穿心莲内酯对铜绿假单胞菌PAO1诱发小鼠感染模型的体内保护作用研究

目的:考察穿心莲内酯对铜绿假单胞菌PAO1诱发小鼠感染模型的体内保护作用。方法:将左氧氟沙星配比不同剂量穿心莲内酯灌胃给予腹腔注射PAO1菌液复制的小鼠细菌感染模型,以小鼠24、48、72 h死亡率为指标,考察穿心莲内酯对左氧氧氟沙星的协同体内抗感染作用;采用全波长多功能酶标仪在420 nm下测定6个不同浓度(100、10、1、0.1、0.01、0.001μg.m L-1)穿心莲内酯对PAO1 24 h内生长速率的影响。结果:穿心莲内酯可有效提高左氧氟沙星对PAO1细菌感染小鼠模型的存活率(P0.05~0.01),但对体外铜绿假单胞菌PAO1生长无影响。结论:穿心莲内酯可提高左氧氟沙星体内抗PAO1的作用,但该作用与其直接抗菌作用无关。     

铜绿假单胞菌MexAB-OprM主动外排表型筛选和外排基因检测

目的 研究解放军总医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排系统，为指导临床合理选择抗生素提供依据。方法 采用外排泵抑制剂（苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺）与喹诺酮类抗生素，以微量肉汤稀释法测定加与不加外排泵抑制剂时环丙沙星与左氧氟沙星的最低抑菌浓度（MIC）值，并计算MIC值的变化，根据加与不加外排泵抑制剂MIC值降低3个稀释度及以上筛选主动外排表型阳性菌株；PCR扩增外排表型阳性菌的耐药基因oprM、mexB和mexR，并对3株菌进行mexR基因测序分析；RT-PCR检测oprM基因的mRNA水平，分析耐药基因的表达情况。结果 苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺能极大的降低左氧氟沙星和环丙沙星的MIC值，70株多重耐药铜绿假单胞菌中46株表型阳性（65．7％），其中PCR检测oprM、mexB和mexR基因同时阳性菌株42株（91．3％），仅oprM基因阳性2株（4．3％），oprM、mexB和mexR基因均阴性2株（4．3％）。RT-PCR产物测定A值（A260／A280）与PAO1对照阳性菌株13株，以PAO1的oprM／rpoD的A值为对照阳性菌株4株，同时满足A值（A260／A280）和oprM／rpoD比值均高于PA01的菌株3株。测序结果与GenBank中已知的mexR基因比对，其中2株同源性为100％，1株第434位核苷酸插入2bp（AT）。结论 中国人民解放军总医院多重耐药铜绿假单胞菌大多存在主动外排的耐药机制，其耐药与外排泵过度表达相关。     

作用于铜绿假单胞菌外排泵的药物筛选模型的建立及初步应用

铜绿假单胞菌是耐药性十分突出的一类院内感染条件致病革兰氏阴性细菌，根据外排泵是铜绿假单胞菌产生耐药性的主要原因这一原理，以铜绿假单胞菌的外排泵为靶点，用过量表达外排泵的铜绿假单胞菌Y5和外膜微孔蛋白（OprD2)缺陷菌株7208以及铜绿假单胞菌标准菌株PAO1建立了一个作用于铜绿假单胞菌外排泵的药物筛选模型。应用此模型可以初筛作用于铜绿假单胞菌外排泵的药物以及与现有已知的抗生素有协同作用的活性物质的筛选，应用所建立的方法从2449株微生物发酵液中（真菌1700株，放线菌700株，海洋细菌49株）筛选得到4株阳性菌，多次发酵表明这4株阳性菌产生抗铜绿假单胞菌的活性物质的性质比较稳定，进一步的工作正在进行之中。     

