寻常型天疱疮皮损组织中Th17细胞相关细胞因子的表达

目的 研究Th17细胞相关细胞因子IL-23和IL-17在寻常型天疱疮(PV)发病机制中的作用.方法 采用免疫荧光染色法分析PV患者皮损组织和健康人皮肤组织中Th17细胞相关因子IL-17和IL-23的表达及CD163~+巨噬细胞的分布.结果 IL-23~+细胞的染色与CD163~+巨噬细胞的染色重叠.PV患者真皮中IL-23~+ CD163~+细胞和IL-17~+细胞在每个视野(×200)中的平均数分别为80.17±5.42和48.17±8.03,而正常人真皮中分别为29.50±4.45和9.50±3.35,两组差异均有统计学意义(P<0.01).真皮层中IL-23~+细胞数和IL-17~+细胞数存在相关性(r=0.945,P<0.001).结论 CD163~+巨噬细胞是IL-23重要分泌源;IL-23和IL-17在PV患者皮损组织中高表达,IL-23/lL-17细胞因子轴在PV发病机制中可能起着非常重要的作用.     

慢性乙型肝炎组织中Th17细胞相关因子的表达

目的探讨Th17细胞相关细胞因子IL-23和IL-17在慢性乙型肝炎（cHB）发病机制中的作用。方法采用免疫荧光染色法分析比较CHB患者和健康人对照组肝组织Th17细胞相关因子IL-17和IL-23的表达。结果CHB患者肝组织中IL-17、IL-23表达水平均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-23和IL—17在CHB患者肝组织中存在高表达，提示，Th17细胞在CHB的免疫发病机制中可能起重要作用。     

Th17细胞在寻常型天疱疮发病中的作用

目的研究寻常型天疱疮（pemphigus vulgaris,PV）患者Th17细胞的数量和相关细胞因子水平。方法收集15例初次诊断未经治疗的PV患者以及配对的11例健康人,采用流式细胞术检测PV患者外周血Th17细胞在CD4＋T淋巴细胞中的百分比;用ELISA方法检测血浆中的IL-17、IL-6、IL-23和转化生长因子-β（transforming growthfactor-β,TGF-β）的水平。结果PV患者外周血中Th17细胞的百分率较正常对照明显增高;血浆中IL-17和IL-6水平升高,IL-23的水平降低,TGF-β的水平与对照组无差异。结论Th17细胞的增多以及相关细胞因子水平的改变与PV发病密切相关。     

特发性血小板减少性紫瘢患儿Th17细胞及其相关细胞因子的检测

目的探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿Th17细胞及其相关细胞因子IL-17、IL-23及IL-6的改变及其临床意义。方法32例ITP患儿为病例组,30例健康体检儿童为对照组,用流式细胞术检测2组儿童外周血Th17细胞占CD4。细胞的百分率;用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-17、IL-23及IL-6等细胞因子的浓度。结果病例组Th17细胞百分率为（3．12±0．91）％,高于对照组的（1．34±0．62）％,差异有统计学意义（P〈0．01）;病例组IL-17、IL-23、IL-6浓度高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论Th17细胞及其相关细胞因子IL-17、IL-23、IL-6等的异常增高是ITP患儿的病理生理改变之一,干预Th17细胞的分化、增殖或将成为治疗小儿ITP更为有效的方法。     

