肝病患者中丙型肝炎病毒感染的免疫组化检测

以ＨＣＶＮＳ３区单克隆抗体、ＬＳＡＢ法检测了１１６例各类肝病肝组织（其中肝细胞癌５２例，肝炎后肝硬化１６例，慢性肝炎４０例，体质性黄疸８例）及６份正常肝组织（作为对照）中ＨＣＶ抗原的表达状况，结果表明，ＨＣＶ抗原在肝细胞癌、肝炎后肝硬化及慢性肝炎中检出率分别为１３．５％（７／５２）、１２．５％（２／１６）、１０％（４／４０），而在体质性黄疸及正常肝组织中未检出ＨＣＶ抗原。ＨＣＶ抗原可见于癌细胞或癌周肝细胞的胞浆或胞核中，实验结果支持ＨＣＶ与肝细胞癌的关联，ＨＣＶ感染对促使肝病的加重也具有一定影响。肝细胞癌中，胞核型ＨＣＶ抗原表达较多见。癌周组织中ＨＣＶ抗原检出率高于癌组织，提示ＨＣＶ可能主要作用于癌前病变，在肝细胞癌发生的初始阶段起作用，促使正常细胞恶性化。     

HGV/GBV-C感染在肝细胞损伤中的作用探讨

目的 研究单一ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ感染者肝组织中该病毒核酸定位及相关抗原表达,探讨ＨＣＶ／ＧＢＶ－Ｃ感染在肝细胞损伤中的作用。方法 １２例单一ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ感染者经肝穿获得取肝组织常规病理诊断,采用地高辛标记探针原位杂交法检测病毒ＲＮＡ,并用免疫组织化学法检测病毒相关抗原表达。结果 病理诊断急性肝炎８例,慢性肝炎４例。ＨＧＶ／ＧＢＶ－ＣＮＳ５抗原检出阳性率为６６．６７％（８／１２）,阳性信号主要     

重型病毒性肝炎肝组织内丙型肝炎病毒抗原表达的研究

目的：研究重型肝炎肝组织内丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗原表达及特点，探讨ＨＣＶ感染在重型肝炎发生中的地位和作用。方法：用免疫组化法检测２０例重型肝炎组织内ＨＣＶ抗原。结果：肝组织内ＨＣＶ抗原表达阳性率４５％（９／２０），其中慢性重型肝炎６０％（６／１０），亚急性４２．９％（３／７），急性０％（０／３），ＨＣＶ抗原仅在肝细胞内表达，可呈胞浆均质型、包涵体型和膜下型，９例肝组织ＨＣＶ抗原表达阳性患者均混合     

丙型肝炎病毒C33c抗原、核心抗原和HBxAg在人原发性肝内胆管细胞癌中的分布及意义

目的：研究丙型肝炎病毒Ｃ３３ｃ抗原及核心抗原在人肝内胆管细胞癌中的分布及意义。方法：以免疫组织化学方法检测ＨＣＶ两种抗原及ＨＢｘＡｇ在肝内胆管细胞癌及癌旁肝组织中定位及分布。结果：ＨＣＶＣ３３ｃ抗原位于癌细胞或肝细胞的胞浆内；ＨＣＶ核心抗原在癌组织主要呈核阳性，在癌旁肝以胞浆阳性为主。ＨＣＶＣ３３ｃ抗原在癌组织及癌旁肝的阳性率分别为６０％（２１／３５）及１００％（２１／２１），ＨＣＶ核心抗原在上述两种组织的阳性率分别为８７．８％（２９／３３）及６１．９％（１３／２１）；ＨＢｘＡｇ在两种组织中检出率分别为７４．３％（２６／３５）及７６．２％（１６／２１）．Ｃ３３ｃ及ＨＢｘＡｇ双阳性分别为４８．６％（１７／３５）及７６．２％（１６／２１）．结论：除ＨＢＶ感染外，ＨＣＶ感染在人肝内胆管细胞癌的发生中可能起重要作用     

庚型肝炎病毒抗原在急性重型肝炎患者肝组织中的表达及意义

目的：探讨急性重型肝炎患者肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的存在状况及其与发病的关系；方法：采用免疫组化方法以抗－ＨＧＶ ＮＳ５单克隆抗体对２７例急性重型肝炎患者尸检肝组织中的ＨＧＶ等抗原进行了检测；结果：２７例肝组织中检测出ＨＧＶ ＮＳ５阳性６例（２２．２％）。ＨＧＶ ＮＳ５Ａｇ阳性着色颗粒表达于残存的肝细胞胞浆内，阳性细胞呈片簇状分布于汇管区周围。６例中４例重叠有ＨＧＶ或／和ＨＣＶ感染，肝组织中     

