北虫草子实体脂溶性化学成分的GC-MC分析

目的:研究北虫草子实体中的脂溶性成分.方法:采取新鲜的北虫草子实体,用低温烘干后,粉碎,分别用乙醚和石油醚(60-90℃)回流提取6小时,提取物经浓缩后进行甲酯化,并由GC-MS方法对北虫草子实体脂溶性成分进行分析和鉴定.结果:两种提取剂的提取结果基本一致,北虫草子实体乙醚提出物中检测出23个物质峰,鉴定出17种脂溶性成分,主要成分为亚油酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、脱氢麦角甾醇和反式角鲨烯的相对百分含量分别为37.78%,35.42%,6.67%,957%,3.33%,1.99%.结论:本法简便、快速,灵敏度高,可作为北虫草子实体及含北虫草子实体制剂中脂溶性物质的质量定性定量研究.     

水提法和微波助提法在蛹虫草多糖提取中的应用

目的:探讨蛹虫草菌丝体多糖提取方法的应用。方法:利用水提法和微波助提法提取蛹虫草菌丝体中多糖成分,利用苯酚-硫酸法测定其多糖的含量。结果:水提法粗多糖的提取率为22.26%,微波助提法的提取率为15.16%。结论:菌丝体粗多糖提取过程中应用传统水提法提取率高,但其工艺复杂、耗时,微波助提法工艺简便、快速。     

辽阳产人工北虫草中虫草素含量的测定

目的通过一定有效的实验方法测定辽阳产人工北虫草中的虫草素含量。方法使用不同方法对实验北虫草进行提取并使用HPLC法测定,以虫草素标准品测定标准曲线,测定使用不同提取方法提取的北虫草样品中虫草素的含量。结果在甲醇浓度20%料液比1∶30、提取时间30 min条件下提取效果最好。在以水∶甲醇∶甲酸=95∶4∶1为流动相的情况下使用HPLC法测得样品中虫草素含量最高,含量为0.14%。结论本实验方法可对人工培育冬虫夏草中的虫草素含量进行测定。并且经过分析认为,实验中使用的辽宁省辽阳地区出产的人工培育冬虫夏草质量较好,其生产工艺值得推广。     

北虫草子实体脂溶性化学成分的GG-MC分析

目的：研究北虫草子实体中的脂溶性成分。方法：采取新鲜的北虫草予实体，用低温烘干后，粉碎，分别用乙醚和石油醚（60～90℃）回流提取6小时，提取物经浓缩后进行甲酯化，并由GC—MS方法对北虫草子实体脂溶性成分进行分析和鉴定。结果：两种提取剂的提取结果基本一致，北虫草子实体乙醚提出物中检测出23个物质峰，鉴定出17种脂溶性成分，主要成分为亚油酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、脱氢麦角甾醇和反式角鲨烯的相对百分含量分别为37．78％，35．42％，6．67％，9．57％，3．33％,1．99％。结论：本法简便、快速，灵敏度高，可作为北虫草子实体及含北虫草子实体制剂中脂溶性物质的质量定性定量研究。     

冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的分离纯化与含量测定

[目的]从冬虫夏草菌丝体发酵液中提取,分离虫草多糖,并建立样品中多糖的含量测定方法。[方法]采用D101大孔树脂分离冬虫夏草菌丝体发酵液中的多糖;采用苯酚-硫酸法测定样品中多糖含量。[结果]虫草多糖的得率为14·2g/L;样品中虫草多糖的含量为70·6%。[结论]方法简便,准确,重现性好,可用于冬虫夏草菌丝体发酵液中虫草多糖的提取纯化和含量测定。     

生地对大鼠血浆中SOD GST-PX活性丙二醛含量的影响

目的 :探讨生地提取物对大鼠血浆中SOD、GST—PX活性丙二醛的影响。方法 :用生地的石油醚、乙醇、水提取物给大鼠口服 12天后 ,测大鼠血浆中超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GST—PX)的活性和丙二醛 (MDA)的含量。结果 :生地提取物有激发内源性抗氧化酶活性和抗体内脂质过氧化的作用。     

TCA/丙酮沉淀对尿液标本中微量蛋白效果分析

目的:探讨研究TCA/丙酮沉淀法在尿液蛋白提取中的效果。方法:采用丙酮沉淀法、ACN/0.1%TFA沉淀法、TCA/丙酮沉淀法三种不同方法沉淀尿液蛋白,并经对双向电泳(2-DE)图谱,对比三种方法对尿液蛋白2-DE结果的影响。结果:尿液样本经20%TCA/丙酮沉淀法沉淀后所得的蛋白点数及蛋白回收率分别为(392±14)%与(69.4±7.8)%,较ACN/0.1%TFA沉淀法与丙酮沉淀法的蛋白点数及蛋白回收率均有显著优势。TCA方法得到的双向电泳图谱背景清晰,蛋白点分辨率高。结论:TCA/丙酮沉淀法作为较为理想的蛋白沉淀提取方法,具有高效、简便的显著优势。     

