外周血癌细胞中多种肿瘤标记物基因检测预测乳腺癌患者转移和预后的意义

目的：筛选一组可检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因,分析乳腺癌患者相对循环癌细胞数（Lc）与临床病理特征的关联。方法：收集乳腺癌患者142例（乳腺癌组）和正常女性60人（正常对照组）外周血标本。利用CGAP提供的SAGE Genie数据库中数字基因表达演示工具,筛选一组可用于检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因（FAM83A、NPY1R和KRT19）。应用定量巢式PCR方法检测研究对象外周血中标记物基因的表达水平,并通过公式计算患者Lc值。结果：在乳腺癌组患者外周血中肿瘤标记物基因FAM83A、NPY1R和KRT19的表达水平均明显高于正常对照组（P<0.001）。142例乳腺癌患者中有113例（79.6%）至少表达1个肿瘤标记物基因。乳腺癌患者Lc值与其临床分期和远处转移有关联（P<0.001）。Kaplam-Meier生存曲线,Lc值小于2的患者生存时间明显长于Lc值大于2者（P=0.005）。结论：筛选了一组检测乳腺癌外周血循环癌细胞的标记物基因,联合该组基因计算的Lc值与患者临床分期和远处转移有关联,并可辅助判断乳腺癌预后。     

基于生物信息学分析FAM83H-AS1在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 通过生物信息学分析FAM83H-AS1在乳腺癌中的表达及其对临床治疗和预后评估的意义。方法 下载癌症基因组图谱（the Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库中多种肿瘤表达资料,采用R语言分析FAM83H-AS1在多种癌症中的表达情况。单独分析FAM83H-AS1在乳腺癌中的表达情况,并通过基于基因表达水平值的交互式分析平台（Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA）在线数据库验证表达情况。利用TCGA数据库下载并分析生存资料,明确FAM83H-AS1表达水平与乳腺癌患者预后的关系,并利用GEPIA及Kaplan-Meier Plotter进行双重验证。同时利用TCGA临床信息分析FAM83H-AS1与临床病理分期的关系,运用R语言分析FAM83H-AS1与肿瘤微环境、免疫检测点相关基因及肿瘤突变负荷（tumor mutation burden,TMB）的相关性,并进行基因集富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）。结果 FAM83H-AS1在多种癌症中表达异常,其中在乳腺癌中的表达显著升高,且高表达FAM83H-AS1的乳腺癌患者总生存率显著降低。此外,不同临床分期的乳腺癌患者FAM83H-AS1的表达水平不同。FAM83H-AS1与乳腺癌样本中的基质细胞评分及免疫细胞评分均呈负相关,与一些免疫检测点相关基因表达具有相关性,TMB雷达图结果提示FAM83H-AS1在乳腺癌中的表达与TMB存在正相关性,GSEA结果提示FAM83H-AS1的表达与错配修复功能呈正相关性。结论 FAM83H-AS1基因在乳腺癌中高表达,与患者的不良预后、临床病理分期、肿瘤微环境及TMB均有相关性。同时FAM83H-AS1与免疫检测点相关的一些基因及错配修复基因存在相关性,以上可能为临床乳腺癌的治疗、预测预后及基因靶向药物的研制提供理论依据。     

应用荧光定量PCR检测肝细胞癌微小转移

目的：探讨甲胎蛋白（AFP）-mRNA在肝细胞癌（HCC）患者外周血中的表达和临床意义。方法：采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-PCR）方法,检测25例HCC患者外周血中AFP-mRNA的表达。结果：HCC患者外周血中AFP-mRNA表达率显著高于肝炎和肝硬化患者（P〈0.01）。HCC患者外周血中AFP-mRNA表达与患者的肝外转移可能相关,与患者的临床分期、肿瘤直径、数目、血清AFP水平无明显相关（P〉0.05）。结论：AFP-mRNA可作为血液循环中肝癌细胞的标志物。     

P120连环素在乳腺浸润性导管癌中的表达与临床病理意义

目的：探讨P120在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化方法检测84例乳腺浸润性导管癌组织中ER、PR、c-erbB-2及P120的表达情况;84例乳腺癌病例中有43例同时取相应新鲜肿瘤组织和癌旁的正常组织,采用RT-PCR方法检测其P120的表达情况。结果：84例乳腺浸润性导管癌中P120蛋白在细胞膜正常表达率为39.3%。43例乳腺癌术中留取的新鲜肿瘤组织中P120 mRNA阳性表达率为37.2%。P120在乳腺浸润性导管癌与癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义（P〈0.01）。P120表达与淋巴结转移、临床分期及c-erbB-2表达均有明显相关性（P〈0.05）,P120蛋白表达与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤组织学分级及ER、PR表达间均未见明显相关性（P〉0.05）。结论：P120的异常表达可能反映了乳腺浸润性导管癌的侵袭性生物学行为。     

