雷诺昔酚对去势雌性大鼠骨密度的影响

目的 研究雌激素受体调节荆(SERM)雷诺昔酚(RAL)对去势雌性大鼠血生化及骨密度(BMD)的影响.方法 3月龄雌性SD大鼠24只.随机分为3组,假手术组(SHEM)、去势组(OVX)、雷诺昔酚组(RAL+OVX).RAL+OVX组术后7 d给予雷诺昔酚,术后3个月处死各组大鼠,对各组大鼠生化指标、BMD进行检测.结果术后3个月OVX组与SHAM组比较L3-5腰椎骨密度明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),经过3个月的治疗,OVX+RAL组与OVX组动物相比,骨密度明显增加(P<0.01).OVX组与sHAM组相比,骨形成参数血骨钙素(BGP)值增加,差异有统计学意义(P<0.05);骨吸收参数24 h尿羟脯氨酸(HOP)及24 h尿Ca定量均明显升高,差异有统计学意义(均为P<0.01);OVX+RAL组与OVX组相比骨形成参数血BGP值降低,差异有统计学意义(P<0.01);骨吸收参数24 h尿HOP及24 h尿Ca定量均降低,差异有统计学意义(均为P<0.05).但未达到SHEM组水平.结论 去势后3个月大鼠骨密度明显下降,经RAL治疗后的去势大鼠骨密度得到较好的维持.     

乙醇摄入对乙醛脱氢酶2不同基因型小鼠急性心肌梗死及DNA氧化损伤的影响

目的探讨大剂量乙醇摄入对乙醛脱氢酶2(ALDH2)不同基因型小鼠急性心肌梗死及DNA氧化损伤的影响。方法将23只ALDH2基因敲除型(KO)和19只野生型(WT)小鼠随机分为4组:KO组11只,KO+乙醇(E)组12只,WT组9只,WT+E组10只,其中KO+E组及WT+E组经口灌胃大剂量乙醇[2g/(kg·d),连续8d],而KO组及WT组每日经口予以等量0.9%氯化钠溶液连续8d。所有小鼠均制备急性心肌梗死模型,建模4周后经超声诊断仪检测心功能,采用伊文蓝颜料测定心肌梗死面积,E LISA法测定心肌8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。结果(1)急性心肌梗死造模后4周,KO组、KO+E组、WT组、WT+E组小鼠存活数量分别为7、8、7、7只,病死率分别为18.2%、33.3%、22.2%、30.0%,4组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)WT组小鼠左室短轴缩短率、射血分数均高于KO组小鼠,4组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。(3)心肌梗死面积由大至小依次为:KO+E组>KO组>WT+E组>WT组,4组间差异均有统计学意义(均.P<0.05)。(4)心肌8-OHdG水平由高至低依次为:KO+E组>KO组>WT+E组>WT组,4组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论增强ALDH2表达可有效地拮抗大剂量乙醇摄入对急性心肌梗死的损害作用,其发挥保护作用的机制可能与减轻心肌细胞DNA氧化损伤有关。     

