人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立及雌、孕激素受体的表达

目的　为子宫内膜异位症 (EM)的临床研究提供实验动物模型。方法　实验组 :取EM和正常育龄妇女分泌晚期子宫内膜 ,剪碎 ,随机置入裸鼠盆腹腔 ,实验Ⅰ组切除卵巢 ,实验Ⅱ组不切除卵巢 ;对照组 :同法置入人大网膜。术后给雌激素支持。各组裸鼠分别于 5、10、15、2 0、2 5、3 0d脱颈椎处死 ,观察异位病灶生长情况。免疫组化SP法检测异位病灶雌、孕激素受体表达。结果　子宫内膜种植 5d即见异位病灶牢固粘附 ,主要发生在腹壁(56% )、膀胱旁脂肪 (2 1% )等部位 ,可见腺体细胞及散在间质细胞 ,时间越长 ,病灶与裸鼠组织融合越明显 ,盆腹腔粘连越重。用EM患者和正常育龄妇女内膜移植的异位病灶无差别 ,实验Ⅰ组和实验Ⅱ组的裸鼠所形成的异位病灶亦无差别 ,它们的雌、孕激素受体表达未显示差别 ,多数呈弱表达。结论　裸鼠做为EM早期动物模型科学、简便、可行。     

外源性雌孕激素对人子宫内膜异位症裸鼠模型早期病灶中MMP1和TIMP1表达的影响

目的通过建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,探讨雌激素、孕激素对子宫内膜异位症早期病灶中基质金属蛋白酶-1（MMP1）及其抑制剂（TIMP1）表达的影响。方法将育龄妇女的分泌晚期子宫内膜组织种植入裸鼠的盆腹腔,建立人子宫内膜异位症裸鼠模型,随机将裸鼠分为4组：雌激素组、孕激素组、雌孕激素联合组（n=12）和对照组（n=8）,分别肌肉注射雌激素、孕激素和雌孕激素,对照组肌注注射用水。在饲养15d后处死裸鼠,取异位病灶组织,采用免疫组织化学方法（SP法）检测早期子宫内膜病灶中MMP1和TIMP1的表达。结果与对照组相比,雌激素组、雌孕激素联合组、孕激素组的MMP1表达均明显增高,TIMP1表达均明显减低,差异有显著性（F=11.134、16.758,q=3.52～4.60,P〈0.01）;孕激素组MMP1表达明显强于雌激素组,TIMP1表达明显弱于雌激素组（q=3.52、4.57,P〈0.05）;雌孕激素联合组与孕激素组相比MMP1、TIMP1表达无明显差异（P〉0.05）。结论雌激素、孕激素均能加强异位病灶MMP1的合成,抑制TIMP1的产生,其促进子宫内膜异位症的作用机制可能与此有关。     

重庆地区汉族人群Fetuin-A基因rs2248690多态性与多囊卵巢综合征易感性的研究

目的：通过子宫内膜异位症在体模型,系统、完整地研究雌、孕激素对子宫内膜异位症异位内膜组织中间隙连接蛋白26（connexin26,CX26）、CX32和CX43表达的影响。方法：建立子宫内膜异位症裸鼠模型,随机分为3组,即雌激素组(A组),孕激素组（B组）、对照组（C组）。于建模后7 、14 、21、28 d取裸鼠异位病灶,RT-PCR及Western blot分别检测3组异位病灶中CX26、CX32和CX43的表达。结果：异位病灶中CX26在A组表达增高,在B组表达降低,该A、B组与C组相比其差异均有统计学意义（P=0.000）;A组CX43较B组及C组均降低,差异有统计学意义（P=0.000）,B组及C组之间CX43表达差异无统计学意义（P=0.621）;A组、B组及C组异位病灶中均未能检测到CX32的表达。结论：①雌激素、孕激素对异位内膜组织中CX26的调节作用相反。②异位病灶中未能检测到CX32的表达,其对子宫内膜细胞间隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)的影响及内膜的异位种植需待进一步研究。③雌激素可降低异位内膜组织中CX43的表达,孕激素对其无影响,推测雌激素可能通过降低CX43表达,降低内膜细胞GJIC功能,促进细胞异常增殖、分化,导致内膜异位种植能力提高。     

