二氢杨梅素对绒毛膜癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的 探讨二氢杨梅素（DMY）对绒毛膜癌（绒癌）JEG-3及JAR细胞增殖和迁移能力的影响。 方法 MTT法检测不同浓度的二氢杨梅素(0 mg/L, 20 mg/L, 40 mg/L, 60 mg/L, 80 mg/L)作用一定时间后,对绒癌JEG-3和JAR细胞增殖能力的影响;细胞划痕实验和Transwell法检测不同浓度二氢杨梅素(0 mg/L, 40 mg/L, 60 mg/L, 80 mg/L)分别作用绒癌JEG-3细胞及JAR细胞一定时间后,对其迁移能力的影响;Real-time PCR和Western blotting方法分别检测不同浓度二氢杨梅素(0 mg/L, 40 mg/L, 60 mg/L, 80 mg/L)作用绒癌JEG-3及JAR细胞后,基质金属蛋白酶2（MMP-2）mRNA和蛋白表达水平的影响。 结果 不同浓度二氢杨梅素作用绒癌JEG-3和JAR细胞24 h和48 h后,随着二氢杨梅素浓度增加,对JEG-3和JAR细胞增殖抑制作用增强（P＜0.05）。二氢杨梅素作用绒癌JEG-3及JAR细胞后,显著抑制细胞迁移能力,且具有浓度依赖性（P＜0.05）。不同浓度二氢杨梅素作用JEG-3和JAR细胞后,MMP-2 的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。 结论 二氢杨梅素能够抑制JEG-3及JAR细胞的增殖能力且具有浓度依赖性,同时二氢杨梅素可能通过下调绒癌JEG-3及JAR细胞中MMP-2 mRNA和蛋白的表达,抑制绒癌细胞的侵袭迁移。     

组织芯片制备与原位分析技术

目的 建立组织芯片制备技术并观察在各种原位分析中的应用。方法 1．在传统病理学技术的基础上制备各种组织蜡块作为组织供体，再用组织阵列仪按照预先设计制作各种组织阵列蜡块，经切片和烤片后即成为各种组织芯片。2．用各种组织芯片按照常规方法进行HE染色、免疫组化(IHC)、原位杂交(ISH)和原位PCR(IS-PCR)实验分析。结果 (1)用本方法可分别制备低、中和高密度组织芯片，而且组织芯片排列整齐，外形美观，组织点大小一致且不易脱落。(2)HE染色结果均一，核浆对比明显，便于进行诊断和比较诊断；IHC和免疫荧光染色清晰，便于观察和诊断；ISH和IS-PCR实验效果较好，可用于各种基因扩增分析。结论 (1)本方法是一种比较成熟的组织芯片制备技术。(2)用本方法制备的组织芯片可以进行HE染色和各种原位分析。     

甲状腺乳头状癌PTEN、Smad4的表达及意义

目的:探讨甲状腺乳头状癌(PTC)PTEN、Smad4的表达及与PTC临床病理特征的关系。方法:采用SP免疫组化法检测94例PTC及其癌旁组织,29例甲状腺腺瘤组织PTEN、Smad4的表达。结果:PTC中PTEN、Smad4的表达明显低于癌旁组织和甲状腺腺瘤(P0.01,P0.05);不同类型的PTC,随恶性程度的降低,PTEN、Smad4的表达逐渐升高(P0.01,P0.05)。PTC中PTEN和Smad4的表达与性别、年龄、肿瘤大小无关(P0.05),与局部侵犯、颈淋巴结转移和T分期有关(P0.01,P0.05)。PTC中PTEN、Smad4的表达呈显著正相关(P0.05)。结论:PTEN和Smad4表达降低程度与PTC的恶性程度存在量效关系,PTC时PTEN和Smad4存在相互协调关系。PTEN、Smad4低表达可作为PTC预后不良的判断指标。     

乳腺癌高表达基因FAM83A的生物信息学分析

目的筛选乳腺癌高表达基因,用生物信息学方法预测FAM83A生物学功能。方法使用肿瘤基因组解剖计划数据库的数字基因表达演示工具,在乳腺癌组织和乳腺良性肿瘤组织中筛选差异表达的基因。生物信息学方法预测FAM83A基因及其编码蛋白的序列同源性、理化性质、亚细胞定位、结构和表达谱。RT-PCR方法测定FAM83A在乳腺癌、乳腺纤维瘤和正常乳腺组织中的表达。结果筛选出差异表达基因FAM83A。发现其有3个不同的剪接体,基因进化保守,亚细胞定位于线粒体的可能性大。预测有PK,PKA等磷酸化位点,MAPK作用识别位点,SH2、SH3,RPEL和WH2结合基序。二级结构主要是α螺旋和无规则卷曲。RT-PCR证实FAM83A在乳腺癌组织中高表达,而在乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织中均无表达。结论 FAM83A是一个乳腺癌高表达基因,可能作为乳腺癌分子机制研究的靶点。     

