微量元素铬(Cr~(3+))与动脉粥样硬化关系的研究——Ⅰ.Cr~(3+)对高脂血症大鼠血清和组织脂质水平的影响

不同剂量Cr~(3+)(0.1μg～10mg/100gBW)均能改善高脂血症大鼠血胆固醇(Ch)代谢,呈剂量依赖关系。小剂量C~(3+)对血清甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)代谢,中剂量Cr~(3+)对血清TG、磷脂(PL)和主动脉壁Ch代谢,均呈有益效应。不同剂量Cr~(3+)均能使肝TG增加、Ch减低。大剂量Cr~(3+)降低血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C),升高血清TG。     

雌激素对去势小鼠LPL、HL活性的影响

目的　探讨雌激素对卵巢切除 (OVX)的去势小鼠脂蛋白脂酶 (LPL)和肝脂肪酶 (HL)活性的影响。方法　将 30只成年的雌鼠随机分 3组 ,每组 10只。A组为正常饲料 OVX 生理盐水 ,B组为高脂饲料 OVX 生理盐水 ,C组为高脂饲料 OVX 雌激素。喂养 10周后取血 ,分别检测甘油三酯 (TG)、血清脂蛋白脂肪酶 (LPL)、肝脂肪酶 (HL)水平。结果　A、B和C组的TG分别是 (0 2 7± 0 14 )mmol/L、(0 2 8± 0 10 )mmol/L和 (0 30± 0 14 )mmol/L。A、B和C组的LPL分别是 (1 6 7±0 35 )mmol/L、(1 5 3± 0 32 )mmol/L和 (1 0 0± 0 2 8)mmol/L。A、B和C组的HL分别为 (0 4 5± 0 11)mmol/L、(0 4 3± 0 11)mmol/L和 (0 2 9± 0 13)mmol/L。各组的TG差异无显著性 ,但C组的LPL及HL均比对照组低 (P <0 0 5 )。结论　雌激素能降低去势小鼠LPL、HL活性。     

肝素后血浆脂蛋白脂酶(LPL)活性的测定

肝素后血浆中的脂蛋白脂酶(LPL)和肝-甘油三脂酯酶(H-TGL)均能水解脂蛋白的甘油三酯(TG)。本实验先用比浊法测定总脂解活性,然后用1 M 氯化钠抑制 LPL 活性,再用比浊法测 H-TGL 脂解活性,两者的差值即 LPL 活性。用上述方法测出80只正常雄性灰兔肝素后血浆 LPL 活性的正常均值为8. 8±4. 2(标准差)单位。     

毛冬青甲素对3’,5’—环一磷酸腺苷磷酸二酯酶活性的影响

为探讨毛冬青甲素提高血小板 cAMP 的含量的机理,实验通过测量经磷酸二酯酶(PDE)水解作用后剩余的 cAMP 量来计算 PDE 的活性,井探讨不同浓度毛冬青甲素对 PDE 活性的影响。实验结果表明:0.1g/L 及0.5g/L 两种不同浓度的毛冬青甲素溶液其被水解的 cAMP 量分别为91.90±7.91pmol 和66.40±2.84pmol,与对照组(128.00±7.38pmol)比较,p<0.05或 p<0.01。提示毛冬青甲素能抑制PDE 的活性,说明毛冬青甲素能提高血小板 cAMP 水平,抑制血小板的凝集作用是通过抑制血小板的3′,5′-环一磷酸腺苷磷酸二酯酶的活性而实现的。     

低抗凝效价肝素S_(38)对大鼠血脂的调整作用及机理

作者就低抗凝效价肝素S_(38)对大鼠血脂的影响进行了研究。结果表明,S_(38)有调整血脂的作用,显著抑制了大鼠饮食性高胆固醇血症时血清总胆固醇、极低密度及低密度脂蛋白胆固醇的上升,并有升高血清高密度脂蛋白胆固醇与总胆固醇比值的趋势。给予大鼠S_(38)还明显升高大鼠血浆脂蛋白脂酶(LPL)活性及肝脂酶(HEL)活性。这些作用及对脂解酶影响的量效关系与等抗凝效价的商品肝素作用相似。因此认为,S_(38)的血脂调整作用可能与其脂解酶释放作用有关,且与抗凝活性有一定关系。     

