相适应,对充分发挥实验室在高等教学、科研中的作用,提高实验室的使用效益具有重要的意义。本文在剖析实验室管理的含义、原则、内容基础上,提出实验室精细化管理的内涵及其实施精细化管理的原则。     

槲皮素对人肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的激活作用

目的:观察槲皮素对人肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(KCa)的影响,以探讨槲皮素在分子水平扩张血管的作用机制.方法:选取需择期行腹部手术并且血压正常的患者14例,取肠系膜动脉小分支,用急性酶消化法获得单个肠系膜动脉平滑肌细胞.然后应用单通道细胞膜片钳技术观察不同浓度槲皮素对肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道开放概率(NPo)、电流幅度值(Am)、平均开放时间(To)、平均关闭时间(Tc)等各指标的影响.结果:在内面向外式方式下,随着浴液中槲皮素浓度的增高,通道NPo明显增高:槲皮素浓度100μmol/L时,NPo由用药前(即0 μmol/L)的0.028 62±0.011 99增高到0.147 03±0.058 17(P＜0.01);通道Am、To变化不大(P＞0.05);而通道Tc明显缩短:由用药前(477.650±376.650)ms缩短到(112.643±114.365)ms(P＜0.01).结论:槲皮素能直接激活人类血管平滑肌细胞KCa通道而实现降血压效应.     

人肠系膜血管平滑肌细胞BKCa通道在HEK293细胞上的表达方法研究

目的:本研究旨在HEK 293细胞系上成功表达人肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channels,BKCa),建立一种稳定高效表达人肠系膜血管平滑肌细胞BKCa的HEK 293细胞系方法,进一步揭示在工具细胞表达上的BKCa的基本特性,为以后的诸多实验提供参考价值.方法:应用基因工程技术构建人肠系膜血管平滑肌细胞BKCa通道基因表达载体,用脂质体转染法转染HEK 293细胞,建立了稳定高效表达BKCa通道的HEK 293细胞系的方法.结果:在HEK 293细胞系上表达的BKCa单通道电流的电导值为229.56±4.62 pS,具有电压依赖性,钙离子敏感性等特性;在HEK 293细胞系表达的BKCa全细胞宏观电流具有明显的电压依赖性和外向整流特性.结论:成功建立了一种在HEK293细胞系上表达的BKCa通道的实验方法,并成功记录到BKCa通道的单通道电流和全细胞宏观电流,且与天然细胞上BKCa通道电流特性基本一致.     

接触电极导管术中的漏电流问题探讨

通过心导管术采用接触电极引导MAP过程中,由于仪器设备等诸多因素,可造成对受试者的微电击,发生心室纤颤等严重后果。本文叙述了在实验条件下测试三种不同规格放大器通过接触电极对地产生漏泄电流以及对实验动物影响。在此基础上提出了一般     

膜片钳制技术及其在心血管研究中的应用

神经、肌肉、腺体、感官等器官和组织,在生命活动中发挥着重要的生理功能,其基础是这些组织的细胞在各种刺激作用下能产生电兴奋,这种电兴奋是由于细胞膜上的通道对各种离子的通透性变化的结果。因此,研究膜对各种离子的通透机制,阐明离子通道功能与结构的关系,有助于解释生物体的电现象和其它生命现象,同时,对于了解药物与离子通道的相互作用机理也具有重要的理论意义和广泛的应用前景。八十年代初发展起来的膜片钳制技术(patch clamp technique)为从分子水平上了解生物膜离子单通道的门控动力学特征及通透性、选择性等膜信息,提供了最直接的手段。这种技术的兴起与应用,使人们对细胞膜通道功能的认识进入了一个崭新的阶段。也是电生理研究方法的革命性突破。本文就对膜片钳的基本原理及在心血管研究中的应用作一简要综述。     

马桑内酯影响培养幼鼠心室肌细胞钙通道电流的初步研究

马桑内酯(coriaria lactone,CL)是从抗精神病中草药——马桑寄生中提取的有效成分,具有强烈的中枢神经兴奋及致痫作用。我们已有的研究表明,CL能提高神经元膜的兴奋性及增强兴奋性突触传递,而NMDA受体阻断剂Ketamine与电压依赖性钙通道阻滞剂Nifedipine均能有效地抑制CL所致大鼠的痫性脑电活动及行为表现,提示钙离子的内流增加是CL致痫作用的一个重要环节。朱寄天等曾观察到CL除其致痫作用外,还能诱发家兔出现多种类型的心律失常。为此,我们考虑利用培养幼鼠心室肌细胞来观察CL对钙通道的影响。     

急性心肌炎的高频心电图研究

使用国产前置放大器和 A/D、D/A 转换卡和 Doctor-852程序,按 Langner 方法记录分析59例病毒性心肌炎患者的高频心电图,并与60例正常人比较。患者组 QRS 波群6个导联切迹总数超过3个者38例(64.4%),显著高于对照组4例(6%;P<0.01);患者级 QRS 最高频率均值63.2Hz,显著高于对照组(42.1Hz;P<0.01)。从20至100Hz 频率段进行分段频率比较,患者组从40至100Hz 段的频率百分比较对照组增加5～17%,这些改变对诊断心肌炎患者心肌缺血有重要意义.