Th17细胞在免疫性血小板减少症患者中数量及功能研究

目的：研究免疫性血小板减少症（ITP）患者,rh17细胞数量、相关功能分子水平及其与临床指标的相关性。探讨Th17细胞在ITP发病机制中的作用。方法：ITP患者40例,正常对照组14名。应用流式细胞术（FCM）检测骨髓IL-23R＋CD4＋／CD4＋细胞比例;应用ELISA检测骨髓上清液IL-17、IL-23水平;RT—PCR测定骨髓单个核细胞中IL-17mRNA的相对表达水平,并与临床指标进行相关性分析。结果：ITP患者骨髓中IL-23R＋CD4＋／CD4＋细胞比例[（4．933±6．162）％]、IL-17水平[（13．434±7．189）ng／L]、IL-23水平[（56．930±58．512）ng／L]、IL-17mRNA相对表达水平（O．921±0．196）均明显高于正常对照组[（0．897±0．803）％]、[（4．134±2．879ng／E]、[（17．841±11．033）ng／L]、（0．749±0．136）（P〈0．05）;活动期ITP患者IL-23R＋CD4＋／CD4＋细胞比例[（6．699±7．008）％]、IL-17水平[（16．021±7．114）ns／L]、IL-23水平[（72．474±64．835）ng,L1、IL-17mRNA相对表达水平[0．967±0．186]均明显高于缓解期患者[（1．656±1．286）％]、[（7．972±3．326）ng/L]、[（24．114±17．654）ng／L）]、（0．801±0．163）（P〈0．05）。ITP患者上述指标与其临床指标存在相关性。结论：Th17细胞在ITP患者免疫发病机制中发挥重要作用,在ITP患者中不仅数量增加,而且功能活跃。     

Th17细胞及相关细胞因子在原发性胆汁性肝硬化患者的表达

目的观察PBC患者外周血Th17/CD4＋T细胞相关细胞因子（IL-17、IL23、IL21、IL6、TGFβ）的表达,探讨Th17/CD4＋T细胞在PBC发病中的作用.方法收集26例PBC患者（PBC组）,20例HBV患者（HBV组）和20例健康人群（HC组）的外周血,采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定3组患者血清IL-17、IL-23、IL-21、IL-6、TGFβ的水平,比较3组间的表达情况.结果 PBC患者血清IL-17、IL-23、IL-21的表达明显高于HBV患者和健康对照组（P〈0.05）;PBC组IL-6、TGFβ表达明显高于健康对照组（P〈0.05）,而与HBV组比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 Th17/CD4＋T细胞及其分泌的特异细胞因子在PBC的免疫发病发挥着重要作用.     

Th17细胞及IL-17与干燥综合征的研究进展

Th17细胞是机体中一种新型的CD4＋效应T细胞,它不同于Th1型和Th2型T细胞,具有独立的分化和发育调节机制。Th17细胞除了能分泌其特征性细胞因子白介素-17（interleukin-17,IL-17）以外,还能分泌IL-17F、IL-21和IL-22。研究发现Th17以及IL-17在干燥综合征（Sjogren’s syndrome,SS）的发病中起到重要作用,本文就其在SS中的发病机制、临床表现和未来研究前景综述如下。     

细胞因子诱导的人脐血CD4 T细胞Th17极化态的建立

目的建立一个合理的CD4T细胞极化的体外细胞培养方法,研究细胞因子刺激的人脐血CD4T细胞极化时产生IL-17的效应/记忆T细胞（Th17细胞）的表达。方法用TGF-β、抗IL-4、抗IFN-γ、IL-6、IL-1β活化幼稚脐血CD4T细胞,促成Th17细胞表型,IL-23具有维护功能。用流式细胞术分析在Th17极化态和Th0非极化态时CD4T细胞上IL-17和IFN-γ的表达,同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞培养上清液中IL-17和IFN-γ的水平。结果IL-17＋IFN-γ-（Th17）细胞比例在Th17极化态时为（28±2.3）%,非极化态时为（3.2±0.4）%;培养上清液中分泌的IL-17浓度在Th17极化态时为（7350±1530）pg/ml,非极化态时为（218±32）pg/ml,两项指标在Th17极化态时都显著高于非极化态时,差异均有高度统计学意义（P〈0.001）。结论多种细胞因子刺激的CD4T细胞极化时促进了IL-17产物的表达,体外Th17极化态的建立为研究IL-17相关的免疫性疾病提供了一个平台。     

Th17细胞和Treg细胞与不明原因复发性流产的关系

目的:探讨Th17/Treg细胞在不明原因复发性流产患者外周血、子宫蜕膜组织中的变化以及Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-6的表达情况。方法:应用流式细胞术检测20例不明原因复发性流产患者（实验组）、20例正常早期妊娠人工流产患者（对照组）外周血、子宫蜕膜组织中Th17细胞和Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比...     

