LC-MS鉴定大鼠血浆山柰酚代谢产物

目的:采用液相色谱-质谱联用技术鉴定大鼠给药山柰酚单体后血浆中代谢产物。方法:取给药后大鼠的血浆样品经酶水解、酸水解后,进行色谱分离,采用液相色谱-质谱联用仪检测,大气压电喷雾离子源(EPI)负离子条件下进行扫描,鉴定大鼠给药山柰酚(30 mg.kg-1)单体后血浆中代谢产物的结构。结果:通过与山柰酚对照品谱图比较,结合质谱仪扫描结果分析,在大鼠给药山柰酚单体后血浆中鉴定出山柰酚(m/z286.0)代谢产物结构。结论:采用酶水解、酸水解的方法可快速、有效地鉴定出大鼠血浆中山柰酚代谢产物,为进行含山柰酚中药及其复方的药物代谢动力学研究奠定科学基础。     

采用UHPLC-MS和质量亏损过滤技术分析二苯乙烯苷在大鼠体内的代谢产物和代谢途径

目的:分析二苯乙烯苷在大鼠体内的代谢产物并推测代谢途径。方法:将雄性SD大鼠随机分为血浆组(n=3)、尿液组(n=3)、胆汁组(n=3)和组织组(n=9),各组大鼠均单次灌胃二苯乙烯苷200 mg/kg,分别收集给药后10、30 min和1、1.5、2、4 h的血浆,给药后0~6 h的尿液,给药后0~4 h的胆汁以及给药后30 min和1、2 h(每个时间点3只)的心、肝、脾、肺、肾、胃组织样品,经甲醇沉淀蛋白后,采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术和质量亏损过滤技术联合分析、鉴定各样本中的代谢产物,推测代谢途径。结果:从血浆、尿液、胆汁、心、肝、脾、肺、肾、胃样品中分别检出6、7、11、1、5、1、3、4、4个代谢产物,包括Ⅰ相代谢(如水解、加氢、羟化)产物2个、Ⅱ相代谢(如葡萄糖醛酸结合和硫酸化)产物18个,其中葡萄糖醛酸结合产物有12个。结论:二苯乙烯苷在胆汁中的代谢产物种类居多,以Ⅱ相代谢产物二苯乙烯苷的葡萄糖醛酸结合产物为主;代谢途径主要涉及葡萄糖水解、加氢、羟化、葡萄糖醛酸结合、硫酸化反应等。     

HPLC-ECD法测定大鼠血浆中银杏叶黄酮成分及药代动力学研究

目的:建立大鼠灌胃银杏叶提取物后血浆中黄酮类成分的灵敏分析方法,并进行药代动力学研究。方法:血浆样品经葡萄糖醛酸苷水解酶水解后,采用高效液相色谱分离及电化学检测,同时分析大鼠血浆样品中槲皮素、异鼠李素和山柰酚。色谱柱为Agilent Zorbax Ec lipse XDB-C8(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-异丙醇-磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钠-磷酸,pH=2)(15?15?70),流速0.8 mL.m in-1,检测电压为200 mV,柱温30℃。结果:槲皮素、异鼠李素和山柰酚与其他内源性和药源性成分达到良好分离;最低检测浓度达到0.5 ng.mL-1;平均提取回收率分别为88.7%,86.2%,87.0%;准确度在92.7%~105.3%之间,日内精密度RSD小于6.6%,日间精密度RSD小于14.1%,样品分析时间为20 m in。大鼠灌胃给予银杏叶提取物10 mg.kg-1后,酶水解血浆中槲皮素、异鼠李素和山柰酚的半衰期分别为(3.53±1.88)h,(6.94±4.05)h,(3.97±2.30)h;3个黄酮类成分在大鼠血浆中都显示明显的二次达峰现象。结论:建立的检测方法能灵敏、特...     