人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶在肝细胞癌中的表达

应用免疫组织化学ＳＰ法,对正常肝组织、慢性肝炎、肝硬化、癌旁肝硬化和肝细胞癌共１２１例进行人胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ－π）和甲胎蛋白（ＡＦＰ）的检测。结果：正常肝组织ＧＳＴ－π和ＡＦＰ均不表达;慢性肝炎ＧＳＴ－π阳性率为２５％（５／２０）,ＡＦＰ为阴性;肝硬化ＧＳＴ－π阳性率为１９％（５／２７）,ＡＦＰ为阴性;癌旁肝硬化ＧＴＰ－π阳性率为５２％（１４／２７）,ＡＦＰ阳性率为３３％（９／２７     

丙型肝炎患者肝组织中病毒抗原检测

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗原在患者肝组织中的分布状况及其相互关系。方法采取免疫组织化学方法，用多克隆抗－ＨＣＶ和单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３、抗－ＨＣＶ－ＮＳ５，对１０７例ＨＣＶ感染患者肝组织中ＨＣＶ抗原进行检测。结果应用三种抗体均从ＨＣＶ患者肝组织中检出相应抗原，检出率分别为３８．３％，２８．０％和５２．３％；阳性颗粒定位于肝细胞浆；阳性细胞分布呈散在、弥漫状和簇状；ＨＣＶ－ＮＳ３的表达与炎症反应无明显解剖学关系，ＨＣＶ－ＮＳ５阳性细胞较常见位于炎症灶旁或灶中。结论ＨＣＶ各成分在肝组织中的表达水平存在差别；ＨＣＶ－ＮＳ５的表达可能与ＨＣＶ的致病机制有关。     

抗－HCV IgM检测方法的建立及初步临床应用

用一种简单的改良抗－ＨＣＶ免疫检测法检测抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ。３９例丙型肝炎中１７例抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ阳性，其中急性肝炎９例，慢性肝炎组５例，肝硬化组例３例。对照组的急性甲肝、急性乙肝、健康献血员无１例阳性；急性丙肝在临床症状出现时抗－ＨＣＶＩｇＭ、抗－ＨＣＶ　ＩｇＧ的阳性率分别为５０．０％（８／１６）、４３．８％（７／１６），慢肝、肝硬化组中５例抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ持续高水平出现，病情反复，一过性抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ阳性者病情稳定或缓解。结果提示，抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ可作为病情活动性指标，有助于近期ＨＣＶ感染的早期诊断。     

肝细胞癌组织中P16蛋白表达与丙型肝炎病毒感染的关系

目的：研究肝细胞癌（Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＨＣＣ）组织中Ｐ１６蛋白表达与丙型肝炎病毒（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃｖｉｒｕｓ,ＨＣＶ）感染的关系。方法：用免疫组化ＡＢＣ法检测４６例ＨＣＣ及其癌旁肝组织中Ｐ１６蛋白和ＨＣＶ抗原的表达。结果：Ｐ１６蛋白的阴性表达率在ＨＣＣ癌组织（５８．７％,２７／４６）明显高于其癌旁组织（３６．８％,１４／３８）（Ｐ〈０．０５）,在Ｅｄｍｏｎｄｓ     

慢性肝病患者肝组织中庚型肝炎病毒NS5抗原的检测

目的了解慢性肝病患者肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的存在状况。方法采用免疫组织化学方法,用抗ＨＧＶＮＳ５单克隆抗体对１１０例血清学病毒标记非甲非戊、乙型及丙型肝炎的慢性肝病患者肝组织中的ＨＧＶ抗原进行了检测。结果ＨＧＶ的总检出率为３２７％（３６／１１０）,非甲非戊、乙型及丙型肝炎病毒的检出率分别为２１％（４／１９）、３６％（２５／６９）及３２％（７／２２）;活动性肝硬化、原发性肝癌及慢性重型肝炎中ＨＧＶ的检出率为２２％（１０／４５）、４３％（２０／４７）及３３％（６／１８）,不同血清病毒标志组或病理类型之间其检出率差异均无显著意义（χ２＝４３１,１．５２;Ｐ＞０１０,Ｐ＞０２５）。ＨＧＶＮＳ５Ａｇ主要于肝细胞或癌细胞胞浆内表达,阳性肝细胞呈弥漫或大片灶状分布,免疫组织化学双标记染色显示ＨＢｓＡｇ或丙型肝炎（ＨＣＶ）ＮＳ３Ａｇ阳性细胞呈单个或小片灶状,多与ＨＧＡｇ阳性细胞位于同一区域内,或在同一肝细胞内表达。结论在慢性肝病患者肝组织中ＨＧＶ的感染较为常见     