饮用纯净水对大鼠脂代谢酶及载脂蛋白的影响

目的:观察饮用纯净水及加镁纯净水对大鼠血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT),脂蛋白酯酶(LPL),肝脂酶(HL)活性及载脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)、载脂蛋白B(apoB)含量的影响. 方法:健康Wistar大鼠180只,随机分为自来水对照组、纯净水组和加镁纯净水组(纯净水 0.5 g/L MgSO4·7H2O),每组60只,雌雄各半. 各组大鼠分别于3 mo和6 mo随机选取30只处死(雌雄各半),静脉采集非肝素化和肝素化空腹血,分离血清测定LCAT、LPL、HL活性和apoAⅠ、apoB含量. 结果:与自来水对照组比较,饮用纯净水可使大鼠血清apoB含量(g/L)显著增高[自来水3 mo组(0.14±0.08)、6 mo组(0.17±0.04);纯净水3 mo组(0.20±0.11)、6 mo组(0.20±0.05);P<0.05],LCAT、LPL、HL活性及apoAⅠ/ apoB比值均可见下降趋势. 饮用补充了硫酸镁的纯净水(与单纯饮用纯净水比较),可显著降低apoB含量(g/L)[纯净水3 mo组(0.20±0.11)、6 mo组(0.20±0.05);加镁纯净水3 mo组(0.14±0.07)、6 mo组(0.17±0.05);P<0.05],LCAT、LPL、HL活性及apoAⅠ/ apoB比值上升;大鼠血清LPL、HL活性存在性别差异. 结论:饮用纯净水将影响大鼠脂代谢关键酶活性及载脂蛋白含量,长期饮用可能对脂蛋白代谢有负面影响. 饮用纯净水对雌性和雄性大鼠血脂代谢的影响程度不同.     

实验性动脉粥样硬化家兔脂蛋白脂酶活性及病理变化的研究

通过复制家兔动脉粥样硬化(As)模型,初步探讨实验前、后家兔 LPL 活性及其与病理变化的关系。同时检测了血脂水平。实验组 PH—LPL 活性于实验后4周开始降低,尤以13周为明显(P<0.01);13周时成活的11只兔中,有8只主动脉呈现不同程度的病变(霞度4只,中度1只,轻度3只),且与 PH—LPL 活性呈负相关(r_s=-0.685,P<0.05)。PH—LPL 活性差值(与实验前);重度>0.965mmol/L/h,中、轻度0.820～0.540mmol/L/h,<0.300mmol/L/h 为As 病变较难形成,因此,PH—LPL 活性在估计主动脉病变的有无和程度上有一定意义。     

褐藻糖胶对高脂血症大鼠脂代谢酶的影响

【目的】探讨褐藻糖胶(FPS)对高脂血症大鼠脂代谢酶的影响。【方法】取健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常组,模型组,绞股蓝组(剂量为30 mg.kg-1),FPS低、中、高剂量(剂量分别为0.1、0.2、0.4 g.kg-1)组。除正常组外,其他各组以高脂乳剂(10 mL.kg-1)灌胃复制大鼠高脂血症模型。观察各给药组对大鼠脂代谢酶[脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)]活性的影响。【结果】FPS低、中剂量组血清LPL、HL、LCAT及肝脏LPL、HL活性均较模型组显著升高。【结论】FPS通过激活血清和肝脏LPL、HL的活性来降低血清甘油三酯,激活LCAT降低血清胆固醇。     

人脂蛋白脂酶基因重组质粒的构建及其表达

目的研究野生型人脂蛋白脂酶(LPL)cDNA重组表达质粒的构建了及其在COS-1细胞中的表达。方法采用RT-PCR法从人大网膜脂肪组织获取LPL cDNA基因,以pcDNA3.1Zeo( )质粒作为载体,运用基因克隆技术构建野生型人LPLcDNA重组质粒,限制性内切酶酶切、PCR以及双向测序鉴定重组质粒;运用L ipofectam ine 2000TM将重组pcDNA3.1Zeo( )-LPLcDNA质粒导入COS-1细胞,RT-PCR法检测LPL mRNA,ELISA法和比色法分别检测细胞裂解液及细胞培养基中LPL浓度及活性。结果经限制性内切酶酶切及PCR鉴定,证实LPL基因已被连接到pcDNA3.1Zeo( )质粒中;DNA双向测序证实其产物与基因库中LPL基因序列完全一致。LPL mRNA和蛋白表达及其活性测定结果表明,pcDNA3.1Zeo( )-LPL cDNA重组质粒已转染入COS-1细胞中。结论实验成功构建野生型人LPL cDNA重组表达质粒,并证实其能在COS-1细胞中有效表达。     

