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1.
目的:预测肝癌肿瘤抗原AFP新的HLA-A2/A24限制性CTL表位,为肝癌CTL表位肽的筛选及鉴定提供依据.方法:选择与肝癌密切相关的肿瘤抗原AFP为研究目标,采用NetCTL 1.2 Server远程预测系统进行HLA-A2/A24限制性CTL表位预测.结果:共预测出与肝癌相关的肿瘤相关抗原AFP的8个HLA-A2 限制性CTL表位,13个HLA-A24限制性CTL 表位.结论:应用NetCTL 1.2 Server法预测CTL表位是一种高效准确的预测方法.所预测的肿瘤抗原AFP的HLA-A2/24 限制性CTL表位经实验筛选、鉴定后,可为肝癌治疗性疫苗的制备选择合适的CTL表位提供依据. 相似文献
2.
本文报道用临床手术切除的肝癌标本制备细胞悬液直接免疫BALB/c小鼠与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,在筛选过程中获得一株抗血管内皮细胞的单克隆抗体。该细胞株稳定地在体外连续培养四个月。抗体能直接用于常规福尔马林固定的石蜡包埋的切片染色,不需胰酶消化。经A.B.C法免疫组化染色证明,对全身各脏器血管内皮细胞定位以及30例各种类型血管瘤的内皮细胞染色均呈阳性反应。对起源于内皮细胞的5例血管内皮细胞肉瘤定位4例阳性,1例为阴性。而对血管外皮细胞肉瘤却大部份呈阴性反应。与内皮细胞以外的组织无交叉反应。提示此抗体能识别的抗原可能是Ⅷ因子相关抗原,它对起源于血管的软组织肿瘤的鉴别诊断及免疫组化定位有一定的应用价值。 相似文献
3.
儿童恶性骨肿瘤患者Th1/Th2亚群漂移的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
儿童恶性骨肿瘤的发病率仅次于造血系统恶性肿瘤,其中成骨肉瘤约占儿童恶性肿瘤的5%。本病对手术及放化疗的效果不佳,预后极差[1]。随着肿瘤免疫学的发展,以细胞因子为核心的免疫治疗逐渐被临床所接受。根据分泌细胞因子的不同,可将辅助性T淋巴细胞亚群分为辅助性亚群1(Th1)和辅助性亚群2(Th2)两个亚群。Th1亚群与Th2亚群平衡状态的失调,必然导致细胞因子网络的紊乱,从而影响细胞免疫和体液免疫的功能。通过检测细胞因子的水平,可以反映Th1/Th2的平衡状态[2]。恶性骨肿瘤患儿体内Th1/Th2状态尚未见报道。本实验对此进行了… 相似文献
4.
目的给肝癌细胞转入超抗原分子葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)的编码基因,使其表达这种毒素分子,以增强肝癌细胞的免疫原性,达到增强肝癌细胞诱导免疫排斥反应的目的.方法构建SEA编码基因的逆转录真核表达载体,转染病毒包装细胞系PA317后,行滴度测定.以高滴度克隆培养上清转导肝癌细胞株HHCC,筛选获得阳性表达株.然后利用外周血混合淋巴细胞进行杀伤实验.结果成功的构建了SEA的逆转录真核表达载体pLXSN-SEA,转导肝癌细胞后,获得表达SEA分子的阳性克隆HHCC-SEA.培养上清中SEA含量在pg的水平.外周血混合淋巴细胞杀伤实验结果显示,T淋巴细胞对转导后肝癌细胞的杀伤率可达45.6%.高于对HHCC 20.7%的杀伤率,T细胞对转导后肝癌细胞杀伤反应的Km值为5.18×104,而HHCC组的Km值为2.92 × 105,与前者的差别有统计学意义.结论肝癌细胞在转入SEA分子的编码基因后,表达出微量的SEA蛋白,却具有较强的免疫激活能力.即表达SEA的肝癌细胞在很低的浓度下,激活的T细胞即可对其达到最大杀伤反应速度,对T细胞的激活能力远远高于HHCC. 相似文献
5.
判定肿瘤抗原特异性T细胞反应的新方法 总被引:1,自引:1,他引:0
几十年来 ,人们致力于肿瘤疫苗的研究 ,旨在激活患者自身的免疫系统 ,产生持久有效的抗肿瘤免疫。在肿瘤疫苗治疗前后 ,如何准确地定量、定性判定肿瘤抗原特异性T细胞应答 ,评价疗效 ,是影响抗肿瘤疫苗发展的关键。51 Cr释放法和有限稀释法 (limitingdilutionanalyses,LDA) ,一直被认为是评价特异性T细胞反应的金标准 ,但实践证明这两种方法费时、费力且敏感性低。近 5、6年来 ,一些评价T细胞功能和特异性的新方法逐渐建立起来[1 ,2 ] ,由于这些方法更加敏感 ,提供的信息更有意义。尤为重要的是 ,有的方法… 相似文献
6.