肝细胞癌组织中丙肝病毒抗原及HBsAg的免疫组化检测

为了解丙肝病毒（ＨＣＶ）感染与我国肝细胞癌（ＨＣＣ）之间的关系，以及ＨＣＶ抗原成分（ＨＣＡｇ的）在ＨＣＣ组织中的分布状况，应用鼠抗ＨＣＶ单克隆抗体，采用免疫组化技术检测ＨＣＣ组织中ＨＣＡｇ的表达，同时检测了乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。结果：４０只ＨＣＣ标本组织中ＨＣＡｇ，ＨＢｓＡｇ检出率分别为１７．５％（７／４０）和７０％（２８／４０），其中单一ＨＣＡｇ阳性者仅１例，ＨＣＡｇ和ＨＢｓＡｇ同时存     

丙型肝炎抗原在肝炎、肝癌组织中的表达

肝细胞癌手术标本３０例及肝炎肝穿刺标本１５例，作丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）免疫组化研究。第一抗体为ＨＣＶ核心抗原单克隆抗体；检测系统为ＡＢＰＡＰ法。结果肝癌组５例（１７％）、肝炎组３例（２０％）阳性；总阳性率１８％。阳性信号为散在性，胞浆型。肝癌组阳性的５例均见癌旁组织阳性，其中３例同时有散在性癌细胞表达。     

分泌抗丙型肝炎病毒NS5a蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立及应用

制备抗丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）－ＮＳ５ａ重组蛋白的单克隆抗体（单抗），并探讨其在临床诊断中的应用价值。方法通过常规细胞融合技术制备分泌单抗的杂交瘤细胞株，用含该杂交瘤细胞的腹水对石蜡包埋肝组织细胞中的ＨＣＶ－ＮＳ５ａ抗原进行免疫组化测定，同时用抑制法检测６７例丙肝血清中的ＨＣＶＮＳ５ａ和ＮＳ３抗体分布，并与ＮＳ３单抗的结果进行比较。结果融合后的阳性克隆中筛选出４株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株，命名为８Ｂ２，６Ｆ１１，４Ｃ６和７Ｄ９。这４株单抗与ＮＳ５ａ抗原有良好的反应性；与ＨＣＶ核心区多肽，ＮＳ３区表达多肽及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的表面抗原均无反应。免疫组织化学检测显示，在ＨＣＶ感染肝组织中，ＮＳ５ａ抗原阳性占５４．９％（１７／３１），而ＮＳ３抗原阳性占５１．６％（１６／３１），抗原分布多呈包涵体分布，少数病例为胞浆型，１例ＮＳ５抗原呈核型表达。在６７例抗ＨＣＶ阳性血清中，ＮＳ５抗体阳性４０例，占５９．７％，而ＮＳ３阳性４７例，占７０％。结论此法制备的单抗有强特异性，在开展ＨＣＶ免疫组织化学研究上具有广阔应用前景。     

乙肝病毒X基因与人肝细胞癌关系的研究

目的 探讨乙肝病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因与肝癌发病的关系，为从分子水平上研究肝癌病因提供有关信息。方法 采用ＰＣＲ技术对ＨＢＶ不同状态的１０２例原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）、３６例肝硬化（ＬＣ）及２８例慢性肝炎（ＣＨ）血清中ＨＢＶＸ基因进行了检测。结果 在ＨＢＶ５项标志均阴性的５３例ＰＨＣ检出Ｘ基因２０例（３７．７％），３１例ＬＣ中检出５例（１６．１％），１１例ＣＨ中检出２例（１８．２％）。所有ＨＢＶ Ｘ基     

肝细胞癌组织中丙型肝炎NS3蛋白对P53蛋白表达的影响

目的探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３蛋白对Ｐ５３蛋白表达的影响及其在肝癌发生中的作用。方法用免疫组织化学技术检测４７例乙型肝炎病毒阴性的ＨＣＣ及其癌旁肝组织中ＨＣＶＮＳ３蛋白和Ｐ５３蛋白的表达。结果ＨＣＶＮＳ３蛋白在ＨＣＣ中的阳性率（６２％）明显低于癌旁肝组织（８３％）,Ｐ＜００２５。癌组织中其表达强度与癌细胞分化程度呈相关性（Ｐ＜００２５）。Ｐ５３蛋白在癌组织中的阳性率（８１％）明显高于癌旁组织（４７％）,Ｐ＜００２５;癌细胞分化愈差,表达愈强（Ｐ＜００５）;癌组织中Ｐ５３蛋白表达与ＨＣＶＮＳ３蛋白的表达无相关性（Ｐ＞０５）,而癌旁肝组织中两者表达呈显著相关性（Ｐ＜００１）,ＨＣＶＮＳ３蛋白阳性患者中Ｐ５３蛋白表达明显高于ＨＣＶＮＳ３阴性病例,Ｐ＜００５。结论ＨＣＶＮＳ３蛋白可能是在肝细胞转化早期通过内源性机制间接作用于Ｐ５３基因使其突变导致肝细胞癌变。     

