EB病毒在原发性扁桃体弥漫大B细胞淋巴瘤（PTDLBCL）中的表达及其临床意义

 目的  探讨EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)在原发性扁桃体弥漫大B细胞淋巴瘤(primary tonsillar diffuse large B cell lymphoma,PTDLBCL)内的感染情况及其临床病理学意义。方法  采用EBV编码微小RNA(EBV encoded miRNA,EBERs)原位杂交(in situ hybridization,ISH)和EBV潜伏膜蛋白1 (latent membrane protein 1,LMP1),PCR检测EBV在PTDLBCL (n=81)和原发性非扁桃体弥漫大B细胞淋巴瘤(primary non tonsillar diffuse large B cell lymphoma,PNTDLBCL) (n=42)、鼻腔NK/T细胞淋巴瘤(n=10)及慢性扁桃体炎(n=20)中的感染情况,并分析差异。结果  ISH结果显示,PTDLBCL中EBV的阳性率高于PNTDLBCL (t=5.603,P=0.018)。检测PTDLBCL中EBV,PCR阳性率显著高于ISH (t=11.139,P=0.001)。EBV阳性PTDLBCL者预后优于阴性者 (t=5.683,P=0.017);与患者年龄、部位及性别的差异无统计学意义。结论  EBV在PTDLBCL中高表达,其存在与患者预后正相关。检测PTDLBCL的EBV,LMP1 PCR的敏感度高于EBERs ISH,而EBERs ISH的特异度高于LMP1 PCR。     

中线T细胞淋巴瘤的免疫表型及其与EB病毒感染的相关性

目的:探讨中线T细胞淋巴瘤(MTL)的免疫表型特征及其与EB病毒(EBV)感染的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测41例MTL组织CD45RO、CD3ε、CD56、CD20、TIA-1、Granzyme B以及EBV潜伏膜蛋白(LMP-1)的表达,原位杂交技术检测EBV转录产物RNA(EBER1/2)。结果:①CD45RO阳性41例(100%),CD3ε、TIA-1阳性25例(60.98%),Granzyme B阳性22例(53.66%),CD56阳性21例(51.22%),CD20全部阴性。②EBER1/2阳性29例(70.73%),LMP-1阳性17例(41.46%);NK/T细胞淋巴瘤(21/25)明显高于外周T细胞淋巴瘤(8/16)的EBER1/2阳性表达(P<0.05)。结论:MTL以NK/T细胞淋巴瘤为多见,EBV感染与MTL关系密切,EBV感染率与MTL的免疫表型有关,EBV感染在MTL的发生发展中可能起重要作用。     

免疫表型分型结合FISH检测自然杀伤细胞淋巴瘤细胞的染色体畸变

目的：检测自然杀伤(NK)细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。方法：采用免疫表型分型结合荧光原位杂交(FISH)技术,在单细胞水平检测了3倒NK细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。结果：在该3例中,克隆性的染色体畸变仅见于CD56 细胞,左CD3 细胞和CD5 细胞中束发现相应染色体畸变。结论：实验表明,NK细胞淋巴瘤中,含有染色体畸变的肿瘤细胞局限于CD56 、CD3-和CD5-的NK细胞群,NK细胞淋巴瘤可能来源于成熟的NK细胞而非T淋巴细胞。     

EB病毒与上呼吸道NK/T细胞淋巴瘤的关系

目的:研究上呼吸道NK/T细胞淋巴瘤的病理及免疫表型特征,探讨EB病毒(EBV)感染和上呼吸道NK/T细胞淋巴瘤发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测47例上呼吸道NK/T细胞淋巴瘤中有关免疫表型CD20、CD3、CD79a、细胞毒颗粒相关抗原-1(TIA-1)、CD56、CD45RO、颗粒酶B(Granzyme B),以此确定上呼吸道NK/T细胞淋巴瘤细胞免疫表型及EBV潜伏蛋白(LMP-1),原位杂交技术检测EBV编码的RNA(EBER 1/2)。结果:CD3、CD56、CD45RO、Granzyme B阳性表达率达100.0%,EBER阳性表达率达87.2%;LMP-1阳性表达率为40.4%。结论:感染EBV与上呼吸道NK/T细胞淋巴瘤的发生、发展有密切关系。     