二氢辣椒碱诱导治疗性低体温对小鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用

目的探讨二氢辣椒碱(DHC)诱导治疗性低体温对小鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用及其机制。方法将20只成年野生型(WT)小鼠随机分为WT组和WT+DHC组,每组10只;20只瞬时感受器电位香草酸受体1基因敲除(TRPV1 KO)小鼠随机分为TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组,每组10只。所有小鼠建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型。WT组和TRPV1 KO组小鼠再灌注开始后皮下泵注生理盐水1.25 mg·kg~(-1)·h~(-1),WT+DHC组和TRPV1 KO+DHC组小鼠再灌注开始后皮下泵注DHC 1.25 mg·kg~(-1)·h~(-1)。所有小鼠再灌注90 min后全部移入22℃的鼠笼中,每隔5 min记录小鼠再灌注期的中心体温变化至再灌注后24 h。在麻醉开始前和再灌注后24 h对小鼠进行神经行为测试评分,测试结束后取小鼠脑组织切片行氯化三苯基四氮唑染色,计算小鼠的脑组织梗死率。结果4组小鼠再灌注0、30、60 min时中心体温比较差异均无统计学意义(P>0.05)。WT组、TRPV1 KO组和TRPV1KO+DHC组小鼠再灌注90 min时的中心体温与0、30、60 min时比较差异均无统计学意义(P>0.05),2、3、4、6、12、24 h时的中心体温与0、30、60、90 min时比较均显著降低(P<0.05);WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠2、3、4、6、12、24 h时的中心体温在3组同时间点之间两两比较及组内不同时间点之间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。WT+DHC组小鼠再灌注后90 min及2、3、4、6、12、24 h时的中心体温与0、30、60 min时比较均显著降低(P<0.05),且均显著低于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组同时间点(P<0.05)。麻醉前4组小鼠神经行为学测试总分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。再灌注后24 h 4组小鼠神经行为学测试总分均低于麻醉前(P<0.05),但WT+DHC组小鼠的行为学测试总分明显高于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组(P<0.05),而WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠的行为学测试总分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。再灌注后24 h,4组小鼠的自发性活动、攀爬实验、本体觉实验和对触摸触须的反应等4项神经行为学测试评分比较差异均无统计学意义(P>0.05);WT+DHC组小鼠的四肢运动对称性试验和前爪伸展试验评分显著高于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠(P<0.05);WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠的四肢运动对称性试验和前爪伸展试验评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。再灌注后24 h,WT+DHC组小鼠的脑组织梗死率显著低于其他3组(P<0.05);而WT组、TRPV1 KO组、TRPV1 KO+DHC组小鼠脑组织梗死率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠局灶性脑缺血再灌注后皮下泵注DHC可通过激活TRPV1受体诱导治疗性低体温,并减少脑组织损伤,改善脑神经功能。     

不同强度脉冲电磁场对去势大鼠血清雌二醇的影响

目的探讨不同强度的脉冲电磁场对于去势大鼠股骨骨密度及血清雌二醇的影响。方法采用随机数字表法将雌性3月龄SD大鼠分为:假手术组(SHAM)、去势大鼠模型对照组(OP模型)、以及不同频率脉冲电磁场治疗、、组(OVX、、)。去势造模后,OVX、和组大鼠每天在频率为8 Hz,磁通密度分别为0.77mT、3.82 mT和9.87 mT的磁场环境中照射40 min,共30 d。SHAM组和OP模型组不干预。30 d后股动脉放血处死大鼠,取左侧股骨作骨密度测定,取血清标本作血清雌二醇测定。结果与OP模型组相比,OVX、及组大鼠的股骨骨密度增加(P<0.05或P<0.01),但3组间及与SHAM组之间的差异无统计学意义;SHAM组大鼠的血清雌二醇水平均高于其它4组大鼠的血清雌二醇水平(P<0.05或P<0.01),但OP模型组、OVX、及组大鼠的血清雌二醇水平之间的差异无统计学意义。结论低频脉冲电磁场(PEMFs)能减少大鼠在卵巢切除后的骨量丢失、阻止骨密度下降。在磁场频率一致和干预时间相同的前提下,3种不同磁场强度(0.77 mT~9.87 mT)的PEMFs均有防止去势大鼠股骨骨密度降低的作用。同时,PEMFs并不能提高去势大鼠的血清雌二醇的水平,说明PEMFs对于骨质疏松的治疗作用不是由于提高了血清雌二醇的水平。     

