高效液相色谱法测定苦参素分散片的含量

目的 建立高效液相色谱法测定苦参素分散片含量的方法。方法 以Phenomenex C₁₈柱为固定相;流动相0.02mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(pH3.5)-甲醇(90∶10);流量1.0ml·min^-1;检测波长220nm。结果 氧化苦参碱与氧化槐果碱分离良好,氧化苦参碱在0.04～0.16mg·ml^-1浓度范围内呈良好的直线关系,平均回收率为99.4%,RSD为0.78%(n=9)。结论 该方法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定妇安消疹洗液中苦参碱与氧化苦参碱的含量

摘 要 目的:建立测定妇安消疹洗液中苦参碱与氧化苦参碱含量的高效液相色谱(HPLC)方法。方法: 采用Inertsil NH₂(250 mm×4.6 mm,5 μm) 色谱柱;流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(80∶10∶10),流速为1.0 ml·min^-1,检测波长220 nm。结果:苦参碱与氧化苦参碱分别在0.048 9～0.978 0 mg·ml^-1(r=0.999 9)与0.053 5～1.070 0 mg·ml^-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.72%与99.49%,RSD分别为1.60%与1.23%。结论:该方法简单,结果准确、可靠,可用于妇安消疹洗液的质量控制。     

苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对HERG钾通道表达的影响

由于HERG钾通道在心律失常的发生与治疗中具有双重作用，因此成为近年来研究的热点。本文主要通过免疫荧光化学染色法、激光共聚焦显微镜及Western blotting法分别定性、定量地检测不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对稳定转染在HEK-293细胞中HERG钾通道表达的影响。研究发现，苦参碱(1 μmol·L^-1)和氧化苦参碱(1 μmol·L^-1)均能够促进定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道的表达(n=5，P<0.05)，苦参碱(100 μmol·L^-1)能够抑制定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道表达(n=5，P<0.05)，氧化苦参碱(100 μmol·L^-1)对HERG钾通道表达没有影响，白藜芦醇不影响HERG-HEK细胞中HERG钾通道表达。结果表明，低浓度的苦参碱促进HERG钾通道表达，高浓度的苦参碱抑制HERG钾通道表达，低浓度的氧化苦参碱促进HERG钾通道表达，白藜芦醇不影响HERG钾通道表达。这为苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇抗心律失常作用机制及安全性提供了理论依据。     

HPLC测定大鼠微透析液和血浆中苦参碱的浓度

目的 建立大鼠微透析液和血浆中苦参碱的反相高效液相检测方法。方法 色谱柱为Diamonsil C₁₈柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸(用三乙胺调pH至7.6~7.7)(微透析液测定：35∶65;血浆测定：30∶70);流速1.0 mL·min^-1;检测波长220 nm;柱温35 ℃;进样量20 μL。结果 本方法测定苦参碱线性范围微透析液为0.10~25.00 μg·mL^-1,血浆为0.32~81.80 μg·mL^-1,相关系数均为1。微透析液的日内、日间精密度RSD≤6.95 %,血浆RSD≤10.75 %。微透析液的平均回收率为94.7~105.9 %,血浆为98.6~107.9 %,稳定性良好。结论 本方法准确、简单、专属性强,适用于苦参碱大鼠体内药动学研究中微透析液和血浆中药物浓度的测定。     

高效液相色谱法测定痒葏洗剂中苦参碱和氧化苦参碱的含量

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定痒葏洗剂中苦参碱和氧化苦参碱的含量. 方法 固定相为Hypersil ODS柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:乙腈 0.04 mol&#8226;L^-1磷酸二氢钾(13:87),流速1 mL&#8226;min^-1,紫外检测波长220 nm. 用酸溶碱提法提取样品中的苦参碱和氧化苦参碱. 结果苦参碱标准曲线方程为:A=2 158.24C-157.70(r=0.999 8),氧化苦参碱A=1 936.25C-1 137.89(r=0.999 7),线性范围都是25～800 μg&#8226;mL^-1,平均回收率苦参碱为99.06%(RSD=1.69%),氧化苦参碱为100.22%(RSD=1.99%). 结论 该方法 测定痒葏洗剂中苦参碱和氧化苦参碱的含量,操作简便、快速,结果准确,可用于痒葏洗剂的质量控制.     