Features of intestinal T-cell lymphomas in Chinese population without evidence of celiac disease and their close association with Epstein-Barr virus infection

Background Intestinal T-cell lymphoma (ITCL) is a heterogeneous lymphoid neoplastic group with variable clinical and pathological features. ITCL in oriental countries is different from enteropathy-type intestinal T-cell lymphoma (ETCL) in relation to celiac disease and Epstein-Barr virus (EBV). The objective of this study was to investigate the clinicopathological features, immunophenotype, expression of cytotoxic molecule (TIA-1), T-cell receptor (TCR)-γ gene rearrangement, and Epstein-Barr virus (EBV) latent infection in primary ITCL without celiac disease in Chinese.Methods The clinical data of 42 patients were analyzed, and the patients were followed up. Compared with human reactive lymphoid tissues, in situ hybridization for EBER1/2, polymerase chain reaction for TCR-γ gene rearrangement, and immunohistochemical staining for immunophenotypes, TIA-1 and EBV latent membrane proteins (LMP-1) were investigated. Survival curves of different clinicopathological features, immuno-phenotypes, expression of LMP1, TCR-γ gene rearrangement and therapy were analyzed.Results Three fourths of the patients suffered from ITCL in China were men with a peak age incidence in the 4th decade. Common presenting features included fever and hemotochezia. The prognosis was poor with a median survival of 3.0 months. The lesions were mostly localized in the ileocecum and colon. About 38/42 (90.5%) patients demonstrated pleomorphic medium-sized on large cells. Histological features of celiac disease were rarely seen. All 42 patients with ITCL revealed CD45RO positive. Neoplastic cells partially expressed T-cell differentiated antigens (CD3ε, CD4, CD8) and NK cell associated antigen (CD56). The positive frequency of CD3ε, CD4, CD8 and CD56 was 28/42 （66.7%）, 7/42 （16.7%）, 10/42 （23.8%） and 12/42 （28.6%） respectively. Thirty-nine cells (92.9%) expressed TIA-1, but none expressed CD20 and CD68. More than half of the patients (64.3%, 64.3% and 59.5%) revealed TCR-γ gene rearrangement by three different TCR-γ primers respectively. EBER1/2 was detected in 41 (97.6%) of the 42 patients. The expression frequency of LMP-1 was 38.1% (16/42).Conclusions Primary ITCL without celiac disease in Chinese is a special highly EBV-associated clinicopathological entity. There are few similarities in patients with celiac disease in western countries. A small proportion of primary ITCLs in Chinese and extranodal NK/T-cell lymphoma of nasal type belong to the same spectrum.     

西宁地区居民鼻腔NK/T细胞淋巴瘤中细胞毒蛋白的表达及其与EB病毒感染的关系

目的 探讨西宁地区居民鼻腔NK/T细胞淋巴瘤中细胞毒蛋白的表达及其与EB病毒(EBV)感染的关系.方法 以西宁地区和西安地区鼻腔NK/T细胞淋巴瘤各55例石蜡标本为研究对象,同部位B细胞淋巴瘤20例为对照,采用免疫组织化学方法检测CD45RO、CD3、CD20、CD56、TIA-1确定肿瘤细胞的免疫表型.采用原位杂交技术检测EBV编码的mRNA(EBER).结果 西宁地区55例鼻腔NK/T细胞淋巴瘤中CD45RO阳性55例(100％),CD3阳性50例(90.9％),TIA-1阳性36例(65.5％),CD56阳性30例(54.5％),EBER阳性50例(90.9％);西安地区55例鼻腔NK/T细胞淋巴瘤中CD45RO阳性55例(100％),CD3阳性52例(94.5％),TIA-1阳性32例(58.2％),CD56阳性33例(60％),EBER阳性35例(63.6％);两地CD20均阴性.20例面部B细胞淋巴瘤中CD45RO、CD3、TIA-1、CD56均阴性,CD20均阳性,EBER阳性2例(10％).结论 西宁地区鼻腔NK/T细胞淋巴瘤中EBV感染率明显高于西安地区,提示EBV感染与西宁地区鼻腔NK/T细胞淋巴瘤的相关性更强.TIA-1对NK/T细胞淋巴瘤的标记有很好的敏感性和特异性,但无地区性.     

