酒精对大鼠背侧纹状体长时程突触抑制的影响

目的：建立大鼠背侧纹状体长时程突触抑制(LTD)的诱导方法，并观察60mmol/L酒精对大鼠背侧纹状体LTD诱导的影响，初步探讨酒精的作用机制。方法：制备纹状体冠状切面脑片，双极钨丝电极刺激皮层—纹状体传入通路，在大鼠背侧纹状体部位记录诱发的群峰电位(population spike，PS)。预先灌流60mmol/L酒精及N—甲基—D—天冬氨酸(NMDA)受体阻断剂MK—801，再给予强直刺激。结果：对照组给予强直刺激后诱导出明显的LTD，PS幅值减小到原先的20％左右，并持续60min以上;灌流酒精10min再给予强直刺激，PS幅值出现先减小而后增加的变化，60min时已经恢复到强直刺激前的80％;灌流MK—801后给予强直刺激阻断LTD的诱导。结论：强直刺激皮层—纹状体兴奋性传入通路可在背侧纹状体诱导明显的LTD，酒流酒精不影响LTD的产生，然而会影响LTD的保持，NMDA受体参与纹状体LTD的诱导。     

出生前后慢性铝暴露对大鼠海马长时程增强及细胞内Ca2+浓度的影响

目的 研究出生前后慢性铝暴露对年轻大鼠海马长时程增强(LTP)及细胞Ca2+浓度的影响,进一步探讨铝损害学习与记忆的突触机制.方法 对照组、0.2%Al组和0.4%Al组大鼠从孕期始分别自由饮用蒸馏水、Al3+浓度为15 mmol/L和30 mmol/L的AlCl3水溶液.采用细胞外微电极记录法测定海马LTP;以Fura-2/AM为荧光指示剂,检测实施LTP诱导后海马神经元内Ca2+浓度的变化.结果 与对照组相比,铝暴露组群体锋电位平均相对幅值增强率均明显下降(P<0.01),海马细胞内Ca2+浓度降低(P<0.05).2个铝暴露组间Ca2+浓度的差异也有统计学意义(P<0.05).结论 出生前后慢性铝暴露损害了海马LTP的诱导与维持的机制之一可能是Ca2+浓度的降低.     

大黄酚对大鼠海马齿状回突触传递长时程增强的影响

目的:研究大黄酚对麻醉大鼠海马齿状回突触传递活动的影响.方法:采用在体细胞外记录长时程增强(LTP)的电生理学方法,观察侧脑室注射大黄酚(20,10,5ng/μL)对海马齿状回基础突触传递活动和高频刺激诱导LTP的影响,以及给予东莨菪碱后,大黄酚对大鼠海马齿状回高频刺激诱导LTP的影响.结果:大黄酚可剂量依赖性增强大鼠海马齿状回基础突触传递活动;对于高频刺激诱导LTP现象有增强作用;对抗东莨菪碱对高频刺激诱导LTP的抑制作用.结论:脑内静脉注射大黄酚可剂量依赖性增强海马齿状回基础突触传递活动和高频刺激所诱导的LTP,其作用机制可能与大黄酚改善胆碱能系统的功能有关.     

地塞米松对酒精致纹状体突触可塑性变化影响的研究

目的:观察致醉剂量酒精对纹状体长时程增强(LTP)的影响,并通过可以抑制蛋白合成的药物-地塞米松来分析其作用机制,初步探讨酒精对学习记忆影响的作用机制.方法:采用纹状体离体脑片细胞外记录电生理技术和免疫组化技术.结果:研究致醉剂量酒精显著增强纹状体LTP的幅度.地塞米松可以部分翻转酒精对纹状体LTP的增强.结论:致醉剂量酒精极有可能通过激活及早基因从而实现对纹状体LTP的增强作用.     

