木瓜蛋白酶制备抗人肝癌单抗F（ab‘）2及Fab片段

为了制备肝癌ＭｃＡｂ ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２及Ｆａｂ片段。用激活的木瓜酶分别在偏酸性和偏碱性条件下消化１８ｈ和１ｈ，得到Ｆ（ａｂ’）２和Ｆａｂ片段，经ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换色谱柱在Ｗａｔｅｒｓ６５０Ｅ快速蛋白液相色谱系统（ＥＰＬＣ）上建立相应的纯化方法。该法制备Ｆ（ａｂ’）２得率为４３％－６２％，制备Ｆａｂ得率４２％，其活性用免疫荧光法测定均为１．３６×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ。本法操作简单，     

肝癌单克隆抗体HAb_(18)在人体肝癌导向诊断、治疗中的应用

肝癌的导向治疗,自80年代以来发展较快,已成为肝癌综合治疗的手段之一.铁蛋白抗体和甲胎蛋白抗体的标记与治疗显示一定的效果,但作为一种剂型尚有差距.本文报道抗肝癌单抗HAbl8进入I期临床导向诊断、治疗的意义和应用情况。 抗体的纯化与标记,按Goding法,用杂交瘤腹水经Sephacryls-300层析柱纯化为IgG.再用胃蛋白酶(Sigma)切割,分     

β-葡萄糖醛酸酶前药对βG基因转染人胆管癌细胞的作用

目的　探讨βG基因/β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G)前体药系统对人胆管癌细胞株QBC939的抑制作用。方法　构建真核表达的逆转录病毒载体pDOR-βG,利用阳离子脂质体将其转入人胆管癌细胞株QBC939,检测其表达及β-G前体药对转基因细胞的增殖阻断作用。结果　经G418筛选后的阳性细胞克隆,为高表达βG的胆管癌模型。免疫组织化学、免疫荧光、原位杂交等证实了pDOR-βG在转基因细胞中的表达;四唑蓝（MTT）比色试验测定β-G前体药对QBC939-pDOR-βG细胞有显著的抑制增殖作用,β-G前体药浓度为0.292g/L时,其抑制率为67.6%。QBC939-βG组与对照组比较差异有非常显著性（P＜0.01）。结论　βG基因/β-G前体药系统是一种新的自杀基因系统,可作为胆道肿瘤基因治疗的一种新方法。     

肝癌放免治疗剂~(131)I-HAb18对大鼠各组织的病理学变化

目的:观察不同剂量~(131)Ⅰ-HAb18在长期毒性试验中对大鼠各组织的病理损伤,为确定安全的临床使用剂量提供依据。方法:80只SD大鼠随机分为4组(含对照组),实验组腹腔注射3种剂量的~(131)Ⅰ-HAb18,对照组注射等体积生理盐水,每月2次,共3月,末次注射24h后处死,解剖一半大鼠,取各组织制成石蜡切片,镜检。停药恢复2月后,处死解剖余下的大鼠,制成切片,观察。结果:与对照组相比,低剂量组的大鼠各组织基本正常,中剂量组的大鼠约有一半组织出现轻度的病理改变,高剂量组的大鼠部分组织出现坏死等不可复性病理改变。结论:在长期毒性试验中低剂量为安全剂量,中剂量对SD大鼠有毒性作用,高剂量对SD大鼠有较重的毒性。     

肝癌单克隆抗体HAb18及其碘标记物的质控研究与应用

肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８及其碘标记物的质控研究与应用陈志南，刘智广，米力，仇凯，隋延仿，刘彦仿，刘成刚，徐力青，曲萍（病理学教研室８６３肝癌导向药物课题组）关键词肝肿瘤，抗体，单克隆；ＨＡｂ１８，质量控制中图号Ｒ３９２近年单克隆抗体在人类疾病的治疗和...     