寻常性银屑病患者外周血和皮损中Thl7细胞表达及相关性研究

目的探讨寻常性银屑病患者外周血和皮损中Th17细胞及相关因子IL-17、IL-22表达水平与疾病严重程度的相关性。方法抽取寻常性银屑病患者和正常人外周血,用流式细胞仪检测外周血Thl7细胞,ELISA试剂盒检测血清中IL-17、IL-22表达。取寻常性银屑病患者皮损和正常人对照者皮肤,用量子点免疫荧光双标法检测Thl7细胞表达。结果两组患者外周血中CD4及IL-17抗体阳性表达率相比差异有统计学意义(P<0.05);实验组患者外周血IL-17和IL-23表达水平明显高于对照组(P<0.05),并与PASI呈正相关(r=0.501,P<0.05);寻常性银屑病患者皮损和正常人对照者皮肤组织中Th17细胞表达比例差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Th细胞比例在寻常型银屑病患者外周血和皮损中明显增加,IL-17和IL-22的水平均升高。     

非小细胞肺癌患者化疗前后免疫功能的改变

 目的 比较非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者外周血CD3+T细胞、CD4+CD25high调节性T细胞（regulatory T cell,Treg cell）、γ-干扰素（interferon γ,IFN-γ）和白介素-12（interleukin-12,IL-12）与健康人的差异,并分析化疗前后CD4+CD25highTreg细胞、IFN-γ和IL-12的改变,探讨肺癌患者化疗前后免疫功能的改变。方法 选取NSCLC患者20例,健康志愿者20例为对照。分别抽取患者化疗前、化疗后3 d及7 d外周血3 mL,分离其外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,以流式细胞仪检测CD3+T细胞比例、CD4+CD25highTreg细胞比例（%）,并取上清液检测IFN-γ和IL-12。结果 健康组CD3+T细胞比例为（61.52 ± 13.46）%,肺癌组化疗前CD3+T细胞比例为（55.15 ± 20.11）%,化疗后3 d、7 d分别为（57.73 ± 14.08）%和（62.79 ± 7.80）%。肺癌组化疗前与化疗后3 d、7 d比较,差异无统计学意义（P>0.05）。健康组CD4+CD25highTreg细胞的比例为（2.14 ± 0.85）%;肺癌组CD4+CD25highTreg细胞的比例在化疗前为（2.76 ± 0.53）%,较健康人明显升高（P<0.05）;肺癌组CD4+CD25highTreg细胞的比例在化疗后3 d、7 d分别为（2.54 ± 0.57）%、（2.72 ± 0.29）%,较化疗前减少,而在3 d减少较7 d明显,各组比较,P<0.05。健康组 IFN-γ和IL-12分别为（34.36 ± 4.38）和（33.24 ± 4.36）pg/mL;肺癌组IFN-γ和IL-12在化疗前分别为（38.47 ± 5.04）和（34.82 ± 5.30）pg/mL,与健康组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。肺癌组IFN-γ在化疗后3 d、7 d分别为（40.42 ± 5.66）和（39.27 ± 6.07）pg/mL,较化疗前有所增加,化疗后3 d和化疗前比较,P<0.05,但化疗后7 d和化疗前比较,P>0.05。肺癌组IL-12在化疗后3 d、7 d分别为（35.51 ± 5.03）和（38.62 ± 6.44）pg/mL,较化疗前有所增加,化疗后3 d和化疗前比较,P>0.05,化疗后7 d和化疗前比较,P<0.05。结论 化疗对肺癌患者机体的免疫环境可能具有优化作用,从而增强机体的抗肿瘤免疫应答。     