长期酒精暴露和戒断后大鼠不同脑区肌动蛋白结合蛋白、细胞周期素依赖性蛋白激酶5的表达

目的 探讨长期酒精暴露和戒断对大鼠不同脑区肌动蛋白结合蛋白（cofilin）、磷酸化cofilin （P-cofilin）以及细胞周期素依赖性蛋白激酶5（cdk5）表达的影响.方法 雄性SD大鼠24只,随机等分为1个对照组和3个实验组.实验组大鼠自由饮含低浓度乙醇（体积分数为6％）的水溶液2月,对照组大鼠正常饮自来水.2月后撤除酒精进行戒断症状评分,并分别在戒断0h、戒断6h、戒断2d处死大鼠取脑组织.采用免疫组织化学方法检测各组大鼠伏隔核和纹状体区cofilin、p-cofilin （ser3）以及cdk5的表达水平.结果 实验组大鼠撤除酒精后出现明显的戒断症状,在戒断6h达到高峰.在大鼠伏隔核区,戒断0h组cofilin表达水平较对照组显著降低[（0.31±0.05）,（0.39±0.05）,P＜0.05],戒断0h、戒断6h组cdk5表达水平较对照组显著升高[（0.36±0.07）、（0.34±0.07）,（0.25±0.05）,P＜0.05].在大鼠纹状体,戒断0h组cofilin表达水平较对照组显著降低[（0.26±0.04）,（0.34±0.05）,P＜0.05],戒断6h组p-cofilin表达水平较对照组显著升高[（0.43±0.06）,（0.30±0.06）,P＜0.01],戒断0h组cdk5表达水平较对照组显著升高[（0.35±0.06）,（0.26±0.05）,P＜0.05],戒断6h组cdk5表达水平与对照组相比显著升高[（0.37±0.06）,（0.26±0.05）,P＜0.01].结论 长期酒精暴露诱导大鼠形成酒精依赖,并导致相关脑区肌动蛋白结合蛋白以及cdk5的表达变化.     

不同时程吗啡依赖戒断大鼠海马CA1区BDNF 及PSD-95的表达

目的观察不同时程吗啡依赖大鼠戒断1周后海马CA1区脑源性神经生长因子(BDNF)及突触后致密质95(PSD-95)的表达变化,探讨吗啡依赖戒断对海马CA1区的影响。方法建立不同时程(1周、2周、4周)吗啡依赖大鼠模型并自然戒断1周后,应用RT-PCR方法观察海马CA1区BDNF及PSD-95的表达情况。结果吗啡依赖1周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较生理盐水对照组下降(P<0.01),吗啡依赖2周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠有所上升(P<0.05),但仍低于生理盐水对照组(P<0.01),吗啡依赖4周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠、吗啡依赖2周戒断组大鼠均下降(P<0.01)。结论BDNF及PSD-95在吗啡依赖大鼠自然戒断1周后的海马CA1区的表达降低,吗啡依赖戒断对海马CA1区损伤明显。     

葡多酚对慢性酒精中毒大鼠的脑保护作用

目的 探讨葡多酚对慢性酒精中毒大鼠的脑保护作用.方法 将60只大鼠随机分为4组:对照组,给予水和普通饲料喂饲;葡多酚组,给予水和100mg·kg-1·d-1葡多酚饲料喂饲;酒精组:给予酒和普通饲料喂饲,并采用自由饮方法建立慢性酒精中毒模型.治疗组:给予酒和100mg·kg-1·d-1葡多酚饲料喂饲.造模后每周测量各组大鼠体重,观察其体重变化情况;以2、3、4个月为时点,采用Morris水迷宫对各组大鼠进行行为学检测;取各组大鼠海马、皮层、纹状体及小脑.分别检测其丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)及超氧化物岐化酶(SOD)活性.比较其变化情况.结果 (1)治疗组与酒精组大鼠体重均出现一过性负增长,体重增长缓慢,但治疗组体重负增长趋势明显好于酒精组(P<0.05);葡多酚组及对照组大鼠体重均为正常增长趋势,而且葡多酚组大鼠增长趋势明显快于对照组(P<0.05).(2)造模后2个月.酒精组大鼠平台定位时间及搜索路径长度均明显大于对照组(均P<0.05),之后逐步加重;而其他各组平台定位时间及搜索路径长度与对照组并无明显差异(均P>0.05).与酒精组比较,治疗组各时点平台定位时间及搜索路径长度均明显下降(P<0.05).(3)纹状体和小脑中各检测指标均无明显变化,而海马及皮层中各指标均发生变化.酒精组海马中MDA水平明显高于对照组(P<0.05),SOD及GPX水平均明显低于对照(P<0.05);皮层中MDA水平亦明显高于对照组(P<0.05),GPX水平明显低于对照组(P<0.05).治疗组大鼠海马及皮层中MDA水平明显低于酒精组(P<0.05),而且海马中SOD及GPX水平明显高于酒精组(P<0.05),但与对照组并无明显差异(P>0.05).结论 采用逐渐增加剂量的自由饮方法可成功建立慢性酒精中毒动物模型;慢性酒精中毒可导致大鼠体重下降、进行性记忆功能障碍和脑组织氧化损伤,而葡多酚可通过增加GPX含量、增强SOD活性从而抑制酒精对大鼠脑组织的氧化损伤,起到脑保护作用.     