槲皮素血浆代谢物抗大鼠C6脑胶质瘤细胞的作用

目的:考察槲皮素大鼠血浆中的代谢物对大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的作用。方法:将槲皮素血浆代谢产物槲皮素、槲皮苷和异鼠李素分别与C6胶质瘤细胞共培养24 h后,LDH活性法检测代谢产物对C6脑胶质瘤细胞的毒性作用,流式细胞仪检测C6胶质瘤细胞凋亡与线粒体膜电位变化。结果:槲皮素和异鼠李素对大鼠C6胶质瘤细胞有显著的细胞毒性作用,均能显著诱导C6胶质瘤凋亡(P<0.05),槲皮素显著降低线粒体膜电位(P<0.05)。结论:槲皮素血浆中的槲皮素甲基化代谢产物是主要的抗肿瘤活性成分,而槲皮素苷类代谢产物抗肿瘤活性较弱,为槲皮素及其靶向制剂进一步应用于脑胶质瘤的治疗提供参考依据。     

槲皮素在大鼠血浆及组织中的分布

目的:研究槲皮素在大鼠血浆及其组织中的分布.方法:大鼠灌胃给予槲皮素100mg·kg-1,1 h后断头处死,分离血浆及各组织,以香兰素为内标建立高效液相色谱法测定槲皮素在血浆及各脏器中的药物浓度.结果:大鼠灌胃给药后,槲皮素能迅速分布至各组织中.其浓度在胃中最高,其次为血、肝、肾、心、肺、脾,而在肌肉及大脑中则未检测出.结论:槲皮素组织分布广泛.HPLC法测定槲皮素在血浆及组织中的药物浓度,稳定、简便.     

黄山药总皂苷肠内菌代谢及代谢产物吸收的研究

目的 :本文离体和整体观察人和大鼠肠内菌对黄山药总皂苷(DX)的代谢作用及整体给予DX后吸收入血的有效成分。方法 :用薄层色谱(TLC)及电喷雾质谱(ESI -MS)法检测粪中DX及其代谢产物。整体给予大鼠灌服DX900mg/kg ,于给药后不同时间采集尿及血清样品 ,用ESI -MS检测吸收入血成分。结果 :DX容易被人和大鼠消化道菌群代谢 ,随着代谢时间的延长 ,出现了各种甾体皂苷的降解产物及终产物薯蓣皂苷元 (Dio)。整体实验表明 ,在大鼠血及尿中均发现分子量为415 3的代谢产物 ,经ESI -MS二级质谱分析 ,上述分子量的化合物为Dio。结论 :DX可被人和大鼠肠内菌代谢 ,DX经口服后Dio被吸收入血。     

新型Rho激酶抑制剂DL0805-1大鼠体内药代动力学初步研究

目的建立一种高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定具有Rho激酶抑制作用的吲唑类化合物DL0805-1在大鼠血浆中血药浓度的方法,并用该法研究DL0805-1的药物代谢动力学。方法检测系统为Agilent 1200-DAD;色谱柱:Agilent TC-C18(4.6 mm×250mm,5μm);检测波长:235 nm;柱温:35℃;流速:1 ml·min-1;流动相:乙腈与0.05%H3PO4梯度洗脱;尾静脉给予大鼠DL0805-1,于不同时间点取血,测定血浆中DL0805-1的浓度并计算其药物代谢动力学参数。结果尾静脉给予DL0805-1后,在血浆中检测到原型及其代谢产物。其中,DL0805-1的半衰期为(2.34±1.42)h,达峰浓度为(3.51±0.44)mg·L-1,代谢产物半衰期为(1.27±0.45)h,达峰浓度为(3.55±0.22)mg·L-1。结论 DL0805-1在体内可能代谢成其它物质发挥生物学作用。该法灵敏度高,操作简便、准确,可用于大鼠血浆中DL0805-1的测定及药动学研究。     