葛根素预防雌激素缺乏性骨质疏松的机制探讨

目的观察葛根素对去卵巢大鼠股骨骨密度、颌骨骨密度和血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)及雌二醇(E2)水平的影响。方法 3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(sham group)、单纯去势组(OVX group)、去势+雌二醇治疗组(OVX-estrogen group)和去势+葛根素治疗组(OVX-puerarin group)。给药3个月后测量各组大鼠股骨和颌骨骨密度,血清中TNF-α和CRP及雌二醇(E2)水平。结果 OVX-puerarin组较sham组体重明显增加(P<0.01);较OVX-estrogen组的TNF-α(P<0.01)、CRP(P<0.05)及E2(P<0.01)水平显著下降;其下颌骨和股骨远端骨密度与OVX组、sham组之间无显著性差异,但其股骨近端骨密度较OVX-estrogen组明显增加(P<0.05)。结论葛根素作为抗炎因子,能够显著降低TNF-α和CRP的水平,但并不会提高雌激素的水平;葛根素对卵巢切除所致的骨质疏松症有一定的治疗作用,但会明显提高机体体重。     

雷洛昔芬对去势大鼠骨密度IL-6的影响

目的观察雷洛昔芬对去势大鼠骨密度、血清IL-6的影响,探讨雷洛昔芬抗骨质疏松的作用机制。方法48只3月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组(SHAM),单纯去势组(OVX),去势 雌激素组(OVX E2),去势 雷洛昔芬组(OVX R),每组12只。3个月后处死,取大鼠股骨测定各组骨密度。采集血清,用放射免疫分析法检测并比较各组IL-6的表达,用单因素方差分析进行统计学分析。结果雷洛昔芬组大鼠骨密度显著高于去卵巢组(P<0.05),血清IL-6浓度值显著降低(P<0.01)。结论雷洛昔芬治疗骨质疏松的作用与血清IL-6水平降低相关。     

雌激素缺乏对牙周炎大鼠牙槽骨骨保护素表达的影响

目的 研究雌激素缺乏对牙周炎大鼠牙槽骨中骨保护素(OPG)表达的影响,探讨雌激素调节牙槽骨改建的机制.方法 采用切除双侧卵巢及牙周结扎的方法建立雌激素缺乏的大鼠牙周炎动物模型,观察大鼠牙周组织病理改变,应用免疫组织化学技术观察OPG在牙槽骨的表达,比较卵巢切除(OVX,n=18)、假手术(Sham,n=17)及雌二醇治疗(OVX+E2,n=18)3组大鼠牙槽骨OPG表达吸光度(A)值的差异.结果 各组大鼠组织学观察均显示牙槽骨骨小梁稀疏,牙槽骨表面可见破骨细胞及骨吸收陷窝,OVX组更为显著.Sham组、OVX组及OVX+E2组的牙槽骨OPG阳性表达A值分别为38 799±6228、27 854±5246和37 146±6394,OVX组吸光度低于Sham组和OVX+E2组(均P＜0.05),而Sham组和OVX+E2组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 雌激素缺乏降低牙槽骨中骨保护素的表达,促进实验性牙周炎大鼠牙槽骨的吸收.     

雌激素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响

目的:探讨雌激素对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响。方法:选取雌性大鼠36只,随机分为假手术组、卵巢切除(OVX)组、OVX+苯甲酸雌二醇(EB)组,每组12只。首先采用海马注射Aβ1-42建立AD模型,然后通过Morris水迷宫观察大鼠的学习记忆能力,同时通过ELISA检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乙酰胆碱酯酶(Ch AT)的活性。结果:与OVX组比较,OVX+EB组逃避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05),原平台象限活动时间明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),穿越原平台次数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。且提高大鼠脑组织SOD、Ch AT活性,降低MDA活性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:雌激素可改善AD大鼠的学习记忆能力。     

