氢氧化钙在模拟根尖周模型内抑菌效果的观察

目的 观察4种浓度氢氧化钙在模拟根尖周组织内的抑菌效果.方法 用吸液管尖、BHI琼脂及5mL塑料注射针筒制备成模拟根尖周模型.将具核梭杆菌、牙髓卟啉单胞菌、粪肠球菌分别定植入模拟根尖周组织内.共制备模型138个,根据实验细菌分3个实验大组,每组40个,共120个.每实验组内依据氢氧化钙浓度(10%、30%、60%、90%)再分为4个亚组,每亚组10个样本.另外18个为对照组,其中阳性对照组9个,封入0.02%洗必泰溶液,阴性对照组9个,封入蒸馏水.通过即刻涂片镜检和48h厌氧培养后涂片镜检观察细菌检出率,评估氢氧化钙的抑菌能力.结果 实验菌株为具核梭杆菌或牙髓卟啉单胞菌时,10 %、30%和 60%氢氧化钙组都有明显抑菌效果(P<0.05),而90%氢氧化钙组抑菌效果不明显;4种浓度氢氧化对粪肠球菌均无明显抑菌效果.0.02% 洗必泰溶液对3种细菌均有显著的抑菌效果,阴性对照组则无任何抑菌作用.结论 在模拟根尖周模型内氢氧化钙对具核梭杆菌和牙髓卟啉单胞菌的抑菌作用较好,其作用根据浓度不同存在差别,对粪肠球菌无明显抑菌效果.     

MTAN用于抑制血链球菌、具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌混合菌的体外研究

研究Nisin粉、柠檬酸、吐温-80混合物(MTAN)和乙二胺四乙酸(EDTA)(MTAN+EDTA)对血链球菌、具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌双混合及三混合菌液的抑制作用.用含有不同乳酸链球菌素(Nisin)浓度的MTAN、MTAN+ ED-TA各处理血链球菌、具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌双混合及三混合菌液,OD值法测最低抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC).结果 示MTAN对各混合菌液均可抑制,浓度增加,抑制增强,浓度≥250 μg/ml时可杀菌;不同浓度的Nisin组MTAN+ EDTA对各混合菌液均可抑制,浓度≥2.5.μg/ml时可杀菌.因此,MTAN作用于3种细菌的各菌液后均有显著抗菌作用,加入EDTA后,抗菌作用增强.     

银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌作用

目的：探讨银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌活性,为研制开发治疗牙周病的新型纯中药抗菌药物提供药理学依据。方法：本实验分为阴性对照组、亚胺培南对照组和不同浓度及剂型的银杏叶提取物组。采用溶剂提取法制取银杏叶提取物,采用打孔法和试管法在厌氧环境下检测银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌活性,并与金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌对比。通过观察抑菌环直径和测定最小抑菌浓度（MIC）衡量银杏叶提取物的体外抑菌作用。结果：在抑菌环实验中,银杏叶提取物、银杏叶片和银杏叶软胶囊的原液和1∶4的稀释液作用于牙龈卟啉单胞菌,抑菌环直径随着浓度的降低而减小,银杏叶提取物的最大抑菌直径为16.5 mm,银杏叶片和软胶囊最大抑菌直径分别为15.3和14.5 mm,银杏叶提取物抑菌直径明显大于银杏叶片和银杏叶软胶囊（P <0.05）,银杏叶片与银杏叶软胶囊抑菌直径比较差异无统计学意义（P>0.05）;大肠埃希菌组和金黄色葡萄球菌组得到同样的结果。MIC测定,银杏叶提取物组内比较,银杏叶提取物浓度高于1.95 mg/L时,试管内均无牙龈卟啉单胞菌生长,而大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌仍可以生长,浓度高于6.25和12.5 mg/L时大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌不生长,银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用优于大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌。结论：银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌具有抑菌作用。     