白癜风患者外周血中IL-17和IL-23检测的临床意义

目的观察白癜风患者外周血IL-17和IL-23的变化,探讨Th17细胞在白癜风发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验方法检测44例白癜风患者及40例健康对照外周血IL-17和IL-23的含量。结果白癜风患者外周血IL-17和IL-23的水平与健康对照相比均显著升高(P0.05)。白癜风患者IL-17含量与病程呈负相关(r=-0.45,P0.05),与皮损面积呈正相关(r=0.36,P0.05)。结论 Th17细胞在白癜风发病过程中可能发挥一定的作用。     

类风湿关节炎患者CD8+IL-17+T细胞升高及其机制

目的 探讨CD8+IL-17+T细胞在类风湿关节炎(RA)的改变及可能的机制.方法 随机采集39例RA患者和40名健康人的外周血.以流式细胞术测定全部RA患者和27名健康人的外周血CD8+IL-17+T细胞的比例;以ELISA方法测定全部RA患者和健康人的血清白细胞介素(IL)6、IL-23和IL-17水平,并分析这些指标可能的相瓦关系.结果 RA患者CD8+IL-17+T细胞在CD8+T细胞的比例中位数为2.7%,95%可信区间为1.55%-3.74%;而正常人中位数为1.61%,95%可信区间为1.25%-2.61%.RA患者外周血CD8+IL-17+T细胞升高(P<0.05).对CD8+IL-17+T细胞功能相关的IL-17水平测定结果为,RA患者为(429±502)ng/L,而正常人仅为(13±30)ns/L(P<0.01).RA患者血清IL-17水平明显升高.对于CD8+IL-17+T细胞分化相关细胞因子的血清测定结果,IL-23水平在RA患者为(157.83±27.07)ns/L,正常人为(21.97±3.52)ns/L(P<0.01);IL-6水平在RA患者为(32.67±34.50)ns/L,正常人为(1.82±1.51)ns/L(P<0.01);RA患者血清IL-6、IL-23水平明显升高.结论 RA患者CD8+IL-17+T细胞数量增多,作用增强,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因.     

Cellular sources of interleukin 16 in benign and malignant pleural effusions

Background  Interleukin 16 (IL-16) can be detected by ELISA in pleural effusion (PE) and its concentration is higher than in serum. This study investigated the cellular sources of IL-16 in PE.

Methods  The samples of PE were collected from 34 patients who were newly diagnosed having PE in the pleural cavity. We performed cell culture to purify the pleural mesothelial cells (PMC), Wright staining to count the purity and immunocytochemical stain to identify the cultured cells. The intracellular IL-16 expression was detected by flow cytometry (FCM). The different cells in PE were first separated by magnetic cell sorting (MCAS) then the separated cells were cultured in RPMI1640 with 10% fetal calf serum (FCS). We extracted the supernatant and detected IL-16 concentration by ELISA. The IL-16 protein was detected by immunohistochemistry and double immunofluorescence staining.

Results  The percentages of cells which secreted IL-16 were: CD3⁺CD8^－ cells ((74.27±15.56)%, n=34); CD3⁺CD8⁺ cells ((69.86±18.55)%, n=34); CD19⁺ cells ((45.30±18.77)%, n=15); CD14⁺ cells ((16.91±16.69)%, n=15); and PMC ((2.05±1.85)%, n=7). The concentrations of IL-16 in the supernatant from cultured cells were: CD4⁺ cells ((102.50±42.51) ng/L, n=5); CD8⁺ cells ((92.58±18.34) ng/L, n=5); CD19⁺ cells ((79.85±5.62) ng/L, n=5); CD14⁺ cells ((58.51±25.38) ng/L, n=5); and PMC ((18.14±8.37) ng/L, n=5). In lymphocytes, monocytes/macrophages and PMC, we could observe the cells that expressed IL-16 protein. In paraffin-embedded sections, we also could observe by immunohistochemistry the CD4⁺IL-16⁺ cells, CD8⁺IL-16⁺ cells, CD19⁺IL-16⁺ cells, and CD14⁺IL-16⁺ cells.