HPLC-DAD法同时测定中药苦参中七种生物碱成分的含量

摘 要 目的：建立HPLC DAD法同时测定中药苦参中氧化槐醇碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、槐醇、苦参碱及槐果碱七种生物碱的含量。 方法: Agilent Zorbax C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为10 mmol·L^-1醋酸铵水溶液(0.05%氨水,pH=9.0) (A) 20 mmol·L^-1醋酸铵的甲醇 乙腈(1∶2)混合溶液(B),梯度洗脱,流速：1.0 ml·min^-1,检测波长：220 nm,柱温：30℃。结果: 氧化槐醇碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、槐醇、苦参碱及槐果碱的质量浓度分别在0.093~1.860 μg(r=0.999 6) 、0.530~10.600 μg (r=0.999 7)、0.062~1.240 μg (r=0.999 8)、0.281~5.620 μg (r=0.999 9)、0.026~0.520 μg (r=0.999 8) 、0.036~0.720 μg (r=0.999 7) 及0.032~0.640 μg (r=0.999 6)内与峰面积呈良好的线性关系。氧化槐醇碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、槐醇、苦参碱及槐果碱的平均加样回收率分别为97.5%、98.2%、99.0%、99.4%、99.2%、98.2%和98.7%,RSD分别为1.18%、0.92%、1.43%、1.04%、0.81%、0.43%和0.88%(n =6)。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于苦参药材多成分的质量控制研究。     

LC/MS分析大鼠体内氧化苦参碱及其主要代谢物LC/MS分析大鼠体内氧化苦参碱及其主要代谢物

目的研究氧化苦参碱在大鼠体内的主要代谢产物。方法以氧化苦参碱和苦参碱为对象优化液相色谱/电喷雾离子阱质谱(LC/ESI-ITMSⁿ)实验条件，分析总结其电喷雾质谱的一级电离规律和二级质谱裂解规律，作为氧化苦参碱大鼠体内代谢物结构分析的依据。健康大鼠腹腔肌注40 mg·kg^-1氧化苦参碱，收集0~24 h的尿样，尿样中的代谢物经C₁₈小柱进行富集与纯化后，在优化的LC/ESI-ITMSⁿ条件下进样分析。代谢物的结构推导主要依据代谢物的色谱保留时间及其电喷雾离子阱质谱(ESI-ITMSⁿ)电离规律。结果在大鼠尿样中有原药及其6种I相氧化及还原代谢产物，且主要代谢物为苦参碱。未发现II相代谢物。结论本法不仅操作简便、快速，而且灵敏度高、专属性强。该分析技术是研究药物代谢最有效的方法之一。     

苦豆子提取过程中氧化苦参碱与苦参碱、氧化槐果碱与槐果碱的相互转化

目的 研究苦豆子药用植物提取过程中氧化苦参碱与苦参碱、氧化槐果碱与槐果碱的相互转化。方法 采用不同提取溶媒(水及55%乙醇)、不同pH及不同提取时间3个因素,HPLC测定苦豆籽、苦豆草植物中氧化苦参碱与苦参碱,氧化槐果碱与槐果碱的含量。结果 随着提取时间的增加,氧化型生物碱转化为还原型生物碱的量随之增大;提取溶剂对苦豆子中生物碱转化的影响无明显差异;随着提取时间的增加,氧化苦参碱与苦参碱总量呈缓慢下降的趋势,氧化槐果碱与槐果碱总量也呈缓慢下降的趋势。结论 氧化型生物碱与还原型生物碱转化趋势可为苦豆子生物碱质量控制提供依据,也可为工业化提取苦豆子生产工艺提供依据。     

