B群链球菌荚膜多糖抗原的分离纯化工艺研究

目的为提高荚膜多糖抗原得率,降低荚膜多糖中残余蛋白质含量和核酸含量,提高荚膜多糖抗原纯度,优化B群链球菌荚膜多糖的提取纯化工艺条件。方法研究pH值,沉淀核酸和荚膜多糖的乙醇浓度,乙醇沉淀多糖所需的温度和时间;比较蛋白酶K法、Sevag法和冷酚抽提法去除荚膜多糖中杂蛋白质的效果。结果建立起25%乙醇沉淀去核酸,冷酚抽提法去蛋白质分离纯化荚膜多糖,55%乙醇沉淀多糖的方法。3批GBSⅢ发酵液中获得的荚膜多糖的唾液酸含量为12.4%~14.8%;分配系数(Kav)≤0.5的多糖回收率达90%以上;荚膜多糖得率为0.021~0.027 g/L,抗原纯度较高。结论从发酵液中提取纯化荚膜多糖抗原的工艺是可行有效的。     

香菇多糖的精制

目的研究香菇多糖精制工艺。方法用酶解法和Sevag法脱蛋白;用透析法除去小分子物质;用苯酚-硫酸法测定香菇多糖含量。结果香菇粗品多糖经精制后其纯度为79.4%。结论本法可用于香菇多糖的精制。     

不同种类黄芪中多糖含量的比较

目的：本文对不同品种(蒙古黄芪、膜英黄芪)黄芪中多糖成分进行含量测定。方法：运用水提醇沉法提取蒙古黄芪,膜荚黄芪,用苯酚-浓硫酸比色法测定多糖含量。结果：以葡萄糖为对照品,苯酚-浓硫酸比色法测定线性关系良好,平均回收率99．50%,RSD1．25%。结论：不同品种,不同产地黄芪根中含有的多糖存在较大差异。     

静态离子交换法脱除黄芪粗多糖液中蛋白的研究

目的筛选黄芪粗提多糖除蛋白的最优工艺条件。方法通过一系列因素的考察,以蛋白脱除率和多糖保留率为指标,考察离子交换树脂对黄芪粗多糖除蛋白的最优工艺,并采用吸附等温线对蛋白的脱除效果进行评价。结果经筛选,D152阳离子交换树脂具有较好的蛋白脱除效率,且对多糖含量影响较小,其蛋白脱除率和多糖保留率分别为68.5%和97.3%,D152树脂对蛋白质的吸附呈单分子层吸附,其最大吸附量q0为16.50mg/g。结论 D152阳离子交换树脂适用于黄芪粗多糖的除蛋白,为其工业化生产奠定基础。     

“双高优化法”优化柴胡多糖提取工艺及多糖含量研究

目的:采用"双高优化法"优化柴胡多糖提取工艺,同时提高多糖得率和提取物多糖含量,降低部分难以经纯化除去的杂质。方法:在预实验筛选提取方法和醇沉工艺的基础上以水浴回流结合水提醇沉提取柴胡多糖,以"双高优化法"即以柴胡多糖得率和含量的归一值为评价指标,辅以响应面法优化出"双高"提取工艺,对"双高"工艺组和普通组分别作三次验证试验,测算两试验组的多糖含量差距,再对提取物进行初步纯化,研究两组多糖含量差异是否变化。结果:"双高"提取工艺:料也比38 m L·g~(-1),提取温度98℃,提取2次,每次4 h。验证结果:多糖得率6.23%,多糖含量53.57%,比普通优化组的含量高9.44%。用未筛选工艺的Sevag法初步纯化两组提取物,"双高"组精多糖含量达67.85%,与普通组精多糖含量差距不仅未缩小,反而有所增大。结论:经"双高优化法"优化的提取工艺,其多糖得率和提取物多糖含量均很高,该工艺能避免提取出部分无法由Sevag法除去的杂质,提高提取物在Sevag纯化中的纯化率。     

海胆黄多糖SEP纯化工艺的研究

为了规模化制备具有抗肿瘤活性的海胆黄多糖(SEP),简化纯化步骤和提高多糖收率,在原有分离纯化方法的基础上,结合超滤技术,对SEP的纯化工艺进行了优化。采用木瓜蛋白酶-Sevag联用法,以超滤法替代减压浓缩和透析去除杂质,优化酶法提取条件和超滤参数。研究结果表明:用0.6%的木瓜蛋白酶在pH 6.5、60℃酶解5 h,可去除18.3%的蛋白质,3次Sevag法后,蛋白质去除率达71.7%,多糖回收率80.1%。采用截留相对分子质量100 k的膜超滤浓缩,压力0.05 MPa,原液质量浓度1.2 mg/mL,浓缩3倍时的多糖截留率为84.0%。各步骤多糖累计回收率为67.3%,该纯化工艺可获得高产率高纯度的SEP,为规模化制备SEP奠定了基础。     

