慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌组织泛素系统基因及蛋白表达的变化

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌组织内蛋白降解的信号分子泛素-蛋白酶体系统基因和蛋白表达的变化及意义。方法采用单纯熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。Western印迹法测定大鼠伸趾长肌内蛋白酶体C2亚基蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测伸趾长肌内泛素和E2-14kmRNA表达变化。结果RT-PCR分析结果显示,伸趾长肌组织中泛素、E2-14k mRNA表达(积分光密度值)较对照组显著增加(P值均<0.05)。Western印迹法分析结果显示,伸趾长肌组织中蛋白酶体C2亚基蛋白的表达较对照组显著增强(P<0.05)。结论COPD大鼠骨骼肌泛素系统基因表达和蛋白表达显著增强,提示骨骼肌内泛素-蛋白酶体途径活性上调,是蛋白降解增强的原因之一。     

COPD大鼠膈肌组织泛素-蛋白酶体途径的研究

目的研究COPD大鼠膈肌组织内蛋白降解途径之一的泛素-蛋白酶体系统组成成分的变化及意义。方法采用单纯熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。蛋白免疫印记（Westernblot）方法测定大鼠膈肌内E2-14k、蛋白酶体C8亚基的蛋白表达;逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测膈肌内泛素和蛋白酶体C2亚基的mRNA表达。结果Westernblot分析结果显示,COPD大鼠膈肌组织中E2-14k的蛋白表达较正常对照组显著增强（0.81±0.28比0.50±0.25,P〈0.05）,蛋白酶体C8亚基的蛋白表达变化不明显（P〉0.05）;RT-PCR分析结果显示,膈肌组织中泛素的mRNA表达（IOD值）较对照组显著增加（0.89±0.20比0.50±0.15,P〈0.05）,蛋白酶体C2亚基的mRNA表达与正常对照组比较无明显差异（P〉0.05）。结论COPD大鼠膈肌组织内泛素-蛋白酶体降解途径被激活,可能是引起蛋白降解的重要因素之一。     

肿瘤坏死因子α对COPD大鼠骨骼肌蛋白酶体C2亚基表达的影响

目的 研究COPD大鼠骨骼肌蛋白酶体C2亚基的表达,以及TNF-α对其表达的影响,探讨COPD大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢的机制.方法 SD大鼠随机分为对照组、COPD组及COPD+TNF-α组,每组15只.COPD组和COPD+TNF-α组大鼠用单纯熏香烟法制成COPD大鼠动物模型,分离其伸趾长肌,分别给予不含和含TNF-α(10μg/L)的孵育液进行离体有氧孵育.利用实时定量PCR和Western blot技术检测C2亚基在转录和蛋白水平的变化.结果 COPD组和COPD+TNF-α组C2亚基mRNA表达为对照组的1.74倍和1.95倍(P均<0.01),其中COPD+TNF-α组显著高于COPD组(P<0.01).COPD组和COPD+TNF-α组C2亚基蛋白表达也显著高于对照组(1.04±0.15和1.23±0.16比0.71±0.12,P<0.05和P<0.01),COPD组和COPD+TNF-α组表达无显著差异(P>0.05).结论 COPD时骨骼肌蛋白降解增加可能是经由TNF-α激活泛素一蛋白酶体途径所致.     

肿瘤坏死因子-α在慢阻肺大鼠骨骼肌蛋白分解代谢中的作用及其机制

目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢中的作用及其机制。方法45只SD大鼠随机分为空白对照组、COPD组和COPD TNF-α组,每组15只。COPD组和COPD TNF-α组大鼠用单纯熏香烟法制成COPD大鼠动物模型,分离其伸趾长肌,分别给予含或不含有TNF-α(10μg/L)的孵育液进行离体有氧孵育。实时定量PCR和Western blot检测泛素在mRNA和蛋白水平的变化。结果COPD组和COPD TNF-α组泛素mRNA和蛋白的表达均高于空白对照组(P<0.05或P<0.01)。结论COPD时骨骼肌蛋白降解增加可能是TNF-α激活泛素-蛋白酶体途径所致。     

肿瘤坏死因子-α在慢阻肺大鼠骨骼肌蛋白分解代谢中的作用及其机制

目的 研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢中的作用及其机制.方法 45只SD大鼠随机分为空白对照组、COPD组和COPD+TNF-α组,每组15只.COPD组和COPD+TNF-α组大鼠用单纯熏香烟法制成COPD大鼠动物模型,分离其伸趾长肌,分别给予含或不含有TNF-α(10μg/L)的孵育液进行离体有氧孵育.实时定量PCR和Western blot检测泛素在mRNA和蛋白水平的变化.结果 COPD组和COPD+TNF-α组泛素mRNA和蛋白的表达均高于空白对照组(P<0.05或P<0.01).结论 COPD时骨骼肌蛋白降解增加可能是TNF-α激活泛素-蛋白酶体途径所致.     

脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解增强与泛素转寻表达关系的研究

目的：测定脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解率的变化，探讨骨骼肌帽白降解的分子机制。方法：腹腔注射内毒素建立大鼠脓毒症模型，动物随机分成4组，分别为腹腔注射内毒素后2h、6h、12和24h组，每组各设正常对照。借助骨骼肌充分氧供离体孵育系统，氨基酸自动分析仪测定不同时相点孵育液中伸指长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率；应用northern blot方法测定伸指长肌组织泛素mRNA的表达变化，分析骨骼肌帽白降解与泛素mRNA表达的关系。结果：脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白降解率在2h和6h轻度增加，肌纤维蛋白降解率则在2h和6h增加1．5－2．2倍，在12h增加40％。伸指长肌组织泛素mRNA－2．4kb的水平主要在2h和6h增加明显，增幅达2－5倍，泛素mRNA-1.2kb未见明显变化；肌纤维蛋白降解与泛素mRNA-2.4kb表达间呈显著正相关（γ=0.9731,P=0.003)。结论：脓毒症时骨骼肌蛋白降角增加可能同泛素－蛋白酶体蛋白降解途径活性增强相关。     

脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解增强与泛素转录表达关系的研究

目的 :测定脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解率的变化 ,探讨骨骼肌蛋白降解的分子机制。方法 :腹腔注射内毒素建立大鼠脓毒症模型 ,动物随机分成 4组 ,分别为腹腔注射内毒素后 2h、6h、12和 2 4h组 ,每组各设正常对照。借助骨骼肌充分氧供离体孵育系统 ,氨基酸自动分析仪测定不同时相点孵育液中伸指长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率 ;应用northernblot方法测定伸指长肌组织泛素mRNA的表达变化 ,分析骨骼肌蛋白降解与泛素mRNA表达的关系。结果 :脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白降解率在 2h和 6h轻度增加 ,肌纤维蛋白降解率则在 2h和 6h增加 1 5～ 2 2倍 ,在 12h增加 40 %。伸指长肌组织泛素mRNA 2 4kb的水平主要在 2h和 6h增加明显 ,增幅达 2～ 5倍 ,泛素mRNA 1 2kb未见明显变化 ;肌纤维蛋白降解与泛素mRNA 2 4kb表达间呈显著正相关 (r =0 9731,P =0 0 0 3)。结论 :脓毒症时骨骼肌蛋白降解增加可能同泛素 蛋白酶体蛋白降解途径活性增强相关。     

ω3脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌蛋白酶体活性的作用机制

目的 探讨ω3脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌蛋白酶体活性的作用机制.方法 30只SD大鼠随机分为5组:空白组、模型组、假手术组、常规TPN组和ω3脂肪酸组.模型组采用盲肠结扎穿刺术复制脓毒症模型,假手术组仅翻动盲肠,不做结扎处理.实验期间大鼠禁食不禁水,ω3脂肪酸组给予加用ω3脂肪酸的肠外制剂,TPN组未加用ω3脂肪酸外,其余成分相同.其余3组仅给予生理盐水肠外注射.在模型复制前5 d即开始连续给予相应治疗.分别于造模第16和24小时检测20S蛋白酶体活性及不同亚基C2和C8亚基的活性.结果 16小时点各组伸趾长肌的20S蛋白酶体活性:空白组与假手术组间差异无显著性(P>0.05).与空白组相比,模型组的20S蛋白酶体活性明显增加(P<0.05).与模型组比较,TPN组活性下降,但差异无显著性(P>0.05);而ω3脂肪酸组的20S蛋白酶体活性显著下降(P<0.05).24小时点的20S蛋白酶体活性比较:模型组、TPN组和ω3脂肪酸组的20S蛋白酶体活性均比空白组明显增加(P<0.05),3组间比较差异无显著性(P>0.05).16小时点各组伸趾长肌的C2亚基mRNA表达水平比较:空白组与假手术组间比较差异无显著性(P>0.05).与空白组相比,模型组的C2mRNA表达明显增加(P<0.05).与模型组比较,TPN组C2基因转录水平下调,但差异无显著性(P>0.05);ω3脂肪酸组的C2亚基基因转录水平明显下降(P<0.05).24小时点的各组大鼠伸趾长肌C2亚基基因转录水平变化趋势与16小时点一致.16小时点的空白组与假手术组大鼠伸趾长肌C8 mRNA表达均差异无显著性(P>0.05).与空白组相比,模型组的C8 mRNA表达明显增加(P<0.05).与模型组比较,TPN组和ω3脂肪酸组的C8基因转录水平均没有显著下降(P>0.05).24小时点的各组大鼠伸趾长肌C8亚基基因转录水平变化趋势与16小时点一致.结论 ω3脂肪酸能够降低脓毒症大鼠骨骼肌内20S蛋白酶体活性及C2亚基活性,但对16及24小时点C8亚基的基因转录水平无影响.     