慢性饮酒对大鼠胃粘膜细胞的凋亡与增殖的影响

目的 :研究大鼠慢性饮酒过程中胃粘膜的细胞凋亡和细胞增殖变化的规律 ,探讨慢性酒精刺激对胃粘膜的自我保护作用的影响。方法 :以 6% (V/V)的酒精作为大鼠饮水的唯一来源 ,利用流式细胞仪定量分析大鼠饮酒的不同时程内胃粘膜细胞的细胞周期和细胞凋亡 ,同时用免疫组化方法定性观察了大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡情况。结果 :饮酒 3～ 2 8天的大鼠胃粘膜的细胞凋亡较对照组明显增加 ,在饮酒 3～ 14天的大鼠胃粘膜其细胞增殖也明显增加 ,提示在此时期内胃粘膜的细胞更新增强。结论 :长期低浓度酒精反复刺激可以促进胃粘膜的细胞凋亡并引起大鼠胃粘膜的自我保护作用减弱     

针刺对大鼠脑缺血后海马突触可塑性的促进作用

目的:探讨针刺治疗缺血性脑血管疾病的机制。方法:采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型,随机分为假手术组、缺血组和治疗组,观察针刺对脑缺血后缺血同侧海马齿状回(DG)突触可塑性的影响。结果:缺血2周后缺血同侧海马齿状回兴奋性突触后电位(EPSP)、群峰电位(PS)的I/O曲线幅度均显著降低(P<0.05);和缺血组相比,治疗组EPSP、PS的I/O曲线幅度均显著升高(P<0.01,P<0.05),和假手术组相比无明显差异(P>0.05)。EPSP的长时程增强(LTP)幅度在缺血2周后明显升高(P<0.05);治疗组与假手术组相比明显升高(P<0.05),与缺血组无明显差异(P>0.05)。PS的LTP幅度在缺血2周后明显降低(P<0.05),治疗组明显高于缺血组(P<0.05),与假手术组相比无明显差异(P>0.05)。EPSP的长时程抑制(LTD)幅度在缺血2周后明显降低(P<0.05),治疗组与假手术组相比明显降低(P<0.05),与缺血组相比无明显差异(P>0.05)。PS的LTD幅度缺血组与假手术组无明显区别(P>0.05);治疗组与假手术组相比有所升高(P<0.05),与缺血组相比无明显差异(P>0.05)。结论:针刺对缺血引起的海马DG区I/O曲线的EPSP、PS的幅度变化起保护作用;针刺能修复缺血造成海马DG区PS的LTP诱导的损害;针刺对缺血后海马DG区EPSP的LTD的诱导无明显影响,对PS的LTD诱导有一定的提高作用。     

慢性酒精刺激对大鼠海马突触素ⅠmRNA表达的影响

目的 探讨慢性酒精刺激对大鼠海马突触素I(synapsin I)mRNA表达的影响。方法 设立正常对照组(即纯水组)与实验组，两组动物分别以纯水、10％酒精为唯一饮料连续喂养，两组动物又分30d与60d两组。用组织原位杂交技术观察海马突触素Ⅰ mRNA表达的变化。结果 正常对照组大鼠海马CA各区及齿状回有强的突触素Ⅰ mRNA表达。慢性酒精刺激30d后突触素Ⅰ mRNA在海马的表达与正常对照组相比有显著下降。慢性酒精刺激60d后突触素Ⅰ mRNA在海马的表达与30d相比进一步下降。结论 慢性酒精中毒引起大鼠海马突触素ⅠmRNA表达的下降，其表达的下降可能与学习记忆障碍有关。     

神经病理痛大鼠脊髓背角突触传递的长时程可塑性变化

目的：观察神经病理痛大鼠脊髓背角突触传递可塑性的变化，阐明在伤害性刺激及神经损伤时“中枢敏化”(central sensitization)在神经病理疼痛中的作用。方法：将Sprague—Dawley大鼠的腰5/腰6(L5/L6)脊神经紧结扎造成神经病理痛模型，采用电生理学技术记录脊髓背角C—纤维诱发场电位，比较模型组与假手术对照组大鼠脊髓背角C—纤维诱发电位LTP诱导的差异。结果：(1)在神经病理痛大鼠，高频、低强度的条件电刺激(频率100Hz，波宽0．5ms，强度10V，串长ls，串间隔10s的4串电刺激)作用于坐骨神经即可诱导脊髓背角C-纤维诱发电位产生LPT；然而在假手术对照组大鼠，同样的刺激则不能诱导LTP的产生，只有高频、高强度的条件电刺激(强度30—40V，其余参数同上)作用于坐骨神经才可诱导脊髓背角C-纤维诱发电位产生LTP。(2)与假手术对照组大鼠相比，神经病理痛大鼠脊髓背角C-纤维场电位的诱发阈值显著降低，而幅值显著升高。结论：神经损伤情况下，在脊髓背角更容易诱导出C-纤维诱发场电位的LTP，使脊髓伤害性感觉的突触产生“超敏变化”。这种突触传递的长时程可塑性变化很可能是神经病理痛产生中枢敏化的病理基础。     

