人类免疫缺陷病毒感染与T淋巴细胞损伤

人类免疫缺陷病毒(HIV)是具有包膜的正链RNA病毒,以人体免疫系统中最重要的CD4+T淋巴细胞为感染和攻击目标,通过损伤细胞膜、干扰细胞自身蛋白合成直接杀伤CD4+T细胞,诱导感染细胞生成某些细胞因子间接杀伤CD4+T细胞,gp120与CD4分子交联,诱导CD4+T细胞凋亡。在HIV感染及多种细胞因子作用下,T淋巴细胞分化为细胞毒性T细胞,特异性识别和清除病毒感染的细胞;分化为调节性T细胞,发挥免疫抑制功能,防止免疫过激;分化为记忆性T细胞,介导再次免疫应答。     

环孢素A抑制正常人外周血记忆CD4~+T细胞产生IL-22的实验研究

目的探讨环孢素A(CsA)是否能够抑制正常人CD4+T细胞产生白细胞介素22(IL-22)。方法使用密度梯度离心法制备正常人外周血单个核淋巴细胞(PBMCs),加入PMA+Inomycin刺激细胞后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测正常人外周血PBMCs中产生IL-22的T细胞亚群,以及IL-17-IFN-γ-IL-22+CD4+T细胞亚群(Th22);PMA+Inomycin刺激正常人PBMCs,同时加或不加环孢素A(CsA)后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测IL-22+CD4+T细胞和IFN-γ+CD4+T细胞的比例,以及IL-22+CD4+T细胞表达记忆表型分子CD45RO情况。结果正常人外周血中产生IL-22的T细胞以CD4+T细胞为主,且存在仅分泌IL-22,不分泌IL-17和IFN-γ的Th22亚群;CsA以剂量依赖方式抑制CD4+T细胞产生IL-22和IFN-γ;CsA抑制外周血PBMCs中记忆CD4+T细胞产生IL-22。结论 CsA能抑制正常人外周血中记忆CD4+T细胞产生IL-22。     

肺结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞增多并抑制抗结核免疫

目的 研究肺结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞是否增多,这些调节T细胞是否抑制结核的特异细胞免疫反应.方法 使用细胞分离、流式细胞分析及细胞增殖及增殖抑制等实验方法,对20例肺结核患者及17例健康人群外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞的数量及免疫学特征作研究.结果 肺结核患者外周血中CD4+CD25+ FoxP3+调节T细胞数占CD4+细胞总数的比例显著高于健康人群(P＜0.01).在体外,肺结核患者外周血单个核细胞在BCG及ESAT-6的刺激下增殖能力比健康对照人群明显增强(P＜0.01),产生的γ-干扰素比健康人群也明显增强(P＜0.05);清除调节T细胞后的肺结核患者外周血单个核细胞对BCG刺激下产生γ-干扰素及白介素-10比没有清除时显著增强(P＜0.05);从肺结核患者外周血分离CD4+ CD25+调节T细胞和CD4+ CD25 -细胞,CD4+ CD25 -细胞对BCG及ESAT-6刺激产生γ-干扰素和白介素-10的能力因CD4+ CD25+调节T细胞加入后而显著减弱(P＜0.05).结论 肺结核患者CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞增多,通过抑制结核患者细胞免疫反应,参与肺结核的发病.     

IL-23与结核病相关性的研究进展

<正>IL-23是一种可以介导白细胞间相互作用的细胞因子,在免疫应答的调节中发挥重要作用,属于IL-12细胞因子家族成员,其生物学活性与IL-12相似,又不同于IL-12,主要是由活化的CD4+T细胞、树突细胞、巨噬细胞、B细胞和内皮细胞产生[1]。IL-23能促进T细胞增殖及分化,诱导T细胞产生IFN-γ,诱导TH17分泌IL-17相关的IL-17A和IL-17F、     

IL-17参与小鼠心脏移植排斥反应的实验研究

目的 研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义.方法 建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组.观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体γt(RORγt)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA在移植术后1、2、3、4、5、6、7、8 d的动态表达水平.免疫荧光法观察移植术后第4天移植心脏内CD4+、CD8+T细胞中IL-17的表达情况.结果 RT-PCR检测显示,在急性排斥反应组中,IL-17和RORγt mRNA的表达都早于IFN-γ,在移植术后第2天即可于移植心脏中检测到,其表达量在术后第4天均达到高峰,随后逐渐下降,并分别在术后第6天和第7天无表达.免疫荧光结果显示,急性排斥组移植心脏内有大量CD4+、CD8+T细胞浸润,细胞因子IL-17主要由CD4+T细胞分泌.结论 Th17细胞在移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对移植脏器中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标.     