长座虫草子实体和菌丝体中碱基和核苷类物质的HPLC分析

建立高效液相色谱法同时测定长座虫草中13种核苷和碱基类物质,色谱条件为：TSKgel ODS-100V色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.01 mol/L KH2PO4水溶液系统为流动相,梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长260 nm,柱温20℃。13种成分在50 min内均达到基线分离,线性关系良好(r≥0.9990,n=8);平均回收率在98.4%~107.5%(RSD<2.0%,n=5)。结果表明长座虫草子实体中胞嘧啶、次黄嘌呤含量相对较高;菌丝体中尿嘧啶、鸟苷、腺苷含量较高,尿苷在菌丝体和子实体中含量均较高。     

人急性早幼粒HL60细胞双向电泳条件的优化

目的:比较不同蛋白提取方式和不同电泳条件下HI60细胞全蛋白的双向电泳结果,寻找新的针对HL60细胞省时高效的双向电泳条件.方法:分别采用标准蛋白提取,三氯乙酸/丙酮沉淀和超声破碎三种不同蛋白提取方法,在传统双向电泳和改良双向电泳条件下做对比,并做蛋白点数和凝胶重复性分析.结果:在传统等电聚焦条件下,双向电泳凝胶图谱两端均出现大量横纹和阴影,分离效果较差.采用改良双向电泳条件后,三种蛋白提取方法的蛋白分离效果均明显改善,重复性提高,并且省时、可靠.其中,标准蛋白提取优于三氯乙酸/丙酮沉淀和超声破碎两种蛋白提取方法,蛋白点数即可达到(1102±7)个,重复性为(74.8±6.4)%,基本满足后续蛋白点的筛选和比对.三氯乙酸/丙酮沉淀法可造成部分蛋白损失,仅能分离出(844±15)个蛋白点.超声破碎法虽然使得蛋白点数明显增多,但可重复性明显下降,还不足40%.结论:采用标准蛋白提取法和改良的电泳条件,可以省时、高效地分离HL60细胞全蛋白.     

虫草菌丝体HPLC指纹图谱的研究

目的:建立虫草菌丝体的HPLC指纹图谱方法,为质量控制提供一定参考依据。方法:以phenomenx.OOG-4435-EO-C_(18)为色谱柱;流动相为甲醇-0.05%磷酸水梯度洗脱,检测波长为260nm,进样量为10μL,流速为1.0 m L/min;对指纹图谱进行相似度评价以及聚类分析。结果:建立虫草菌丝体的HPLC指纹图谱,确定9个共有峰;确定其相对保留时间以及相对峰面积的比值,该方法能够很好的鉴别不同生产厂家虫草菌丝体产品。结论:该方法精密度、稳定性和重复性良好,可应用于虫草菌丝体的质量控制。     

人工培养蛹虫草与冬虫夏草的比较研究

目的：为蛹虫草的开发利用提供依据。方法：从生物学地位及资源状况、化学成分和安全性评价等方面对蛹虫草和冬虫夏草进行详细的比较分析。结果：蛹虫草与冬虫夏草是同一个属;子实体三大营养素总量略高于冬虫夏草,脂肪含量是冬虫夏草的一半左右;虫草酸含量稍低,其他特殊成分含量都很高,特别是虫草素的含量远高于冬虫夏草;对小鼠急性经口毒性试验表明蛹虫草属实际无毒级。结论：人工培养蛹虫草可以替代冬虫夏草使用。     

柞蚕蛹虫草超微粉对小鼠免疫功能的增强作用

目的：探讨东北柞蚕蛹虫草超微粉对小鼠免疫功能的影响,为提高柞蚕蛹虫草的利用率提供依据。方法：40只小鼠随机分为阴性对照组,低（0.1665 g·kg^-1）、中（0.3333 g·kg^-1）和高剂量柞蚕蛹虫草超微粉组（0.9999 g·kg^-1）;每组10只。低、中和高剂量柞蚕蛹虫草超微粉组小鼠经口给予柞蚕蛹虫草超微粉30 d,阴性对照组小鼠经口给予等量蒸馏水。测定各组小鼠体质量、脾脏指数和胸腺指数,采用小鼠淋巴细胞转化实验观察淋巴细胞转化能力,足跖增厚法检测小鼠迟发型变态反应水平,检测小鼠抗体生成细胞数、小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数。结果：与阴性对照组比较,各剂量柞蚕蛹虫草超微粉组小鼠体质量、脾脏指数和胸腺指数差异无统计学意义（P>0.05）;中和高剂量柞蚕蛹虫草超微粉组小鼠淋巴细胞转化能力高于阴性对照组（P<0.05）;中和高剂量柞蚕蛹虫草超微粉组小鼠迟发型变态反应水平高于阴性对照组和低剂量柞蚕蛹虫草超微粉组（P<0.05）;各剂量柞蚕蛹虫草超微粉组小鼠抗体生成细胞数高于阴性对照组（P<0.05）;各剂量柞蚕蛹虫草超微粉组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数高于阴性对照组（P<0.05）。结论：东北柞蚕蛹虫草超微粉对小鼠免疫功能有增强作用,推荐剂量为0.333 3和0.9999 g·kg^-1。     