肝细胞癌组织中丙肝病毒抗原及HBsAg的免疫组化检测

为了解丙肝病毒（ＨＣＶ）感染与我国肝细胞癌（ＨＣＣ）之间的关系,以及ＨＣＶ抗原成分（ＨＣＡｇ的）在ＨＣＣ组织中的分布状况,应用鼠抗ＨＣＶ单克隆抗体,采用免疫组化技术检测ＨＣＣ组织中ＨＣＡｇ的表达,同时检测了乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。结果：４０例ＨＣＣ标本组织中ＨＣＡｇ、ＨＢｓＡｇ检出率分别为１７．５％（７／４０）和７０％（２８／４０）,其中单一ＨＣＡｇ阳性者仅１例,ＨＣＡｇ和ＨＢｓＡｇ同时存在的检出率为１５％（６／４０）。镜下见ＨＣＡｇ呈细颗粒状分布于细胞胞浆,ＨＣＡｇ阳性细胞以局灶型分布为主。提示我国部分肝癌患者的癌组织中确实存在ＨＣＶ,ＨＣＶ感染可能是除乙肝病毒以外,导致我国ＨＣＣ发生的另一相关因素。     

新型病毒TTV与乙型肝炎病毒混合感染的初步探讨

了解新型肝炎病毒ＴＴＶ与乙型肝炎病毒混合感染对肝脏病变及ＨＢＶ复制状态的影响。方法套式聚合酶反应检测乙型肝炎患者血清ＴＴＶＤＮＡ并对检测结果和临床资料进行统计学分析,结果１７７例慢性ＨＢＶ感染者中３２例ＴＴＶＤＮＡ阳性,阳性率１８．１％,其中无症状携带者５／５２（９．６％）,慢性肝炎７／４６（１５．２％）,重型肝炎９／３９（２３．１％）,活动性肝硬化９／４０（２２．５％）,各组间无统计学差异;在慢     

乙型肝炎患者血清抗：HCV临床意义探讨

应用第二代抗─ＨＣＶ酶免疫试验检测了１９４例各型乙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒抗体（抗─ＨＣＶ），结果抗─ＨＣＶ阳性率为２３．２％，其中，重型肝炎（ＳＨ）者为４４．４％、原发性肝癌（ＰＨＣ）者为３７．５％、肝硬化（ＣＩＲ）者为３６．６％、慢活肝（ＣＡＨ）者为２６．１％、慢迁肝（ＣＰＨ）者为１６．７％、急性肝炎（ＡＨ）者为７．１％、无症状ＨＢｓＡｇ携带者（ＡＳＣ）的为６．７％，提示肝病越严重，其抗─ＨＣＶ的阳性率就越高。还发现重叠感染ＨＣＶ的乙型肝炎患者之ＨＢＶ复制率较低。     

丙型肝炎病毒感染成年树的实验研究

目的：探讨成年树（Ｔｕｐａｉａ）感染ＨＣＶ的可能性。方法：用ＨＣＶＲＮＡ阳性人血清接种１０只健康成年Ｔｕｐａｉａ。观察临床表现；定期检测血清ＡＬＴ和ＨＣＶＲＮＡ正、负链；检测肝组织中ＨＣＶ３种抗原和负链ＨＣＶＲＮＡ；行肝组织病理检查。结果：Ｔｕｐａｉａ接种阳性血清后，１０例均出现不同程度的肝炎症状；１０例血清ＡＬＴ升高，其中３例在２８周时仍高于正常；６例肝组织中ＨＣＶ抗原持续阳性，持续时间大于２８周；１０例出现急性肝炎的肝组织病理学变化，其中４例有慢性肝炎病变。检测４只动物血清的系列标本，ＨＣＶＲＮＡ均呈间歇性阳性；检测３只动物肝组织负链ＨＣＶＲＮＡ均为阳性；检测１例动物肝外组织，其中心肌细胞、胰岛细胞和肾小管上皮细胞中有ＨＣＶ３种抗原染色阳性信号。结论：ＨＣＶ能够感染成年Ｔｕｐａｉａ，并可形成慢性病变，感染率约为６０％，慢性病变发生率约为４０％。Ｔｕｐａｉａ可作为研究丙型肝炎的实验动物     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。