雾化吸入盐酸肾上腺素注射液的过敏性和刺激性研究

目的 通过豚鼠雾化吸入给予盐酸肾上腺素注射液,评价临床超说明书给予盐酸肾上腺素注射液的安全性。方法 通过建立雾化给药药物浓度检测方法,确定吸入给药实际给药量。以临床使用盐酸肾上腺素给药频次与剂量结合过敏性试验评价方法,采用豚鼠全身主动过敏试验方案,评价盐酸肾上腺素注射液雾化吸入后对豚鼠产生的全身过敏反应及呼吸系统毒性反应。32只豚鼠按体质量随机分成4组：阴性对照组(等体积的生理盐水)、阳性对照组(致敏剂量：20 mg·kg^-1卵白蛋白)、低剂量组(致敏剂量：15.5 μg·kg^-1盐酸肾上腺素)和高剂量组(致敏剂量：31 μg·kg^-1盐酸肾上腺素)。各组激发剂量是致敏剂量的2倍,激发时观察过敏反应症状,激发后采集血液与肺泡灌洗液,全血用于检测血液学,分离血清和肺泡灌洗液用于检测IgE。动物解剖后取支气管与肺脏组织做组织学检测与免疫组化。结果 使用雾化装置给予豚鼠盐酸肾上腺素在给药3.95 min时可达到临床等效剂量。各组豚鼠在致敏给药期间体质量正常增长,无明显异常反应。激发时,阳性对照组豚鼠出现强阳性过敏反应,阴性对照组、低剂量组和高剂量组豚鼠均无明显过敏反应。与阴性对照组比较,阳性对照组豚鼠血液中嗜酸性粒细胞显著升高(P<0.05),血清和肺泡灌洗液中IgE含量明显增加(P<0.05或P<0.01);组织病理学结果显示阳性对照组豚鼠激发后肺组织内出现炎性细胞浸润,肺泡内出现大量红细胞和渗出液;免疫组化结果提示阳性组豚鼠肺组织内炎性症状与B淋巴细胞增多相关。而低剂量组和高剂量组豚鼠血液学指标、血清IgE含量、免疫组化和组织学检查结果均与阴性对照组无明显差异。结论 盐酸肾上腺素注射液经雾化给予豚鼠不发生过敏反应,且未产生呼吸系统毒性。盐酸肾上腺素注射液雾化吸入是安全可行的。     

红细胞分散对奥沙利铂体外溶血试验的影响研究

目的： 通过分散红细胞改良体外溶血试验方法,探索奥沙利铂临床与非临床相一致的溶血性结果。方法： 在标准的体外溶血试验方案基础上,通过改变反应介质考察奥沙利铂的溶血结果;显微镜观察各试验方法中的红细胞分布,探索不同介质下体外溶血试验机制;酶标仪检测溶血试验试管中上清液吸光度计算溶血率;通过温和摇晃方式改变奥沙利铂对红细胞的药物暴露。结果： 以葡萄糖作为体外溶血试验介质时多类溶血制剂药物产生假阴性结果,在体外溶血试验中葡萄糖介质内红细胞发生细胞间黏附、聚集成团现象;通过持续温和摇晃方法,以葡萄糖为介质的奥沙利铂体外溶血试验产生阳性结果。结论： 体外溶血试验使用葡萄糖为实验介质时,可以通过温和分散红细胞的方式充分暴露奥沙利铂与红细胞的接触,展示更为客观的溶血实验结果。     

枸杞多糖对多柔比星犬药代动力学的影响

目的：研究枸杞多糖对多柔比星在比格犬中的药代动力学性质的影响。方法：8只比格犬连续12d给予枸杞多糖胶囊（20mg/kg）或空胶囊,在第7天所有犬均静脉注射给予多柔比星（1.5mg/kg）,本研究使用高效液相-荧光检测器对多柔比星的血药浓度进行检测。同时,本研究还对多柔比星对犬CYP3A活力的影响进行评价。结果：与单独给予多柔比星相比,联合给予枸杞多糖没有改变例如曲线下面积和清除率在内的多柔比星的药代动力学性质。但是,研究结果表明,枸杞多糖会抑制CYP3A的活性,CYP3A是多柔比星在犬中的重要代谢酶。结论：在给予多柔比星同时联合口服给予枸杞多糖不会影响多柔比星的药代动力学性质,但是会抑制CYP3A的活性。     