联合检测PTEN基因和雌激素受体对判断乳腺癌生物学行为和预后的价值

目的探讨PTEN基因、ER和PR的表达水平对判断乳腺癌生物学行为和预后的临床意义。方法采用免疫组织化学SP法,检测石蜡包埋42例乳腺癌组织和12例乳腺小叶增生（对照组）中PTEN蛋白、ER和PR的表达水平,比较上述蛋白表达的差异及其与乳腺癌复发、转移、病理分级及生存情况的相关性。结果乳腺癌组PTEN高表达率低于对照组（P〈0.05）;PTEN基因在乳腺癌中的表达与肿瘤大小、肿瘤复发和病理分级无相关性（P〉0.05）;〈45岁者PTEN高表达率明显低于〉45岁（P〈0.05）;PTEN高表达的乳腺癌与腋淋巴结转移及远处转移呈负相关（P〈0.01）;PTEN高表达患者5年生存率明显高于PTEN低表达患者（P〈0.01）,且PTEN基因表达与ER受体呈正相关性（P〈0.05）,与PR表达无明显相关性（P〉0.05）。结论乳腺癌患者PTEN基因低表达提示肿瘤易发生淋巴结及远处转移,其预后不良;联合检测ER和PTEN基因的表达可作为一种预测乳腺癌预后和转移趋势的指标。     

Claudin-4在人乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨claudin-4（CLDN4）在乳腺癌中的表达及临床意义。方法：收集本院外科手术切除的60例乳腺癌及对应癌旁乳腺组织,实时定量PCR（qRT-PCR）检测CLDN4mRNA在乳腺癌及癌旁组织中的表达;免疫组织化学染色检测CLDN4表达,统计分析CLDN4蛋白与肿瘤临床病理资料间的相关性。结果：CLDN4mRNA及蛋白在乳腺癌组织中表达水平明显高于对应癌旁组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）;乳腺癌组织中CLDN4蛋白高表达与肿瘤体积增大、恶性组织学分级、淋巴结转移及高TNM分期成显著正相关（P〈0.05）。结论：CLDN4在乳腺癌组织中表达上调并与肿瘤恶性临床病理特征有关。CLDN4可能成为乳腺癌早期诊断的重要标志物及分子治疗靶点之一。     

LRP16基因在乳腺癌中的表达及临床意义

目的：检测LRP16基因在乳腺癌中的表达及与乳腺癌预后的相关性。方法：用免疫组化方法检测62例临床乳腺癌标本中LRP16、ER、PR和E-cadherin的表达。结果：LRP16、ER、PR和E-cadherin在临床乳腺癌标本中表达的阳性率分别为56.5%、56.5%、48.4%、40.3%。LRP16在临床乳腺癌中的表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期、ER表达呈正相关,与E-cadherin表达呈负相关（P〈0.05）。E-cadherin在临床乳腺癌标本中的表达与腋窝淋巴结转移、临床分期呈明显负相关（P〈0.05）。结论：LRP16与乳腺癌生物学行为密切相关,可以作为乳腺恶性程度评判的新指标。     

乳腺癌外周血管内皮生长因子的表达及其意义

目的研究血管内皮生长因子在乳腺癌患者外周血中的表达水平与乳腺转移复发之间的相关性。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测38例乳腺患者,术前、后外周血中VEGF含量,分析乳腺癌外周血VEGF含量与乳腺癌转移复发的相关性。结果乳腺癌患者术后随访时新出现转移者与无复发转移者的外周血VEGF含量分别为（416.29±22.58）pg/ml,（84.54±15.84）pg/ml及两者术前外周血VEGF含量分别为（385.07±10.73）pg/ml,（209.66±59.03）pg/ml,两者间外周血VEGF含量差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论术后定期检测外周血VEGF含量可以用来判断乳腺癌复发及治疗效果。     

乳腺癌增殖细胞核抗原表达及其临床意义

目的：检测乳腺癌组织中增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达及其与临床病理指标的关系.方法： 应用免疫组化S-P法检测76例乳腺癌石蜡切片中PCNA的表达,并与临床病理指标行相关性分析.结果： 76例乳腺癌组织中PCNA阳性表达率为78.9%.其中肿瘤≥3 cm者PCNA阳性表达率为90.4%（37/41）,〈3 cm者PCNA阳性表达率为65.7%（23/35）,两者差异显著（P〈0.01）.淋巴结转移组PCNA阳性表达（86.7%）明显高于淋巴结未转移组（67.7%）,两者差异显著（P〈0.05）.并且随着肿瘤组织学分级的增高,PCNA阳性表达率明显增高（P〈0.05）. 结论： PCNA表达与乳腺癌的发生、发展关系密切,是乳腺癌患者预后判定有价值的生物学指标.     