IL-4与IL-10调控CD4+ T细胞CXC趋化性细胞因子受体4的研究

目的研究IL-4和IL-10对CD4+ T细胞上CXC趋化性细胞因子受体4（CXCR4）表达的调控。方法采用流式细胞术，实时定量逆转录PCR（RT-PCR），细胞因子的趋化性分析以及Scatchard分析法检测CXCR4和CXCR4 mRNA。结果 IL-4和IL-10能够显著上调或下调CD4+ T细胞上CXCR4的表达。SDF-1诱导的CD4+ T细胞趋化性同样也受到IL-4和IL-10的调控。IL-4和IL-10能分别上调或下调CD4+ T细胞中CXCR4的mRNA表达。在新鲜分离的CD4+ T细胞上只存在一种亲和力的CXCR4（Kd 6.3 nmol*L-1）。而IL-4刺激的CD4+ T细胞存在两种不同亲和力的CXCR4（Kd1 4.4 nmol*L-1和Kd2 14.6 nmol*L-1）。IL-4和IL-10通过环腺苷酸和环鸟苷酸双重信号途径对CD4+ T细胞上CXCR4表达的调控与Ca2+激活刺激无关。IL-4和IL-10可能是通过CD26来调控CXCR4在CD4+ T细胞上的表达。结论 IL-4和IL-10对CXCR4-SDF-1受体-配体对的调节，在HIV侵袭和炎症感染进程有关的细胞因子环境中起着重要作用。     

氨茶碱、地塞米松对哮喘患者CD4+CD25+T调节细胞抑制功能的影响

目的探讨哮喘患者CD4+ CD25+ T调节细胞的作用是否存在缺陷及药物(地塞米松、小剂量氨茶碱)对其作用的影响,为有效控制哮喘提供依据。方法分离哮喘患者及健康对照者外周血CD4+ CD25+ T调节细胞及CD4+CD25-T淋巴细胞并培养,设CD4+ CD25+ T调节细胞组、CD4+CD25-T淋巴细胞组及CD4+ CD25+ T调节细胞联合CD4+CD25-T淋巴细胞组,第3组又分为氨茶碱干预组、地塞米松干预组及空白对照组,72h后取培养上清液用ELISA法检测IFN-γ、IL-5、IL-13水平。结果健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞可抑制IFN-γ、IL-5及IL-13的生成(P<0.01),哮喘患者仅抑制IFN-γ、IL-5的生成(P<0.01);地塞米松预处理CD4+ CD25+ T调节细胞后,健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞抑制IFN-γ(P<0.05)、IL-5(P<0.01)、IL-13(P<0.01)生成能力增强,哮喘患者抑制IL-5、IL-13生成能力增强(P<0.01);采用氨茶碱预处理后,健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞抑制IL-5(P<0.01)、IL...     

悬浮红细胞对CD4+CD25+Treg细胞分化的影响

目的 体外观察悬浮红细胞对异体T淋巴细胞向CD4+ CD25+ Treg细胞分化的影响.方法 采用Ficoll密度梯度离心法和免疫磁珠法从人外周血中分离纯化出CD3+T淋巴细胞,给予CD3/CD28抗体刺激,并分别与异体非去白悬浮红细胞或去白悬浮红细胞混合培养72 h.采用流式细胞仪检测各组培养体系中CD4+ CD25+Treg细胞的比例.采用实时荧光定量PCR检测各组Foxp3 mRNA的表达情况.采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组细胞上清中促炎细胞因子[白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)和干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)]和抗炎细胞因子[白细胞介素10(interleukin-10,IL-40)和转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)]的水平.结果 与阴性对照组(细胞培养液组)比较,非去白悬浮红细胞和去白悬浮红细胞组CD4+ CD25+ Treg细胞比例明显增加,功能基因Foxp3 mRNA表达也明显增高;1L-2和IFN-γ促炎细胞因子分泌减少,IL-10和TGF-β抗炎细胞因子分泌增多(P＜0.01).而与去白悬浮红细胞比较,非去白悬浮红细胞作用更加明显(P＜0.05).结论 悬浮红细胞可能通过调节促炎/抗炎细胞因子平衡诱导异体T淋巴细胞向CD4+ CD25+ Treg分化,而悬浮红细胞内残留的白细胞可能在其中起了关键作用.     

