低温冷冻标本制备透射电镜样品

1　材料和方法　标本取材于 - 70℃冰箱保存 3a,手术完整切除的先天性胫骨假关节 .将冷冻的胫骨周围病变软组织修切 1 mm× 1 mm× 1 mm小块数粒 ,投入 40 g· L-1戊二醛 ,0 .1 mol· L-1磷酸缓冲液 (p H7.4)前固定 4h,磷酸缓冲液漂洗 ;1 0 g· L-1四氧化锇 ,0 .1 mol· L-1磷酸缓冲液后固定 2 h,磷酸缓冲液漂洗 .常规丙酮脱水 ,Epon81 2包埋 ,LKB NOVA型超薄切片机切片 ,电子染色 ,JEM- 2 0 0 0 EX电镜观察并拍照 .2　结果　先天性胫骨假关节为一种起源于骨膜的纤维瘤病(CPT) .电镜下细胞呈梭形、星形或不规则形 ,散布于胶原纤维…     

亚低温对大鼠脑损伤后脑保护作用

实验资料　健康雄性SD大鼠 (医动字B0 8 0 0 5号 ,由西安交通大学实验动物中西提供 ) 4 5只 ,体质量 2 5 0～ 30 0g ,随机分为假手术组、损伤组和亚低温治疗组 3组 ,每组各 15只 .以5 0g·L-1氯胺酮 80～ 10 0mg·kg-1腹腔内注射 ,将麻醉后的大鼠俯卧固定于自制的简易落体致伤装置 ,参照Feeney法将顶部皮肤矢状切开 ,在“人”字缝前 3mm ,中线右 3mm顶部颅骨钻孔并扩大骨窗 (直径 5mm) ,不越过中线 ,暴露硬膜 ,将底面直径 3mm的致伤撞垫轻轻置于骨窗中央的硬膜上 ,用 2 0g重物自 4 0cm高处沿滑杆垂直落下打击撞垫 (冲击力为 80 0g·cm-2…     

大孔吸附树脂法分离纯化山茱萸总皂苷

目的 :研究并优化大孔树脂法分离纯化山茱萸总皂苷 .方法 :70 0mL·L-1乙醇提取后 ,上HPD 3 0 0型大孔吸附树脂 ,水洗后分别用 3 0 0mL·L-1,5 0 0mL·L-1,70 0mL·L-1乙醇洗脱 ,考察大孔树脂富集、纯化山茱萸总皂苷的吸附性能和洗脱参数 ,并与常规溶剂提取法相对照 .结果 :山茱萸总皂苷富集于 5 0 0mL·L-1乙醇洗脱液部分 ,洗脱剂用量为上柱样品液的 8倍 ,洗脱率达 81 8% .大孔树脂法与常规溶剂法提取山茱萸总皂苷的得率分别为 2 4 9% ,2 19% .结论 :采用大孔吸附树脂可较好地纯化山茱萸总皂苷     

光固化树脂修复楔状缺损138例的疗效分析

楔状缺损是一种较常见的牙体非龋性疾病 ,本文应用玻璃离子垫底光固化树脂修复楔状缺损 ,临床效果如下。1　材料与方法1 1　病例选择选择楔状缺损患者 183例 ,共 4 32颗患牙。其中 ,男性 4 7例 ,女性 36例。年龄最大 6 9岁 ,最小 2 2岁。前牙 176例 ,前磨牙及磨牙 2 5 6例。选择的患牙均无龋坏 ,无充填体 ,无牙周疾病 ,牙髓活力正常。1 2　材料及设备选用玻璃离子 (上海青浦齿科材料厂 ) ,美国 3M公司F 2 0 0 0光固化树脂 ,BAYER 35型光固化机。1 3　修复方法清除病损区牙石、软垢、菌斑、色素 ,用 75 %酒精棉球清洗、消毒、隔湿 ,无油压…     

小鼠睾丸中神经激肽B受体(NK3r)的免疫组织化学

1　材料和方法1.1　材料　雄性成年 BAL B/ c小鼠 6只 ,体质量 2 5～ 2 8g.以颈椎脱臼法处死后立即取材 ,用 9g· L- 1 生理盐水迅速冲洗干净置入 40 g· L- 1 多聚甲醛固定 2 4h,再浸入含 30 0 g·L- 1蔗糖的缓冲液中浸泡 4℃过夜 ,包埋剂包埋后恒冷箱切片 ,分两套收集 ,片厚 4μm,贴于涂明胶载玻片上室温晾干 .1.2　方法　经 30 m L· L- 1 的甲醇双氧水封闭 30 min后 ,第一套切片按照 ABC法进行染色 :1进兔抗神经激肽 B受体 [1 ](1∶ 5 0 )染色 12～ 2 4h;2 Biotin标记的山羊抗兔 Ig G抗体(DAKO 1∶ 40 0 )染色 6～ 8h;3 Avidin…     

选择性釉质酸蚀结合自酸蚀粘结对釉质粘接剪切强度的影响

目的 评估选择性釉质酸蚀结合自酸蚀粘接、全酸蚀和自酸蚀粘接3种不同粘结系统对釉质粘接树脂的剪切强度影响.方法 在30颗无龋坏离体人磨牙分别制备60个牙釉质粘接界面试件,随机分为3组,每组10颗牙,第1组用35％磷酸预处理牙釉质结合可乐丽菲露SEbond粘接;第2组用35％磷酸和3M Singlebond2粘接;第3组用可乐丽菲露SEbond粘接.各试件在37℃生理盐水进行浸泡24 h,分别进行牙釉质抗剪切强度的测试.结果 3组剪切强度两两比较,P＜0.05,有统计学意义;第1组粘接强度明显好于第3组(P＜0.05),提示磷酸预酸蚀釉质处理后再联合使用自酸蚀粘接系统可大大提高粘接强度.结论 选择性釉质酸蚀结合自酸蚀可以显著提高树脂与牙釉质的粘接强度.     