黄连素与戊间甲酚对粪肠球菌的体外协同抗菌效果研究

  目的  研究黄连素与戊间甲酚联合使用对粪肠球菌的抗菌作用。  方法  采用微量肉汤稀释法和活菌菌落形成单位（CFU）分别测定黄连素和戊间甲酚对粪肠球菌的最小抑菌浓度（MIC）;悬液定量杀菌试验和死活菌染色检测黄连素和戊间甲酚对浮游和生物膜状态粪肠球菌的杀灭效果;扫描电子显微镜观察黄连素和戊间甲酚对粪肠球菌成熟生物膜结构的影响;CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒和乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒测定黄连素和戊间甲酚对人口腔黏膜上皮角质细胞（HOK）的毒性。  结果  黄连素的MIC为512 μg/mL,戊间甲酚的MIC为0.023 3%;悬液定量杀菌试验表明,512 μg/mL黄连素或0.002 33%戊间甲酚单独使用时对浮游状态粪肠球菌杀灭效果较弱,但二者联合使用时表现出协同抗菌作用;死活菌染色和扫描电子显微镜结果表明二者联合使用时对生物膜状态粪肠球菌杀灭效果较弱,但可影响生物膜结构;512 μg/mL黄连素和0.002 33%戊间甲酚单用（或联用）处理HOK细胞时,其存活率远大于损伤率,细胞毒性较低。  结论  黄连素与戊间甲酚对粪肠球菌具有协同抗菌作用,且生物安全性较好。     

金银花醇提液对根管粪肠球菌的体外抑菌实验

目的 通过金银花醇提液在体外对粪肠球菌作用,判断金银花是否存在抑制杀灭粪肠球菌的有效成分,以根管冲洗剂次氯酸钠（NaOCl）作为对照以评价其作用效果。方法 采用热回流浸提、旋转蒸发获取金银花浸液。以平皿打洞法验证粪肠球菌对金银花的敏感性。利用噻唑兰（MTT）辅助判断直接接触实验作用的效果,确定金银花醇提液对粪肠球菌生物膜的最小抑菌浓度（MIC）。结果 400 mg/ml金银花醇提液抑菌环直径最大,抑菌效果与2％ NaOCl无显著差异。最小抑菌浓度为100 mg/ml。结论 金银花醇提液对粪肠球菌具有一定抑制作用。     

葡萄皮渣中原花青素对临床常见分离菌的抗菌效应分析

目的：探讨葡萄皮渣中的原花青素对临床常见分离菌大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肠球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（M RS A ）的抗菌作用。方法应用琼脂平板法测定原花青素对临床分离出的30株大肠杆菌、28株铜绿假单胞菌、15株鲍曼不动杆菌、32株屎肠球菌、25株粪肠球菌、70株 M RS A的最低抑菌浓度（M IC ）,并计算半数抑菌浓度（M IC50）和90％抑菌浓度（MIC90）,用统计软件SPSS16．0对结果进行统计分析。结果3～8 mg／mL的原花青素对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等革兰阴性杆菌均无抑菌作用;3～8 mg／mL的原花青素对粪肠球菌无抑菌作用,对屎肠球菌的抑菌率仅为6．3％;用原花青素对70株MRSA进行抑菌检测：4 mg／mL原花青素的抑菌率为65．7％,8 mg／mL抑菌率为95．7％,MIC50为4．221 mg／mL、MIC90为6．260 mg／mL。结论葡萄皮渣中的原花青素对常见革兰阴性杆菌如大肠杆菌、铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌无抑菌作用,对革兰阳性球菌如MRSA、肠球菌有一定的抑菌效果,特别是对MRSA抑菌作用非常明显（P＜0．05）。     

西帕依固龈液对牙龈卟啉单胞菌体外抑菌作用的研究

目的 比较西帕依固龈液、氢氧化钙和次氯酸钠在体外对牙龈卟啉单胞菌的抑菌杀菌作用,为临床推广使用西帕依固龈液提供实验依据.方法 ①采用液体稀释法药敏实验检测西帕依固龈液对牙龈卟啉单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).②采用液体扩散法比较观察西帕依固龈液、氢氧化钙和次氯酸钠对牙龈卟啉单胞菌抑菌圈大小.结果 ①西帕依固龈液对牙龈卟啉单胞菌的MIC和MBC分别为5mg/mL和10 mg/mL.②比较5mg/mL和10 mg/mL西帕依固龈液与5mg/mL次氯酸钠对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用,差异有统计学意义(P＜0 05).5 mg/mL西帕依固龈液与3mg/mL氢氧化钙、20 mg/nL的西帕依固龈液与5 mg/mL次氯酸钠对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用,差异无统计学意义(P＞0.0)5).结论 在体外抑菌实验中,选择合适的浓度,西帕依固龈液对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用可以与氢氧化钙和次氯酸钠相当.     