雌激素对SD大鼠舌下神经核电生理的影响

目的:研究雌激素对SD大鼠舌下神经核电生理的影响。探讨雌激素保护上气道稳定性的机制,为OSAHS的临床预防和治疗提供理论依据。方法:选取成年7周龄雌性Sprague-Dawley大鼠30只,随机等量分为假手术组(SHAM组),去卵巢组(OVX组),去卵巢+雌二醇组(OVX+E2组)。通过卵巢切除与雌激素回补建立不同雌激素水平的SD大鼠模型,通过在体细胞外记录技术检测雌激素对舌下神经核自发电活动的影响。结果:OVX组与SHAM组和OVX+E2组相比,舌下神经核的自发放电频率低(小)于其他两组,且具有统计学差异(P<0.05)。结论:雌激素可以通过某种途径来改变舌下神经核的兴奋性,进而改变颏舌肌及其他舌内外肌的紧张性来影响上气道的稳定。     

染料木素与17β雌二醇对去势大鼠生殖系统的影响

目的: 观察染料木素(GST)和17β雌二醇(E2)对生殖系统的不同影响. 方法: 选用成年雌性SD大鼠40只,随机分为假去势组(Sham)、去势组(OVX)、E2组(E2,400 μg/kg·d)、GST高剂量组[GST-h, 50 mg/(kg·d)]及GST低剂量组[GST-L, 25 mg/(kg·d)]. 用药6 wk后用放射免疫法测定各实验组大鼠血清雌二醇水平,巴氏染色观察阴道上皮角化细胞百分率,并测定大鼠体质量及子宫指数. 结果: E2替代能显著增加血清雌二醇水平、子宫指数及阴道上皮细胞百分率(P值均＜0.01 vs OVX﹚;GST低剂量替代能增加子宫指数及阴道上皮细胞百分率(P值均＜0.01 vs OVX﹚;GST高剂量组对子宫指数及阴道上皮细胞百分率与去势组比较无差异(P>0.05);GST高及低剂量两组对血清雌二醇值无影响. 结论: 低剂量GST表现出对生殖系统的弱雌激素样作用,但这种作用远低于雌激素的影响;高剂量则对生殖系统起抑制作用.     

吗啡预处理的晚期心肌保护作用及其与诱导型一氧化氮合酶的关系

目的　探讨吗啡预处理的晚期心肌保护作用以及诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在此过程中的作用。方法　建立在体小鼠冠状动脉阻断的心肌缺血再灌注模型。吗啡预处理 2 4h后 ,小鼠心肌缺血 4 5min ,再灌注 12 0min。用氯化三苯四唑 ( 2 ,3,5 triphenyltetrazoliumchloride ,TTC)染色确定梗死心肌范围。心肌梗死范围以梗死心肌 (IS)占缺血区心肌 (AAR)的重量百分比表示。并观察选择性iNOS抑制剂 (S methylthioureasulfate ,SMT)和iNOS基因敲除对吗啡预处理心肌保护作用的影响。结果　缺血再灌注后野生对照组IS/AAR为 4 3%± 5 % ,2 4h前给予吗啡可以使IS/AAR显著降低至 2 2 %± 4 % (P <0 0 5 )。吗啡预处理后再给予SMT可以取消吗啡的心肌保护作用。吗啡预处理对iNOS基因敲除小鼠完全没有心肌保护作用。结论　吗啡预处理具有晚期心肌保护作用。iNOS介导了吗啡预处理的晚期心肌保护作用     

胆总管结扎所致肝损伤中Nrf2对细胞信号传导和基因表达的影响

目的 研究核因子相关因子 2（Nrf2）在胆汁淤积中的作用。方法 野生鼠（WT）和Nrf2基因敲除小鼠(KO)给予胆总管结扎手术,应用蛋白杂交技术观察丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号传导途径的变化;应用RNA酶保护测定（RPA）技术测定基因变化。结果 在BDL组血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）显著升高;纤维粘连蛋白的表达在KO鼠明显增多;p-JNK、p-stat3、p-AKT、p-p38在WT鼠的BDL组的活化强度较大。Nrf2的靶基因NQO1,谷胱甘肽S 转移酶(GST)的同工酶（GST-Ya,GST-pa）在WT鼠的BDL组明显上调,而在KO鼠中则被抑制。TGF-β1、TIMP-1、胶原蛋白1在KO鼠的BDL组上调幅度较大。结论 在胆总管结扎后胆汁淤积所致肝损伤中,Nrf2对MAPK信号传导和炎症、纤维化过程均有影响,部分通过上调抗氧化基因的表达起到细胞保护作用。     