自噬-溶酶体系统在慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌萎缩中的作用机制

目的探讨自噬-溶酶体系统在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠骨骼肌萎缩中的作用机制。方法采用单纯熏香烟法复制慢阻肺大鼠动物模型。采用Real time PCR,Western blot技术检测大鼠趾长伸肌中FOXO转录因子以及自噬相关基因Bnip3、Beclin1、p62、MAP-LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5的mRNA及蛋白表达,探讨自噬-溶酶体系统在慢阻肺大鼠骨骼肌萎缩中的作用机制,进一步探索骨骼肌萎缩的机制。用透射电镜观察对照组和实验组大鼠趾长伸肌组织切片及肺组织切片中的变化。结果 Real time PCR分析结果显示,实验组大鼠趾长伸肌组织中FOXO转录因子以及自噬相关基因Bnip3、Beclin1、p62、Atg5的mRNA表达实验组显著高于对照组(P均0.05,其中Bnip3两组对照P均0.01)。两组大鼠MAP-LC3Ⅱ/Ⅰ的mRNA表达比较差异无统计学意义(P0.05)。Western blot分析结果显示,实验组大鼠趾长伸肌组织中FOXO转录因子以及自噬相关基因Bnip3、Beclin1、p62、MAP-LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组(P均0.05,其中Bnip3,MAP-LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1两组对照P均0.01)。透射电镜下,相比于对照组,实验组大鼠趾长伸肌胞浆内自噬溶酶体增多,肺组织切片中发现肺组织纤维化和炎症细胞增多。结论实验组大鼠趾长伸肌组织内自噬-溶酶体系统被激活,可能是骨骼肌萎缩的机制之一。     

Bcl-2及Bax表达与COPD大鼠骨骼肌细胞凋亡的相关性

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠骨骼肌Bc l-2、Bax表达与骨骼肌细胞凋亡的关系。方法 100只健康W istar大鼠随机分为模型组80只,正常对照组(NC)20只。模型组采用熏香烟和气管内滴注猪胰蛋白酶(PEE)法建立COPD模型大鼠,以低于NC大鼠平均体重的90%作为判断发生营养不良的标准,将COPD模型大鼠分为COPD营养不良组(NM)和COPD营养正常组(MC)。取大鼠骨骼肌(膈肌、趾长伸肌)制备石蜡切片,分别采用TUNEL法测定骨骼肌细胞凋亡率,免疫组织化学法测定骨骼肌Bc l-2、Bax表达,Im age-Pro P lus version 6.0图像系统测定Bc l-2、Bax蛋白表达强度。结果 NM大鼠膈肌、趾长伸肌的凋亡率高于NC和MC(P<0.05);NM大鼠膈肌、趾长伸肌Bc l-2的表达均低于NC和MC(P<0.05);NM膈肌、趾长伸肌的Bax表达均强于MC和NC(P<0.05)。结论 COPD模型大鼠可能存在骨骼肌细胞凋亡,Bc l-2、Bax可能参与COPD模型大鼠骨骼肌细胞凋亡。     

2005年广西流动人口疟疾监测结果分析

目的了解广西流动人员疟疾流行现状,进而提出针对性防治措施。方法收集全区网络直报疫情资料和各级疾病预防控制机构疟疾监测数据进行分析。结果2005年广西流动人口发热病人平均疟原虫阳性率为0·33%。80·62%的病人为本地居民外出到疟疾流行区务工感染所致。以从事护林/砍伐比例最高,占44·19%。结论加强返乡流动人口疟疾监测是巩固广西疟疾防治的关键所在。     

2004年邹城市中小型饮食行业餐具消毒效果调查

为确保消费的饮食安全，更好地了解饮食业餐具消毒效果卫生状况，从而为进一步加强监督管理提供依据，于2004年4～7月对邹城市所属中小型饮食业进行餐具消毒效果检测，共检测876份，现将结果报告如下。     