大鼠口服有效及接近耐受剂量的菊花提取物后木犀草素与芹菜素的药动学研究

 目的 研究大鼠口服有效及接近耐受剂量的菊花提取物后,其主要效应成分（木犀草素和芹菜素的药动学,并考察其药动学参数与剂量间的关系。方法 20只SD雄性大鼠随机分成4组,分别灌胃100,200,400及12 000 mg·kg-1的菊花提取物,采集给药前及给药后72 h内不同时间点血浆,以HPLC测定血浆中木犀草素及芹菜素的浓度。采用DAS（V2.0软件,以非房室模型计算主要的药动学参数,包括：峰浓度（ρ_max、 血药浓度-时间曲线下面积（AUC、消除半衰期（t1/2、表观分布容积（Vd、 血浆清除率（CL等。 结果 大鼠灌胃菊花提取物,当剂量以1∶2∶4递增时（100～400 mg·kg-1,木犀草素和芹菜素的ρ_max分别以1.0∶2.0∶4.1及1.0∶2.4∶4.4递增,AUC分别以1.0∶2.1∶4.6及1.0∶2.0∶4.3递增;不同剂量间木犀草素和芹菜素的t1/2、CL、Vd无明显差异,两者的t1/2分别为7.75～8.93 h和6.51～7.05 h, CL分别为8.94～11.8和1.34～1.69 L·h·kg-1 ,Vd分别为43.0~55.2 L·kg-1和11.4～13.7 L·kg-1。当剂量由400增加到12 000 mg·kg-1时,木犀草素及芹菜素的ρ_max仅增加2.4和2.0倍,AUC仅增加6.4和3.1倍,但t1/2、CL、Vd显著增大,木犀草素的t1/2、CL及Vd分别为14.2 h、41.1 L·h·kg-1、858 L·kg-1,芹菜素的t1/2、CL及Vd分别为41.6 h、15.5 L·h·kg-1 、337 L·kg-1。结论 大鼠灌胃100～400 mg·kg-1菊花提取物,其效应成分木犀草素及芹菜素呈线性动力学特征,而剂量由400增加到12 000 mg·kg-1时,表现出非线性动力学特征。     

大鼠脑脊液多次采集改良模型的建立

目的 建立大鼠多次采集脑脊液的动物模型,以进行药物在大鼠脑部的动力学研究。方法 将大鼠麻醉后,利用脑立体定位仪,通过大鼠双侧耳道与上方门齿固定大鼠头部,切开大鼠头部皮肤,暴露颅骨与颈部肌肉交界处,将采样针对准大鼠颅骨与颈部肌肉交界处的中心位置,利用脑立体定位仪的上下轴将采样针竖直缓慢向下刺入,刺入约0.6~0.9 cm（视大鼠体质量而定）后,脑脊液即可被采出。结果 脑脊液采集成功率（脑脊液成功采样1次及以上）100%（26例）,动力学采样成功率（脑脊液成功采样6次及以上）80%（10例）。结论 本模型操作简单、结果稳定、成功率高、重复性高,适合脑部作用药物进行脑脊液动力学研究。     

LC-MS测定大鼠脑脊液与血浆中西达本胺浓度及其药动学研究

目的建立快速检测SD大鼠脑脊液和血浆中西达本胺浓度的LC-MS测定方法,并应用于大鼠静脉注射西达本胺后的脑脊液和血浆中药动学研究。方法对建立的检测大鼠脑脊液和血浆中西达本胺浓度的LC-MS分析方法进行专属性、精密度、准确性、基质效应及稳定性等考察验证。♂SD大鼠12只,分为2组,每组6只,分别静脉注射给予西达本胺3,6 mg·kg^–1剂量,于给药后0.083,0.25,0.5,1,1.5,2,3 h采集脑脊液和血浆,采用LC-MS测定大鼠脑脊液和血浆中西达本胺的浓度变化,并利用DAS药动学软件拟合脑脊液和血浆中AUC、C_max、T_max、t_1/2等主要药动学参数,计算血脑屏障透过率。结果方法学研究显示,大鼠脑脊液中西达本胺线性范围为0.2～64 ng·mL^–1(r=0.999 0,定量下限为0.2 ng·mL^–1),血浆中西达本胺的线性范围为2～1 000 ng·mL^–1(r=0.999 1,定量下限为2 ng·mL^–1     