CD4+CD25+调节性T细胞在糖尿病发病中作用的研究

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在糖尿病发病中的作用及机制。方法:选取BALB/c小鼠,每日腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40mg/kg,连续5天,建立1型糖尿病模型;从小鼠内眦静脉采血,检测血糖;取小鼠尿液,检测尿糖;流式细胞术检测两种小鼠感染不同时间脾细胞悬液中CD4+T细胞和CD4+CD25+T细胞百分含量;ELISA法检测脾细胞培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果:BALB/c小鼠的IFN-γ水平在注射STZ第2周和4周明显增高(P<0.05);IL-10水平在注射STZ第2周和4周明显降低(P<0.05);CD4+T细胞数量在注射STZ第2周未见明显升高,第4周水平明显升高(P<0.05);CD4+CD25+T细胞数量在注射STZ第2周和4周明显降低(P<0.05)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞通过抑制Th1型细胞因子分泌,分泌IL-10等细胞因子,防止糖尿病的发生,维持自身耐受。     

Association of IL-7 with disease progression in Chinese HIV-1 seropositive individuals

Background Elevated levels of interleukin-7 (IL-7) have been correlated with CD4(+) T cell depletion and the emergence of syncytium-inducing (SI) variants in human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) infection, and suggested as an indicator of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) disease progression. Therefore, we investigated the effects of IL-7 on disease progression and virus phenotype in Chinese HIV/AIDS patients. Methods In a cross-sectional study of 71 untreated HIV-1 seropositive individuals and 12 healthy donors, plasma IL-7 levels were determined by an ultra sensitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and its relations to CD4(+) T cells, CD8(+) T cells, plasma viral loads and HIV phenotypes were analyzed. Results Significant higher IL-7 levels were found in Chinese HIV/AIDS patients [(3.33 ± 3.60) pg/ml] than those of health controls [(1.2 ± 0.81) pg/ml] ( P &lt;0.05), and IL-7 levels were inversely associated with CD4(+) T cell counts ( r = － 0.497, P &lt;0.01). Furthermore, IL-7 levels were significant higher in patients with SI variants [(9.12 ± 4.55) pg/ml] than those with non-syncytium-inducing variants [(1.50 ± 2.69) pg/ml] ( P &lt;0.01). Conclusions Increased IL-7 levels were found in Chinese HIV/AIDS patients and significantly associated with disease progression, thus increased IL-7 plasma levels may indicate disease progression.     

细胞因子对HIV/AIDS患者的免疫调节作用

目的 探讨多种细胞因子对高效抗反转录病毒治疗（HAART）的HIV/AIDS患者的免疫调节作用.方法 确诊HIV感染者或AIDS患者40例,CD4＋T细胞数均＜350/μl,接受HAART治疗,并分别于HAART治疗的0、12及24个月随访备血,健康对照组30例.ELISA检测血清和上清液细胞因子（IL-12、IL-21、IP-10和IFN-γ）,流式细胞术检测CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、CD4＋CD25＋FOXP3 Treg细胞.结果 未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者外周血中IL-12、IL-21和IFN-γ水平显著低于正常人,CD4＋T细胞明显降低,HAART治疗后均不同程度升高;而IP-10、CD8＋T细胞、CD4＋CD25＋FOXP3 Treg细胞显著高于正常人,HAART治疗后水平下降.CD4＋T、CD8＋T、CD4＋CD25＋FOXP3 Treg与各细胞因子水平有一定的相关性.结论 细胞因子可能和HIV/AIDS感染的致病机制相关,并可能参与了抗HIV病毒免疫重建和病毒控制过程.     