惠州市车间空气中有毒物检测结果分析

目的 了解惠州市电子、五金、电镀等企业生产车间中有毒物污染情况，以便提出有效的预防措施。方法根据中华人民共和国国家标准中气相色谱法、原子吸收分光光度法、分光光度法对车间空气中有毒物质进行检测。结果2003～2004年共检测车间空气样品3625份，舍格3511份，总合格率为96．8％。其中锰尘舍格率最低，为82．2％；其次是三氯乙烯91．0％，氰化氢93．4％，甲苯97．1％，硫酸97．2％，铅烟98．2％，正己烷99．2％。苯99．3％，二甲苯99．6％，其他合格率为100％。结论惠州市部分电子、五金、电镀企业车间空气中有毒物的浓度较高，应改善生产车间的通风设施，做好工人的个人防护。     

2005年汕头市登革热定点监测结果分析

目的 通过定点监测为汕头市登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据。方法收集监测点的登革热疫情、人群抗体水平和媒介伊蚊等监测资料，用EPI2002软件统计分析。结果2005年汕头市无登革热疫情，抗登革热病毒IgG、IgM阳性率低，伊蚊幼虫孳生密度高峰在6、8、9、10月份，低谷在4、7、11月份，孳生情况随着月平均降水量、平均气温变化而变化；孳生场所以农村、暂时性容器为主。结论汕头市有登革热流行的自然、社会环境条件，人群普遍对登革热易感，8～10月是发动爱国卫生运动，清除伊蚊孳生地，预防、控制登革热流行的适当时机。     

广东高州市2005年医疗机构消毒质量监测分析

目的评价辖区内医疗机构消毒灭菌质量，督促各医疗单位提高消毒灭菌效果，防止医源性感染的发生。方法对辖区内的医疗单位已消毒或灭菌的用品进行抽样检测，将检测结果进行统计学分析。结果这次采集使用中消毒液、无菌器械、物体表面、手术室空气和医务人员手共3556份，检测达卫生标准2955份，符合率为83、10％，不同样品检测达卫生标准百分率依次为97．37％、95．56％、86．25％、75．41％和62、49％。结论高州市医疗机构消毒灭菌质量用卫生指标评价，卫生站的符合卫生标准率低于医院，手术室空气和医务人员手的监测合格率低于使用中消毒液和无菌器械。     

湛江市2007年登革热监测结果

目的分析湛江市2007年登革热监测结果,为登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策提供科学依据。方法收集监测点的登革热疫情、布雷图指数、人群抗体水平和媒介伊蚊等监测资料,用EPI2002软件统计分析。结果2007年湛江市暴发2起登革热疫情,发病205例,男97例,女108例;抗登革热病毒IgG阳性率低,伊蚊幼虫孳生密度高峰在9月份,低谷在6-8月份,阳性容器以永久性容器为主。结论湛江市有登革热流行的自然、社会环境条件,人群普遍对登革热易感,8-9月是发动爱国卫生运动,清除伊蚊孳生地,预防、控制登革热流行的适当时机。     

宁波市2004年疫苗损耗监测评估

为及时了解宁波市预防接种点的疫苗使用情况，科学地制定疫苗使用计划，我们于今年4-10月在镇海区开展常规接种疫苗（卡介苗BCG、脊灰三价糖丸TOPV、百白破三联疫苗DPT、麻疹减毒活疫苗MV）的损耗监测，现将监测结果评估如下。     

2007～2009年铜陵市人民医院产科抗生素应用分析

目的了解产科抗生素的应用情况并评价其合理性以加强临床使用的管理。方法随机抽查铜陵市人民医院2007～2009年产科出院患者病历中的抗生素使用情况,进行回顾性的调查统计分析。结果抗生素使用率达67%,头孢类药物是主要种类,以单独用药情况最多;多数品种DUI接近1。结论该院产科抗生素使用基本合理,但尚须建立有效的监管制度,控制过度使用。     

羧甲基壳聚糖在口腔科中的研究进展

羧甲基壳聚糖（Carboxymethyl Chitosan）是壳聚糖（Chitosan）经羧甲基化而得的一种水溶性多糖。与壳聚糖相比,羧甲基壳聚糖的水溶性提高,且安全、无毒、无害,具有成膜性、保湿性、生物相容性好的特点,是一种良好的药物载体。本文就对羧甲基壳聚糖在口腔医学中的应用做综述：     

食品中氯霉素测定方法的应用研究

目的探讨ELISA检测法检测食品中氯霉素的可行性。方法采用国际上先进的ELISA检测法和酶标读数仪定量检测，并与高效液相色谱-电喷雾串联质谱法（HPLC—MS／MS）比较。结果氯霉素含量为0．05～0．20ug／kg之间，CV％为2．5％～5％，回收率为85．0％～110．0％，标准曲线r=-0．992～-0．999。结论ELISA法具有灵敏度高，干扰少，测定步骤简便、快速。操作安全，设备投资少，测定结果准确可靠。