雌、孕激素对子宫内膜异位症裸鼠模型异位病灶中间隙连接蛋白26、32、43表达的影响

目的：通过子宫内膜异位症在体模型,系统、完整地研究雌、孕激素对子宫内膜异位症异位内膜组织中间隙连接蛋白26（connexin 26,CX26）、CX32和CX43表达的影响。方法：建立子宫内膜异位症裸鼠模型,随机分为3组,即雌激素组（A组）,孕激素组（B组）、对照组（C组）。于建模后7、14、21、28 d取裸鼠异位病灶,RT-PCR及Western blot分别检测3组异位病灶中CX26、CX32和CX43的表达。结果：异位病灶中CX26在A组表达增高,在B组表达降低,该A、B、C组相比其差异均有统计学意义（P=0.000）;A组CX43较B、C组均降低,差异有统计学意义（P=0.000）,B、C组之间CX43表达差异无统计学意义（P=0.621）;A、B、C组异位病灶中均未能检测到CX32的表达。结论：①雌激素、孕激素对异位内膜组织中CX26的调节作用相反。②异位病灶中未能检测到CX32的表达,其对子宫内膜细胞间隙连接细胞间通讯（gap junction intercellular communication,GJIC）的影响及内膜的异位种植需待进一步研究。③雌激素可降低异位内膜组织中CX43的表达,孕激素对其无影响,推测雌激素可能通过降低CX43表达,降低内膜细胞GJIC功能,促进细胞异常增殖、分化,导致内膜异位种植能力提高。     

雌激素受体亚型在子宫内膜异位症在位内膜及小鼠模型中的表达及意义

 目的探讨雌激素受体不同亚型（ERа和ERβ）在子宫内膜异位症（EM）的在位内膜及小鼠模型的异位病灶中的表达及意义。方法收集子宫内膜异位症患者20 例（EM 组）和非子宫内膜异位症患者20 例为对照组（NEM 组）,分别利用0.2,0.4,0.6 g 梯度量化子宫内膜建立小鼠模型,5 d后获取异位病灶组织,应用免疫组化方法检测ERа和ERβ蛋白的表达。结果EM 组及NEM组种植率比较：0.2 g 的种植率分别为60%和15%,差异有统计学意义（ P< 0.05）;0.4 g 种植率分别为100%和85%,0.6 g种植率分别为100%和100%,差异无统计学意义（ P> 0.05）。异位病灶体积比较,EM组各组病灶均大于NEM组（ P< 0.05）。ERа蛋白表达上,在位内膜中EM组比NEM组阳性率高,在EM组中在位内膜阳性率均比同组各异位病灶高,差异有统计学意义（ P< 0.05）。NEM 组在位内膜与异位病灶ERа蛋白表达比较,差异无统计学意义（ P> 0.05）。ERβ蛋白表达上,在位内膜及异位病灶中EM组比NEM 组阳性率高,差异均有统计学意义（ P< 0.05）,而两组中在位内膜阳性率均比同组各异位病灶低,差异有统计学意义（ P< 0.05）。两组在位内膜ERβ蛋白表达均比同组相应各组异位病灶少,差异有统计学意义（ P<0.05）。结论子宫内膜异位症患者在位内膜具有更强的异位种植能力,在位内膜中ERа和ERβ均高表达,雌激素受体高表达在子宫内膜异位症发生发展中的作用可能以β亚型的作用为主。     

子宫内膜异位症与雌、孕激素受体及其亚型的相关性

子宫内膜异位症(EM)中异位内膜的生长和侵袭依赖于性激素,而性激素与其受体结合后才能起作用.该文综述了雌、孕激素受体的结构、功能、基因、亚型及其在在位、异位内膜中的表达,并探讨其在EM的发生、发展以及治疗和预后中的作用.     