基于AUC权重的参麦注射液多组分整合毒代动力学

课题组前期研究系统考察了参麦注射液在大鼠和犬等动物体内多种组分的毒代动力学。文章中提出了基于AUC自定义权重系数"中药多组分整合毒代动力学"思路,在参麦注射液犬和大鼠的毒代动力学数据基础上,根据各组分的AUC值计算各组分的权重系数,对血药浓度进行加权求和,获得基于AUC自定义权重系数的整合毒代动力学模型。参麦注射液的整合毒代模型能较为准确的反应参麦注射液在动物体内的暴露、蓄积等情况,并与相关生物标志物有高度的关联性。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中人参果抗肿瘤活性成分25-OCH3-PPD

目的 建立Beagle犬血浆中25-OCH3-PPD浓度的LC-MS/MS测定方法.方法 血浆样品用乙腈提取,采用选择性反应监测方法测定其血药浓度.检测仪器为Thermo TAQ型液相色谱-质谱联用仪,离子源为APCI源,用于定量分析的离子反应为:m/z 493.4→425.5(25-OCH3-PPD)和m/z 180.2→110.2(非那西丁);色谱柱为:Agilent Ci8柱(4.6× 150 mm,5μm);流动相为:水-甲醇(5:95,V/V).结果 25-OCH3-PPD的线性范围为5～1000 ng/mL,方法的绝对提取回收率为87.7％～98.0％,批内和批间的精密度均小于11.2％,血浆介质对25-OCH3-PPD低、中、高3个浓度水平的测定影响程度均小于15％.结论 该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于临床前Beagle犬血浆中25-OCH3-PPD的测定及其药代/毒代动力学研究.     

临床前药物安全性评价研究中的毒代动力学

正1毒代动力学的历史和含义临床前药物安全性评价研究中的毒代动力学(Toxicokinetics,TK)研究受试物在毒性试验中不同剂量水平下的全身暴露程度和持续时间,预测受试物在人体暴露时的潜在风险,是非临床毒性试验的重要研究内容之一[1]。药物TK是一门较新的学科,人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)首次提出TK研究的指导原则(ICH,S3,a、b部分)[2-4]。国内药物TK     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定参麦注射液中9种皂苷

目的:本研究采用高效液相色谱-串联质谱检测方法,建立同时测定参麦注射液中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rc,Rd,Rb1,Rb2,Ro和麦冬皂苷D的分析方法。方法:本实验应用Thermo BDS Hypersil C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm),柱温30℃。以乙腈(A)-0.02%醋酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 mL·min-1,以电喷雾离子源选择反应监测(SRM)方式正离子模式分别检测离子对m/z 823.5→643.75(人参皂苷Rg1),m/z 969.4→789.46(人参皂苷Re),m/z 823.6→371.94(人参皂苷Rf),m/z 1101.7→343.17(人参皂苷Rc),m/z 969.4→789.46(人参皂苷Rd),m/z 1131→371.80(人参皂苷Rb1),m/z 1101.7→343.35(人参皂苷Rb2),m/z 979.7→641.65(人参皂苷Ro);负离子模式检测离子对m/z 889.4→853.67(麦冬皂苷D)。结果:本法专属性良好,各成分均能达到有效分离,线性关系良好(r>0.99),人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rc,Rd,Rb1,Rb2,Ro和麦冬皂苷D最低定量限分别为0.03、0.003、0.3、0.03、0.003、0.03、0.03、5、3 ng·mL-1,回收率均在97.10%¹02.14%范围内,重复进样精密度均小于2.63%(RSD)。讨论:与文献中报道方法相比,本方法快速、灵敏度高、准确性好、重复性好,可以对参麦注射液中含量差异较大的四类皂苷类成分进行同时定量,能够用于参麦注射液的含量测定和质量控制。