NRP1基因敲除对放射性肺纤维化进程的影响及其作用机制

目的：观察神经菌毛蛋白1（NRP1）基因对放射性肺纤维化（RIPF）进程的影响,并探讨其在Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路和转化生长因子β1（TGF-β1）/Smads通路介导的上皮间质转化（EMT）发生发展过程和细胞外基质（ECM）沉积中的作用。方法：利用Cre-LoxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）特异性敲除NRP1基因的转基因C57BL/6J小鼠并进行鼠尾鉴定,将160只小鼠按照射后不同时间点随机分为4周组、8周组、16周组和24周组,每组小鼠按随机数字表法分为野生型（Con）组、野生型单纯照射（IR）组、NRP1基因特异性敲除（KO-Con）组和NRP1基因特异性敲除+照射（KO+IR）组,每亚组10只。KO-Con和KO+IR组小鼠腹腔注射他莫昔芬特异性敲除AT-Ⅱ细胞NRP1基因,IR组和KO+IR组小鼠采用20 Gy全胸照射建立RIPF小鼠模型。模型构建完成后,利用HE染色法和Masson染色法验证模型是否构建成功;利用免疫组织化学（IHC）法检测小鼠肺组织中Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达水平;Western blotting法检测小鼠肺组织中NRP1、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测小鼠肺组织中NRP1、Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1、Smad2、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）mRNA表达水平。结果：HE染色和Masson染色显示RIPF小鼠模型构建成功,IR组小鼠肺部主要为放射性肺炎病理形态表现。与Con组比较,随时间的延长,IR组小鼠肺组织中NRP1蛋白和mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05）,24周时达到最高（P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长IR组和KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白及mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05或P<0.01）;与IR组比较,随时间的延长,KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）,但仍高于Con组（P<0.05或P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长,IR组和KO+IR组小鼠肺组织中上皮细胞标志物E-Cadherin mRNA表达水平逐渐降低（P<0.05）,间质细胞标志物N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,但KO+IR组小鼠肺组织中E-CadherinmRNA表达水平明显高于IR组（P<0.05或P<0.01）,N-Cadherin和Vimentin mRNA表达水平均明显低于IR组（P<0.05或P<0.01）。结论：NRP1基因敲除可抑制RIPF的发生发展,其机制可能与调节小鼠肺组织中Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smads信号通路的表达进而抑制EMT进程有关。     

Unc13基因胰岛β细胞条件性敲除小鼠模型的构建和鉴定

目的 构建Cre重组酶系统调控的Unc13基因胰岛β细胞条件性敲除小鼠,为Unc13基因在胰岛素分泌中扮演的角色和作用机制的体内实验研究提供更特异的动物模型。方法 运用CRISPR/Cas9技术构建Unc13^flox/flox转基因小鼠,将其与胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶（Ins2-cre）工具鼠进行杂交,采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）和测序等方法对其子代小鼠的基因型进行鉴定,并对该基因敲除（knock out,KO）小鼠及其同窝野生（wild type,WT）小鼠的体质量、糖耐量、胰岛素分泌水平进行测定。结果 成功构建胰岛β细胞特异性Unc13基因条件性敲除小鼠（以下简称为Unc13 KO鼠）。进一步研究显示Unc13 KO鼠与WT鼠相比,体质量无明显变化,但糖耐量受损,胰岛素第一时相分泌下降。结论 成功构建了Unc13基因胰岛β细胞条件敲除小鼠动物模型,为探讨Unc13基因在糖尿病发生、发展中的作用提供研究平台。     