子宫内膜异位症与雌、孕激素受体及其亚型的相关性

子宫内膜异位症(EM)中异位内膜的生长和侵袭依赖于性激素,而性激素与其受体结合后才能起作用.该文综述了雌、孕激素受体的结构、功能、基因、亚型及其在在位、异位内膜中的表达,并探讨其在EM的发生、发展以及治疗和预后中的作用.     

子宫内膜异位症在位及异位子宫内膜Fas、FasL的表达

目的：检测子宫内膜异位症（EM）患者在位及异位内膜中Fas，FasL蛋白的表达， 探讨其在子宫内膜异位症免疫发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学（SP）法分别测定了EM患者在位和异位内膜及正常对照子宫内膜中Fas，FasL蛋白的表达。 结果：1、EM患者在位内膜及正常对照子宫内膜中Fas及FasL的表达均呈周期性改变，增生期呈低水平表达，分泌期表达增高， 两组间同期别比较增生期无显著差异，分泌期EM患者在位内膜的Fas及FasL表达均低于正常对照组；2、异位子宫内膜中的Fas及FasL的表达都呈现低水平或不表达。结论：子宫内膜异位种植可能与Fas及FasL的表达障碍有关。     

子宫内膜异位症组织AIB1表达及其与ER和PR相关性

目的 探讨子宫内膜异位症(EM)病人异位内膜和在位内膜中核受体共激活因子(AIB1)蛋白的表达,以及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的关系.方法 采用免疫组化法,分别检测45例EM病人的异位内膜和在位内膜以及42例正常子宫内膜(对照组)的AIB1、ER、PR蛋白的表达.结果 异位内膜和在位内膜AIB1的表达均显著高于对照组 (t=15.897、14.430,P<0.01);异位内膜中ER、PR的表达显著低于对照组 (t′=4.482、2.937,P<0.05);异位内膜中AIB1与ER呈负相关(r=-0.712,P<0.01).结论 AIB1、ER和PR 在子宫内膜中的异常表达可能与EM的发生发展有关.     

雌、孕激素对大鼠子宫内膜NO含量的影响

目的：观察乙烯雌酚、左旋18甲基炔诺酮对SD大鼠子宫内膜NO含量的影响，方法：实验分为对照组，雌激素组、孕激素组，采用Griess方法测定NO含量。结果：雌激素组SD大鼠子宫内膜NO含量较对照组显著升高（P＜0．01）孕激素组NO含量较对照组显著降低（P＜0．01）。结论：雌激素、孕激素可调节子宫内膜NO含量。     

PROK1及其受体PROKR1在子宫内膜异位症中的表达和临床意义

目的：探讨前动力蛋白-1(prokineticin 1,PROK 1)及其受体(prokineticin-receptor 1,PROKR 1)在子宫内膜异 位症中的表达水平及意义。方法：采用定量PCR(quantitative PCR,qPCR)和蛋白质印迹法检测PROK 1和PROKR 1在18 例正常对照组和22例子宫内膜异位症患者在位内膜及异位内膜中的表达水平;将6例正常对照组子宫内膜间质细胞分 离、培养,给予雌二醇(estradiol,E2)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)干预后,采用qPCR检测PROK 1 mRNA的表达水平。结果：PROK 1 和PROKR 1 mRNA在子宫内膜异位症患者的异位内膜和在位内膜以及正常对照组 子宫内膜中均有表达,表达最高的为异位内膜组,表达最低的为正常内膜组(P<0.05);PROK 1 和PROKR 1 蛋白在子 宫内膜异位症患者的异位内膜和在位内膜以及正常对照组的子宫内膜中均有表达,在异位内膜中表达最高,在正常 内膜中表达最低(均P<0.05);在正常子宫内膜组及子宫内膜异位症组中PROK 1的蛋白表达水平均为分泌期高于增生期 (均P<0.05);E2对子宫内膜间质细胞PROK 1 mRNA的表达无明显影响,TNF-α能上调子宫内膜间质细胞PROK 1 mRNA 的表达。结论：PROK 1及其受体参与了子宫内膜异位症的发生并对其发展有促进作用,TNF-α可能上调PROK 1的表 达从而促进血管生成。     