四逆散化学成分及其在大鼠血浆和肝脏中原型成分和代谢产物分析

目的:基于UHPLC-QTOF-MS分析四逆散在大鼠血浆和肝脏中原型成分和代谢产物,推测其代谢途径。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组(n=3)、血浆组(n=3)和肝组织组(n=12)。除对照组外,各组大鼠以30 g·kg^-1灌胃四逆散提取液,连续给药3 d,每天1次。收集血浆组大鼠末次给药后0.5, 1, 2, 4, 6 h的血浆样品;收集肝组织组大鼠末次给药后0.5, 1, 2, 4 h的肝组织样品(每个时间点3只)。乙腈沉淀蛋白,采用UHPLC-QTOF-MS和质量亏损过滤技术,分析四逆散水提液的化学成分、血浆和肝脏的代谢产物。结果:从四逆散中鉴定56个化学成分(准确鉴定14个),主要包括黄酮类、柴胡皂苷类、甘草三萜类和芍药苷类;大鼠血浆和肝脏中共鉴定14个原型成分和29个代谢物,Ⅰ相代谢产物6个、Ⅱ相代谢产物23个,其中葡萄糖醛酸结合产物12个、硫酸化结合产物7个。结论:四逆散在大鼠血浆和肝脏的代谢产物主要以Ⅱ相代谢葡萄糖醛酸化和硫酸化为主;主要代谢途径有羟基化、葡萄糖醛酸化、硫酸化、硫酸化与葡萄糖醛酸化结合等。     

X射线辐射对阿帕替尼在大鼠体内代谢的影响

目的 用超高压液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析方法鉴定辐射组和正常组大鼠体内阿帕替尼的代谢产物，探究X射线辐射对阿帕替尼体内代谢的影响。方法 将大鼠随机分成4组，辐射1组、辐射2组大鼠进行X射线腹腔照射，照射剂量为2 Gy,正常1组和正常2组大鼠不照射，照射完成后24 h, 4组大鼠均灌胃给予45 mg·kg^-1阿帕替尼。采集大鼠给药前和给药后的血浆、尿样和粪样。生物样品经固相萃取法处理后进行UPLC-Q-TOF-MS/MS分析，用Peakview和Metabolitepilot软件鉴定阿帕替尼的代谢产物。结果 在正常组大鼠体内检测到53个代谢产物，包括46个Ⅰ相代谢产物和7个Ⅱ相代谢产物。在辐射组大鼠体内发现64个代谢产物，包括54个Ⅰ相代谢产物和10个Ⅱ相代谢产物。在正常1组和辐射1组大鼠血浆中代谢产物无差异；与正常2组相比，辐射2组大鼠尿中增加了5个代谢产物，粪中增加了9个代谢产物。阿帕替尼在正常组大鼠体内的主要代谢途径包括氧化、N-脱烷基化、水解、脱氢化、氢化、硫酸酯化、葡萄糖醛酸化。与正常组相比，X射线辐射增加了...     

HPLC法测定大鼠血浆中奥拉西坦的浓度

目的:建立大鼠血浆中奥拉西坦浓度的检测方法。方法:取大鼠8只,一次性灌胃给予奥拉西坦200 mg.kg-1,给药2 h后取血,采用高效液相色谱法检测其血药浓度。色谱柱:Symmetry shiedTMRP18;流动相:乙腈-水(3.2∶96.8,V/V),流速:0.8 mL.min-1;检测波长:210 nm;柱温:40℃;进样量:20μL。结果:奥拉西坦的保留时间为3.65 min;其检测浓度的线性范围为2～100 mg.L-1(r=0.999 8);低、中、高浓度血浆样品的绝对回收率分别为(91.1±5.17)%、(97.9±3.22)%、(98.4±1.99)%,方法回收率分别为(96.35±3.01)%、(101.40±3.41)%、(102.23±1.37)%;日内RSD分别为2.86%、4.38%、3.54%,日间RSD分别为3.25%、3.17%、3.14%;奥拉西坦血浆样品-40℃保存30 d及反复冻融3次后性质稳定,血浆样品处理后放置4 h对测定无影响。8只大鼠血浆样品中奥拉西坦的平均浓度为(35.58±10.83)mg.L-1。结论:本方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可用于大鼠血浆中奥拉西坦浓度的测定。     

