培养基成分对云南红豆杉细胞生长和产生1-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响

目的 研究B5培养基主要成分对云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法 利用植物组织培养技术结合HPLC分析手段，通过改变B5培养基中CaCl2、NaH2PO4、(NH4) 2SO4和KNO3的质量浓度，研究其对云南红豆杉细胞生长及10-去乙酰巴卡亭Ⅲ量的影响。结果 试验组与对照品相比，B5培养基中高质量浓度的NaH2PO4能够显著促进云南红豆杉细胞生长，CaCl2、(NH4)2SO4和KNO3浓度对细胞生长无显著影响；B5培养基中低质量浓度的CaCl2、NaH2PO4、(NH4)2SO4和KNO3能够显著促进10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放。结论B5培养基中NaH2PO4为300 mg/L时，能够显著促进云南红豆杉细胞生长，细胞生长量是对照的1.2倍，CaCl2、(NH4)2SO4和KNO3分别在75～300、134～268和2 500～5 000 mg/L对细胞生长无显著影响；B5培养基中CaCl2、NaH2PO4、(NH4)2SO4和KNO3的质量浓度分别为75、75、3.5、625 mg/L时，能够显著促进细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放，10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的量分别是对照的1.5、1.4、2.4倍。     

氟化物联合五倍子水提取物对变形链球菌影响的体外研究

目的:研究氟化物与五倍子水提取物联合应用对变形链球菌生长和代谢的影响。方法:取10 m L的无菌培养管120支,分为12组,对照组1组,实验组11组,每组各10支。对照组中含无菌去离子水,实验组中含有不同浓度氟化钠(0.01%、0.02%)、五倍子水提取物(0.25、0.5、1 mg/m L)及氟化钠与五倍子联合应用的培养基内培养变形链球菌标准菌株,检测培养前后两组培养基光密度值及p H的变化。结果:与对照组相比,各实验组变链菌的生长受到明显抑制,同时各组培养基的p H变化也逐渐减小,氟化钠与五倍子联合应用时未发现明显的协同效应。结论:氟化钠及五倍子水提取物均可显著抑制变形链球菌的生长及产酸代谢活动,两者联合应用时未见明显的协同效应。     

用羊血代替兔血制作血平板在“链球菌菌落在血平板上的溶血特性”实验中的应用

目的本实验用脱纤维羊血代替脱纤维兔血制作血平板,并观察其对链球菌溶血现象产生的影响。方法向高压灭菌过的哥伦比亚琼脂培养基中加入6 mL脱纤维羊血或兔血,混匀后,倾注平板。经无菌试验合格后,将链球菌分区划线涂布于平板上,37℃培养24 h,培养后于室温放置1和2 d后(day 2和day 3),观察菌落在血平板上的生长情况和产生溶血情况。结果甲型溶血性链球菌培养24 h后(day 1),在羊血平板上有明显的草绿色溶血环,而兔血平板上并未产生明显的草绿色溶血环;平板置于室温1和2 d后(day 2和day 3),在羊血平板上仍然能观察到草绿色溶血环,而培养在兔血平板上的菌落在day 3时才观察到微弱的α溶血现象。乙型溶血性链球菌培养24 h后(day 1),在羊血平板上已经出现明显的无色透明溶血环,此时兔血平板上也有溶血环,但并不透明;平板置于室温1 d后(day 2),羊血平板上的无色透明溶血环更加明显和透明,此时兔血平板开始出现无色透明溶血环。丙型链球菌培养24 h后(day 1),羊血和兔血平板上,均未产生溶血现象,在室温静置几天后,也没有产生溶血现象。结论羊血平板更适合观察甲、乙、丙型链球菌的溶血现象,更适用于教学示教用。     

总序香茶菜的组织培养与快繁研究

目的对总序香茶菜进行组织培养和离体快速繁殖。方法以总序香茶菜带芽茎段为外植体,在附加有不同种类和不同浓度激素的MS培养基上进行培养。结果最佳芽诱导培养基:MS BA0.05～0.5mg/L NAA0.01～0.05mg/L;最佳芽增殖培养基:MS BA0.5mg/L NAA0.05mg/L(或IAA0.01mg/L);最佳生根培养基:MS NAA0.1mg/L 活性炭0.05%;最佳愈伤组织诱导与生长培养基为:MS 2,4-D1.0～2.0mg/L BA0.1～0.2mg/L。结论成功建立了快速无性繁殖系。     