MAPK在弗司可林诱发的脊髓背角LTP中的作用

目的  探讨丝裂霉素活化蛋白（MAPK）在弗司可林（Forskolin）诱发的脊髓背角长时程增强（LTP）中的作用。 方法  采用SD 大鼠, 常规细胞外记录技术记录脊髓背角腰膨大部位浅层C-纤维诱发电位。 结果  ①弗司可林（100μmol/L）诱发的脊髓背角LTP为PKA的抑制剂H89 (200μmol/L) 所阻断;②MAPK的选择性抑制剂PD98059 (100μmol/L) 阻断弗司可林诱导的脊髓 LTP; ③NMDA受体抑制剂阻断弗司可林诱导的脊髓 LTP。结论  MAPK参与弗司可林诱导的脊髓背角C-纤维诱发的LTP;弗司可林诱导的LTP可能是通过cAMP-PKA-MAPK信号途径起作用的。     

对侧腹外侧索强直刺激在脊髓运动神经元诱发的长时程增强

目的:探讨强直刺激对侧腹外侧索(cVLF),在脊髓运动神经元(MN)能否诱发突触传递的长时程可塑性变化。方法:应用新生大鼠脊髓切片MN细胞内记录技术,观察强直刺激cVLF前后,在MN诱发的兴奋性突触后电位(EP-SP,即cVLF-EPSP)的变化。结果:对cVLF施加强直刺激,有2个MNs的cVLF-EPSPs幅度增大达基础值的120%以上,且维持至少30 min,可被定义为长时程增强(LTP,即cVLF-LTP)。另外,在1个有cVLF-LTP的MN,同时观察到同侧背根刺激诱发的EPSP出现长时程增强。结论:通过强直刺激cVLF,在新生大鼠脊髓MN可诱发出突触传递的LTP,并可伴有异突触的LTP现象。     

吗啡对新生期大鼠脊髓背角长时程增强的作用

目的:评价吗啡对电刺激坐骨神经诱发新生期大鼠脊髓背角浅层长时程增强(LTP)的影响。方法:雄性SD大鼠20只,日龄18-21d,体重60-65g,随机分为对照组、吗啡组(M组)、纳洛酮组(N组),纳洛酮+吗啡组(MN组),每组8例。麻醉下分离左侧坐骨神经,记录电极插于左侧T13-L1脊髓背角浅层,刺激电极刺激左侧坐骨神经,给予4V、0.5ms、1/60Hz单个方波电刺激30min以诱发场电位,抽取生理盐水10μl、吗啡10μl(15μg/μl)、纳洛酮10μl(2.5μg/μl)、纳洛酮(2.5μg/μl)和吗啡(15μg/μl)各5μl的混合液,在脊髓上方3mm,经2min内缓慢滴注,给药后5min时,给予4串条件电刺激(8V、0.5ms、100Hz、串长1s、串间隔10s)后,再给予单个方波电刺激120min以上,记录强直刺激前30min、条件电刺激后0-30,35-60,65-120min时段平均场电位幅值及潜伏期。结果:与强直刺激前30min比较,C组和N组A类特征的波在强直刺激后各时段平均场电位幅值升高,潜伏期缩短,M组A类特征的波在强直刺激后各时段平均场电位幅值降低,潜伏期延长,MN组A类特征的波在强直刺激后0-30min平均场电位幅值升高,潜伏期缩短,35-120min时段平均场电位幅值降低,潜伏期延长,以上P<0.05或0.01,C类特征的波在刺激前后变化不明显。结论:吗啡可抑制电刺激新生期大鼠坐骨神经诱发脊髓背角以A类特征波的突触LTP,可能是其所处神经发育阶段决定的。     

Effects of kainic acid that damages the marginal division of rat striatum on hippocampal long-term potentiation]

OBJECTIVE: To investigate the relationship between the marginal division (MrD) of the striatum and other brain regions associated with learning and memory. METHODS: Long-term potentiation (LTP) was induced by high-frequency stimulation of the perforant path-dentate gyrus, and changes in hippocampal LTP after destruction of the marginal division with kainic acid were observed. RESULTS: High-frequency stimulation of the perforant path produced significant increases in the peak amplitudes of the population spike (PS) in normal rats and those receiving saline treatment. In rats with damaged MrD, the increase in PS and the excitatory postsynaptic potential were less obvious compared with normal or saline-treated rats, indicating that the LTP of the hippocampus was attenuated by damage of the MrD. CONCLUSION: Damage of the MrD impacts the LTP formation in the hippocampus.     