灯盏花素及其β-环糊精包合物在大鼠体内的药代动力学

目的建立测定大鼠血浆中灯盏乙素浓度的反相高效液相色谱法，研究灯盏花素及其β-环糊精包合物(灯盏花素-β-CD)大鼠灌胃后体内药代动力学行为。方法以甲醇-水-醋酸盐缓冲液为流动相，Shim-pack C₁₈为固定相；12只大鼠随机均分为2组，分别灌胃灯盏花素及其包合物后，检测血浆药物浓度。药时数据采用3P97药代计算程序处理。结果线性范围10-400 ng·mL^-1，方法回收率95.32%-98.81%；灯盏花素和包合物的C_max分别为(154±18) ng·mL^-1和(328±31) ng·mL^-1；AUC_0-12h分别为(710±126) ng·h·mL^-1和(1 093±200)ng·h·mL^-1，经t检验两者有极显著性差异(P<0.01)。结论该法准确、灵敏，适用于灯盏乙素血浆浓度的测定；制备的灯盏花素包合物与灯盏花素相比吸收显著增加。     

氧化苦参碱凝胶体外经皮渗透及大鼠药动学研究

目的 研究氧化苦参碱凝胶的体外经皮渗透影响因素,并对其在大鼠体内的药动学进行研究。方法 采用Valia-Chien 双室扩散池,以大鼠离体皮肤为渗透屏障,HPLC测定氧化苦参碱浓度,以药物累积渗透量为指标,对药物及渗透促进剂的浓度进行筛选。结果 氧化苦参碱经皮凝胶的最优处方12 h累积渗透量为(18.094±1.253)mg·cm^-2,大鼠静注与经皮给药的血浆药动学研究表明,经皮给药的AUC_(0-t)是注射给药的1.9倍(P<0.01)。结论 氧化苦参碱凝胶的经皮吸收能力良好,能长时间持续释放药物,有望成为新的给药剂型。     

复方苦参注射液4种生物碱大鼠体内药动学研究

目的建立LC-MS法测定大鼠血浆中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱的质量浓度,研究复方苦参注射液在大鼠体内药动学过程及其参数。方法在血浆样品中加入内标,采用氯仿提取处理,以甲醇-0.2mL.L-1甲酸水溶液-10mmol.L-1NH4Ac水溶液(85∶7.5∶7.5)为流动相;VP-ODS柱分离,检测健康大鼠iv 2g.kg-1复方苦参注射液后12h内血浆样品中4种生物碱的质量浓度,用DAS 2.0药动学程序处理4种生物碱的血药浓度-时间数据。结果静注复方苦参注射液后,4种生物碱在大鼠体内的药代动力学符合二室开放模型,Cmax与原药液中质量浓度比例基本相符,苦参碱和氧化苦参碱AUC(0-∞)较为相近;苦参碱和槐果碱K12分别约为K21的2倍多,氧化槐果碱为3倍多,氧化苦参碱二者基本相近;表观分布容积顺序为槐果碱>氧化槐果碱>苦参碱>氧化苦参碱;氧化苦参碱t1/2β最短;苦参碱和槐果碱MRT(0-∞)较大,氧化苦参碱最小。结论氧化苦参碱部分代谢为苦参碱而增加了后者的血药浓度;氧化苦参碱主要分布在血液,消除最快,而其他3种生物碱会分布到组织;苦参碱、槐果碱和氧化槐果碱从中央室转运到周边室较为迅速,而氧化苦参碱转运速度相等。     

RP-HPLC法同时测定复方苦参注射液中氧化槐果碱、氧化苦参碱和苦参碱的含量

目的建立复方苦参注射液中氧化槐果碱、氧化苦参碱和苦参碱的含量测定方法。方法Hy-persil ODS2色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈水磷酸(体积比为10.00∶30.00∶65.00∶0.05,含33 mmol.L-1的SDS),检测波长为210 nm,柱温为室温。结果氧化槐果碱质量浓度在2.52~50.4 mg.L-1内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 9(n=6),平均回收率为98.2%,RSD为1.8%(n=9);氧化苦参碱质量浓度在17.44~174.4 mg.L-1内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 7(n=6),平均回收率为99.5%,RSD为2.2%(n=9);苦参碱质量浓度在1.96~39.20 mg.L-1内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 7(n=6),平均回收率为102.3%,RSD为2.0%(n=9)。结论测定方法可作为复方苦参注射液质量控制方法。     

