表达在HEK293细胞上的BKCa通道基本特性与动力学调控研究

目的构建稳定表达人血管平滑肌大电导钙激活钾通道(BKCa)的293细胞系,并研究其基本电生理学特征和动力学模型。方法通过脂质体(lipofectamine 2000)转染法转染BKCa表达质粒pcDNA3.1-BKα和(或)pIRES-BKβ1,筛选稳定表达的单克隆细胞系。使用膜片钳多种记录方式研究其基本电生理学特性,同时建立BKCa动力学研究模型。结果构建稳定转染BKCa通道α和(或)β1亚单位的HEK293细胞系,通过膜片钳能够记录到具有与天然细胞BKCa电生理学特性相似的电流,包括大电导特性[内面向外式构型下单通道电导为(216.38±3.55)pS]、电压依赖性、Ca2+依赖性、钾离子选择性和200nmol/L IbTX(BKCa特异性阻断剂)阻断;联合表达β1亚单位能够明显增加通道的开放时程。采用inside-out宏观电流记录方式可以记录到明显的尾电流。可以用于分析通道激活、去激活等动力学模型及药物动力学作用机制。结论成功构建稳定转染BKCa通道α和(或)β1亚单位的HEK293细胞系。膜片钳实验证明具有典型的BKCa电生理学特性,同时建立的细胞系可以很好的用于BKCa通道功能调控研究和动力学参数分析。     

阴虚证五心烦热与TNF-α IL-1β IL-6相关性的临床观察

目的：观察阴虚五心烦热与TNF-α、IL-1β、IL-6的相关性。方法：采用临床流调方法,选取慢性肾炎、糖尿病两种疾病的阴虚证有五心烦热组为研究对象,设阴虚无五心烦热组与非阴虚证有五心烦热组及无五心烦热组患者为对照组。结果：①血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量改变,阴虚证有五心烦热组最高,与该证无五心烦热组、非阴虚证有五心烦热组分别比较均有差异（P〈0.05、P〈0.05）,与非阴虚证无五心烦热组差异最显著（P〈0.01）;阴虚证无五心烦热组含量升高,与非阴虚证有五心烦热组和无五心烦热组比较均有差异（均P〈0.05）;非阴虚证有五心烦热组与非阴虚证无五心烦热症组比较有差异（P〈0.05）。②TNF-α、IL-1β、IL-6含量与阴虚证积分呈正相关（r=0.685,P〈0.05;r=0.573,P〈0.05;r=0.693,P〈0.05）。结论：TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高与阴虚证密切相关,对阴虚证辨证具有重要意义;TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高与阴虚证积分呈正相关,随阴虚发热程度的加重,IL-1水平也随之升高。说明TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高也可作为阴虚证轻重鉴别的参考指标;TNF-α、IL-1β、IL-6升高与五心烦热症具有相关性。     

原代培养猪冠脉平滑肌细胞的电压依赖和钙激活的钾通道

作者应用改良的细胞膜片钳制技术对原代培养的猪冠状动脉平滑肌细胞的电压依赖性和钙激活的钾通道的特性进行了研究。整个实验均在计算机的控制下进行,各种膜片中引导出的电流,通过膜片钳制放大器后,均输入至计算机进行采样、存贮和分析。结果显示:①这种通道活动呈明显的电压依赖性,随膜的去极化而激活,电流-电压关系     

加强微机开发应用 提高生理学科教学水平

当今,我们正处在一个科学技术飞跃发展的时代,而电子计算机的广泛应用是这个时代的重要标志。电子计算机在医学各个领域的渗透,对医学的发展和变革产生了深远的影响。为了适应变化着的新形势,四川省生理学会于1985年6月成立了“微机应用开发组”,经过两年来的努力工作,取得了一些积极成果,为在我省生理学专业普及微机应用创造了条件,     