银杏酮酯及其HP-β-环糊精包合物在大鼠体内的药物动力学

目的建立测定大鼠血浆中槲皮素、山柰素浓度的反相高效液相色谱法,研究银杏酮酯颗粒及其HP-β-环糊精包合物大鼠灌胃后体内药物动力学行为。方法血浆标本水解后,经乙酸乙酯提取,以甲醇-水-磷酸为流动相;12只大鼠随机均分为2组,分别灌胃银杏铜酯颗粒及其包合物后,检测血浆药物浓度。药时曲线采用DAS药代计算程序处理。结果槲皮素在2.6~264.0μg.mL-1,山柰素在1.2~120μg.mL-1与峰面积线性关系良好。结果表明GBE50经包合后,槲皮素主要药动学参数Cmax,tmax,AUC0-t,AUC0-∞分别为(0.219 4±0.034 5)mg.L-1、(4±1)h、(0.872±0.243)h.mg.L-1、(0.843±0.431)h.mg.L-1;参比制剂中槲皮素主要药动学参数Cmax、tmax、AUC0-t、AUC0-∞分别为(0.164 6±0.004 1)mg.L-1、(8±3)h、(0.434±0.132)h.mg.L-1、(0.577±0.143)h.mg.L-1。GBE50经包合后山柰素主要药动学参数Cmax、tmax、AUC0-t、AUC0-∞分别为(0.016 3±0.003)mg.L-1、(1±0.2)h、(0.077±0.023)h.mg.L-1、(0.09±0.04)h.mg.L-1;参比制剂中山柰素主要药动学参数Cmax、tmax、AUC0-t、AUC0-∞分别为(0.015 5±0.002)mg.L-1、(8±3)h、(0.023±0.003 5)h.mg.L-1、(0.026±0.011 2)h.mg.L-1.以槲皮素计,包合物的相对生物利用度为146.10%;以山柰素计,包合物的相对生物利用度为346.15%。结论该法准确,适用于槲皮素和山柰素血浆浓度的测定;制备的银杏酮酯-羟丙基-β-环糊精包合物与银杏铜酯颗粒相比,吸收明显增加。     

HPLC法测定马兜铃酸Ⅰ在大鼠体内的浓度及其毒代动力学

目的：建立大鼠血浆中马兜铃酸Ⅰ的HPLC测定方法，采用单次灌胃给药毒性研究的3种剂量对马兜铃酸Ⅰ进行毒代动力学的初步研究，了解在毒性实验条件下马兜铃酸Ⅰ所达到的全身暴露与毒性之间的内在联系。方法：大鼠分别灌胃给予马兜铃酸Ⅰ100、30、10mg／kg，测定不同时间点的血浆药物浓度，应用统计矩的方法对血药浓度．时间数据进行拟合并计算毒代动力学参数。结果：测定方法的最低定量浓度为0．02mg／L，线性范围为0．02～40．00mg／L，回收率在82．4％～101．2％之间，日内、日间RSD小于1．0％。100、30、10mg／kg3个剂量组的主要毒代动力学参数如下：t1/2a分别为（0．8±0．4）、（0．9±0．7）、（1．0±0．8）h；t]1／2分别为（34±19）、（133±64）、（114±50）h；tmax分别为（0．31±0．12）、（0．25±0．00）、（0．38±0．19）h；Cmax分别为（3．0±1．7）、（1．1±0．7）、（1．0±0．7）mg／L；AUC（0-48）分别为（18±3）、（18±2）、（21±5）mg·L^-1·h。结论：该方法重现性好、灵敏度高，适用于大鼠血浆中马兜铃酸Ⅰ的测定。马兜铃酸Ⅰ能迅速吸收入血，随后快速分布、缓慢消除。在毒性剂量下，马兜铃酸Ⅰ在大鼠体内的毒代动力学过程具有非线性动力学性质。     

小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS同时测定方法的建立及在药动学研究中的应用

目的：建立同时测定小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS法,并研究小型猪皮肤外用二丙酸倍他米松乳膏后,二丙酸倍他米松及倍他米松的药动学特征。方法：血浆样品经酸化后以乙醚-环己烷（4∶1）提取,LC-MS/MS分析,以Hedera ODS-2（150 mm×2.1 mm,5μm）为分析柱,流动相为5 mmol·L-1醋酸铵水溶液（含0.1%乙酸）–甲醇,梯度洗脱。二丙酸倍他米松、倍他米松及内标布地奈德的监测离子对分别为m/z 563.2（[M＋CH3COO]-）→483.1、m/z 451.2（[M＋CH3COO]-）→361.0和m/z 489.3（[M＋CH3COO]-）→357.1。对小型猪外用二丙酸倍他米松乳膏后其血浆中二丙酸倍他米松及代谢物倍他米松的浓度进行测定,并计算主要药动学参数。结果：二丙酸倍他米松血药浓度在26.85~644.4 ng·L-1范围内线性关系良好,倍他米松血药浓度在10.62~637.2 ng·L-1范围内线性关系良好。结论：本方法专属性强、简便、灵敏,可用于血浆样本中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的测定及药动学研究。     