Synaptic metaplasticity through NMDA receptor lateral diffusion

Lateral diffusion of glutamate receptors was proposed as a mechanism for regulating receptor numbers at synapses and affecting synaptic functions, especially the efficiency of synaptic transmission. However, a direct link between receptor lateral diffusion and change in synaptic function has not yet been established. In the present study, we demonstratedNMDAreceptor(NMDAR) lateral diffusion in CA1 neurons in hippocampal slices by detecting considerable recovery of spontaneous or evoked EPSCs from the block of (+)-MK-801[(+)-5-methyl-10,11-dihydro-5H-dibenzo[a,d] cyclohepten-5,10-imine maleate], an irreversible NMDAR open-channel blocker. We observed changes on both the number and the composition of synaptic NMDAR on recovery. More importantly, after the recovery, long-term potentiation(LTP)-producing protocol induced only LTD(long-term depression) instead of LTP. In contrast, a complete recovery from competitive NMDAR blocker D,L-AP-5 was observed without subsequent changes on synaptic plasticity. Our data suggest a revised model of NMDAR trafficking wherein extrasynaptic NMDARs, mostly NR1/NR2B receptors, move laterally into synaptic sites, resulting in altered rule of synaptic modification. Thus, CA1 synapses exhibit a novel form of metaplasticity in which the direction of synaptic modification can be reverted through subtype-specific lateral diffusion of NMDA receptors.     

缺氧预适应对小鼠海马脑片LTP的影响

目的:观测缺氧预适应对小鼠海马脑片LTP的影响.方法:小鼠缺氧0次(H0)、1次(H1)、4次(H4)后取海马组织,制备成离体海马脑片,刺激海马CA3区Schaffer侧枝,在CA1锥体细胞层记录各组LTP.结果:H1组海马CA1区LTP诱出率最低,H0、H4组诱出率均高于H1组.H0和H4组小鼠海马脑片在高频强直串刺激后PS增幅的百分率和fEPSP斜率增幅的百分比变化均显著高于H1组(P＜0.01).H0组与H4组差异无统计学意义(P＞0.05).结论:缺氧抑制LTP的诱导,缺氧预适应可以恢复对LTP的诱导,突触可塑性的变化可能参与缺氧预适应小鼠脑保护.     

α-Synuclein与帕金森病临床前期动物模型研究

用 1 甲基 4 苯基 1 ,2 ,3 ,6 四氢吡啶 (MPTP)小剂量慢性给药建立帕金森病临床前期动物模型 ,观察小鼠脑组织形态学、生物化学及行为学方面的变化 ,同时对实验组小鼠黑质内α 突触核蛋白 (α synuclein ,NACP)阳性细胞数与纹状体内的突触数量进行动态变化的研究 ,探讨NACP与突触损伤之间的关系。C5 7BL/ 6j小鼠 60只 ,根据给药时间长短分为 5、1 0、1 5、2 0d 4组 ,腹腔注射MPTP〔4mg/ (kg·d)〕 ,正常对照组注射生理盐水。最后一次给药后 7d进行脑组织取材 ,分别进行NACP免疫组化染色、黑质纹状体形态学观察及纹状体内多巴胺含量的检测。发现 :1 )黑质内NACP免疫组化阳性细胞数在 5d组为最高峰 ,随后各组逐渐减少。 2 )电镜下黑质内除见固缩的神经细胞外 ,其他的神经元也有超微病理改变如线粒体肿胀、粗面内质网减少等。 3 )各给药组小鼠纹状体内的多巴胺含量与正常对照组相比均有明显下降 (P <0 .0 1 ) ,各给药组之间无明显差异 (P >0 .0 5 )。实验结果证实 :1 )低剂量MPTP慢性给药小鼠虽不能诱导出帕金森病的症状 ,但免疫组化、多巴胺含量测定及超微病理出现的改变可以作为帕金森病临床前期动物模型的参考指标。 2 )在MPTP慢性给药小鼠的早期阶段 ,黑质内神经细胞损伤时NACP表达水平增高可能是神?