正常家兔心率变异特点

目的:记录测定正常家兔在体和离体短程心率变异情况,探讨心脏自主神经功能的变化情况,为进一步研究家兔冠状动脉粥样硬化、冠脉痉挛时自主神经变化反映在心率变异性上的特点提供基础数据.方法:在体组用正交法记录胸前心电;离体组,采用兰氏(Langendorff)心脏灌流系统基础上,用正交悬浮电极法记录心电.采用Powerlab/8sp多道生理仪采集心电波.利用Chart模块对电信号进行短程心率变异分析.结果:正常家兔在体和离体组,短程心率变异分析结果值有明显不同.结论:正常家兔短程HRV特征较人体有明显区别,其频段取值范围有明显差异;在体与离体组HRV差异与神经体液调节因素有关.     

镁离子对原代培养猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响

目的：应用膜片钳单通道技术研究镁离子(Mg^2 )对原代培养猪冠状动脉平精肌细胞钙澈活钾通道(KCa)的影响.方法：选择培养5天后的单个棱形平精肌细胞，用二步拉镐经热抛光尖端直径约1～2gμm，充灌液体后阻抗约5～7MΩ的微吸管进行高阻封接，在对称性高钾溶液下采用内面向外式膜片记录电流。单通道电流信号经膜片钳放大器放大，滤波(3KHz)后，经12位A／D，D／A转换器在pClamp6．0．2专用软件支持下输入并储存在计算机内，然后进行分析处理。结果：猪冠状动脉平滑肌细胞KCa单通道电导值为135±15pS，[Ca^2 ]i为10^-7mol，膜电位为-40mV，向膜内侧液加入Mg^2 至1和4mmol，通道活度(NPO)显著增加;并发现随着[M^2 ]i从0．5mmol依次增加至14mmol，Mg^2 对KCa通道可产生浓度依赖性激活作用；而且用一定浓度的EGTA把[Ca^2 ]螯合到很小时(<10^-9 mol)，再向膜内侧加入Mg^2 (4mmol)仍对通道有激活作甩。结论：[Mg^2 ]i对KCa通道可产生浓度依赖性激活作用，且在膜内侧相对无Ca^2-的情况下仍可激活KCa通道，这可能是Mg^2 舒张血管平滑肌的作用机制之一。     

接触电极导管术中的漏电流问题探讨

通过心导管术采用接触电极引导MAP过程中,由于仪器设备等诸多因素,可造成对受试者的微电击,发生心室纤颤等严重后果。本文叙述了在实验条件下测试三种不同规格放大器通过接触电极对地产生漏泄电流以及对实验动物影响。在此基础上提出了一般     

山羊在位心肌细胞动作电位的测定

采用悬浮式玻璃微电极技术,对10只山羊在位心室肌细胞动作电位多项参数进行了测定,并观察了开胸后动物的心率变化和人工电刺激于易颤期时,心室发生纤颤的动作电位图形,以及动作电位和心电图的关系。结果是:APH109.97±13.29mv、Vmax335.88±70.38v/s,ERP239±35.10ms、ApD100、50、10分别为318.63±48.58ms,275.58±44.94ms,138.16±13.22ms。开胸2—3小时后,心率可由开胸时的120—130次/分减慢至90—100次/分。心室纤颤一旦出现,均呈不可逆改变。心电图的QRS上升支同动作电位O相相一致,T波相当于快速复极期。     

胆心综合征60例的高频心电图研究

通过微机对60例胆心综合征患者和60例正常成人记录三个最大肢导联和V_4～V_5导联的高频心电图。对两组的切迹、最高频率以及频谱含量和切迹与最高频率的关系进行分析,结果表明:(1)患者组六导联组合切迹数≥3个的例数占总例数80％,平均每例切迹数4.18±1.88;正常对照组六导联组合切迹数≥3个的例数占总例数6％平均每例切迹数1.20±0.47,组间显著性检验P<0.01。(2)患者组切迹和最高频率主要出现Ⅱ、