血培养仪阳性报警标本的多参数分析

目的评价法国生物梅里埃公司Bact/ALERT 3D全自动血培养仪阳性结果中病原菌分布及假阳性报警率,以指导血培养结果的正确解读。方法对2013年8-10月的血培养仪阳性报警瓶进行转种培养,采用VITEK-2Compact全自动细菌鉴定仪进行分离菌的鉴定,分析分离菌的种类、假阳性报警率及原因。结果 224瓶阳性报警瓶中菌株分离阳性191瓶,总阳性率为85.27%,假阳性报警率为14.73%;所分离出的病原菌中,肠杆菌科细菌占首位为68.06%,其次为葡萄球菌属、非发酵菌和链球菌属,分别占16.23%、8.38%和2.62%;分离菌报阳时OD值>4 000占55.80%,OD值3 000⁴ 000占33.93%,OD值2 0004 000占33.93%,OD值2 000³ 000占10.27%;标本阳性报警1d内出现占73.66%,2d内出现占90.62%,3d内出现占93.75%,3d后才出现占6.25%。结论肠杆菌科细菌和葡萄球菌属是引起菌血症和败血症发生的主要病原菌,为减少假阴性结果的产生,应加长培养时间,至少培养3d,并察看OD值曲线状态有助于判断假阳性。     

骨盆骨折患者的护理

目的 总结骨盆骨折患者临床治疗的护理方法及体会.方法 收集2009年10月至2010年10月入住我科的80例骨盆骨折患者的I临床资料,密切关注患者病情变化,均行一般护理,主要护理措施包括:急救护理、心理护理、并发症的观察和护理、康复护理及给予患者出院指导等.结果 80例骨盆骨折患者均随访1个月～2年,依Matt评分标准,经相应的护理后,恢复情况为优者58例占75.3%,良17例占22.1%,-般2例占2.6%,其中3例占3.8%合并重要脏器损伤,最终因伤势过重死亡.结论 对骨盆骨折患者术前术后采取有效的护理措施,能够挽救患者生命,加快其生理功能的康复.     

免疫比浊法与ELISA法检测梅毒抗体的一致性比较

目的 评价免疫比浊法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测梅毒抗体的一致性.方法 以ELISA检测门诊和住院患者标本共10 985例,ELISA阳性者再做苍白密螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)及免疫比浊法(3TP).结果 共检出ELISA阳性200例,ELISA法与3TP和TPPA检测结果阳性符合率均为92.50％,ELISA法无漏检,出现假阳性15例,假阳性率1.70％;3TP与TPPA检测阳性符合率为98.40％,3TP漏检3例,漏检率1.60％,出现假阳性3例,假阳性率为0.03％,3种方法的阳性检出率差异无统计学意义;按ELISA的原始吸光度值,将200例标本分为高、中和低吸光度组,把每组中的3种方法进行统计学比较,高吸光度组和中吸光度组中3种方法的阳性符合率均＞95.0％,检测结果差异无统计学意义;在低吸光度组中,ELISA法与3TP和TPPA的符合率均为70.70％,3TP与TPPA的符合率为87.80％,检测结果差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 ELISA、3TP两种检测方法均有较高的灵敏度和特异性,尤其是在中、高吸光度值时,3TP特异性比ELISA强,且与TPPA的一致性很好,可用做梅毒的大批量初筛和确认试验.     

HIV抗体筛查的回顾性分析与初筛流程的建立

目的 建立适于微生物科室临床标本人类免疫缺陷病毒(HIV)筛查的流程.方法 对近3年来医院用硒标法和(或)ELISA法初筛HIV阳性与确认结果之间的关系进行回顾性分析.结果 硒标法敏感度为97.75%,ELISA法敏感度为100.00%,两法在真阳性标本中的符合率为97.75%;硒标法和ELISA法单一阳性时,假阳性率约为90.00%,两法均阳性时,假阳性率仅为2.25%;ELISA法吸光度值(OD)＜0.60时.硒标法和确认结果＞96.00%均为阴性.结论 综合以上两法检测特点和初筛结果回顾性分析,科室建立了不同临床标本的HIV初检和复查流程,这对预防HIV医院感染具有积极意义,对其他医院HIV初筛流程的建立也有参考作用.     