EB病毒在不同类型淋巴瘤中的表达及检测方法的比较

目的探讨EB病毒（EBV）在不同类型淋巴瘤中的表达差异及对用于检测EBV表达的3种实验方法（免疫组织化学、原位杂交、PCR）进行比较分析。方法收集明确诊断淋巴瘤石蜡组织57例,包括结外NK／T细胞淋巴瘤（NK／TCL）鼻型12例、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITCL）13例、霍奇金淋巴瘤（HL）12例、弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）20例,应用免疫组织化学（IHC）、原位杂交（ISH）、聚合酶链反应技术（PCR）分别检测淋巴瘤中EBV蛋白（LMP-1）、EBV潜伏相关RNA（EBERl）、EBV（DNA）的表达情况。结果57例淋巴瘤组织中EBV蛋白（LMP-1）、EBER1、EBVDNA总阳性表达率分别为17．5％（10／57）、47．4％（27／57）、50．9％（29／57）。其中NK／TCL鼻型为8．3％（1／12）、83．3％（10／12）、91．7％（11／12）;AITCL为30．8（4／13）、53．8％（7／13）、61．5％（8／13）;HL为33．3％（4／12）、41．7％（5／12）、41．7％（5／12）;DLBCL为5．00％（1／20）、25．0％（5／20）、25．O％（5／20）。PCR及原位杂交检测方法比免疫组化更敏感（P〈0．05）。结论EBV感染在不同类型的淋巴瘤中表达存在差异,3种检测方法之间的阳性表达率也不同且ISI-I和PCR检测方法优于IHC。     

鼻型自然杀伤/T细胞淋巴瘤病人肿瘤组织CD44与血管内皮生长因子的表达及意义

目的 探讨鼻型自然杀伤（NK／T）细胞淋巴瘤高度侵袭性的分子机制。方法 对17例鼻型NK／T细胞淋巴瘤病人的活检组织标本,采用免疫组织化学法检测CD20、CD43、CD45RO、CD3ε、CD44、CD56、细胞毒抗原TIA－1;原位杂交法检测血管内皮生长因子（VEGF）,碱性纤维母细胞生长因子（bFGF),EB病毒（EBV）。结果 17例鼻型NK／T细胞淋巴瘤中,12例CD3ε阳性,15例CD43／CD45RO、CD56阳性,17例TIA－1阳性,CD20均阴性,7例CD44阳性,11例VEGF弱阳性或阳性,3例bFGF弱阳性,15例EBV阳性。3例肿瘤细胞异型性明显者CD44均为阴性,7例死亡者中4例CD44阴性;VEGF在血管浸润4例中有2例阴性,7例死亡者中4例阴性;bFGF在血管浸润4例中2例阴性,7例死亡者中6例阴性。结论CD44与鼻型NK／T细胞淋巴瘤的不良预后无明显相关性;VEGF在鼻型NK／T细胞淋巴瘤的表达明显高于bFGF,其生物学意义及临床预后意义有待进一步探讨。     

淋巴母细胞性NK／T细胞淋巴瘤与EB病毒的关系

目的 探讨淋巴母细胞性NK/T细胞淋巴瘤与EB病毒的关系。方法 收集5例母细胞性NK/T细胞淋巴瘤,1例原发于鼻腔,4例原发于淋巴结。用免疫组织化学SP法确定瘤细胞本质,用原位杂交法检测EB病毒编码的RNA（EBER1/2）。结果 原发于鼻腔的1例EBER1/2呈阳性,原发于淋巴结的4例EBER1/2均阴性。EB病毒潜伏膜蛋白（LMP-1）全部阴性。结论 EBV在母细胞性NK/T细胞淋巴瘤的发生中可能具有一定作用。     