肺感方体外抗菌活性的实验研究

目的：观察肺感方对11种临床常见病原菌的体外抗菌作用.方法：使用肉汤微量稀释法测定肺感方对不同菌株的最低抑菌浓度（MIC）及最低杀菌浓度（MBC）.结果：肺感方对标准金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠球菌、铅黄肠球菌的MIC分别为62.5,62.5,125,31.25,250,500 g/L,相应的MBC为：62.5,62.5,250,31.25,500,1 000 g/L;对临床分离菌株鲍曼不动杆菌（多重耐药）、铜绿假单胞菌（多重耐药）的MIC和MBC均分别为250,500 g/L;对粪肠球菌、白色念珠菌、肺炎克雷伯菌（超广谱β内酰胺酶阳性）、大肠埃希菌（超广谱β内酰胺酶阳性）无明显体外抗菌作用.结论：肺感方对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、铅黄肠球菌、鲍曼不动杆菌（多重耐药）及铜绿假单胞菌（多重耐药）具有体外抗菌作用,其中对肺炎克雷伯菌的抗菌活性最强.     

壳聚糖与溶菌酶复配体系的杀菌性能研究

采用对倍稀释法测定壳聚糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,并用定量法测定壳聚糖与溶菌酶复合体系的杀菌率,与单一成分的壳聚糖或溶菌酶进行对比,最后考察了壳聚糖和溶菌酶复合体系的稳定性,并对其抑菌机理进行初步研究。结果表明：2 g/L壳聚糖虽然对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌有一定的杀菌率,但对白色念珠菌的杀菌率还不到50%,而溶菌酶质量浓度在5~20 g/L对受试菌无明显抑菌作用。将2 g/L壳聚糖和10 g/L溶菌酶复配后,对受试菌的杀菌率优于单独使用壳聚糖或单独使用溶菌酶,尤其是对白色念珠菌的杀菌力明显提高;将复配液样品置于54 ℃恒温箱内14 d,杀菌率略有降低,但仍然保持在90%以上,说明复配体系稳定性良好。     

粪肠球菌对利奈唑胺低水平耐药机制的研究及同源性分析

目的研究4株临床分离的利奈唑胺低水平耐药粪肠球菌的耐药机制及同源性。方法收集临床分离的利奈唑胺耐药粪肠球菌4株,采用微量肉汤稀释法确认菌株对利奈唑胺最低抑菌浓度（MIC）;PCR扩增和测序检测23SrRNAV区基因、核糖体蛋白L3和L4编码基因（rplC、rplD）及多重耐药基因cfr和新型耐药基因optrA。多位点序列分型（MLST）分析菌株同源性。结果4株粪肠球菌对利奈唑胺MIC值均为8滋g/ml,均为低水平耐药,23SrRNAV区基因、核糖体蛋白L3和L4编码基因均未发现任何位点突变,未检测到cfr基因,但均携带optrA基因。MLST分型显示4种ST型,分别为ST476、ST16、ST116、ST75。结论初步推断携带optrA基因与粪肠球菌对利奈唑胺呈现低水平耐药有关,耐药菌株在本院呈散发。     

多西环素对224株肠球菌的体外抗菌活性研究

目的观察多西环素对肠球菌的体外抗菌活性。方法采用二倍琼脂稀释法对 2 2 4株肠球菌进行体外抗菌实验 ,并与惠氏 -百宫制药有限公司生产的米诺环素进行抗菌效果对比。结果多西环素有很好的抗菌效果 ,对 16 9株粪肠球菌和 5 1株屎肠球菌的最低抑菌浓度 (minimuminhibitoryconcentration ,MIC90 )均为 4mg/L ,而米诺环素对 16 9株粪肠球菌和 5 1株屎肠球菌的MIC90 也同样是 4mg/L。结论 2 2 4株肠球菌对多西环素和米诺环素的敏感率分别为 98.2 1%和 10 0 %。表明多西环素和米诺环素均有较好的抗菌效果     

微酸性电解水对根管内粪肠球菌生物膜抗菌作用的体外研究

  目的  研究微酸性电解水（slightly acidic electrolyzed water，SAEW）作为根管冲洗液对根管内粪肠球菌（Enterococus faecalis，E. faecalis）生物膜的抗菌作用。  方法  离体牙根管内培养E.f生物膜，以1%次氯酸钠（sodium hypochlorite，NaClO）溶液为阳性对照，分别用浓度为50 mg/L、60 mg/L的SAEW冲洗1 min、3 min、5 min，扫描电镜（field emission scanning electron microscope，FE-SEM）观察E.f生物膜形态变化，共聚焦显微镜（confocal laser scanning microscope，CLSM）结合Live/Dead荧光染色观察E.f生物膜荧光染色情况并测定生物膜死菌比例。  结果  FE-SEM观察:50 mg/L及60 mg/L的SAEW、1% NaClO溶液随着冲洗时间的延长，生物膜中细菌减少，菌体皱缩破裂。CLSM观察:50 mg/L及60 mg/L的SAEW、1% NaClO溶液随着冲洗时间的延长，红色荧光增多，死菌比例逐步增高，三个时间点间比较差异有统计学意义（P < 0.05）；1% NaClO溶液冲洗1 min、3 min、5 min的死菌比例高于50 mg/L及60 mg/L的SAEW，差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  50 mg/L、60 mg/L的SAEW对根管内E. faecalis生物膜有一定的抗菌作用，但弱于1% NaClO溶液。     