人子宫内膜异位症NOD-SCID鼠模型的建立

目的　探讨采用人在位子宫内膜及异位子宫内膜建立子宫内膜异位症动物模型的可行性。方法　获取人分泌晚期在位子宫内膜及人异位子宫内膜种植于NOD -SCID鼠腹部皮下 ,随机分成 4组 ,分别在 2、4、6、8周取出其皮下移植物行病理检查。结果　 3 2只小鼠均存活 ,有 15只小鼠皮下在位内膜移植物经HE染色可见明显的子宫内膜腺体和间质 ,成功率为 93 .75 %。而异位内膜移植物仅见到纤维结缔组织。结论　用人在位内膜建立NOD -SCID小鼠子宫内膜异位症模型成功率高 ,模型性状显著且稳定。     

子宫内膜异位症细胞粘附分子的表达及其意义

目的：探讨ＣＡＭｓ与子宫内膜异位症发病的关系。方法采用光镜、免疫组织化学技术和对ＥＭ的在子宫内膜和卵巢异位子宫内膜各１７例、子宫内膜腺癌６例、对照组子宫内膜２０例分别进行了病理组织学观察和Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、ＣＤ４４表达的检测。结果ＥＭ的在位子宫内膜和卵巢异位子宫内膜上皮细胞和内膜腺癌Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表达均显著你于对照组;ＥＭ的卵巢异位子宫内膜上皮细胞的内膜腺癌ＣＤ４４表达较对照组显著增高,     

Expression of TWEAK on the Ectopic and Eutopic Endometrium from Women with Endometriosis

Objective To investigate the relationship between Tumor necrosis factor （TNF）-like weak inducer of apoptosis（TWEAK） and endometriosis.
Methods TWEAK mRNA and protein concentrations in paired samples of eutopic endometrial tissue from women with and without endometriosis, and also of ectopic endometrial tissue from women with endometriosis were measured by Real-time PCR, immunohistochemistry and Western blotting, respectively.
Results Compared with control endometrium from women without endometriosis and eutopic endometrium from women with endometriosis, TWEAK expressions were reduced on the ectopic endometrium （P〈O.05）. Moreover, the expressions of TWEAK mRNA on eutopic endometrium and control endometrium in proliferative phase were much lower than those in secretory phase. TWEAK protein was expressed in the cytoplasm of glandular cells and stromal cells of endometrium.
Conclusion TWEAK is expressed on the endometrium of reproductive women, and its concentration rises in secretory phase, compared with that in proliferative phase. Patients with endometriosis had a lower expression of TWEAK on ectopic endometrium, which may lead to a decreased level of apoptosis on endometrial cells. Consequently, endometrial cells were able to survive outside uterus helping the development of endometriosis.     