NIDDM患者肝素后血浆LPL和HEL活性变化

本文研究91例非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者(合并冠心病者30例),肝素后血浆脂蛋白脂酶(LPL)和肝内皮细胞脂酶(HEL)活性变化及其与血清高密度脂蛋白胆固醇(HDLch)水平的相关性,并对其可能在冠心病(CHD)中的作用进行初步探讨。以71例性别、年龄、体重指数(BMI)相匹配而无CHD的非糖尿病人作为对照组。结果表明:病人LPL活性低于对照组,HEL活性高于对照组(LPL:1.20±O.65 VS2.20土0.68u MFFA/mL/h,p<0.001;HRL:4.46±1.94 Vs2.36±09 u MFFA/mL/h,P<0.001。LPL活性与HDLch水平呈正相关(γ=0.278,P<0.01),而“[HEL活性与HDLCh水平呈负相关(γ=-0.521,P<0.001)。此外,男、女性病人合并有CHD组的HEL活性明显高于无CHD组;女性病人合并CHD组的LPL活性显著低于无CHD组,但男性病人合并CHD组的LPL活性无显著性降低。结合有关文献讨论LPL和HEL在脂蛋白代谢方面的作用。     

高密度脂蛋白亚组份对脂蛋白脂肪酶和肝脂酶活性的影响

本研究在体外测定了高密度脂蛋白2(HDL_2)和高密度脂蛋白3(HDL_3)对脂蛋白脂肪酶(LPL)和肝脂酶(HTGL)脂解乳麋微粒(CM)和极低密度脂蛋白(VLDL)的影响。用制备超离心法从正常人血浆分离HDL亚组份。从Ⅰ型高脂血症患者分离CM,从Ⅳ型高脂血症患者分离VLDL,从正常人肝素后血浆分离两种脂酶。用VLDL和CM作底物,增加HDL_2的量可分别增加LPL的活性65％和55％,分别减少HTGL的活性60％和67％;而HDL_3对LPL和HTGL的活性无明显影响。     

CD40配体通过诱导型环氧合酶途径诱导单核巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶

目的:观察重组人CD40配体(rhCD40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制.方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4 μg/ml)的rhCD40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3 mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U937细胞24 h后收集上清液;在加入终浓度为0.4 μg/ml rhCD40L的基础上,分别加入终浓度为10-4 mol/L的阿司匹林(COX-1抑制剂)或NS-398,共同刺激U937细胞24 h后收集上清液.酶谱法测定上述U937细胞培养上清中MMPs活性.结果:rhCD40L可使MMP-2和MMP-9活性增加(P＜0.01),且随浓度的增加而逐渐增强,0.4 μg/ml rhCD40L作用最强;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(P＜0.05).NS-398、阿司匹林均可抑制rhCD40L诱导U937细胞分泌MMP-2和MMP-9(P＜0.01),NS-398的抑制作用强于阿司匹林(P＜0.05).结论:rhCD40L以浓度依赖的方式诱导单核巨噬细胞分泌MMPs,这种诱导作用可能与诱导型环氧合酶(COX)有关,而且与COX-2的相关性可能较COX-1更密切.     