外周血Mfn2基因表达检测在乳腺癌诊断中的意义

目的 探讨线粒体融合蛋白2（Mfn2）mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达及意义。方法 收集62例乳腺癌患者和25例健康人外周静脉血和组织病理学标本,提取总RNA,检测Mfn2mRNA以及乳腺癌组织中表皮生长因子受体（EGFR）的表达。结果 0~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者外周血中Mfn2mRNA阳性率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;健康人外周静脉血中Mfn2mRNA的表达为100%,明显高于其在乳腺癌患者外周血中的表达（P〈0.05）;乳腺癌患者组织病理学标本中,EGFR阳性34例,其中外周血Mfn2mRNA阳性者12例;EGFR阴性28例,其中外周血Mfn2 mRNA阳性者17例。EGFR阳性患者中Mfn2 mRNA的表达率明显低于EGFR阴性者（P〈0.05）。结论 乳腺癌患者外周血中Mfn2mRNA表达阳性率与肿瘤分期、转移和EGFR表达有关。RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血Mfn2mRNA可能有望成为检测乳腺癌细胞微转移的有效方法。     

CD146在乳腺癌中的表达及意义

目的：检测乳腺癌中CD146的表达情况以及分析与临床病理特征的相关性。方法：收集10例正常乳腺和79例乳腺癌组织标本;用免疫组化法检测CD146、ER、PR、HER2、P53的表达,分析CD146表达与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果：CD146在正常乳腺组织中不表达,在乳腺癌中的表达率约24.1%,且组织学级别越高,其表达率越高（P〈0.05）;CD146表达的乳腺癌中,ER、PR多为阴性表达（P〈0.05）;CD146的表达与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移情况、以及与HER2和P53的表达无关。结论：CD146在ER阴性表达的乳腺癌中高表达,可能与肿瘤上皮间质转化有关。     

CD44和MMP-2在乳腺癌中的表达和意义

目的：探讨CD44和MMP-2在乳腺癌组织中的表达及其在淋巴结转移中的作用。方法：应用免疫组化SP法检测CD44和MMP-2在94例乳腺癌及其对应乳腺组织中的表达。结果：94例乳腺癌中,CD44在乳腺癌中表达64/94（68.09%）,其中伴淋巴结转移者37/44（84.09%）;MMP-2在乳腺癌中表达66/94（70.21%）,有淋巴结转移者39/44（88.64%）。而在其对应乳腺组织中 CD44和 MMP-2的表达分别为12/94（12.77%）和17/94（18.09%）。CD44和MMP-2在乳腺癌中表达明显高于对应正常乳腺组织（P〈0.05）,伴淋巴结转移者明显高于不伴淋巴结转移者（P〈0.05）,CD44和MMP-2在乳腺癌中表达呈正相关（r=0.46,P〈0.05）。结论：CD44和MMP-2的表达与乳腺癌及乳腺癌淋巴结转移密切相关,联合检测CD44和MMP-2的表达,有助于乳腺癌的辅助诊断和判定其临床预后。     

乳腺癌组织中Bmi-1蛋白表达与病理学特征的相关性研究

目的研究Bmi-1蛋白在乳腺癌组织中的表达与l临床病理学特征的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌组织中Bmi-l蛋白的表达水平,分析Bmi-1蛋白在乳腺癌组织中的表达,并结合乳腺癌患者的临床病理资料分析与其相关性。结果乳腺癌组织中Bmi-l蛋白的阳性表达率为88．3％,Bmi1蛋白阳性表达与淋巴结转移、肿瘤大小、远处转移及TNM临床分期密切相关（P＜0．05）,与ER、PR、CerbB2等临床病理特征无显著性相关（P〉0．05）。结论Bmi-l蛋白的高表达在乳腺癌的发生、发展和转移中起重要作用,提示Bmi1可能成为预测乳腺癌高度转移的新标志物。     

