壳聚糖修饰的载胰岛素聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的生物黏附性及毒性评价

 目的 探讨壳聚糖修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）纳米粒的生物黏附性，阐明其促吸收机制，并考察纳米粒的细胞毒性以评价其安全性。方法 以胰岛素为模型药物，采用FITC标记胰岛素，复乳法制备普通PLGA纳米粒，壳聚糖包裹制备生物黏附性PLGA纳米粒。粒度及表面电位分析仪测量纳米粒的粒径及Zeta 电位，超速离心法测定载药纳米粒的包封率，通过测定胃肠道中胰岛素的总量评价纳米粒的生物黏附性，并采用MTT法评价PLGA纳米粒的细胞毒作用。结果 纳米粒粒径均一，PLGA普通纳米粒及生物黏附性纳米粒的平均粒径分别为（124.7±11）和（136.6±13）nm，粒径差别不大，但壳聚糖包衣显著地增强了纳米粒的正电性，使得Zeta电位由负值（-1.67±0.05） mV逆转为正值（42.6±0.3）mV，并且提高了药物的包封率，由（46.67±1.82）%增至（52.73±2.96）%。生物黏附性纳米粒口服后胃肠道中胰岛素的总量显著高于普通纳米粒，3 h达到1.31倍。MTT法显示生物黏附性PLGA纳米粒及普通PLGA纳米粒在所考察的剂量范围内（≤25 mg·mL-1），均对细胞无特殊毒性。结论 壳聚糖修饰的PLGA生物黏附性纳米粒是蛋白多肽类药物口服给药的良好载体。     

盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的制备及评价

目的 制备盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂并考察制剂的纤毛毒性和体内药代动力学行为.方法 考察盐酸纳洛酮在不同pH溶液中的稳定性,不同吸收促进剂对盐酸纳洛酮的促渗透效果,筛选出适宜的处方;以离体蟾蜍上颚黏膜表面纤毛的相对运动百分率评价盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的纤毛毒性;考察盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂在大鼠体内的药代动力学行为.结果盐酸纳洛酮溶液在pH3.5~5.5范围内稳定,0.2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)促渗透效果最好;盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的纤毛毒性小且可恢复;盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂起效快,在大鼠体内的生物利用度与肌肉注射相当.结论 本文制备的鼻腔喷雾剂体外性质稳定可控,纤毛毒性小,起效快,生物利用度高,具有较好的应用前景.     

不同粒径黄体酮的制备及评价

目的 比较不同粒径黄体酮注射液的释放速度和生物利用度.方法 制备黄体酮纳米级、微米级注射液,通过X线粉末衍射分析(PXRD)和傅里叶变换红外光谱分析(FTIR)对两者进行表征,经透析法比较两制剂和黄体酮原料药的溶出速度.HPLC-MS法测定肌注不同药物后大鼠血浆中药物浓度,计算药代动力学参数,并进行统计学分析.结果 PXRD和FTIR分析中,两制剂晶型结构基本无变化,晶型稳定.黄体酮纳米级、微米级注射液在PBS溶液中释放达到90%时分别需要2和4 h,而原料药释放完全需要近40 h.药代动力学实验中,相比市售黄体酮注射液,黄体酮纳米级、微米级注射液的Cmax分别提高了1.8和1.7倍,AUC0-t分别提高了2.95和1.63倍.两者生物利用度均高于黄体酮注射液.结论 黄体酮纳米级、微米级注射液的释放速率显著高于原料药,生物利用度均高于市售注射液.     

羟基喜树碱-磷脂复合物的制备、表征及细胞毒性评价

目的 制备羟基喜树碱-磷脂复合物(HCPT-PC),对其理化性质进行表征,并考察其细胞毒性.方法 采用马尔文粒径电位测定仪、扫描电镜、透射电镜对粒径和形态进行表征;采用X线粉末衍射、红外光谱对复合机制进行考察;同时考察其溶解度和抗肿瘤活性.结果 HCPT-PC粒径为(145.08±18.37)nm;扫描电镜和透射电镜下呈均匀分布的球形;粉末衍射结果显示,HCPT-PC中HCPT从结晶态转变为无定形状态;红外光谱显示HCPT与PC的极性端存在弱相互作用;HCPT-PC在水、PBS、乙醇、正辛醇中的溶解度分别提高约21.91、20.36、1.42和6.32倍;与HepG2、SMMC-7721和H22细胞作用48和72 h后,HCPT-PC的IC50值较HCPT分别提高3.57、11.14、2.79、37.26、21.23和24.49倍.结论 HCPT通过与PC的极性端形成弱相互作用复合成无定形状态的HCPT-PC,其溶解度和抗肝癌活性较HCPT显著提高.     