HPLC-MS/MS法测定人体色甘酸钠血浆浓度及其药代动力学研究

采用HPLC-MS/MS法测定人血浆中色甘酸钠浓度，进行其滴鼻液和鼻用喷雾剂的药代动力学研究并评价其生物等效性。采用高效液相分离系统，流动相为乙酸铵-甲醇(含50%乙腈)(15∶85)，固定相为AGT Venusil XBP C₁₈(250 mm×4.6 mm ID， 5 μm)色谱柱。采用质谱检测系统， ESI离子源， 正离子模式， 多级反应监测(MRM)方式， m/z 469→263.1(色甘酸钠)， m/z 447.2→327.1(内标，普伐他汀钠)。在0.3～20 ng·mL^-1色甘酸钠血药浓度呈线性关系， 定量限为0.3 ng·mL^-1， 回收率在94.1%以上， 日内日间的RSD均小于14.3%。单剂量给药色甘酸钠鼻用喷雾剂或滴鼻液， 其药代动力学参数T_1/2分别为(1.82±0.54)和(1.59±0.52) h； T_max分别为(0.47±0.12)和(0.44±0.15) h； C_max分别为(9.79±4.66)和(10.88±4.05) ng·mL^-1， AUC_{0-5 h}分别为(11.52±3.46)和(12.63±4.23) ng·mL^-1·h。色甘酸钠鼻用喷雾剂相对生物利用度F_r为(93.6±13.8)%。本法灵敏度高， 适用于色甘酸钠治疗药物监测及其药代动力学和生物利用度研究。     

LC-MS测定大鼠脑脊液与血浆中西达本胺浓度及其药动学研究

目的建立快速检测SD大鼠脑脊液和血浆中西达本胺浓度的LC-MS测定方法,并应用于大鼠静脉注射西达本胺后的脑脊液和血浆中药动学研究。方法对建立的检测大鼠脑脊液和血浆中西达本胺浓度的LC-MS分析方法进行专属性、精密度、准确性、基质效应及稳定性等考察验证。♂SD大鼠12只,分为2组,每组6只,分别静脉注射给予西达本胺3,6 mg·kg^–1剂量,于给药后0.083,0.25,0.5,1,1.5,2,3 h采集脑脊液和血浆,采用LC-MS测定大鼠脑脊液和血浆中西达本胺的浓度变化,并利用DAS药动学软件拟合脑脊液和血浆中AUC、C_max、T_max、t_1/2等主要药动学参数,计算血脑屏障透过率。结果方法学研究显示,大鼠脑脊液中西达本胺线性范围为0.2～64 ng·mL^–1(r=0.999 0,定量下限为0.2 ng·mL^–1),血浆中西达本胺的线性范围为2～1 000 ng·mL^–1(r=0.999 1,定量下限为2 ng·mL^–1     

分散相液相微萃取法测定通过输液管后注射液中的邻苯二甲酸酯增塑剂含量

目的 采用分散相液相微萃取与GC-MS结合,建立测定通过输液管后注射液中6种邻苯二甲酸酯含量的方法。方法 将30 μL苯甲酸苄酯(内标)的甲苯溶液和20 μL十六烷基三甲基溴化铵溶液快速注入到5.0 mL样品溶液中,旋涡振荡1 min,4 000 r·min^-1离心5 min。弃去水相,使有机相聚集于离心管底部,取1.0 μL萃取液进行CG-MS分析。结果 6种邻苯二甲酸酯的富集倍数为174~280,检测限为(S/N=3)0.007~0.04 ng·mL^-1,加样回收率为97.8%~101.2%,RSD为0.44%~0.93%。在某些通过输液管的注射液中检出DBP和DEHP。结论 本方法灵敏、简便、快速,适用于通过输液管后注射液中微量邻苯二甲酸酯的检测。     