HPLC法测定大鼠血浆中1’-羟基咪达唑仑及咪达唑仑的浓度

目的:建立大鼠血浆中咪达唑仑及其代谢产物1’-羟基咪达唑仑测定的高效液相色谱（HPLC）方法。方法:血浆样品以地西泮为内标,经碳酸盐缓冲液碱化后,由混合有机溶剂（正己烷:二氯甲烷=7:3,v/v）提取。采用Hypersil BDS C₁₈（250mm×4.6 mm,5μm）柱,以KH₂PO₄(0.02 mol·L^-1)缓冲液-乙腈-甲醇（38:20:42）为流动相,柱温40℃,流速1.0 ml·min^-1,于紫外230 nm处检测1’-羟基咪达唑仑及咪达唑仑浓度。结果:在该试验条件下,血浆中1’-羟基咪达唑仑的线性范围为8.32～832 ng·ml^-1,最低检测限为8.32 ng·ml^-1;咪达唑仑的线性范围为25～2 500 ng·ml^-1,最低检测限为25 ng·ml^-1。其日间和日内精密度均小于8%,提取回收率为84～90%。结论:本方法专属性强、灵敏度高、重复性好,适用于实验室评价药物间相互作用研究。     

LC-ESI-MS同时测定大鼠血浆中盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的：建立同时测定大鼠血浆中盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法。方法：采用高效液相色谱串联质谱法,色谱柱为Shim Pack VP—ODS C18色谱柱（150mm×2．0mm,5μm）,柱温30％,流动相为乙腈：0．5％甲酸水溶液（80：20,氨水调pH=3．5）,流速0．2ml·min^-1。结果：盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的最低检测限范围为1．0～1．2ng·ml^-1,定量下限范围为5．0～11．5ng·ml^-1,日内、日间RSD〈2．98％。结论：该法准确、快速,可用于上述4神成分的药动学研究。     

咖啡酸在大鼠体内的药动学研究

目的:建立测定大鼠血浆中咖啡酸浓度的高效液相色谱法,并用于药动学研究。方法:测定大鼠灌胃与静脉注射给药后咖啡酸的血药浓度,采用药动学程序Topfit 2·0进行统计处理,计算非室模型药动学参数。结果:大鼠灌胃给药后咖啡酸的主要药动学参数Cmax为(0·56±0·12)μg·mL-1,tmax为(0·18±0·04)h,t1/2为(0·67±0·12)h,ke为(1·05±0·20)h-1,AUC(0~t)为(0·34±0·05)μg·h·mL-1;大鼠静脉注射给药后t1/2为(0·45±0·05)h,ke为(1·55±0·18)h-1,AUC(0~t)为(9·07±2·24)μg·h·mL-1。结论:大鼠灌胃给予咖啡酸后,吸收迅速,消除半衰期较短,其绝对生物利用度较低。     

大鼠体内槲皮素的血药浓度测定及其药代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆中槲皮素浓度的高效液相色谱法,并应用于药代动力学研究。方法10只大鼠(雌雄各半)灌胃给予槲皮素50 mg/kg。采用高效液相色谱法测定槲皮素的血药浓度,以山柰酚为内标,流动相为甲醇-缓冲液(0.1 mol/L NH4AC+0.3 mmol/LEDTA-Na2)-乙酸=(60∶40∶1,V/V),色谱柱为迪马ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),测定波长为370 nm,进样量为20μL,流速为1 mL/min,柱温为35℃。结果槲皮素血药浓度线性范围是0.01～50μg/mL(r=0.999 9),定量下限为0.01μg/mL。低、中、高(0.05,5,25μg/mL)3个质量浓度的回收率为97.2%～103.4%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。大鼠灌胃给予槲皮素50 mg/kg后的最大血药浓度为(2.033±0.41)μg/mL,达峰时间为0.5 h,t1/2ke为(4.17±0.64)h,0-∞药时曲线下面积为(6.77±0.80)μg/(h.mL)。结论方法专属性高,准确、灵敏,可为今后槲皮素的药代动力学研究提供方法学依据。     