人工虫草菌丝体提取物抗哇巴因所致心脏毒性作用的研究

观察了人工虫草菌丝体石油醚及水提取物抗哇巴因所致豚鼠心脏毒性,并且通过测定ＳＯＤ及ＭＤＡ观察其抗菌自由基作用。结果表明石油醚提取物可显著提高哇巴因所致豚鼠心脏毒性和死亡剂量,可有效地增加ＳＯＤ活性及降低ＭＤＡ含量,提示本品可对抗哇巴因的心脏毒性和死亡剂量,可有效地增加ＳＯＤ活性及降低ＭＤＡ含量,提示本品可对抗哇巴因的心脏毒性,提高机体的抗氧化能力,未见水提物抗哇巴因所致豚鼠心脏毒性及抗氧自由基的作     

冬虫夏草及其发酵虫草中甘露醇含量比较研究

目的：首次进行了对冬虫夏草和不同菌种、不同发酵工艺的虫草中甘露醇的含量测定。方法：采用紫外分光光度法测定冬虫夏草和不同菌种、不同发酵工艺的发酵虫草中甘露醇的含量。结果：实验结果表明冬虫夏草的甘露醇含量最高，与发酵虫草的含量有差异。结论：发酵虫草能否作为冬虫夏草的代用品还需进一步研究。     

蚕蛹虫草镇静及性激素样作用的研究

蚕蛹虫草水煎剂灌胃给药，对小鼠具有镇静作用，能减少小鼠自主活动次数，协同戊巴比妥钠催眠作用，抗惊厥，提高耐疲劳能力；明显升高正常大鼠血浆皮质醇及睾丸酮含量，增加大鼠体重及包皮腺、精囊、前列腺的重量，而且增加去势大鼠精囊一前列腺重量，具有雄激素样作用。其作用性质及强度与冬虫夏草相似。     

蛹虫草菌丝生长特性的初步研究

目的：研究蛹虫草菌丝的生长特性。方法：通过蛹虫草菌株在培养基上的生长试验,观察其菌丝生长速度及产分生孢子的数量等生长情况。结果：不同菌株在相同培养基上的生长速度和产孢量相似,相同菌株在不同培养基上差别较大。结论：培养基的成分对蛹虫草菌丝的生长速度和产孢量有较大影响。     

北冬虫夏草子实体培养条件的探索

目的模拟自然条件刺激的方法诱导北虫草产生子实体。方法利用正交设计的方法培养北虫草子实体。结果找到了培养子实体的比较合适的温度、湿度、光照时间、昼夜温差、接种量、营养液比例等条件,并发现了植物激素玉米素、吲哚乙酸有加快子实体生长及增加子实体多糖含量的作用。结论该方法缩短了北虫草子实体的培养周期。     

蝙蝠蛾拟青霉及蛹虫草与野生冬虫夏草活性比较

目的 冬虫夏草是我国珍稀药用资源,具有多种药理活性.但是天然虫草产量少需求大,使其成为濒危资源.通过研究与其具有相似的化学成分和药理作用的蝙蝠蛾拟青霉和蛹虫草,可以对其进行保护.方法 利用野生冬虫夏草、蝙蝠蛾拟青霉和蛹虫草的有效成分含量测定,抗疲劳活性,免疫增强活性及体外降血糖活性研究进行比较.结果 3种虫草均含有多糖,腺苷和虫草酸;此外,蝙蝠蛾拟青霉和蛹虫草中的多糖及虫草酸含量均与冬虫夏草相当;冬虫夏草具有显著的降血糖活性、抗疲劳活性和免疫增强活性;蝙蝠蛾拟青霉具有很好的降血糖活性和抗疲劳活性;蛹虫草具有显著的免疫增强活性和抗疲劳活性;且三者对小鼠的自主活动次数均无显著影响,表明三者均对小鼠无刺激性.结论 蝙蝠蛾拟青霉和蛹虫草与野生冬虫夏草的药理作用相似,具有很大的发展空间.     

柞蚕蛹虫草对老龄大鼠单胺氧化酶活性和脂褐质及羟脯氨酸含量的影响

目的：探讨柞蚕蛹虫草对老龄Wistar雄性大鼠组织中的单胺氧化酶（MAO-B）活性、脂褐质及羟脯氨酸含量的影响。 方法：经口给药14 d后,采用紫外比色法测定MAO-B活性,用荧光比色法测定脂褐质含量及分光光度法测定羟脯氨酸含量。 结果：3个老龄实验组的MAO-B活性、脂褐质及羟脯氨酸含量与老龄对照组比较,差异均有显著性（P<0.05）。结论：柞蚕蛹虫草具有降低老龄实验组脑、肝组织中MAO-B活性,降低心、肝、脑组织中羟脯氨酸含量的作用,且能增加皮肤中羟脯氨酸的含量。