Effect of recombinant human endostatin on endometriosis in mice

Background Direct and indirect evidences have suggested that angiogenesis is a prerequisite for the development of endometriosis. Aiming at offering experimental evidences for anti-angiogenesis therapy, we transplanted the eutopic endometrium from patient with endometriosis into the severe combined immunodeficiency disease (SCID) mice, to evaluate the effect of the endostatin on the growth and angiogenesis of the established endometriosis lesions in SCID mice model.Methods Eutopic endometrium of women with endometriosis was transplanted into the SCID mice. The mice were randomized into treatment (n=10) and control groups (n=10). Two weeks after the implantation of endometrium fragment, the treatment group was injected with recombinant human endostatin YH-16 into the peritoneal cavity (2 mg·kg(-1)·d(-1)), whereas the control group received equivalent volume of PBS (200 &micro;l/d). The volume of endometriotic lesions in SCID mice was measured every three days, and all the treatment lasted for 14 days. Immunohistochemistry was used to determine microvessel density (MVD) and the expression of VEGF. The results were analyzed by t test and χ(2) test to value the treating effect. Results Compared with the control group, growth of endometriosis lesion was reduced in the mice treated with YH-16. Statistically significant differences in the volume and weight of the ectopic lesions were observed between the treatment and the control groups (P&lt;0.05). Microscopical examination showed that after being treated with YH-16, the volume of the endometrial tissues decreased, the glands depauperated, and the glandular epithelium partially degenerated. Necrotic debris was observed in the endometrial stroma. MVD and expression of VEGF in the treatment group were significantly lower than those in the control group (P&lt;0.05). Conclusions Recombinant human endostatin affects the maintenance and growth of endometriotic tissues by inhibiting angiogenesis and reducing the expression of VEGF in ectopic lesion. The angiostatic agent may be promising as a therapy for endometriosis.     

子宫内膜异位症内膜组织中ER、PR蛋白的表达及意义

目的：探讨子宫内膜异位症（EMS）患者子宫在位、异位内膜中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达及临床意义。方法：选取我院2010年1月-2012年12月间收治的因子宫内膜异位症行子宫及附件全切患者40例设为观察组,采用免疫组化法,检测该组患者在位、异位内膜中ER、PR的表达情况,采用图像分析系统测定的灰度值反映其表达强度（灰度值与表达强度二者成反比）;并设同期因宫颈病变及卵巢良性肿瘤行子宫及附件切除的患者40例为对照组,对比两组患者子宫内膜中ER、PR的表达情况。结果：观察组子宫异位内膜增殖期ER、PR表达与在位内膜组及对照组组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）;对照组子宫内膜增殖期ER、PR表达高于分泌期（P〈0．05）;EMS不同分期内膜组织中ER、PR表达无统计学差异（P〈0．05）。结论：EMs患者在位和异位内膜中ER、PR异常表达,与EMS发生、发展密切相关。     

环氧合酶-2在子宫内膜异位症子宫内膜组织中的表达

目的：研究环氧合酶-2（COX-2）在子宫内膜异位症（内异症）在位子宫内膜组织和异位子宫内膜组织中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法检测30例卵巢内异症在位内膜、10例卵巢巧克力囊肿壁异位内膜及27例正常子宫内膜中COX-2的分布和表达。结果：COX-2在3组子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞中均可见表达。COX-2在正常对照组内膜和卵巢内异症组在位内膜腺上皮细胞中的表达均是分泌期高于增生期（P<0.05)，而在间质细胞中的表达分泌期与增生期比较无统计学差异（P>0.05)。COX-2在卵巢内异症组在位和异位内膜中的表达均高于对照组（P<0.05），而内异症患者在位和异位内膜中COX-2的表达则无统计学意义（P>0.05）。结论：COX-2在卵巢内异症在位和异位内膜中表达增高，可能与卵巢内异症的病理异常有关。     