莫昔沙星对苯妥英钠在家兔体内药动学的影响研究

目的:研究莫昔沙星对苯妥英钠药动学的影响。方法:10只家兔耳缘静脉推注苯妥英钠(10mg·kg-1),给药后10、30、60、120、240、360、480min时采血样建立苯妥英钠单用组;自最后一次采血样后48h喂服莫昔沙星(10mg·kg-1)连续5d,第6天给药2h后静脉注射苯妥英钠(10mg·kg-1),不同时间采血样建立苯妥英钠与莫昔沙星合用组;以紫外分光光度法测定各组血样中苯妥英钠的血药浓度,以3p97药动学软件拟合药动学参数。结果:与单用组比较,合用组苯妥英钠血药浓度下降;2组AUC分别为(5836.22±489.13)、(4329.21±344.67)mg·min·L-1(P<0.05),t1/2β分别为(196.11±22.68)、(158.21±28.76)min(P<0.01),消除速度常数和清除率分别增加1.38、1.32倍(P<0.01),Vd无显著性差异(P>0.05)。结论:与莫昔沙星合用后苯妥英钠体内代谢速度加快。     

HPLC测定大鼠血浆中阿魏酸的浓度及其药动学研究

目的建立测定大鼠血浆中阿魏酸的反相高效液相色谱法,并测定灌胃给予康脉心口服液（Kangmaixin oral liquid,KMX）后大鼠血浆中阿魏酸的浓度及药动学参数。方法血浆样品经酸化后用乙酸乙酯进行液-液萃取,色谱柱为Diamonsil TM C18（4．6mm×250mm,5μm）,Agilent C18预柱;流动相为乙腈-0．085％H3P04溶液（17：83）;流速1．0mL·min^-1;DAD检测波长316nm;柱温35℃。测定KMX灌胃后阿魏酸在大鼠体内的血药浓度,建立阿魏酸药时曲线,并对其进行房室模型的拟合和药动参数的计算。结果阿魏酸在0．13704-5．710gg·mL^-1内具有良好的线性关系（r=0．9998）,最低定量限为6．852ng;样品溶液在36h内稳定,精密度良好（RSD〈5．0％）;平均回收率为91．8％-100．5％。阿魏酸在大鼠体内过程符合二室模型,Tmax=20．10min,Cmax=743．6ng·mL^-1,T1/2Ka=6．781min,T1/2a=17．82min,T1／2β=179．4min。结论该方法简便、灵敏度高,无杂质干扰,可用于KMX中阿魏酸的药动学研究,其中阿魏酸在大鼠体内吸收分布迅速而消除慢。     

普卢利沙星活性代谢产物NM394的检测及其药动学特征

目的建立人血浆中普卢利沙星活性代谢产物NM394检测的HPLC法,并进行其在人体内药动学的研究。方法10名健康受试者单剂量口服200mg普卢利沙星片后,采集一系列血样,检测其血药浓度。血浆经高氯酸沉淀蛋白,以ZORBAX Eclipse XDB—C18（150mm×4．6mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈-2％醋酸-水=20：40：40（V/V/V）,流速为0．8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为278nm。结果NM394在血药浓度0．05-7．50mg·L^-1内线性关系良好（r=0．9999）,定量下限为0．05mg·L^-1;低、中、高3个浓度的相对回收率（n=5）分别为（105．16±1．86）％、（105．01±1．94）％、（100．40±4．53）％,日内RSD（n=5）分别为5．57％、2．36％、2．31％,日间RSD（n=5）分别为3．25％、2．22％、4．26％。药动学参数分别为：ρmax（1．480±0．329）mg·L^-1,tmax（0．825±0．374）h,AUC0→t（6．853±1．679）mg·h·L^-1,AUC0→∞（7．488±1．687）mg·h·L^-1。结论本方法简便、灵敏、快速、准确,适用于人血浆中普卢利沙星活性代谢产物NM394浓度的检测及其药动学研究。