“纳米银/羧甲基壳聚糖”生物敷料的研制、表征及抑菌试验研究

目的:通过合成水溶性"纳米银/羧甲基壳聚糖"生物敷料,以标准菌株测试其抑(抗)菌性能。方法:通过紫外吸收光谱表征及扫描电子显微镜形貌观察纳米银,以红外吸收光谱表征由氯乙酸法将壳聚糖改性而成的羧甲基壳聚糖,再将羧甲基壳聚糖与纳米银结合,合成水溶性的"纳米银/羧甲基壳聚糖"生物敷料,再用标准菌株测试其抑抗菌性能。结果:合成的纳米银粒径大小为60～100nm,改性后的羧甲基壳聚糖在IR谱图于1635.56cm-1和1385.22cm-1处出现了羧甲基壳聚糖钠盐的特征吸收峰。该"纳米银/羧甲基壳聚糖"敷料对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌的MIC分别为:0.25mg/ml(其中含纳米银0.05mmol/L),0.5mg/ml(其中含纳米银0.1mmol/L),0.5mg/ml(其中含纳米银0.1mmol/L);2.5mg/ml"纳米银/羧甲基壳聚糖"(含银0.25mmol/L)在M-H培养基上对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌的抑菌环分别为17mm,11mm,11mm。结论:合成的"纳米银/羧甲基壳聚糖"生物敷料能结合羧甲基壳聚糖和纳米银的优点,具有强大的广谱抗菌性能。     

高效液相色谱法测定盐酸纳美芬注射液中的依地酸二钠含量

目的 建立盐酸纳美芬注射液中依地酸二钠的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法测定.色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶柱;流动相:0.3%四丁基氢氧化铵溶液(盐酸调节pH至4.0)-水-乙腈(20:45:35,V/V/V);流速:1.0 ml/min;检测波长:254 nm;柱温:30℃;进样体积:20μl.结果 依地酸二钠的定量限为0.199μg/ml,最低检测限为0.060μg/ml,在2.4593~7.3780μg/ml浓度范围内线性良好,线性方程为Y=10.125X-0.216,相关系数r=1.000,各浓度平均回收率在98%~102%之间,RSD%为0.58%.结论 该检测方法专属性良好、简便,快速,灵敏,精密度高,重现性好.     

缓释米诺环素的介孔纳米生物玻璃载药系统

目的：构建介孔纳米生物活性玻璃（mesoporous nano-bioactive glasses,MNBG）微球装载及缓释米诺环素的载药系统。方法：采用溶胶 凝胶法制备MNBG微球作为药物载体,组分为SiO2、CaO和P2O5,根据硅的含量分为60S、70S、80S和90S组。使用扫描电子显微镜（scanning electron microscope,SEM）观察材料表面结构与粒径;氮气吸脱附实验计算材料的比表面积与孔径大小;傅里叶（Fourier）红外光谱及热重分析计算MNBG颗粒对米诺环素的装载率;紫外光分光光度计测定载药系统在21 d内的药物累积释放情况;琼脂扩散实验检测载药颗粒磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS)对粪肠球菌生成抑菌环的大小。结果：MNBG微球为分散良好,粒径较为均一的介孔纳米球形颗粒。MNBG颗粒对米诺环素盐酸盐的装载率与其孔径大小相关,其中含60S的载药率高于70S、80S和90S组,达到16.33%。60S载药系统在PBS溶液中对米诺环素的释放于24 h内呈现突释,达到总载药量的28%;随后药物缓慢释放,在第21天时米诺环素的释放量累积达到总载药量的35%,维持药物浓度达到47 mg/L。琼脂扩散实验结果显示60S载药系统可以抑制粪肠球菌生长。结论：60S MNBG可有效装载、缓释米诺环素,是较为理想的载药材料。     