错配修复基因1在新疆维吾尔族及汉族卵巢子宫内膜异位症患者中的表达与意义

目的探讨新疆维吾尔族、汉族人群中错配修复基因1(hMLH1)转录水平与卵巢子宫内膜异位症发病的关系。方法收集新疆地区维吾尔族、汉族卵巢子宫内膜异位症患者异位内膜组织(异位内膜组)、在位内膜组织(在位内膜组)以及正常子宫内膜组织(对照组),在位内膜组及对照组的子宫内膜均通过病理检查分为分泌期或增殖期。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(QRT-PCR)定量分析各内膜组织中hMLH1的表达水平。结果维吾尔族及汉族在位内膜组、对照组子宫内膜分泌期与增殖期hMLH1的表达量均无明显差异(P=0.807,P=0.956,P=0.511,P=0.286);维吾尔族和汉族异位内膜组与在位内膜组中hMLH1的表达量比较差异无统计学意义(P=0.058,P=0.854);维吾尔族在位内膜组及对照组的内膜组织中hMLH1的表达量中位数(M)分别为0.109、0.120,四分位数间距(Q)分别为0.180、0.306;汉族在位内膜组及对照组的内膜组织中hMLH1的表达量M分别为0.209、0.270,Q分别为0.286、0.309;hMLH1的表达在在位内膜组及对照组间比较差异有统计学意义(P=0.017),hMLH1的表达在维吾尔族、汉族间比较差异有统计学意义(P=0.037)。结论在位内膜组织中hMLH1的表达水平下降可能与新疆地区维吾尔族及汉族卵巢子宫内膜异位症发病有关。子宫内膜组织中hMLH1的表达水平存在民族差异。     

米非司酮治疗后VEGF-165在异位和在位子宫内膜中的表达

目的探讨米非司酮对VEGF-165在子宫腺肌症中表达的影响。方法43例子宫腺肌症患者分为对照组(n=21)和米非司酮治疗组(n=22),采用放射免疫法测定对照组(月经第3天)和米非司酮组(术前)血清中FSH、LH、E2、PRL、P及T的水平。采用免疫组化法测定两组患者在在位和异位子宫内膜中的VEGF-165蛋白水平。结果米非司酮组较对照组血清FSH、LH、E2、P明显降低(P<0.05),而血清PRL和T的水平两组间无统计学差异(P>0.05)。VEGF-165在子宫内膜腺上皮细胞内的表达,异位内膜均明显高于在位内膜(P<0.05);而其在间质细胞内的表达,异位内膜与在位内膜无统计学差异(P>0.05)。米非司酮组异位和在位内膜腺上皮细胞、间质细胞中VEGF-165的表达水平均较对照组明显降低(P<0.05)。VEGF-165在对照组异位内膜腺上皮细胞中的表达,增殖期高于分泌期(P<0.05)。结论米非司酮治疗后,VEGF-165在异位和在位内膜中的表达明显下降,可能是通过抑制VEGF蛋白合成,降低血管通透性,抑制新生血管生成,从而有效地控制子宫内膜异位症的发生发展。     

丹那唑对小鼠子宫内膜异位种植的抑制及其机制

 目的 观察丹那唑对子宫内膜异位症模型小鼠异位内膜的影响，以初步探讨子宫馁膜异位症中丹那唑对小鼠异位内膜粘附的作用。方法 用增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein,EGFP）转基因和野生型C57BL/6J小鼠建立子宫内膜异位症模型，丹那唑组给予丹那唑灌胃，对照组给予等量的生理盐水灌胃，2周后处死动物，成像并比较两组小鼠荧光表达的强弱； Western blot和real time RT-PCR等技术对异位内膜的粘附因子ICAM-1、CD44进行检测。结果 镜下可见模型小鼠肠管间、腹壁下、肝叶下或脾周形成绿色团块状或星点状内膜异位病灶，丹那唑组异位灶体积及荧光表达强度明显低于对照组 (P＜0.05)；丹那唑组和对照组的凋亡率显著高于空白组（P值均＜0.001），而丹那唑组的凋亡率显著高于对照组（P＜0.01）；丹那唑组CD44、ICAM-1 蛋白和mRNA表达显著低于对照组（P值均＜0.01）,以2－△△Ct计算CD44、ICAM-1 mRNA表达量（空白组为1），对照组、丹那唑组的CD44 mRNA表达量分别是空白组的16.34、3.43倍；对照组、丹那唑组的ICAM-1 mRNA表达量分别是空白组的1.53、1.12倍。结论 丹那唑可抑制子宫内膜异位症模型小鼠异位内膜的粘附和病灶的产生，这种作用主要可能是通过促进细胞凋亡达到降低粘附因子ICAM-1、CD44的表达而实现的。