三阴性乳腺癌和HER-2过表达乳腺癌的临床病理特征比较

目的探讨三阴性乳腺癌和HER-2过表达乳腺癌的临床病理特征。方法选取210例雌、孕激素受体均为阴性的乳腺癌患者为研究对象,根据HER-2检测结果将其分为两组,三阴性乳腺癌组（Estrogen Receptor ER、Progesterone Receptor PR和HER-2表达阴性）85例,HER-2过表达乳腺癌组（ER、PR阴性和HER-2表达阳性）125例,比较两组发病部位、病理类型、肿瘤直径大小、淋巴结转移、组织学分级、TNM分期、p53表达及Ki-67表达情况。结果两组在发病部位上差异无统计学意义（P=0．4317）,均好发于外上象限部位,分别占58．82％和46．4％;两组在病理类型、肿瘤直径大小、TNM分期、p53表达上差异无统计学意义（P=0．6146、P=-0．2744、P=0．5909、P=0．6002）,其中浸润性导管癌、直径为2-5cm、II期所占比例均最高;三阴性乳腺癌组淋巴结转移以阳性为主,占56．47％,HER-2过表达乳腺癌组以阴性为主,占67．2％,差异有统计学意义（P=．0007）;两组在组织学分级上,差异有统计学差异（P=0．0278）,其中组织学2级所占比例最高;三阴性乳腺癌组在Ki-67表达上与HER-2过表达组相比,有差异有统计学差异（P=0．0041）。结论三阴性乳腺癌和HER-2过表达乳腺癌的病理类型均好发在外上象限,以浸润性导管癌为主,就诊时均是II期病人为主。三阴性乳腺癌较HER-2过表达乳腺癌的侵袭性更强,细胞增殖更活跃,组织学分级更高,更易发生淋巴结转移,因此预后更差。     

乳腺癌微血管密度及彩色多普勒血流成像与腋窝淋巴结转移的分析

目的本文通过分析乳癌原发灶的声像图特征并结合术后对肿瘤内部微血管密度（MVD）的检测来预测腋窝淋巴结转移,并探讨原发灶的超声血流动力学及形态学（主要是肿瘤大小）特征与MVD的相关性。方法术前分析48例乳腺癌超声图像特征,术后用免疫组化方法获得乳腺癌内部的MVD。结果原发灶的大小（以2cm为界）腋窝淋巴结转移组和无转移组有显著差异（P〈0.05）;彩色多普勒血流显像（CDFI）显示：腋窝淋巴结转移组较无转移组病灶内彩色血流信号丰富（P〈0.05）,两组比较有显著差异（P〈0.05）;腋窝淋巴结转移组与无转移组两组间MVD有显著差异（P〈0.05）。结论通过对乳腺癌肿块原发灶彩超声像图（肿瘤大小与血流分级）和肿瘤内MVD的分析,判断患者腋窝淋巴结是否有转移,可为临床分期和治疗提供一定的帮助。     

年轻与中老年女性乳腺癌病理特征对照研究

目的：分析年轻与中老年女性乳腺癌病理特征差异。方法：回顾分析我院2002年1月~2010年8月收治的64例年龄35岁的年轻乳腺癌患者的临床及病理资料,并与同期所有收治的35岁以上的291例中老年女性乳腺癌进行比较,所有病例均经手术治疗及病理确诊。结果：年轻组占同期收治病例的18.03%;年轻组雌激素受体（ER）或孕激素受体（PR）阳性患者比例低于中老年组差异有统计学意义（P〈0.05）;年轻组无淋巴结转移及ER阴性患者比例高于中老年组差异有统计学意义（P〈0.05）;两组乳腺癌患者中病理组织类型、肿瘤大小、pTNM分期比较,差异均无统计学意义。结论：ER表达、PR表达、淋巴结未转移伴ER阴性的患者年轻组与老年组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;年轻女性乳腺癌发病率呈上升趋势,一般认为较年老乳腺癌相比更具侵袭性,预后差。本研究数据显示年轻组占同期收治病例的18.03%,需要提高我区年轻女性对乳腺癌的警惕,加强对乳腺癌知识的宣传教育。     

趋化因子受体CXCR4在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的分析趋化因子受体CXCR4在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的关系,探讨CXCR4在乳腺癌发病中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测46例乳腺癌组织、30例乳腺癌旁组织和30例正常乳腺组织中CXCR4的表达,分析其不同表达与患者年龄、肿瘤大小、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、TNM分期、病理分级和淋巴结转移等临床特征的关系。结果46例乳腺癌组织中CXCR4的表达率为61%,显著高于正常乳腺组织和乳腺癌旁组织,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。乳腺癌组织中CXCR4的高表达与TNM分期、病理分级和淋巴结转移相关（均P〈0.05）。结论CXCR4在乳腺癌中有较高的表达率,其可能在协同促进乳腺癌的侵袭转移中起重要作用。