丁酸氯维地平注射乳剂中依地酸二钠的含量测定

目的:建立测定丁酸氯维地平注射乳剂中微量依地酸二钠的高效液相色谱法。方法:采用Agilent ZORBAX Extend-C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),梯度洗脱流动相A为0.66 %四丁基氢氧化铵溶液-乙腈(3:1)(pH6.5),B相为甲醇-水(9:1),流速为1.0 mL·min^-1,进样量50 μL,检测波长为254 nm。结果:依地酸二钠峰不受辅料干扰,在8.04~80.37 ?g·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 9),加样回收率为97.78%（n=9, RSD=0.62%）,定量限0.402 μg,供试品中依地酸二钠含量分别为46.7 μg·mL^-1、47.0 μg·mL^-1、49.6 μg·mL^-1。结论:该方法准确可靠、专属性强,可用于丁酸氯维地平注射乳剂中依地酸二钠的含量测定。     

吗啡对布比卡因抑菌作用影响的实验研究

目的:探讨1.5mg/ml布比卡因和40μg/ml吗啡单独或联合应用对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌体外生长的影响。方法:菌株在琼脂培养基中稀释至7.5×105cfu/ml,细菌悬液在37℃麻醉药中培养48h。结果:布比卡因抑制大肠杆菌生长(59±0.8)%,P<0.05;金黄色葡萄球菌(22±3.6)%,P<0.05;对粪肠球菌生长无抑制作用。40μg/ml吗啡仅对金黄色葡萄球菌有抑制作用(13.8±3.1)%;P<0.05,吗啡能增加布比卡因对粪肠球菌、金黄色葡萄球菌10%,(P<0.05)和大肠杆菌7%(P<0.05)的抑制效果。结论:布比卡因和吗啡单独或联合应用对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌生长抑制作用,粪肠球菌对吗啡和布比卡因混合液敏感。吗啡对布比卡因抑菌有协同作用。     

RP-HPLC法测定诺氟沙星葡萄糖注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量

  目的  建立诺氟沙星葡萄糖注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量测定方法。  方法  选择色谱柱为（SHISEIDO C18-MGⅡ 5 μm 4.6×250 mm），流动相为乙腈:0.05 mol/L醋酸铵:水，流动相比例为70∶15∶15，流速为1.0 mL/min，进样体积为20 μL，柱温为35 ℃，检测波长为254 nm，采用三氯化铁和乙二胺四乙酸二钠反应形成螯合物后对其进行测定。  结果  乙二胺四乙酸二钠峰与其他色谱峰分离度良好；乙二胺四乙酸二钠在2.0326～200.3260 μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（R2 = 0.9997），平均回收率为98.11%（n = 9）。  结论  该方法快速、简便、专属性强、精密度高、重复性好，结果准确可靠，适用于诺氟沙星葡萄糖注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量测定。     

黄柏与五倍子抗菌活性物对肠球菌抑菌效果

目的探讨高速逆流色谱(HSCCC)法提纯黄柏与五倍子配伍抗菌活性物质对粪肠球菌体外抑茵效果的影响。方法选择150株临床分离野生粪肠球菌株,随机分为Ⅰ组、Ⅱ组与Ⅲ组,每组各50株,均配制成2000cfu/ml~3000cfu/ml的菌液。黄柏与五倍子配伍药做成中药煎剂,配制成浓度成1g/ml为A药液,高速逆流色谱法提纯黄柏与五倍子配伍抗菌活性物质,配制成浓度成1g/ml为B药液;Ⅰ组将粪肠球菌液涂到用A药液与M-H培养基混合的培养基上,Ⅱ组将粪肠球菌液涂到用B药液与M-H培养基混合的药液培养基上,Ⅲ组将粪肠球菌液涂到M-H培养基上,上述培养基均贴上环丙沙星(CIP)、红霉素(ERY)、四环素(TE)、青霉素(PEN)、氯林可霉素(ClE)、苯唑青霉素(OXA)和克拉霉素(CLA)药敏纸,并观察培养基药敏情况。结果Ⅰ组的CIP、ERY、TE、PEN、ClE、OXA和CLA耐药率分别为26%、40%、36%、30%、42%、38%和24%,Ⅱ组Ⅲ组为10%、26%、14%、8%、18%、24%、4%,和76%、92%、100%、88%、96%、90%、60%,对CIP、ERY、TE、PEN、ClE、OXA和CLA耐药率ⅢⅠ组Ⅱ组,三组之间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论高速逆流色谱法提纯黄柏与五倍子配伍抗菌活性物质对临床分离的粪肠球菌菌株具有较强的抑菌活性,其抑茵作用比黄柏与五倍子配伍药做成中药煎剂强。