柴胡桂枝汤挥发油对Fmr1基因敲除小鼠脑组织超氧化物歧化酶和丙二醛及一氧化氮的影响

目的利用超临界二氧化碳（CO2）萃取法获取柴胡桂枝汤挥发油,并在Fmrl基因敲除小鼠（脆性基因敲除小鼠）模型上观察柴胡桂枝汤挥发油的抗癫痫作用,及其与超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的关系。方法将30只30日龄的Fmrl基因敲除小鼠（KO）和30只30日龄的野生型小鼠（WT）分别分成两组（KO空白组和KO用药组,WT空白组和WT用药组）,按1．7ml／kg的剂量腹腔注射柴胡桂枝汤挥发油,观察柴胡桂枝汤挥发油对小鼠旷场行为的影响,并取不同部位的小鼠脑组织制成1：10（重量体积比）的组织匀浆,测定SOD活性及MDA、NO的水平。结果与空白组比较,用药组小鼠在旷场实验中运动的平均速度、总路程、穿过各区的次数减少：脑组织中SOD活性增高,而MDA、NO水平均降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论柴胡桂枝汤挥发油对Fmr1基因敲除小鼠的探索性、兴奋性、运动性均有抑制作用;其抗癫痫作用与清除自由基、阻止过氧化物生成,减少NO的神经毒性相关。     

ether-a-go-go相关基因通道在胰岛β-细胞中的作用

目的 探究ether-a-go-go相关基因（ether-a-go-go related gene,ERG）通道在胰岛β-细胞中的作用。方法 提取野生型（wild type,WT）与ERG基因敲除型（knockout,KO）小鼠胰岛β-细胞,利用全细胞膜片钳技术记录钾离子电流与动作电位,分析敲除ERG基因后钾电流与动作电位的变化。对两组小鼠进行腹腔注射葡萄糖耐量实验,分析基因敲除后小鼠糖耐量的变化,探究ERG基因是否对体内血糖浓度有影响。结果 在两组小鼠胰岛β-细胞中记录到的钾离子电流均呈现内向整流趋势,KO组钾离子电流明显减小,动作电位时程明显延长。动物实验中,KO组小鼠糖刺激2 h后血糖浓度较WT组显著降低。结论 ERG通道电流是胰岛β-细胞中钾离子电流的重要组成部分,可显著影响动作电位时程,进而影响体内血糖浓度。     

Insl3基因缺失与睾丸扭转的关系

目的探讨Insl3基因缺失与睾丸扭转的关系。方法分别取青春前期(出生后23 d,P23)及成年小鼠(出生后90d,P90)的野生型(WT)、杂合子(Het)及Insl3基因敲除(KO)小鼠,使用显微镜观察睾丸的位置、形态及精索的形态、长度。结果 Insl3 KO小鼠睾丸扭转发生率(3.94%),明显高于Het组(1.25%)及WT组(0)(P<0.05);精索形态异常在KO组与WT组有显著差异(64.38%vs 0,P<0.001);在各年龄组,Insl3 KO小鼠比WT及Het小鼠精索长度明显增长(P<0.05),但WT和Het小鼠之间无显著差异(P>0.05)。结论 Insl3基因敲除小鼠的精索、睾丸解剖异常明显增加,睾丸扭转率增高。Insl3激素缺失与睾丸扭转的发生关系密切。     