那格列奈片的稳定性研究

目的:建立那格列奈片的稳定性分析方法,研究那格列奈片的稳定性。方法:采用HPLC法;色谱柱为ZY1104型YWG-C_(18)为(250mm×4.6mm,10μm);流动相:乙腈—[醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.6)]—甲醇(2:2:1);紫外检测波长258nm;流速1.0mL·min~(-1);内标法室温测定。结果:那格列奈在0.1～0.8mg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999);回收率为(100.05±0.88)％。结论:该稳定性分析方法操作简便,结果准确可靠,可排除分解产物的干扰。本片对湿、热及光均稳定,加速试验3个月其含量基本不变。     

盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的药效学研究

目的:评价盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的药效。方法:以新西兰大耳白兔为动物模型,通过给予中毒剂量的盐酸二氢埃托啡建立阿片类药物中毒模型,考察高、中、低三个浓度盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的药效,并与肌内注射及静脉注射盐酸纳洛酮注射液的救治效果进行比较。结果:盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂治疗效果与肌注相当。结论:盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂起效迅速,救治效果显著,使用方便,特别适合危重症病人的自救与互救。     

高效液相色谱法测定盐酸异丙嗪咖啡因片的含量及溶出度

目的 建立测定盐酸异丙嗪咖啡因片的含量及溶出度的高效液相色谱法.方法 色谱柱:Agilent TC C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-三乙胺水溶液(浓度为3‰,磷酸调至pH2.3)=(50:50);流速:1.0 ml/min;检测波长分别为250和272 nm;柱温:30℃;进样量20μl(溶出度测定时进样量为10 μl).溶出条件采用桨法,温度为37℃,分别以900 ml pH1.2盐酸、pH 4.5醋酸缓冲液、pH 6.8磷酸缓冲液及水为溶出介质,以50、75 r/min作为转速进行溶出条件的筛选.结果 该HPLC检测方法专属性良好;盐酸异丙嗪、咖啡因分别在0.5 ～ 100 μg/ml和4.0 ～ 400 μg/ml范围内线性关系良好,线性回归方程分别为Y=96.21X-7.303(r=1)、Y=51.33X +68.88(r=0.9999);盐酸异丙嗪检测限为15 ng/ml,定量限为40 ng/ml;咖啡因检测限为2 ng/ml,定量限为10 ng/ml.平均回收率分别为盐酸异丙嗪(100.04±1.39)％(n=9),咖啡因(99.42±1.07)％(n=9);供试溶液在12h保持稳定.确立了以900 mlpH 1.2盐酸为溶出介质,桨法转速为50 r/min的溶出方法,溶出时间30 min.制剂在4种溶出介质中溶出度均在15 min内达85％以上,其溶出不受体液pH影响.结论 所选溶出条件适用于盐酸异丙嗪咖啡因片的溶出测定.所建含量及溶出度检测方法简便、快速、灵敏,精密度高,重现性好,结果准确,适合同时对盐酸异丙嗪及咖啡因进行含量及溶出度分析.     

盐酸环丙沙星脂质体肺部给药的体内外性质研究

目的研制适于肺部给药的盐酸环丙沙星脂质体制剂,并对其体内外性质进行评价。方法采用硫酸铵梯度法制备盐酸环丙沙星脂质体,通过正交设计优化处方,纳米粒径分析仪测定脂质体的粒径,透射电镜观察脂质体的表面形态;分别采用透析法和凝胶柱色谱法测定脂质体的包封率,以筛选最佳测定方法;采用模拟肺液和生理盐水作为释放介质考察脂质体的体外释放行为。采用气管滴注给药方式,对盐酸环丙沙星脂质体在大鼠体内的药代动力学、肺组织分布和肺部刺激性进行了研究。结果盐酸环丙沙星脂质体优化处方组成中二肉豆寇酰磷脂酰胆碱与胆固醇的摩尔比为1:1,硫酸铵浓度为0.6 mol/L,药脂质量比为1:3,脂质体的平均包封率为94.0%,平均粒径350 nm,且大小均匀,形态完整。透析法比凝胶柱色谱法能更有效地分离脂质体和游离药物。盐酸环丙沙星脂质体具有良好的缓释作用和靶向效果,与盐酸环丙沙星溶液相比,其在大鼠肺组织中的t1/2延长7.21倍,Cmax提高4.99倍,肺靶向效率由2.01提高至800,提高了288倍,并且盐酸环丙沙星脂质体对大鼠肺部的刺激性小且可逆。结论本研究制备的盐酸环丙沙星脂质体包封率高,具有缓释、靶向效果,且肺部刺激性小,适于肺部给药。     

HPLC法测定甲氧氯普胺鼻腔喷雾剂的含量和有关物质

目的：建立测定甲氧氯普胺（ MCP）鼻腔喷雾剂含量和有关物质的HPLC检测方法。方法采用Agilent TC－C18柱（250 mm ×4．6 mm,5μm）,流动相为乙腈－磷酸盐缓冲液（取0．05 mol／L磷酸二氢钾溶液,加三乙胺5 ml,用磷酸调至pH 4．0）（19∶81）,检测波长为275 nm,柱温30℃,流速为1．0 ml／min。结果与结论在建立的色谱条件下,MCP与有关物质峰基线分离,MCP浓度在10～200μg／ml 范围内线性关系良好,r＝0．9999,回收率为100．3％～101．6％, RSD为0．68％（n＝9）,MCP检出限0．3 ng。该方法准确、可靠,重复性较好,可作为MCP鼻腔喷雾剂的质量控制方法。     

HPLC法测定盐酸噻吩诺啡片中的有关物质

目的：建立盐酸噻吩诺啡片有关物质检查的HPLC法。方法：用Phenomenex C18（250mm×4．6mm,5μm）色谱柱,以甲醇旬．02mol·L。磷酸盐缓冲液（pH=3,含0．2％的三乙胺）（60：40）为流动相,检测波长242nm,流速1．0ml·min^-1。结果：最低检测限为15μg·L^-1。盐酸噻吩诺啡与有关物质分离良好。结论：本法灵敏度高、专属性强,可用于盐酸噻吩诺啡片的有关物质检查。