Caco-2细胞单层模型的建立和评估

目的 建立Caco-2细胞单层的培养和模型评价的方法,为后续研究普萘洛尔(propranolo)对映异构体转运动力学特征奠定基础.方法 常规培养条件下,将Caco-2细胞分别以2.5×105、5.5×105 cells/ml分别接种于Transwell的聚碳酸脂膜上(0.4ml/well),在培养10d、15d和21d后,以细胞单层跨膜电阻(Transepithelial electrical resistance,TEER)、标志物的表观通透系数(The apparent permeability coefficients,Papp)初步评价 Caco-2细胞单层模型的完整性,以扫描电镜和透射电镜验证模型的完整性,以期确定建模时的细胞接种密度和培养时间;检测细胞单层模型在HBSS液和不同浓度的普萘洛尔溶液中培养不同时间时的TEER值,以评价单层模型的稳定性.结果 以5.5×105 cells/ml 接种21d后,TEER＞200Ω*cm2、Papp＜1.0×10-6cm/s,形态学观察可见细胞融合形成连续、完整的单细胞层,细胞表面覆盖一层刷状缘微绒毛;细胞单层模型在HBSS液和盐酸普萘洛尔药液(≤640mmol/L)中孵育8h后TEER＞200Ω*cm2.结论 以5.5×105 cells/ml为细胞接种密度且培养至21d后,Caco-2细胞单层形态与小肠上皮细胞类似,跨膜电阻、标志物透过量均达到要求,具有良好的完整性,而且细胞单层的完整性在HBSS液和盐酸普萘洛尔药液(≤640mmol/L)中可稳定8h,表明该细胞模型建立成功,可用于后续普萘洛尔对映异构体药物吸收动力学研究.     

复方氯已定含漱液与碳酸氢钠溶液对于昏迷患者口腔护理的疗效比较

目的探讨复方氯已定含漱液与碳酸氢钠溶液对于昏迷患者口腔护理的疗效差异。方法选取2015年1月2017年11月至我院神经外科收治的昏迷患者158例,采用随机数字表法分为氯已定组与碳酸氢钠组各79例,氯已定组采用复方氯已定含漱液进行口腔护理,每日两次;碳酸氢钠组采用碳酸氢钠溶液进行口腔护理,每日两次。两组患者均连续使用7天,比较两组患者口臭发生率、口腔炎症(牙龈红肿、口腔溃疡)、肺部感染、口腔菌落数等的发生率。结果两组患者在一般资料方面差异无统计学意义,具有可比性(P0.05);复方氯已定含漱液对于昏迷病人在预防口臭、牙龈红肿、口腔溃疡方面疗效优于碳酸氢钠溶液(P0.05);复方氯已定含漱液对于昏迷病人在预防肺部感染、抑制口腔微生物方面疗效优于碳酸氢钠溶液(P0.05)。结论复方氯已定含漱液在预防口腔感染具有良好优势,值得临床推广。     

抗幽门螺杆菌rHpaA鸡蛋黄抗体的研制

目的：采用基因工程技术表达重组幽门螺杆菌黏附素rHpaA，以此蛋白为抗原制备抗rHpaA的高特异性鸡蛋黄抗体。方法：诱导重组质粒pQE30-HpaA在大肠杆菌中大量表达rHpaA蛋白，用rHpaA免疫鸡，以水稀释法联合盐析法提取纯化IgY，采用Bradford法测定含量，SDS—PAGE电泳分析纯度，Western blot鉴定抗原特异性，ELISA测定效价和巴氏消毒后的活性。结果：IgY提纯后含量为24．6mg／ml，纯度约为90％，Western blot显示在相对分子量30000处出现单一条带，ELISA效价为1：12800，巴氏消毒后未见效价损失。结论：成功获得了高浓度、高纯度、高效价、耐巴氏消毒的特异性IgY，为进一步制备预防幽门螺杆菌感染的特异性IgY制剂奠定了基础。     

产气肠杆菌组成型启动子的筛选及其活性测定

目的：从产气肠杆菌基因组中筛选组成型启动子,并检测其活性。方法用Sau3 AⅠ限制性内切酶将产气杆菌的基因组酶切到500 bp大小,连接到pCMR8 a载体上,转化DH5α感受态后涂布氯霉素和卡那抗生素的双抗平板上筛选启动子,经SDS－PAGE分析启动子的蛋白表达能力,筛选较强启动子并对其进行截短和顺反性实验,最后利用截短启动子表达不同的蛋白。结果成功筛选到了5个启动子序列,获得到了表达能力最强启动子的截短核心序列,验证了其具有反向启动外源蛋白表达的能力,成功表达了其他外源蛋白。结论本实验通过大肠埃希菌表达系统成功的筛选并验证了产气杆菌的一种组成型启动子,具有较强的启动外源蛋白表达能力,对工业上蛋白的生产及实验室表达某种蛋白具有重要意义。     

IgA肾病的中医药临床研究进展

综述近几年中医药对IgA肾病的病因病机、辨证分型、临床用药情况,指出存在问题并对治疗研究进行展望。