对氨基苯甲酸对粘性放线菌生长影响的研究

目的　探讨对氨基苯甲酸 (PABA)对牙根面龋致病菌之一的粘性放线菌生长的影响。方法　在加入不同浓度 PABA的改良 Carlsson培养基中采用厌氧培养技术 (80 % N2 ,10 % H2 ,10 % CO2 )培养细菌 48小时 ,通过 UV- 16 0 1紫外可见分光光度仪测定细菌浓度 OD值 (λ=5 40 nm) ;并用平板倾注法对细菌进行计数及琼脂平板培养观察细菌生长的情况。结果　 10 - 1 0～ 10 - 4 g/ L 浓度的 PABA有促进粘性放线菌生长的能力 ,且当 PABA浓度增加到 10 - 6g/ L 时 ,促进生长的作用达最强 ;当 PABA浓度增加到 10 - 3 g/ L 时 ,对粘性放线菌的生长无明显的促进作用。结论　 PABA可促进粘性放线菌的生长 ,在 PABA浓度为 10 - 6g/ L 时 ,促进生长的能力达最强     

两种培养基基础液对鼠疫菌生长影响的观察

目的寻找一种适宜鼠疫菌生长的培养基基础液(消化液),使其在培养基上生长良好,为鼠疫检测工作打下良好基础。方法选取两种牛肉(牦牛肉和黄牛肉)用同种方法制备成赫金格尔消化液,对两种消化液进行外观检查、氨基氮含量测定、鼠疫菌活菌计数观察,寻找出适宜鼠疫菌生长的最适基础液。结果对两种牛肉按同种方法制备出的消化液进行对比观察,黄牛肉制备出的消化液其上清液不透明,氨基氮含量为400 mg/L左右,未达到鼠疫菌生长所需的氨基氮范围(500~800 mg/L或更高);牦牛肉制备出的消化液其上清液透明,氨基氮含量为820 mg/L左右,在鼠疫菌生长所需的氨基氮范围。对两种消化液制成的基础培养基进行鼠疫菌活菌计数观察,牦牛肉制备出的消化液优于黄牛肉制备的消化液,差异有统计学意义(EV76paris组t=1.876,P0.05;141组t=0.818,P0.05)。结论鼠疫菌生长的最适基础液为牦牛肉制备出的赫金格尔消化液。     

积雪草离体培养和快速繁殖方法探讨

[目的]探讨采用植物组织培养技术进行积雪草快速繁殖的方法,为积雪草的人工栽培及优良品种选育奠定基础.[方法]以积雪草的带节茎为材料,研究离体培养与植株再生的过程.[结果]Murashge and Tucker(MT)基本培养基加N-苯基-N'-1,-2,-3-噻二唑-5-脲(TDZ)0.5 mg/L,有利于丛生芽的产生,不定芽诱导率为87.6%;根的诱导以MT 吲哚乙酸(IAA)0.2 mg/L培养基较好,生根率为100%,且植株生长旺盛.试管苗移栽,成活率可达90%左右.[结论]在MT培养基中加入TDZ可增加积雪草带节茎组织培养的成芽率,移入添加0.2 mg/L IAA的MT培养基中培养可增加其生根率,该方法为积雪草工厂化离体繁殖奠定了基础.     

甘油对毕赤酵母高密度发酵表达重组水蛭素Ⅱ的影响

目的：考察甘油对毕赤酵母生长和重组水蛭素Ⅱ表达的影响。方法：在摇瓶和IOL发酵罐中用含有不同浓度甘油的培养基培养毕赤酵母，测定毕赤酵母的生长和重组水蛭素Ⅱ的表达。结果：发酵培养基中初始甘油浓度为5g／L时，毕赤酵母生长速度明显加快；补料过程中甘油浓度大于70g／L时，毕赤酵母生长受到抑制。与不加甘油相比较，诱导表达期维持培养基中甘油浓度在5g/L以下，重组水蛭素表达可提前4h，诱导30h其活性达13000 ATU／ml，比仅用甲醇诱导时效价提高了7．7％。结论：降低初始培养基中甘油浓度有利于毕赤酵母生长，补料过程中培养基甘油浓度应维持在押制毕赤酵母生长的浓度之下，诱导阶段培养基中少量的甘油有利于水蛭素的表达.     