紫河车体外对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

目的 观察中药紫河车对黑素细胞和酪氨酸酶的影响。方法 采用MTT法测定黑素细胞增殖情况,Hunt法测定黑素合成,以蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性。结果 (1)紫河车对黑素细胞具有增殖作用,其最佳增殖浓度为0.1g/L(P<0.01);(2)紫河车可增强黑素合成能力,其最佳增强能力为0.1g/L(P<0.01);(3)紫河车对酪氨酸酶亦具有激活作用,其最佳激活浓度为1g/L(P<0.01)。结论 紫河车能激活黑素细胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性。     

高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞增殖及细胞间黏附分子1表达的影响

目的 探讨脂联素(ADPN)对体外高糖培养的人肾小管上皮细胞增殖及细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,揭示脂联素对高糖环境中的肾小管上皮细胞可能的保护作用机制.方法 ①将人肾小管上皮细胞用5.5 mmol/L葡萄糖(正常对照组)、30.0 mmol/L葡萄糖(高糖组)、5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇(甘露醇组)、30.0 mmol/L葡萄糖+2.5μg/ml ADPN(脂联素组)分别培养24 h,48 h,96 h后,运用MTT法测定细胞增殖.②将人肾小管上皮细胞用5.5 mmol/L葡萄糖(正常对照组)、30.0 mmol/L葡萄糖(高糖组)、30.0 mmol/L葡萄糖+不同浓度ADPN(ADPN终浓度分别为2.5,5.0,7.5,10.0,15.0和20.0 μg/ml,脂联素组)分别培养48 h后,运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中ICAM-1的含量.结果 ①高糖组细胞增殖被抑制,加入低浓度脂联素(2.5 μg/ml)后促进了细胞增殖;②ICAM-1在高糖组表达较高,加入中等以上浓度脂联素(ADPN浓度为10.0,15.0,20.0 μg/ml)ICAM-1的表达减少.结论结果 提示脂联素可能通过减少ICAM-1的表达而起到保护肾脏的作用.     

口服类肝素理化性质和药理活性的研究

目的：制备口服类肝素样品并研究其理化性质、促脂酶释放活性和抑制血栓形成作用。方法：猪十二指肠通过提取分离得到类肝素样品，采用常规方法测定其抗Xa因子活性、活化部分凝血激酶时间(APTT)活性等各项理化性质，采用比色测定法考察其促进肝脂酶(HL)和脂蛋白脂酶(LPL)释放活性，并采用大鼠动静脉旁路血栓模型考察其口服给药对血栓形成的抑制作用。结果：类肝素样品抗Xa因子活性70.4IU／mg，APTT活性33.8IU／mg，FXa／FIIa为2．1，促HL和LPL释放及抑制大鼠动静脉旁路血栓作用显著。结论：类肝素样品具有显著的促HL和LPL释放及口服抑制血栓形成作用。     

人参皂苷Rg1、甲壳胺和转化生长因子β1对人牙周膜细胞增殖和分化功能的作用

目的:探讨人参皂苷Rg1、甲壳胺(Chi)和转化生长因子β1(TGF-β1)对原代培养的人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响. 方法:用原代培养的人牙周膜细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法、酶动力学方法、放射免疫法和流式细胞仪检测人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)、不同浓度Chi(0.05 g/L、 0.1 g/L、 0.2 g/L)、不同浓度TGF-β1(0.5 μg/L、 1 μg/L、 2 μg/L)和单纯DMEM培养液(对照组)对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌和细胞凋亡的影响. 结果:①与对照组比较除TGF-β1 (0.5 μg/L、2 μg/L)组和Chi(0.2 g/L)组第7天外,TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组在3、5、7天均能明显增强牙周膜细胞的增殖能力(P<0.05).②TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组细胞裂解液中ALP活性均明显高于对照组(P< 0.05).③ 7天时,除Chi(0.2 g/L)组外,其他各组骨钙素分泌均明显强于对照组(P<0.05);21天时,人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组明显高于其他各组(P < 0.05).④TGF-β1 (1 μg/L)组、Chi (0.1 g/L)组和人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组细胞凋亡百分率与对照组比较均明显降低(P< 0.01). 结论:与TGF-β1一样,Chi及人参皂苷Rg1有促进牙周膜细胞增殖的作用,能增强人牙周膜细胞ALP活性,增加牙周膜细胞骨钙素的分泌,有降低牙周膜细胞凋亡率的作用.     