Conclusions  IL-16 in PE is mainly secreted by T lymphocytes, including CD3⁺CD8^－ cells and CD3⁺CD8⁺ cells. CD19⁺ cells and CD14⁺ cells can also secrete IL-16, but the percentage of PMC that can secrete IL-16 is very low.

     

寻常性银屑病患者外周血Th1和Th17细胞亚群的研究

目的检测寻常性银屑病患者外周血中Th极化细胞Th1和Th17细胞数量和比例的变化,探讨其在银屑病发病机制中的作用。方法选择30例寻常性银屑病患者,采用流式细胞术(FCM)检测寻常性银屑病患者外周血中CD4+T细胞上IFN-γ+IL-17-(Th1)、IL-17+IFN-γ-(Th17)的表达,并与健康对照组比较,分析寻常性银屑病严重指数PASI和Th极化细胞表达量、Th1/Th17比值之间的关系。结果寻常性银屑病患者PBMC中IFN-γ+Th1细胞的数量、IL-17+Th17细胞的数量均高于健康对照组(P<0.01);Th1/Th17比值低于健康对照组(P<0.01),Th17细胞的数量与PASI呈正相关(P<0.01,r=0.726),Th1/Th17细胞比值与PASI指数呈负相关(P<0.01,r=0.573)。结论寻常性银屑病患者外周血存在Th1/Th17细胞失衡现象,Th1/Th17比值变化可能参与银屑病患者的免疫学发病机制。     

共刺激分子在Behcet病患者结节红斑组织中的表达

目的探讨Behcet病患者结节红斑中B7:CD28/CTLA-4的表达及意义。方法采用免疫组化方法对5例Behcet病活动期患者腿或臂部结节红斑中CD4、CD8、CD19、CD68、HLA-DR、B7-1、B7-2、CD28和CTLA-4分子表达的情况进行了检测,并用双重染色方法探讨了细胞来源。结果Behcet病结节红斑中表皮约90%的细胞表达B7-1和B7-2,但无CD28和CTLA-4表达。真皮和皮下表达CD4、CD8、CD19、CD68、HLA-DR、CD1a、CD28、CTLA-4、B7-1和B7-2的细胞均显著增多。双染结果显示,100%CD4+T细胞表达CD28分子,47.9%的CD4+T细胞表达CTLA-4分子。100%CD68+细胞表达B7-1和B7-2分子。分别有74.5%和60.8%的HLA-DR+细胞表达B7-1和B7-2分子。结论CD28和CTLA-4分子主要表达于CD4+T细胞,B7-1和B7-2分子主要表达于单核巨噬细胞、抗原提呈细胞和角朊细胞。B7:CD28/CTLA-4通路可诱导巨噬细胞和T淋巴细胞的功能和活性,对Behcet病患者结节红斑的发生、炎症的持续和扩大起重要作用。     

特应性皮炎患者外周血白介素-17和白介素-23水平的检测

目的探讨特应性皮炎(AD)患者外周血中白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)的含量及其在AD发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测40例AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量,并与AD疾病严重程度作相关性分析。AD疾病严重程度用SCORAD评分标准判断。同时以30例性别、年龄匹配的健康人作为对照组。结果AD组外周血中IL-17的含量为(36.23±8.66)pg/L,明显高于健康对照组(17.11±2.25)pg/L(t=13.38,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.412,P0.05)。AD组外周血中IL-23的含量为(52.78±8.56)pg/L,高于健康对照组(24.86±3.12)pg/L(t=19.02,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.493,P0.05)。结论AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量增高且与病情的正相关性,提示过量表达的Th17细胞调控因子IL-23可能激发Th17细胞处于功能活跃状态,Th17细胞分泌过量的效应因子IL-17促进AD发病发挥一定作用。