耐热乳糖酶产生菌株的筛选及产酶条件试验

目的探讨耐热乳糖酶产生菌的筛选方法及其产酶条件。方法利用含有X-gal平板培养基,于60℃划线培养,筛选出耐热乳糖酶产生菌,并观测了培养温度、培养时间、培养基初始pH及乳糖浓度对菌株生长及产酶条件的影响。结果筛选出含耐热乳糖酶菌株,该菌株的最适产酶条件分别为培养温度(60±1)℃,培养时间18～21h,培养基起始pH7.0～8.0,培养基乳糖浓度41.7mmol/L。结论在含有X-gal培养基进行划线培养是筛选产乳糖酶菌株的有效方法,同时该菌株具有嗜热性。     

对氨基苯甲酸对粘性放线菌生长影响的研究

目的 探讨对氨基苯甲酸（PABA）对牙根面龋致病菌之一的粘性放线菌生长的影响。方法 在加入不同浓度PABA的改良Carlsson培养基中采用厌氧培养技术（80%N2，10%H2，10%CO2）培养细菌48小时，通过UV-1601紫外可见分光光度仪测定细菌浓度OD值（λ=540nm)；并用平板倾注法对细菌进行计数及琼脂平板培养观察细菌生长的情况，结果 10^-10-10^-4g/L浓度的PABA有促进粘性放线菌生长的能力，且当PABA浓度增加到10^-6g/L时，促进生长的作用达最强；当PABA浓度增加到10^-3g/L时，对粘性放线菌的生长无明显的促进作用。结论 PABA可促进粘性放线菌的生长，在PABA浓度为10^-6g/L时，促进生长的能力达最强。     

玛咖醇提取物对BMSCs的增殖作用

目的研究玛咖醇提取物对骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)的增殖的作用。方法采用贴壁法培养BMSCs,MTT比色分析法测定细胞生长曲线,随机将BMSCs分成6组,用终浓度为0、10、5、2.5、1、0.5 mg/m L的玛咖醇提取物处理不同的时间组,以MTT比色分析法测BMSCs的OD值。结果玛咖醇提取物为2.5 mg/mL、1 mg/mL作用BMSCs 3 d后,细胞的增殖能力高于对照组(P <0.05),其增殖作用最显著。而高浓度10 mg/mL对BMSCs则出现了抑制作用,与对照组相比促增殖能力降低(P <0.05)。结论玛咖醇提取物在2.5 mg/mL、1 mg/mL具有促进体外培养BMSCs增殖的能力,而高浓度10 mg/m L则抑制细胞的增殖。     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

高生物量富铬酵母发酵工艺的研究

[目的]研究高含量富铬酵母的选育及其高浓度发酵工艺.[方法]通过Cr3+抗性培养基筛选和亚硝基胍诱变确定酵母菌株,通过对铬吸收的影响选择最佳铬盐,采用葡萄糖流加和铬盐添加策略在5L发酵罐中进行培养.[结果]经过抗性筛选和亚硝基胍诱变获得了耐受1 000 mg/L CrCl3的菌株GC9,在3种铬盐CrCl3、Cr2(SO4)3、Cr(NO3)3中以添加Cr2(SO4)3所获得的铬吸收最高.在对数生长后期加入铬浓度为400 mg/L的Cr2(SO4)3,培养42h后细胞干重达到(96.1±0.4)g/L,铬含量达到(2 390±32) μg/g(其中有机铬含量为94％).[结论]本研究为工业快速制备富铬酵母提供了一种参考方法.     