兔实验性动脉粥样硬化血浆脂蛋白脂酶和肝脂酶活性的变化

初步建立了兔肝素化血浆脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)活性的测定方法,两种脂酶活性以水解三油酸甘油酯(TG)生成游离脂肪酸(FFA)的含量表示。测得雄性日本大耳白兔肝素化后15min血浆LPL、HL活性最大,批内差异分别为4.96%、3.26%;正常兔LPL、HL分别为12.15±4.07μmol·L~(-1)FFA/h·ml、17.11±6.80μmol·L~(-1)FFA/h·ml;实验兔喂饲胆固醇12wk形成动脉粥样硬化(AS)时LPL、HL活性分别为7.94±3.36μmol·L~(-1)FFA/h·ml、4.54±1.52μmol·L~(-1)FFA/h·ml,两者均较正常兔明显降低(P<0.005)。提示:在高胆固醇负荷时,LPL、NL活性降低可能促进了AS的形成。     

消脂平片对实验性高脂血症大鼠降血脂作用及机制的研究

目的高血脂症的有效治疗对防治动脉粥样硬化和冠心病等心脑血管疾病的发生具有重要意义。文中探讨消脂平片对实验性高脂血症大鼠的降血脂作用及其作用机制。方法采用喂养大鼠高脂饲料的方法建立实验性高脂血症模型,同时给予消脂平片和血脂康胶囊干预治疗,连续灌胃给药9周,观察大鼠体重变化,测定大鼠血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,ApoA-I)、载脂蛋白B(apolipoprotein B,Apo-B)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量,以及大鼠肝组织中脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)、肝酯酶(hepatic lipase,HL)和总酯酶(PHPA)的活性。结果消脂平片对食用高脂饲料引起大鼠体重降低有明显改善作用,且可降低大鼠血清TC、TG、LDL-C、Apo-B的含量,升高HDL-C、ApoA-Ⅰ的含量及ApoA-Ⅰ/Apo-B比值,并使动脉粥样硬化指数(TC/HDLC)降低;可降低高脂血症模型大鼠血清MDA含量,提高SOD、GSH-PX和NO活性活力,同时可增强高脂血症大鼠肝组织中LPL、HL和PHPA的活性。结论消脂平片能有效降低实验性高脂血症大鼠血脂水平,具有显著地降血脂作用,其作用机制与增强LPL、PHPA酶活性紧密相关。     

人参皂苷Rg1、甲壳胺和转化生长因子β1人牙周膜细胞增殖和分化功能的作用

目的探讨人参皂苷Rg1、甲壳胺(Chi)和转化生长因子β1(TGF-β1)对原代培养的人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响. 方法用原代培养的人牙周膜细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法、酶动力学方法、放射免疫法和流式细胞仪检测人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)、不同浓度Chi(0.05 g/L、 0.1 g/L、 0.2 g/L)、不同浓度TGF-β1(0.5 μg/L、 1 μg/L、 2 μg/L)和单纯DMEM培养液(对照组)对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌和细胞凋亡的影响. 结果①与对照组比较除TGF-β1 (0.5 μg/L、2 μg/L)组和Chi(0.2 g/L)组第7天外,TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组在3、5、7天均能明显增强牙周膜细胞的增殖能力(P<0.05).②TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组细胞裂解液中ALP活性均明显高于对照组(P< 0.05).③ 7天时,除Chi(0.2 g/L)组外,其他各组骨钙素分泌均明显强于对照组(P<0.05);21天时,人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组明显高于其他各组(P < 0.05).④TGF-β1 (1 μg/L)组、Chi (0.1 g/L)组和人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组细胞凋亡百分率与对照组比较均明显降低(P< 0.01). 结论与TGF-β1一样,Chi及人参皂苷Rg1有促进牙周膜细胞增殖的作用,能增强人牙周膜细胞ALP活性,增加牙周膜细胞骨钙素的分泌,有降低牙周膜细胞凋亡率的作用.     

脂蛋白脂酶的制备及茶叶多糖对该酶的影响

利用Heparin-Sepharose CL-6B(H-S-CL-6B)亲和层析法分离提纯了牛奶中的脂蛋白脂酶(LPL),并研究了茶叶多糖(TP)对该酶活力的影响。实验结果表明,1毫升反应体系中,160μg的TP能使LPL活力提高7%,并且能降低该酶对抑制剂如NaCl的敏感性,与肝素有相似的作用。