重组SEA基因真核表达载体的构建及诱导小鼠抗肝癌免疫的效应 总被引:4,自引:2,他引:2
目的:构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)真核表达载体,并通过体内转染,观察其诱导抗小鼠肝癌的免疫效应。方法:采用基因工程技术构建SEA基因的真核表达载体,使其表达SEA分子。通过阳离子脂质体介导的体内转染,观察其对小鼠肝癌的治疗作用。用^51Cr释放法测定治疗组与对照组动物脾淋巴细胞杀伤H22细胞的活性。结果:成功地构建了SEA真核表达载体pLXSN-SEA,体内转染pLXSN-SEA的荷瘤小鼠肿瘤明显缩小,生存期延长,4/10小鼠肿瘤完全消退,且长期无瘤生存。CTL杀伤活性实验表明,瘤区内转染pLXSN-SEA可诱导强烈的CTL杀伤效应,与对照组相比较差异显著(P<0.01)。结论:超抗原SEA体内转染对肿瘤具有明显的治疗作用,有望用于抗肿瘤的生物治疗。 相似文献
7.
目的比较纳米乳剂包裹的复合抗原NE(MHS)经不同途径免疫小鼠后的抗肿瘤免疫学效应,探索肿瘤疫苗有效的给药途径。方法采用磁力超声法制备纳米疫苗NE(MHS)(融合蛋白MAGE1-HSP70和超抗原SEA按摩尔比100∶1混合),评价其粒径、包裹率及稳定性。以NE(MHS)经口服、皮下、静脉和腹腔注射4种途径免疫C57BL/6小鼠,IFN-γELISPOT和LDH杀伤实验检测小鼠特异性细胞免疫反应情况,肿瘤治疗、攻击实验比较4种不同途径免疫的抗肿瘤效应。结果所制备纳米乳剂为乳白色均质胶体混悬液,粒径为20±5nm,包裹率为87%。B16-MAGE1接种后第28天,口服免疫组小鼠肿瘤体积明显大于其他3组(P<0.05),而小鼠脾淋巴细胞中分泌IFN-γ的特异性T淋巴细胞频数及对B16-MAGE1的杀伤效果、荷瘤小鼠的生存期、小鼠成瘤时间等4组间两两比较均无统计学差异。结论纳米乳剂疫苗NE(MHS)经不同途径给药后对小鼠的抗肿瘤免疫学效应相近,表明其适用于多种途径给药(包括口服),是一种使用方便的肿瘤基因工程纳米疫苗。 相似文献
8.
9.
树突状细胞负载肝癌抗原肽疫苗体外诱导特异性免疫学反应的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
目的:研究树突状细胞(dendritic cell,DC)负载肝癌抗原肽EPVTKAEML体外诱导特异性CTL的能力及其抑癌效果。方法:用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR—SSP)选择HLA—B7表型供者,从脾组织中分离、培养DC-EPVTKAEML特异性CTL。用^51Cr释放法检测CTL的杀伤活性,并用抗HLA-1分子单抗(mAb)进行杀伤抑制实验。结果:找到4例HLA-B7杂合子供者,用DC负载HLA-B7限制的抗原肽EPVTKAEML可诱导特异性CTL反应,对肝癌细胞HHCC有较强的杀伤作用。结论:DC负载抗原肽EPVTKAEML在体外可诱发较强的特异性免疫反应。 相似文献
10.
MAGE-1与结核杆菌HSP70融合基因的构建及原核表达 总被引:3,自引:3,他引:0
目的 构建结核杆菌HSP70与肿瘤抗原MAGE-1的融合基因,在大肠杆菌中进行表达,并通过GST纯化系统进行分离纯化。方法 利用PCR方法扩增TBHSP70基因,经测序后连入原核表达载体pGEX-4T-1,再通过PCR方法扩增MAGE-1基因片段(289~927bp),测序后插入TBHSP70基因的5’端,构建MAGE-1与TBHSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-MAGE-1-TBHSP70,含有该质粒的大肠杆菌DH5a进行诱导表达和分离纯化。结果 成功地扩增了TBHSP70基因与MAGE-1基因片段,测序结果表明与GenBank公布的序列一致;成功地构建了pGEX-MAGE-1-TBHSP70原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌DH5α经IPTG诱导后表达一Mt约为125000的蛋白,经GST融合蛋白表达系统纯化,得到了MAGE-1与TBHSP70的融合蛋白。结论 成功地获得了MAGE-1与TBHSP70的融合蛋白,为研究MAGE-1-TBHSP70融合蛋白在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础。 相似文献