芦荟多糖的分离纯化及其相对分子质量和含量测定

目的 研究库拉索芦荟多糖的分离纯化,测定分离得到的纯化多糖PSA2的相对分子质量及其多糖和蛋白质的含量. 方法采用水提醇沉法提取粗多糖,反复冻融法除蛋白质,DEAE-cellulose 52和Sephadex G-100凝胶色谱柱纯化多糖,得到纯化组分(PSA2),高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测定PSA2的相对分子质量,苯酚 硫酸法测定其多糖含量,考马斯亮蓝G-250法测定其蛋白质含量. 结果 PSA2的相对分子质量为8 457.4,其多糖含量为 61.0%,蛋白质含量为0.7%. 结论 多糖的提取工艺简单可行,HPGPC法,苯酚 硫酸法和考马斯亮蓝G-250法准确快捷.     

西藏土当归多糖的纯化及对兔血红蛋白的影响

目的 研究西藏当归多糖的纯化及对兔血红蛋白的影响.方法 采用水煮醇沉法对西藏当归多糖进行粗提,用Sevag试剂和阴、阳离子交换法对比纯化粗多糖.结果 纯化后的当归多糖水溶解、灭菌注谢于兔皮下,采用HiCN法检测兔血红蛋白的含量,一段时间内兔血红蛋白稳步升高,且达一相对稳定值.结论 当归多糖具有刺激血红蛋白生成的作用.     

黄芪叶中有效成分含量的研究

目的：研究膜荚黄芪叶中皂苷、黄酮、多糖的含量。方法：采用连续回流提取法和超声波提取法提取膜荚黄芪叶中的皂苷、黄酮、多糖类成分,比色法测定其含量。结果：黄芪叶中黄酮和皂苷的含量较高。     

黄芪地上部分中多糖含量的研究

目的:对黄芪花、茎中的多糖成分进行提取,并测定了含量。方法:以UV-光度法对黄芪花、茎中多糖含量进行测定。结果:黄芪花中多糖含量为2．676mg/g,茎中含量为10．599mg/g。结论:黄芪地上部分中含有多糖类成分,茎中多糖比花中略高。     

败酱草多糖的脱蛋白研究

目的研究败酱草多糖的脱蛋白工艺。方法采用Sevag法、三氯乙酸法、酶法对败酱草多糖进行脱蛋白研究。结果酶法脱蛋白效果明显好于Sevag法,三氯乙酸法的多糖损失较多。在木瓜蛋白酶用量4%（W/V）、pH值6.0、温度55℃、酶解时间2.5 h的条件下,败酱草多糖的蛋白脱除率为51.65%,多糖损失率为7.93%。结论用酶法脱蛋白效果较好。     

板桥党参多糖的含量测定

目的:建立板桥党参多糖含量测定的方法。方法:采用传统的水提醇沉法提取多糖,石油醚脱脂,savage法脱蛋白;以板桥党参精制多糖测得板桥党参多糖对葡萄糖的换算因子,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果:平均加样回收率为98.9%,RSD=1.1%;板桥党参中多糖的含量为19.53%。结论:该法简便、快速、准确、重现性好,为板桥党参的质量控制提供一定依据。     

益智多糖含量测定

目的 研究益智中多糖含量测定方法。方法 水提醇沉法提取粗多糖,Sevage法除蛋白,H₂O₂脱色,流水透析和冷冻干燥制备多糖。PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生,HPLC测定其单糖组成。以益智精致多糖测得多糖对葡萄糖的换算因子,苯酚-硫酸法测定益智中多糖的含量。结果 益智多糖由葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖五种单糖组成。益智多糖含量为12.91%,RSD=4.72%(n=5),平均加样回收率为99.1%,RSD为4.57%(n=5)。结论 该法简便,快捷,可用于益智多糖的含量测定。     

当归多糖与黄芪多糖配伍对辐射损伤模型小鼠的保护作用

目的：研究当归多糖与黄芪多糖配伍对辐射损伤模型小鼠的保护作用。方法采用60Coγ射线对小鼠进行全身照射复制辐射损伤模型。以小鼠30 d存活率和死亡小鼠平均存活时间、小鼠外周血白细胞数、骨髓细胞DNA含量、血清丙二醛（ MDA）含量为指标,观察当归多糖、黄芪多糖及其不同比例配伍对辐射损伤模型小鼠的保护作用。结果在当归多糖、黄芪多糖及其不同比例配伍的药物保护组中,小鼠30 d平均存活率升高,死亡小鼠平均存活时间延长,外周白细胞计数增加,骨髓细胞DNA含量增加,MDA含量降低。结论当归多糖、黄芪多糖及其不同比例配伍对辐射损伤模型小鼠均有一定的保护作用,其中以当归多糖∶黄芪多糖（3∶1）配伍的效果最佳。     

