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1.
目的研究用微载体培养人肝细胞及肝非实质细胞的方法.方法采用体外简易两步灌流和差速离心法获取胎肝细胞和肝非实质细胞,在综合限定条件下进行微载体cytodex3粘附培养,并对培养肝细胞的形态及合成葡萄糖和白蛋白的功能进行动态测定.结果分离肝细胞及肝非实质细胞在接种时即呈明显的聚集倾向,将其与微载体混合振荡孵育20min后,二者极易相粘附.在被覆聚羟乙基异丁烯酸的培养瓶内,使用激素限定条件培养液培养约48h,典型的多细胞聚集球形体得以形成.该形态特征以及白蛋白、葡萄糖合成能力可保持1月结论使用微载体培养人肝细胞和肝非实质细胞具有多种优点,有广泛的应用价值. 相似文献
2.
3.
输血后丙型肝炎早期抗体应答规律的观察 总被引:4,自引:0,他引:4
应用合成肽酶联免疫吸附试验(ELISA)和重组免疫印迹试验(RIBA),动态观察了10例输血后肝炎(PTH)患者丙型肝炎病毒(HCV)感染早期(输血后36~38周)的抗体应答规律,发现9例血清抗HCV阳性,其中8例HCV-RNA阳性。核心(C)抗体检出率高,其出现时间比非结构(NS)区抗体提前1~3周。C区合成肽抗体;lgM比lgG提前1~4周检出,其检出的吸光值与血清ALT(GPT)水平呈显著正相关(P<0.01)。同时发现3例存在抗HCV“被动输入”。研究表明,本地区PTH患者多由HCV感染所致。检测C区抗体IgM不仅有助于早期诊断,而且可反映HCV活动性感染。 相似文献
4.
目的探讨腹腔移植微载体粘附培养人肝细胞对D氨基半乳糖(DGal)诱导的急性肝衰竭小鼠的保护作用.方法采用胶原酶灌流法分离人肝细胞,胶原被覆的微载体Cytodex3加以培养,经腹腔注射2×106个肝细胞及载体,观察急性肝衰竭小鼠(n=32,25g/kgDGal诱导4h)72h存活率、血清ALT、总胆红素以及肝脏病理变化.结果与只接受微载体而无粘附肝细胞的对照组比较,腹腔移植培养肝细胞对肝衰竭小鼠的存活率有明显改善(65%vs0%),其血清ALT(IU/L,21744±2630vs42631±4928,P<005)及总胆红素(mmol/L,2691±376vs4168±383,P<005)较低.肝组织病理改变较轻.结论腹腔移植微载体粘附培养肝细胞可提供代谢支持,使DGal损伤的小鼠肝功能恢复. 相似文献
5.
大鼠肝细胞的简易分离与聚集培养 总被引:3,自引:1,他引:3
大鼠肝细胞的简易分离与聚集培养王英杰,李梦东,王宇明,丁健培养肝细胞作为理想的体外模型,在肝病研究中日益发挥着重要作用,但经典胶原酶原位灌流法技术难度大,普遍单层法培养的肝细胞存活时间短,故在一定程度上限制了肝细胞培养的广泛开展。鉴此,我们采用体外简... 相似文献
6.
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8.
目的 探讨丙型肝炎患者保护性免疫缺陷的原因 .方法 根据 HCVC区和 NS4区基因序列设计并人工合成 3条合成肽 ,采用抗原捕捉酶联免疫吸附试验检测 HCV感染者血清中抗 - HCV Ig G抗体轻链κ/λ比值 .同时以正常人血清做对照 .结果 抗 - HCV SP42 ,CP10和 CP9抗体轻链的表达呈明显的偏斜 ;116例抗 - HCV阳性者中 113例 (97.41% ) ,抗 - HCV Ig G抗体轻链κ/ λ比值偏高 .所有病例追踪观察 1a(其中 11例抗 - HCV阳性者随访 2 a) ;30例患者接受 α-干扰素治疗 ,发现抗 - HCV抗体 κ/ λ比值恒定不变 .结论 HCV感染者抗 - H… 相似文献
9.
应用放射免疫沉淀法测定182例各型肝炎、肝硬化、HBsAg慢性携带者,以及40例其他疾病患者血清中抗肝细胞膜特异性脂蛋白抗体(简称抗-LSP)。重型肝炎的抗-LSP阳性率最高,占93.75%(15/16),慢性活动性肝炎次之,占83.67%(41/49),急性肝炎占66.15%(43/65),慢性迁延性肝炎占63.64%(14/22),肝硬化占55%(11/20),HBsAg慢性携带者占10%(1/10),其他疾病组占5%(2/40)。本文提示,检测抗LSP对判定急性肝炎的转归有一定的意义;慢性肝炎时抗-LSP水平升高有助于慢性活动性肝炎的诊断。 相似文献
10.