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作者采用PharmaciaSephacrylS—300凝胶色谱柱,建立了IgG类McAb的一步法制各级纯化方法。该法是将McAb腹水直接上样,用pH7.410mmol/LPBS洗脱(流速0.5ml/min),即得到纯化的McAb。一次上样量40~50ml腹水,回收率为85%-90%.整个纯化周期4h。纯化的McAb经SDS—PAGE测定,纯度>90%,免疫组化ABC法测定活性为1:80000(7.8×10-11mol/L)。该法操作简单、快速,只要有一台核酸/蛋白检测仪,便可进行制备级水平的纯化。 相似文献
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凝胶色谱法半制备级纯化单克隆抗体 总被引:1,自引:0,他引:1
作者采用SePllacylS-200凝胶色谱柱,在快速蛋白液相色谱系统(FPLC)建立了肝癌相关抗原单克隆抗体半制各级纯化方法。该法是将McAb腹水经40%饱和硫酸铵盐析粗分离后,再用凝胶色谱纯化,一次上样量相当于5~10ml腹水,可得纯化McAb30~60mg,得率为6~6.5mg/ml腹水,回收率为63%,一次色谱纯化周期2h,整个分离纬化可在3h内完成。经SDS—PAGE和DEAE离子交换色谱法检测McAb纯度大于80%,ABC染色法测定McAb活性为,1:40000(1.56×10-10mol/L),是一般实验室纯化IgG类McAb的实用方法。 相似文献
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人肝癌细胞系HCC-9204的建立及其特性研究 总被引:7,自引:0,他引:7
目的和方法:作者用组织块培养法,对12例肝细胞肝癌手术标本进行培养,并对能存活的细胞进行形态学观察,LDH同工酶谱和AFP检查,核型分析,对数求解和放射自显影测定细胞增殖周期,异种移植及生物学特性研究,结果:1例获得长期体外生长的能力,将其命名为HCC-9204,无论形态学观察,还是LDH同工酶谱的变化,均符合肝癌细胞的一般特征,并具有体外分泌AFP的能力,染色体众数为78~80条各群染色体均增加,而以C,E群增加最为明显,并恒定出现M_2der(4)t(4;19)和M_8del(13)两种标记染色体,增殖周期约为20h,异种移植成瘤率100%.结论:HCC-9204是一株人体肝癌细胞系,可用于肝癌防治研究. 相似文献
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随着人们生活水平的不断提高,人口老龄化,饮食营养状况的改善,糖尿病的患病率逐年增高。为研究上海市黄浦区外滩街道社区糖尿病的患病率及其危险因素,我们于1997年6月~1998年4月在外滩街道16个居委会进行了糖尿病流行病学调查,现将调查结果和防治对策简要报道如下: 相似文献
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作者采用DEAE-40HR阴离子交换柱。在快速蛋白液相色谱系统(FPLC)建立了IgG类单克隆抗体制备级纯化方法。该法是将McAb腹水经50%饱和硫酸铵盐析粗分离后,再用阴离子交换色谱纯化,一次上样量相当于80~100ml腹水。可得纯化McAb500~600mg,得率为6~7mg/ml腹水,回收率为57~67%.一次纯化周期仅需45min。经SDS-PAGE检测McAb纯度为95%,ABC染色法测定McAb活性为1:20000(3.13×10-10mol/L). 相似文献
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目的:对改良Mather氏法标记的大剂量 ̄(131)Ⅰ-HAb18McAb进行了临床前质量控制.方法:用常规检测方法(柱层析法、PAGE电泳法、体外培养细胞结合分析等)检测了三批样品的游离碘率、体外细胞免疫结合率、无菌、热原质及热稳定性实验等.结果:本法标记物样品热原质、无菌、毒性试验均合格, ̄[131]Ⅰ蛋白标记率≥88.3%,游离碘率≤12.6%,细胞免疫结合率>50%,白蛋白非特异标记率<6%,标记物在37℃48h内,游离碘释放率<20%,细胞免疫结合率>40%.结论:本法制备的碘标记物各项安全指标合格.热稳定实验提示超过48h的标记物游离碘及免疫活性变化较大. 相似文献
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建立政府应对突发公共卫生事件协调机制探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
20 0 3年春季爆发的传染性非典型肺炎 (下简称非典 )在我国部分省市扩散和蔓延 ,在极其短暂的时间里再一次让人们体会到了突发事件所带来的巨大冲击 ,非典的冲击不仅是一次单纯的疫情冲击 ,也不仅仅是一次公共卫生事件 ,而是对我国政治、经济、社会生活产生全面影响的综合性危机事件。政府作为公共事务管理者 ,如何处理社会危机事件将直接关系到政府形象 ,也直接影响着我国政治经济的稳定和发展。如何有效、及时、和平地处理这些突发性危机事件已经成为今后一定时期内必须重视的重大问题。为此 ,在经济全球化和我国建设开放社会的大背景下 ,… 相似文献