碳青霉烯类抗生素耐药性铜绿假单胞菌现状

１９９５年１月至１９９８年１２月，日本广岛红十字医院分离到铜绿假单胞菌２６０株，试验其对亚胺培南、头孢他啶、头孢唑肟、拉氧头孢、咙拉西林、阿米卡星、米诺环素及氧氟沙星等８种药物的敏感性。对其中具有亚胺培南、头孢他啶、氧氟沙星中度或高度耐药性的铜绿假单胞菌，追加帕尼培南、美罗培南、头抱吡肟、头孢匹罗、头孢唑兰及左氧氟沙星等６种药物试验，结果以亚胺培南的抗菌力最优。对亚胺培南、头抱他啶、氧氟沙星耐药的菌株分别占１１．５％、１１．９％、２９．２％。亚胺培南耐药菌株中，４６．６％对美罗培南敏感；而对美罗…     

左氧氟沙星和美洛培南体外诱导铜绿假单胞菌耐药的外排机制研究

目的:研究左氧氟沙星和美洛培南对铜绿假单胞菌耐药的诱导作用及诱导耐药的外排机制。方法:多步诱导法对3株铜绿假单胞菌进行诱导耐药试验,对诱导出的菌株用微量肉汤稀释法测定加与不加外排泵抑制剂(苯丙氨酸-精氨酸-!萘酰胺)的最小抑菌浓度(MIC)的变化,PCR法检测外排泵基因oprM和mexB,并扩增mexR基因进行DNA测序。结果:3株菌均诱导出稳定的耐左氧氟沙星和美洛培南的耐药株,MIC值与原菌比较分别增加了16倍～64倍和2倍～16倍,加外排泵抑制剂后左氧氟沙星的MIC值降低了4倍～8倍;3株菌诱导前后均扩增出外排泵基因oprM和mexB,mexR测序结果与GenBankU23763比较,核苷酸序列第222位(C→T),氨基酸序列(CTG→TTG)均为LEU,为无义突变,核苷酸序列第436位插入1bp(A)移码框。结论:左氧氟沙星和美洛培南可诱导铜绿假单胞菌产生获得性耐药,其耐药机制与主动外排相关。     

美罗培南对las、rhl基因缺陷型铜绿假单胞菌生物膜的体外作用

目的:研究美罗培南对铜绿假单胞菌(PA)PAO1野生型及其PAO1 lasI rhlI、PAO1 lasR rhlR基因缺陷型菌株生物膜的作用。方法:(1)试管双倍稀释法测定美罗培南对铜绿假单胞菌PAO1野生型及其PAO1 lasI rhlI和PAO1 lasR rhlR基因缺陷型菌株的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。(2)采用生理盐水-吸痰管系统进行铜绿假单胞菌PAO1野生型、PAO1 lasI rhlI和PAO1 lasR rhlR基因缺陷型生物膜培养7d后,用美罗培南26 mg·L~(-1)作用24h,然后用扫描电子显微镜观察生物膜的变化。结果:(1)美罗培南对PAO1野生型、PAO1 lasl rhlI基因缺陷型和PAO1 lasR rhlR基因缺陷型3种铜绿假单胞菌菌株的MIC均为1mg·L~(-1),MBC均为2 mg·L~(-1)。(2)7 d后PAO1野生型和PAO1 lasR rhlR基因缺陷型铜绿假单胞菌都可形成较厚、有孔状通道的生物膜,PAO1 lasl rhlI基因缺陷型形成明显稀薄的早期生物膜结构;经过美罗培南作用后,PAO1野生型铜绿假单胞菌的生物膜结构明显稀薄,而PAO1 lasI rhlI、PAO1 IasR rhlR基因缺陷型铜绿假单胞菌的生物膜结构基本被破坏。结论:铜绿假单胞菌的las、rhl基因可影响其生物膜的形成及生物膜对美罗培南的敏感性。     