间尼索地平控释微丸Beagle犬体内药动学研究

目的建立间尼索地平血药浓度的高效液相色谱-质谱联用方法,研究Beagle犬单剂量口服间尼索地平控释微丸的药动学。方法用HPLC-MS法测定健康Beagle犬单剂量口服间尼索地平控释微丸和普通微丸的血药浓度,以DAS 2.0软件计算药动学参数。结果单剂量给药后,控释微丸和普通微丸的tmax分别为(11.154±0.5077)h和(2.213±0.3225)h,Cmax分别为(79.40±10.60)ng.mL1和(116.7±20.35)ng.mL1,AUC分别为(1227.8±296.0)ng.h.mL1和(867.8±146.7)ng.h.mL1,控释微丸的相对生物利用度为141.5%。结论本方法准确、灵敏,间尼索地平控释微丸血药浓度平稳,可较长时间保持血药浓度。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中的左西孟旦及其主要代谢物

建立快速、 灵敏、 易操作的LC-MS/MS法测定人血浆中的左西孟旦及其代谢物OR-1855和OR-1896的浓度。根据待测物的不同性质， 采用两套液相色谱系统和电离方式分别测定人血浆中的左西孟旦和代谢物OR-1855、 OR-1896。测定左西孟旦时， 用瑞舒伐他汀为内标， 血浆样品经甲醇沉淀蛋白， 以甲醇-15 mmol·L^-1醋酸铵-甲酸(55∶45∶0.02， v/v/v)为流动相， Capcell MG III C₁₈柱(35 mm×2.0 mm ID， 3 μm)进行分离， 采用电喷雾电离源，以选择反应监测(SRM)方式进行负离子检测。测定代谢物OR-1855和OR-1896时， 用多索茶碱为内标， 血浆样品经乙酸乙酯萃取， 以甲醇-15 mmol·L^-1醋酸铵-甲酸(65∶35∶0.1， v/v/v)为流动相， Zorbax Extend C₁₈柱(150 mm×4.6 mm ID， 5 μm)进行分离， 采用电喷雾电离源， SRM方式进行正离子检测。测定血浆中左西孟旦方法的线性范围为0.10～50.0 ng·mL^-1， 定量下限可达0.10 ng·mL^-1； 测定血浆中代谢物OR-1855和OR-1896方法的线性范围均为0.20～100 ng·mL^-1， 定量下限均可达0.20 ng·mL^-1。本方法专属性好， 准确、 快速， 适用于左西孟旦注射液的临床药代动力学研究。     

反相离子对色谱法同时测定复方苦参注射液中4个生物碱含量

目的:建立反相离子对色谱同时测定复方苦参注射液中苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱含量的方法。方法:色谱条件:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱;流动相为0.04%磷酸-10 mmol·L-1戊烷磺酸钠水溶液(A)和乙腈(B),线性梯度洗脱,流速为1.2 mL·min-1;柱温为30℃;紫外检测波长:210 nm。结果:苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱质量浓度分别在18.92～946.0,4.052～202.6,9.293～464.6,34.73～1736 mg·L-1范围内线性关系良好,相关系数均为0.9999;RSD重复性试验中4个生物碱含量均小于2.1%;平均加样回收率分别为98.2%,96.4%,96.9%,97.1%。结论:该方法简便、准确,重复性好,可用于复方苦参注射液的质量控制。     

LC-MS/MS法测定大鼠口服延胡索提取物后延胡索乙素和脱氢紫堇碱的药代动力学

建立检测大鼠血浆中延胡索乙素和脱氢紫堇碱分析方法，并应用有机溶剂沉淀法提取含药血浆中的生物碱类成分，色谱采用SB-C₁₈反相柱，流动相为乙腈-乙酸铵(0.1%乙酸)梯度洗脱，质谱采用多反应监测(MRM)方式进行正离子检测，用于定量分析的例子对分别为m/z 356.2→m/z 191.9(延胡索乙素)和m/z 366.2→m/z 350.2(脱氢紫堇碱)。测定血浆中这两种成分的线性范围均为1.0～1 000 ng·mL^{-1，定量下限为1.0 ng·mL-1，相关系数分别为0.994和0.992，延胡索乙素的回收率为71.71%～91.59%，脱氢紫堇碱的回收率为83.27%～103.15%，方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。结果显示，该法选择性强、灵敏度高、操作简便，适用于血浆延胡索乙素和脱氢紫堇碱的药代动力学研究。}