Different plasma levels of interleukins and chemokines: comparison between children and adults with AIDS in China

Background The immunological differences between children and adults with AIDS in China are not well documented. Th1/Th2 cytokines and chemokines are two types of immune factors intimately involved in disease progression of HIV-1 infection. This study aimed to identify changes in plasma levels of Th1/Th2 cytokines inerleukin （IL）-18, IL-16, IL-10 and chemokines regulated on activation, normal T cell expressed and secreted （RANTES）, stromal cell-derived factor-1 （SDF-1） and monocyte chemoattractant protein-1 （MCP-1） in HIV-l-infected children and adults in China. Methods Seventy-five children with AIDS and 35 adult AIDS patients were recruited and clinical data were collected. CD4^＋ T lymphocyte counts were measured by flow cytometery and plasma HIV RNA levels were measured by quantitative RT-PCR. Plasma levels of IL-18, IL-10, IL-16, RANTES, MCP-1, SDF-1a and SDF-1β were quantified by enzyme-linked immunosorbent assay. The levels of β2-microglobulin （β2-MG） and soluble Fas （sFas） were measured to validate the level of humoral and cellular immune activation. Results The mean levels of all cytokines in pediatric and adult AIDS patients were significantly higher than in their healthy controls （P 〈0.01）. The mean levels of these cytokines were higher in pediatric patients than in adult patients （P 〈0.05, except for SDF-la and β2-MG）. Some of the cytokine levels in patients younger than 6 years old was higher than in older children and adults with AIDS （IL-10, IL-18, SDF-la, MCP, RANTES and sFas, P 〈0.05）. Levels of IL-18, IL-10, RANTES and β2-MG of pediatric patients increased as the levels of viral load increased （P 〈0.05）. Conclusions Abnormal immune activation can be measured in Chinese pediatric and adult patients with AIDS, and is higher in children than in adult patients. The cytokines levels coincide with disease progression of AIDS, but have no direct relationship with total CD4^＋ T cell count.     

HIV感染发病和治疗中细胞因子的作用研究进展

免疫激活是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染的一个重要特点,CD4T细胞免疫激活与稳态调节和炎性反应有关,而CD8T细胞免疫激活则与HIV复制和炎性反应有关。白细胞介素-7(interleukin-7,IL-7)、Ⅰ型干扰素和炎性反应细胞因子在HIV感染的发病中发挥重要作用,γc细胞因子和干扰素α在HIV感染的治疗中的作用尚处于临床研究阶段,对于免疫细胞的恢复可能具有一定作用。     

HIV/AIDS合并HCV患者血红蛋白、肝功能与CD4+T细胞计数关系探讨

目的:探讨人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)合并丙型肝炎病毒(HCV)患者血红蛋白与肝功能、CD4+T细胞计数之间的相关性,以期运用观察血红蛋白判断HIV/AIDS合并HCV的预后.方法:采用回顾性分析方法将抗病毒治疗前的HIV/AIDS及HIV/AIDS合并HCV患者分别分为A、B、C组,进行肝功能、血红蛋白、CD4+T细胞计数的观察,予组间比较及统计学分析.结果:HIV/AIDS及HIV/AIDS合并HCV患者A、B、C组各组间贫血发生率有统计学差异(P＜0.05),HIV/AIDS组中随CD4+T细胞计数下降贫血发生率增高,HIV/AIDS合并HCV组中随CD4+T细胞计数下降贫血发生率有不同程度升高.HIV/AIDS及HIV/AIDS合并HCV各组间肝功能与CD4+T细胞计数无统计学差异(P＞0.05).结论:HIV/AIDS合并HCV发生贫血亦较为常见.     

HIV/AIDS合并丙型肝炎的临床与治疗

目的：探讨艾滋病病毒感染者／艾滋病患者（HIV/AIDS）合并丙型肝炎的临床表现和治疗方法。方法：18例HIV／AIDS合并丙型肝炎患者（16例AIDS、2例HIV感染者）中15例肝功能异常。在对HFC／AIDS治疗的同时对其中8例予复方甘草酸苷治疗。结果：16例AIdS患者中7例死亡。8例复方甘草酸苷治疗者中7例ALT、胆红素降至正常。结论：HIV/AIDS合并丙型肝炎可能加速唧感染的病程进展，预后较差，在抗病毒治疗基础上加用复方甘草酸苷对肝功能恢复有益。     