组织芯片技术及其在医学研究中的应用

组织芯片是指固定在玻片上的高密度的组织微点阵。讨论了组织芯片技术的发展历史、现状和在细胞表型、基因表达、疾病分子诊断、预后判定以及与基因芯片的结合等方面的应用，并对其优缺点和发展前景进行了分析。     

外周血癌细胞中多种肿瘤标记物基因检测预测乳腺癌患者转移和预后的意义

目的：筛选一组可检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因,分析乳腺癌患者相对循环癌细胞数（Lc）与临床病理特征的关联。方法：收集乳腺癌患者142例（乳腺癌组）和正常女性60人（正常对照组）外周血标本。利用CGAP提供的SAGE Genie数据库中数字基因表达演示工具,筛选一组可用于检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因（FAM83A、NPY1R和KRT19）。应用定量巢式PCR方法检测研究对象外周血中标记物基因的表达水平,并通过公式计算患者Lc值。结果：在乳腺癌组患者外周血中肿瘤标记物基因FAM83A、NPY1R和KRT19的表达水平均明显高于正常对照组（P<0.001）。142例乳腺癌患者中有113例（79.6%）至少表达1个肿瘤标记物基因。乳腺癌患者Lc值与其临床分期和远处转移有关联（P<0.001）。Kaplam-Meier生存曲线,Lc值小于2的患者生存时间明显长于Lc值大于2者（P=0.005）。结论：筛选了一组检测乳腺癌外周血循环癌细胞的标记物基因,联合该组基因计算的Lc值与患者临床分期和远处转移有关联,并可辅助判断乳腺癌预后。     

预防致病性大肠杆菌所致腹泻的口服菌苗

致病性大肠杆菌所具有的特异性粘附因子实际上是K88抗原,属菌体表面蛋白质。K88抗原有K88ab、K88ac和K88ad等变异型。另外还有一种K99抗原。具有这种抗原的大肠杆菌致病株能够粘附在人和动物(如猪、小牛和羊羔)肠壁粘膜的表面。菌毛在大肠杆菌粘附于粘膜表面的过程中起重要作用。     

组织芯片检测淋巴瘤中活化的细胞毒性细胞

目的：运用组织芯片及常规病理切片检测活化的细胞毒性细胞在各型淋巴瘤中的表达分布情况，为临床治疗和判断预后提供依据。方法：运用免疫组化方法检测60份淋巴瘤标本制成的组织芯片中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况，同时选择10份鼻自然杀伤细胞（NK）／T细胞淋巴瘤常规标本与组织芯片进行比较研究，10份淋巴组织反应性增生标本作为对照。结果：在60份淋巴瘤组织芯片中，发生在淋巴结内者48份，淋巴结外者12份。B细胞淋巴瘤42份，T细胞淋巴瘤16份（外周T细胞淋巴瘤10份、NK／T细胞淋巴瘤2份、T淋巴母细胞瘤2份及问变性大细胞淋巴瘤2份），2份霍奇金淋巴瘤。42份B细胞淋巴瘤的瘤细胞均不表达穿孔素和颗粒酶B。10份外周T细胞淋巴瘤中8份表达穿孔素，9份表达颗粒酶B，阳性表达细胞均为非肿瘤细胞。芯片中的2份和常规10份鼻NK／T细胞淋巴瘤中均见穿孔素和颗粒酶B过度表达。T、B细胞淋巴瘤与NK／T细胞淋巴瘤比较有显著性差异（P〈0．01）。结论：穿孔素和颗粒酶B是鉴定活化的细胞毒性细胞的免疫标志物，可作为NK／T细胞淋巴瘤的诊断性标志物；其在T细胞淋巴瘤中的表达反映了机体的抗肿瘤免疫反应机制。组织芯片技术具有高信息量、简捷、高效、实验误差小、重复性好等优点，可作为研究淋巴瘤的有用工具。