MTT法检测蒲黄提取物对脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的观察蒲黄提取物对体外培养的人脐静脉内皮细胞增殖的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,采用MTT法测定不同浓度蒲黄提取物对HUVEC的影响。结果各浓度蒲黄提取物（100mg/L、75mg/L、50mg/L、25mg/L、10mg/L）均具有显著的促进血管内皮细胞增殖的作用,各浓度之间无明显差异。结论蒲黄提取物可通过促进脐静脉内皮细胞增殖起到抗动脉粥样硬化的作用。     

血红素加氧酶通过抑制NLRP3炎性小体的活化减轻小鼠骨骼肌萎缩

目的 探讨诱导血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)是否通过抑制NLRP3炎性小体的活化减轻小鼠骨骼肌萎缩.方法 32只8周龄雄性C57BL/6小鼠按照简单随机抽样法分为正常组、尾悬吊组(采用尾悬吊法建立下肢肌萎缩模型)、氯化血红素组(在尾悬吊组建模基础上腹腔注射10 mg/μL的氯化血红素hem...     

尿素对幽门螺杆菌生长的影响研究

目的:研究尿素对幽门螺杆菌生长的影响.方法:在幽门螺杆菌培养基中分别加入3种浓度(5 mmol/L,10 mmol/L和20 mmol/L)的尿素,然后将培养基pH分别调至3.5、4.5、5.5.将10株Hp分别接种于这9种培养基中,以确定最佳条件组合.之后采用最佳条件进行胃黏膜活检标本Hp的培养.结果:10株Hp在9种含尿素培养基中以尿素浓度为10 mmol/L、pH为4.5时生长最好,其他8种与之比较差异极为显著(P＜0.01),57份胃镜活检标本分别接种于尿素浓度为10 mmol/L、pH为4.5时生长最好,其他8种与之比较差异极为显著(P＜0.01),57份胃镜活检标本分别接种于尿素浓度为10 mmol/、pH 4.5培养基和pH 7.0不含尿素的普通Hp培养基中,32份标本(56.1 %)在尿素培养基中培养阳性,其中22份(38.6%)在普通培养基中培养阳性.结论:含有适当浓度尿素的培养基可用于胃黏膜Hp的分离培养.     

花叶开唇兰种子非共生萌发的研究

目的筛选花叶开唇兰种子非共生萌发最佳培养基。方法比较不同的基本培养基、蔗糖质量浓度、植物生长物质和培养方式对种子萌发的影响,观察并统计种子萌发率。结果花叶开唇兰种子萌发最适培养基为1/4MS NAA0.1~0.5mg/L 蔗糖20g/L,液体悬浮培养。结论首次报道了花叶开唇兰种子萌发最佳培养基,为花叶开唇兰快速繁殖提供技术参考。     

异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用

目的探讨异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含128 μg/ml异烟肼和无异烟肼的
结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含异烟肼的培养物经0.45 μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无异烟肼的结核分枝杆菌快速
液体培养基内返祖培养。将含异烟肼和无异烟肼的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电
镜观察其表面微观结构。含异烟肼的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无异烟肼的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观
察其菌落形态。对返祖菌及诱导前接种菌的16S rDNA进行鉴定。结果在含128 μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体
培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无异烟肼的结核分枝杆菌
快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落。128 μg/ml异烟肼浓度的结核
分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形。
16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌。结论异烟肼成功诱导脓肿分枝杆
菌L型,可用于脓肿分枝杆菌耐药机制和防治研究。
     

异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用

目的探讨异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含128μg/ml异烟肼和无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含异烟肼的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基内返祖培养。将含异烟肼和无异烟肼的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电镜观察其表面微观结构。含异烟肼的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无异烟肼的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观察其菌落形态。对返祖菌及诱导前接种菌的16S rDNA进行鉴定。结果在含128μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落。128μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形。16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌。结论异烟肼成功诱导脓肿分枝杆菌L型,可用于脓肿分枝杆菌耐药机制和防治研究。     

半夏工厂化育苗技术体系研究初探

目的建立一套半夏工厂化育苗体系,实现半夏的快速繁殖,解决半夏生产因用种而造成的退化问题。方法探讨了外植体诱导、植物生长调节物质质量浓度、光照条件及继代周期对丛生芽增殖的影响。结果外植体的诱导以MS 6-BA(4~5)mg/L NAA0.2mg/L培养基为宜。组织培养中生长调节物质质量浓度为NAA0.2mg/L 6-BA2mg/L、转接时组织块带两个或两个以上芽时,半夏生长状况最好。结论采用工厂化育苗技术可进行半夏的快速繁殖,为保护和持续利用这一重要药材资源提供有效途径。