IL-21、IL-4在急性移植物抗宿主病中的临床研究

目的探讨IL-21和IL-4等细胞因子在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(Acute Graft-Versus-Host,aGVHD)发病机制中的变化规律。方法 20例白血病患者通过异基因造血干细胞移植治疗,统计aGVHD的发生率,采集20例患者移植前后的外周血,双夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中IL-21、IL-4的浓度。结果 (1)allo-HSCT后20例患者全部获得重建造血功能,中性粒细胞恢复到0.5×109/L及血小板恢复到20×109/L的中位时间分别为移植后13.5 d及18 d;(2)发生急性移植物抗宿主病的患者,IL-21浓度较移植前明显升高,IL-21浓度在aGVHD阳性组明显高于aGVHD阴性组(P<0.01)。但IL-4的浓度较移植前明显减低,而且IL-4的浓度在aGVHD阳性组明显低于aGVHD阴性组(P<0.01)。结论 (1)IL-21在急性移植物抗宿主病的发病中起重要的正向调节作用,而IL-4则起负向调节作用;(2)检测allo-HSCT后患者血清的IL-21、IL-4水平,有助于预测急性移植物抗宿主病的发生。     

AIDS合并马尔尼菲青霉病患者外周血Dectin-1、炎症细胞因子及CD4+T淋巴细胞表达情况及其临床意义

目的 探讨AIDS合并马尔尼菲青霉菌病(PsM)患者模式识别受体Dectin-1、炎性细胞因子及CD4+T淋巴细胞表达情况及其临床意义.方法 将120例AIDS患者根据是否合并PsM分为PsM组和非PsM组各60例,比较两组Dectin-1的平均荧光强度、CD4+T淋巴细胞计数和白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-12、IL-23水平.结果 PsM组的Dectin-1表达、CD4+T淋巴细胞计数、IL-2、IL-6、IL-12 和IL-23水平均低于非PsM组(P<0.05).结论 Dectin-1及其调节产生的炎症细胞因子、CD4+T水平下降可能是导致AIDS的患者对马尔尼菲青霉菌易感的重要原因.     

艾滋病热毒蕴结证的 miRNA 差异表达研究

目的：研究艾滋病（AIDS）热毒蕴结证患者与健康对照组间 miRNA 表达差异。方法运用 Agilent miRNA 芯片对AIDS 期热毒蕴结证患者与健康对照组血液标本进行 miRNA 检测,采用 SAS 等系统对组间差异 miRNA 进行筛选,并对相应的miRNA 进行靶基因预测和靶基因功能显著性分析。结果热毒蕴结证组与健康对照组比较,共筛选出表达有显著性差异且倍数差异（FC）大于2的 miRNA 100条,其中64条上调,36条下调。差异表达 miRNAs 功能涉及 T 细胞活化中的 IL-21受体的作用、C 反应蛋白、免疫效应的过程中的正调控等。结论 AIDS 热毒蕴结证患者与健康对照组间存在差异 miRNA 表达,其证候生物学基础可能与 T 细胞活化中的 IL-21受体的作用等相关。     

类风湿关节炎患者CD8+IL-17+T细胞升高及其机制

目的 探讨CD8+IL-17+T细胞在类风湿关节炎(RA)的改变及可能的机制.方法 随机采集39例RA患者和40名健康人的外周血.以流式细胞术测定全部RA患者和27名健康人的外周血CD8+IL-17+T细胞的比例;以ELISA方法测定全部RA患者和健康人的血清白细胞介素(IL)6、IL-23和IL-17水平,并分析这些指标可能的相瓦关系.结果 RA患者CD8+IL-17+T细胞在CD8+T细胞的比例中位数为2.7%,95%可信区间为1.55%-3.74%;而正常人中位数为1.61%,95%可信区间为1.25%-2.61%.RA患者外周血CD8+IL-17+T细胞升高(P<0.05).对CD8+IL-17+T细胞功能相关的IL-17水平测定结果为,RA患者为(429±502)ng/L,而正常人仅为(13±30)ns/L(P<0.01).RA患者血清IL-17水平明显升高.对于CD8+IL-17+T细胞分化相关细胞因子的血清测定结果,IL-23水平在RA患者为(157.83±27.07)ns/L,正常人为(21.97±3.52)ns/L(P<0.01);IL-6水平在RA患者为(32.67±34.50)ns/L,正常人为(1.82±1.51)ns/L(P<0.01);RA患者血清IL-6、IL-23水平明显升高.结论 RA患者CD8+IL-17+T细胞数量增多,作用增强,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因.