阿魏侧耳子实体多糖分离纯化及其化学结构的初步研究

对阿魏侧耳子实体多糖的分离纯化及其级份PW2的化学结构进行了初步研究。阿魏侧耳子实体经热水提取醇沉得粗多糖PW。将PW用Sevag法脱蛋白后,去离子,层析,分级分离得3种多糖级份PW1、PW2和PW3,PW2经紫外光谱鉴定不含有蛋白质和核酸;采用纸色谱和高压电泳以及柱色谱分析结果表明多糖PW2满足结构分析的要求。测定其分子量为3.18×104。PW2经过完全酸水解后,测定多糖是由葡萄糖和半乳糖两种单糖组成,摩尔比例为1.77∶1。通过红外光谱,核磁共振测试分析,初步确定多糖PW2主要以α构型为主,含有少量β构型,单糖的连接方式主要以1-6连接为主链,含有1-4连接的支链,糖环构型为D-吡喃糖环。     

咳尔康口服液中多糖脱蛋白方法研究

目的研究咳尔康口服液中多糖脱蛋白的方法。方法以糖保留率和蛋白去除率为指标,对氯化钙法、盐酸法、三氯乙酸法、Sevag法4种脱蛋白方法进行比较。结果通过正交试验确定了Sevag法的最佳条件为：样品：（氯仿-正丁醇）=3：1,氯仿：正丁醇=3：1,振荡30min,添加试剂2次。结论 Sevag法脱蛋白效果最好。     

维药阿里红多糖的提取及免疫活性研究

目的对新疆维药阿里红中的多糖进行提取,并研究阿里红粗多糖体外免疫活性。方法建立热水提取、乙醇沉淀、Sevag法除蛋白的方法提取阿里红多糖（FoP）,红外及紫外吸收光谱检测其性质,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量;采用MTT法检测不同浓度FoP在体外对小鼠脾细胞及腹腔巨嗜细胞增殖率的影响。结果 FoP产率为0.85%,多糖含量为68.81%;IR谱中,3423,2929,1651,1456,1130,1091,617cm^-1处表现为典型的多糖吸收峰;UV谱中,260,280nm处均无吸收峰;体外活性试验中,FoP对小鼠脾细胞、腹腔巨嗜细胞的生长具有明显的促进作用。结论 FoP具有一定的免疫调节活性。     

灵芝多糖的提纯、组成及活性研究

目的探讨灵芝多糖的分离纯化、单糖组成以及抗肿瘤活性。方法采用热水提取,Sevag法去蛋白质,乙醇分级沉淀,DEAE-32离子交换色谱法从灵芝子实体粉中分离得到灵芝多糖。用SephadexG-100凝胶柱色谱法判断其纯度及相对分子质量,用薄层色谱法及气相色谱法鉴定其单糖组成,溴化四唑蓝法测定其体外抗肿瘤活性。结果从灵芝子实体粉中分离得到两种粗多糖GLPⅠ、GLPⅡ。GLPⅠ进一步分离得到两种均一多糖GLPH1、GLPH2。GLPH1糖苷键为β型,相对分子质量为45000。GLPH1由葡萄糖、半乳糖和痕量甘露糖、岩藻糖组成。GLPH1对KB细胞、BGC细胞、B16细胞的增殖具有一定的抑制作用。结论灵芝多糖GLPH1可望开发成抗肿瘤药或辅助抗肿瘤药。     

红芪多糖的脱蛋白及脱色素工艺

目的：研究红芪多糖（HPS）的脱蛋白、脱色工艺。方法：采用L9（34）正交试验和单因素试验分别优选Sevage法脱蛋白工艺与过氧化氢脱色素工艺。结果：Sevage法脱蛋白工艺为：样液与试剂的体积比为1∶1,氯仿与正丁醇的体积比为4∶1,振摇30min,静置20min。过氧化氢脱色素条件是脱色时间为2～4h,用量为5～20ml过氧化氢每50ml样液。结论：优化后的条件适合于红芪多糖的脱蛋白、脱色素。     

桦褐孔菌多糖的纯化及其单糖组成分析

目的对桦褐孔菌多糖进行纯化,并对其中的单糖组成进行研究。方法桦褐孔菌粗多糖经过脱蛋白、脱色得到纯化多糖。柱前衍生化后利用气相色谱分析得到多糖的单糖组成。结果酶法+TCA法蛋白脱除率较高,为82.32%;多糖保留较多,为76.13%。聚酰胺层析柱法多糖脱色效果最好,脱色率高达93.39%,并且多糖保留率也高达81.68%。多糖脱蛋白后的纯度从之前的21.5%提升到80.4%,脱色后的纯度从80.4%提升到85.2%。桦褐孔菌的多糖主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,各单糖质量百分数分别占3.84%、3.69%、3.32%、18.52%、27.30%、28.17%。结论桦褐孔菌多糖最佳脱蛋白方法为酶法+TCA法,最适宜的脱色方法是聚酰胺层析柱法。气相色谱分析方法简便、灵敏,不但多糖纯度高,而且可以准确测出桦褐孔菌多糖中单糖组成。