β—葡萄糖醛酸苷酶基因转染人胆管癌细胞的生物学观察

目的 建立高表达β－葡萄糖醛酸苷酶（以下简称βＧ）基因的胆管癌模型,并观察转染βＧ基因的胆管癌细胞的超微结构及基因表达产物的定位。方法 构建真核表达的逆转录病毒载体ｐＤＯＲ－βＧ。利用阳离子脂质体将其转入人胆管癌细胞株,经免疫组化染色和免疫电镜等检测其表达,并用民镜观察转染细胞超微结构的变化。结果 经Ｇ４１８筛选后的阳性细胞克隆,为高表达βＧ的胆管癌模型。免疫组织化学染色和免疫电镜证实,其在转染β     

实验大鼠之间流行性出血热病毒自然传播途径的研究——空气传播途径的研究

由实验用大鼠感染流行性出血热病毒而传播引起人该病流行的病例在许多地区相继发生,该病疫区在不断地扩大。疫区内饲养实验用大鼠易被感染,新换种群常受到反复感染。传播途径的研究十分紧迫。本文利用两个自然感染该病毒的大鼠群进行了空气传播途径的研究。分两个实验组,一组设置在笼架饲养、水冲粪便(即湿式作业)的大鼠群中;另一组设置在盒内饲养(即干式作业)的大鼠群中。所用垫料、笼具及用品皆经~(60)Co照射消毒,水为自来水,饲料在90℃干烤8小时后装箱备用。实验组五只或单只饲养,各笼间距离为10cm。实验前用灭害灵杀虫,     

~(99m)Tc标记抗人肝癌单抗Fab片段修饰物在荷人肝癌裸鼠模型中的放射免疫显像

研究抗人肝细胞癌单克隆抗体Ｆａｂ片段修饰物的９９ｍＴｃ标记方法。用２亚氨基噻吩盐酸盐（ＩＴ）修饰ＨＡｂ１８Ｆａｂ片段。用９９ｍＴｃＧＨ转络合法标记ＩＴＦａｂ，测定标记物的放化纯度及生物活性，进行荷人肝癌裸鼠模型的放射免疫显像。结果：纸层析法测得标记率为５０％～８０％，体外细胞结合法测定免疫活性为３０％～４０％。荷人肝癌裸鼠模型尾静脉注入９９ｍＴｃＩＴＦａｂ后４～８小时，肿瘤区放射性有浓聚，１２～２２小时浓聚最多，Ｔ／ＮＴ值为５１８～７４８。因此，９９ｍＴｃＩＴＦａｂ可特异性浓聚于荷人肝癌裸鼠模型中，可能成为肝癌放射免疫显像的有效显像剂。     

肝癌细胞内逆转录病毒介导β-葡萄糖醛酸苷酶基因的表达

目的 建立高表达β－葡萄糖醛酸苷酶（β－Ｇｌｕ）的肝癌细胞株。方法 采用脂质体介导法,将重组逆转录病毒表达载体ｐＤＯＲ－βＧ转染肝癌细胞,Ｇ４１８筛选出阳性克隆,用免疫组化法、酶组织化学法、原位杂交法及酶活性测定等方法观察β－Ｇｌｕ表达情况。结果 共获得４株转染阳性克隆,其中Ｆ１,Ｈ４为β－Ｇｌｕ高表达克隆。免疫组化法发现转染细胞β－Ｇｌｕ免疫阳性物质主要分布于胞质及胞核内,酶组织化学法观察转染细     

阴离子交换FPLC制备级纯化单克隆抗体

作者采用ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换柱。在快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了ＩｇＧ类单克隆抗体制备级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水经５０％饱和硫酸铵盐析粗分离后，再用阴离子交换色谱纯化，一次上样量相当于８０～１００ｍｌ腹水。可得纯化ＭｃＡｂ５００～６００ｍｇ，得率为６～７ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为５７～６７％．一次纯化周期仅需４５ｍｉｎ。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测ＭｃＡｂ纯度为９５％，ＡＢＣ染色法测定ＭｃＡｂ活性为１：２００００（３．１３×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ）．