铜绿假单胞菌临床分离株对喹诺酮类药物的耐药性研究

目的：对铜绿假单胞菌的耐药性进行调查并研究药物联用后对铜绿假单胞菌MIC的逆转情况。方法：通过琼脂二倍稀释法检测86株铜绿假单胞菌对四种喹诺酮类药物与利舍平及维拉帕米联用前后的MIC值及86株桐绿假单胞菌对其它常用抗生素的MIC值;用微量棋盘稀释法测得氧氟沙星、环丙沙星与头孢他啶、哌拉西林联合作用后的部分抑菌浓度（FIC）指数。结果：86株铜绿假单胞菌对诺氟沙星耐药率为74.4% ;氧氟沙星的耐药率为52.2%;环丙沙星耐药率为15.1%;洛美沙星耐药率为20.9%。加入利舍平及维拉帕米后四种喹诺酮类药物对大部分菌株的MIC值均无变化,氧氟沙星和环丙沙星与头孢他啶、哌拉西林联用后FIC指数范围为0.1～1.5,66%的FIC指数≤0.5。结论：86株铜绿假单胞菌除对四种喹诺酮类药物呈现交叉耐药外,还对大多数临床常用的抗生素在耐药。利舍平及维拉帕米不能使诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、洛美少星的耐药性降低。氧氟沙星和环丙沙星与头孢他啶、哌拉西林联用有相加或协同作用,抗菌活性明显增强。     

海南某三甲医院多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM表达及与耐药表型的关系研究

目的探讨多重耐药铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM的表达及其与耐药表型的关系。方法选取2016年9月至2018年10月儋州市人民医院微生物培养室分离的Pa 54株,采用琼脂稀释法测定14种抗菌药物的MIC,加外排泵抑制剂苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺(PAβN)进行干预实验,实时荧光定量PCR检测膜融合蛋白mexA、mexC、mexE、mexX的mRNA表达水平,以判断MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM的表达情况,PCR扩增调控基因mexR、nfxB、mexT、mexZ对扩增产物进行测序,使用Blast软件在GenBank上与已知序列进行比对。结果RT-PCR检测发现,耐药菌株中18株(33.33%)Pa高表达MexAB-OprM外排系统,9株(16.67%)高表达MexCD-OprJ外排系统,12株(22.22%)高表达MexEF-OprN外排系统,14株(25.93%)高表达MexXY-OprM外排系统。抑制剂作用下18株MexAB-OprM外排泵高表达Pa株对头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星的MIC为2~64μg/ml,9株MexCD-OprJ高表达株中6株对头孢噻肟的敏感性MIC为2~128 mg/ml,12株MexEF-OprN中对环丙沙星、亚胺培南的敏感性MIC为4~128 mg/ml,14株MexXY-OprM为庆大霉素、环丙沙星高度耐药菌株。分别随机选择mexA、mexC、mexE、mexX高表达菌株中的4个菌株,mexR高表达菌株中发生3个mexR基因突变;4个nfxB高表达菌株中均发生82位的突变;4个mexT高表达菌株中均发生26位的突变;2个mexZ高表达菌株发生138位的突变,1个发生50位的突变。结论主动外排系统MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM过度表达是Pa多重耐药机制之一,同时与其调控基因mexR、nfxB、mexT、mexZ发生突变相关。     

156株铜绿假单胞菌感染分布及耐药性分析

目的 了解医院铜绿假单胞菌在临床的分布状况和耐药情况,为临床合理选择抗菌药物提供依据.方法 对我院2008年11月～2009年11月各种标本分离的铜绿假单胞菌用K-B法进行药敏试验,对结果进行统计分析.结果 1年内共检出156株铜绿假单胞菌,主要来自呼吸科、ICU、神经中心患者的痰液标本,目前推荐用于铜绿假单胞菌治疗的头孢吡肟、头孢他啶、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林-他唑巴坦、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率依次为48.8%、50.0%、66.7%、66.7%、54.5%、32.7%、53.2%.多重耐药株和泛耐药株各占40.4%和3.2%.结论 本院铜绿假单胞菌的耐药率处于高位,必须采取有力措施控制多重耐药株和泛耐药株的流行.     