Notch1、Notch3及Hes1在胃肠道间质瘤中的表达及临床意义

目的 探讨胃肠道间质瘤(GIST)患者肿瘤组织中Notch信号通路相关蛋白Notch1、Notch3及Hes1表达水平及临床意义.方法 采用实时定量PCR (Q-PCR)和Western blot方法检测135例新鲜GIST标本及临近非肿瘤组织中Notch1、Notch3及Hes1 mRNA和蛋白表达情况.同时采用免疫组织化学方法检测Notch1、Notch3及Hes1蛋白表达情况,并分析各蛋白表达与GIST患者临床病理因素的关系.另将野生型小鼠(WT)和Notch1基因敲除小鼠(KO) 40只,分为WT组、KO组、WT+ GIST组和KO+GIST组,检测各组Notch1、Notch3及Hes1蛋白表达情况.结果 与临近非肿瘤组织相比,GIST组织中Notch1、Notch3及Hes1 mRNA和蛋白表达均上调(P＜0.05).GIST标本的Notch1、Notch3、Hes1阳性率(5926％、65.19％、62.22％)均高于临近非肿瘤组织(17.78％、22.22％、17.78％),差异有统计学意义(P＜0.05).统计分析证实Notch1蛋白表达与GIST的NIH分级密切相关(x2=8.532,P=0.002);Notch3蛋白表达与GIST的肿瘤转移密切相关(x2=7.532,P=0.003);Hes1蛋白表达与GIST的肿瘤大小密切相关(x2=6.781,P=0.012).各组小鼠Notch1、Notch3及Hes1蛋白表达情况显示,与WT组相比,WT+ GIST组小鼠体内3种蛋白表达升高(P＜0.05);与KO组相比,KO+GIST组小鼠体内3种蛋白表达无明显变化(P＞0.05);与WT+ GIST组相比,KO+ GIST组小鼠体内3种蛋白表达降低(P＜0.05).结论 Notch信号通路相关蛋白Notch1、Notch3及Hes1在GIST患者组织中表达升高,Notch信号通路的激活可能在GIST发生、发展过程中起重要作用.     

Limk1在FMR1基因敲除小鼠脑组织的表达及意义

目的：通过免疫组化方法观察LIM-kinase 1（Limk1）在不同年龄组的FMR1基因敲除鼠（FMR1 knockout mouse,KO）和野生鼠（wild type mouse,WT）脑组织不同部位的表达差异.方法：取FVB品系新生和生后2、6周KO鼠（KO0d、KO2周和KO6周）,并分别与同龄WT鼠作对照.每组6只通过免疫组化染色,观察Limk1在不同年龄组的KO和WT小鼠脑组织各部位的表达差异.结果：Limk1在新生鼠的海马、皮层、丘脑、小脑表达丰富,以染色阳性纤维为主,染色阳性细胞少见.生后2周、6周小鼠的大脑皮质和海马仅见少量散在弱阳性细胞表达,但在丘脑未定带、腹后外侧核,小脑蒲肯野细胞和脑干前庭蜗神经核可见强阳性细胞表达.各年龄组KO与WT小鼠Limk1在脑区的分布特点基本一致.KO0d、KO2周及KO6周组小脑、蜗神经核Limk1强阳性表达脑区的平均光密度值以及KO2W及KO6W组丘脑部位的阳性细胞计数均高于同龄WT组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：Limk1在KO与WT小鼠脑组织的表达均有着明显的时空特异性,FMRP能负性调控Limk1表达.     

辣椒素受体在内皮素-1引起热痛觉过敏中的作用

目的 研究辣椒素受体对内皮素-1(ET-1)引起热痛觉过敏的影响.方法 选用辣椒素受体基因敲除小鼠(KO小鼠)及其野生型C57BL/6J小鼠(WT小鼠),分为KO组与WT组,两组分别按3、10、30、100 pmol剂量足底注射ET-1(溶于10 μl磷酸盐缓冲液,n=6).测量注药前和注药后15、30、45及60min时逃避时间(PWT).结果 ET-1引起两组动物PWT降低,在WT组降低幅度更明显,WT组PWT随着ET-1剂量的增加而降低,而KO组PWT在剂量为30 pmol时降低最为明显.结论 ET-1引起的热痛觉过敏部分通过辣椒素受体起作用.