反相高效液相色谱法测定盐酸西替利嗪的血药浓度

目的　建立测定人血清中西替利嗪浓度的反相高效液相色谱法。方法　以羟嗪为内标 ,样品用乙酸乙酯提取两次。提取液用氮气吹干 ,残留物用 1. 7%磷酸复溶后进样分析。采用Shim packCLC ODS柱 (15 0mm× 6mm ,i d ,5 μm) ,0 0 2mol·L-1磷酸二氢钠—甲醇 (40∶6 0 ,V/V)为流动相 ,流速 1 2ml·min-1;检测波长 2 2 9nm。结果　在 2 0～ 10 0 0 μg·L-1范围内 ,西替利嗪血药浓度与色谱峰高比线性关系良好 ,r =0 . 9999(n =7,P <0 . 0 0 1) ,最低检测限为 4 μg·L-1。平均回收率为 99. 80 % ,日内RSD≤ 4 .83% (n =4 ) ,日间RSD≤ 4 . 93% (n =5 )。结论　本方法简便、灵敏、结果准确、重现性好 ,适用于西替利嗪药代动力学研究和临床血药浓度测定。     

环氧树脂半薄切片的多色性染色方法

0　引言　现有的半薄切片多用甲苯胺蓝 [1 ] 及碱性复红染色 ,但在观察时往往组织结构、细胞核及细胞质分辨不够清楚 .此法是在半薄切片染色改良法 [2 ] 的基础上 ,经反复实验 ,进一步改进而成的 .本法操作简单 ,染色效果良好而且着色均匀 ,组织结构清晰 ,适用于电子显微镜超薄切片的准确定位 .1　材料和方法1.1　材料　 10 .2 m ol· L- 1 磷酸二氢钠缓冲液 10 0 m L ,用0 .1mol· L- 1 Na OH调 p H=7.2 . 2 10 g· L- 1 次甲基蓝溶液 :次甲基蓝 1g,加蒸馏水至 10 0 m L. 30 .5 g· L- 1 碱性复红溶液 :碱性复红 0 .0 5 g,硼砂 0 .2 5 …     

冠状动脉小支架置入术对血小板功能及临床疗效的影响

目的　通过术中采集冠状静脉窦血的方法 ,探讨冠状动脉内小支架置入术对冠脉循环中血小板功能的影响及临床应用的可行性 .方法　 39例冠心病患者经冠状动脉造影证实至少有一支血管狭窄大于等于 5 0 % (直径法 ) ,术前进行充分抗血小板治疗后 ,按置入的支架大小分成直径在 2 .5～2 .75 mm之间的小冠脉支架组 (15例 )和支架直径在 3.0～ 4.5 mm之间的对照组 (2 4例 ) ,分别于术前、术中及术后 1min和 10 m in采集冠状静脉窦血 ,放免法测定血浆血小板 α-颗粒膜蛋白 (GMP- 140 )及血栓素 B2 (TXB2 )的浓度 .术后随访 6mo,比较两组的临床疗效 .结果　两组在球囊预扩张后即刻各血小板功能指标均轻度增高 ;支架置入后即刻小支架组GMP- 140由术前的 (7.5 5± 0 .36 ) μg· L- 1升至 (9.83± 0 .78)μg· L- 1 (P<0 .0 5 ) ,对照组由 (7.5 1± 0 .34 )μg· L- 1 升至(9.6 0± 0 .38)μg· L- 1 (P<0 .0 5 ) ;小支架组 TXB2 由术前的(2 47± 2 7) ng· L- 1 升至 (399± 2 3) ng· L- 1 (P<0 .0 1) ,对照组 TXB2 由 (2 33± 17) ng· L- 1升至 (385± 19) ng· L- 1 (P<0 .0 1) ;支架后 10 min两组 GMP- 140降至术前水平 ,TXB2 有下降趋势 .两组组间比较各个时间点血小板活性变化趋势一致 ,均无差异 .两组围手     

菌斑下窝沟龋的初步观察

研究菌斑下窝沟龋的发生对防龋很有意义,本文试图用整体牙磨片法观察菌斑下早期窝沟龋,并对窝沟形态与龋损部位关系作初步探讨。1 材料与方法1.1 牙齿标本:收集完整拔除的阻生智齿70颗,离体牙咬合面用菌斑显示剂检查阳性,置10％福尔马林中备用。1.2 整体牙磨片制备:通过菌斑染色最深的咬合面纵剖牙体成 2mm牙片,常规脱水浸腊后,刮去牙片两侧表面石腊,将牙片磨