奥美拉唑对耐氧氟沙星的铜绿假单胞菌主动外排泵的抑制作用

目的 研究奥美拉唑作为主动外排泵抑制剂提高铜绿假单胞菌对氧氟沙星的敏感性.方法 二倍稀释法筛选临床分离的铜绿假单胞菌,测定耐氧氟沙星菌株对主动外排泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)和加入奥美拉唑后的敏感性.将CCCP和奥美拉唑分别加入铜绿假单胞菌培养液,分为单纯培养的铜绿假单胞菌组、铜绿假单胞菌 CCCP组、铜绿假单胞菌 奥美拉唑组,用RP-HPLC测定分别加入CCCP和奥美拉唑后的0.17、0.50、0.75、1、3、8、15、30、60 min时铜绿假单胞菌菌体内摄取氧氟沙星的含量.结果 在不同时间点,铜绿假单胞菌 CCCP组和铜绿假单胞菌 奥美拉唑组菌体内摄取的药量均显著高于铜绿假单胞菌组.结论 奥美拉唑作为主动外排泵抑制剂,可增强铜绿假单胞菌对氧氟沙星的敏感性.     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

槲皮素代谢产物定性检出条件研究

目的:研究给予大鼠槲皮素后血浆中代谢产物的定性检出条件。方法:给予大鼠槲皮素单体(100mg.kg-1)后腹腔静脉取血,血浆样品经2mol.L-1盐酸(甲醇-水溶液)水解,采用高效液相色谱法对血浆样品中代谢产物进行定性分析。结果:大鼠给药后3h内取血、血浆样品经盐酸水解处理4h,可稳定检测槲皮素和异鼠李素,样品在—20℃条件下贮存稳定。结论:血浆样品采集时间、盐酸水解时间及贮存方式等不同均可影响代谢产物的有效检出。     

甲泼尼龙佐治毛细支气管炎疗效观察

目的探讨甲泼尼龙与布地奈德治疗毛细支气管炎的疗效。方法将182例毛细支气管炎患儿随机分成三组,三组均采用综合治疗,A组62例用甲泼尼龙静脉滴注,B组60例雾化吸入布地奈德,C组60例用静滴氢化可的松,观察三组喘憋、哮鸣音消失和住院时间。结果A组喘憋、哮鸣音消失时间及住院时间均比B,C组缩短（P〈0.05）。结论甲泼尼龙静滴治疗毛细支气管炎有效、安全、方便,明显加快治愈过程,优于布地奈德与氢化可的松。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

绝经妇女宫颈涂片特点及诊断

目的:探讨绝经妇女宫颈病变的诊断及筛查的必要性。方法:对980例绝经妇女宫颈涂片特点进行回顾性分析。结果:未绝经组及绝经组宫颈Ⅱb涂片的检出率分别为5.17%及4.08%,两组比较差异无显著性(P>0.05)。两组涂片检查的敏感性无差别,特异性差异有显著性(P<0.05)。结论:对绝经妇女进行宫颈细胞学筛查是非常必要。     

复发性耳廓假性囊肿的治疗

目的 探讨不同方法对复发性假性耳廓囊肿的治疗效果.方法 对2008年5月至2012年2月在我科就诊的58例复发性假性耳廓囊肿分成2组,穿刺抽液+冷冻+加压包扎组(19例),手术切除囊肿前壁软骨+对穿缝合组(39例),随访3个月到1年,观察2组治愈率、复发率,有效率、并发症等情况.结果 对照组1次治愈后痊愈5例,复发14例,治愈率为26.3％,复发率为73.7％,有效率为78.9％,其中耳廓增厚6例,1例并发化脓性软骨膜炎.观察组治愈38例,复发1例,经过1次穿刺后治愈,治愈率为97.4％,复发率为2.6％,有效率为100.0％.所有患者无耳廓变形、增厚,无化脓性耳廓软骨膜炎的并发症.结论 囊肿前壁软骨切除+对穿缝合是治疗复发性假性耳廓囊肿的高效、首选办法,值得推广.     

大蒜提取物抗肿瘤作用研究进展

癌是严重威胁人类生命和健康的恶性肿瘤,中药大蒜含有多种抗癌活性成分,其抗癌、防癌作用已被国内外大量实验研究结果证实。本文就大蒜提取物的抗癌、防癌作用及在这方面的研究进展作一综述。     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。