Clinicopathology, immunophenotype, T cell receptor gene rearrangement, Epstein-Barr virus status and p53 gene mutation of cutaneous extranodal NK/T-cell lymphoma, nasal-type

Background Extranodal natural killer/T-cell (NK/T cell) lymphoma,nasal-type,is a rare lymphoma.Skin is the second most common site of involvement after the nasal cavity/nasalpharynx.The aim of this study was to investigate the clinicopathologic features,immunophenotype,T cell receptor (TCR) gene rearrangement,the association with Epstein-Barr virus (EBV) infection and p53 gene mutations of the lymphoma.Methods The clinicopathologic analysis,immunohistochemistry,in situ hybridization for EBER1/2,TCR gene rearrangement by polymerase chain reaction (PCR),mutations of p53 gene analyzed by PCR and sequence analysis were employed in this study.Results In the 19 cases,the tumor primarily involved the dermis and subcutaneous layer.Immunohistochemical staining showed that most of the cases expressed CD45RO,CD56,CD3ε,TIA-1 and GrB.Three cases were positive for CD3 and two cases were positive for CD30.Monoclonal TCRY gene rearrangement was found in 7 of 18 cases.The positive rate of EBER1/2 was 100％.No p53 gene mutation was detected on the exon 4-9 in the 18 cases.Fifteen cases showed Pro (proline)/Arg (arginine) single nucleotide polymorphisms (SNPs) on the exon 4 at codon 72.The expression of p53 protein was 72％ (13/18) immunohistochemically.Conclusions Cutaneous NK/T-cell lymphoma is a rare but highly aggressive lymphoma with poor prognosis.No p53 gene mutation was detected on the exon 4-9,and Pro/Arg SNPs on p53 codon 72 were detected in the cutaneous NK/T-cell lymphoma.The overexpression of p53 protein may not be the result of p53 gene mutation.     

慢性乙型重型肝炎患者外周血各亚群淋巴细胞绝对值的特点

目的:分析慢性乙型重型肝炎(以下简称慢重肝)患者外周血各亚群淋巴细胞绝对值的特点.方法:慢重肝患者61例,乙肝引起的肝硬化26例,慢性乙型肝炎21例,健康志愿者10例.采用流式细胞仪检测各自外周血淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 、NK细胞(CD3-/CD16 /CD56 )、NKT细胞(CD3 /CD16 CD56 )等亚群表达百分比,计算各淋巴细胞亚群绝对值,并进行统计学分析.结果:与乙肝引起的肝硬化、慢性乙型肝炎患者以及健康志愿者相比,慢重肝患者CD3 、CD4 及CD8 T淋巴细胞的绝对值均明显降低(P＜0.01或P＜0.05);与存活者相比,慢重肝死亡患者外周血淋巴细胞、CD3 、CD4 、CD8 、NK细胞、NKT细胞绝对值均有一种降低的趋势但尚未达到统计学意义.结论:慢重肝患者存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,可能与其预后存在一定的相关性.     

淋巴结鼻型NK／T细胞淋巴瘤3例临床病理学分析

目的：探讨淋巴结鼻型NK／T细胞淋巴瘤的临床病理学特点。方法：回顾性分析3例淋巴结鼻型NK／T细胞淋巴瘤的临床表现、病理组织学特点，采用免疫组化SP法检测LCA、CD3、UCHL1、CD20、CD79a、CD56，TIA-1、Granzyme B和原位杂交方法检测EBER在淋巴结鼻型NK／T细胞淋巴瘤中的表达情况。结果：3例淋巴结鼻型NK／T细胞淋巴瘤病理学组织学改变表现为淋巴结结构破坏，瘤细胞多形性，中等大小至大细胞弥漫浸润，其中2例有大片坏死。LEA、CD3、CD56、TIA-1、Granzyme B免疫标记及EBER原位杂交阳性表达率100％。结论：淋巴结鼻型NK／T细胞淋巴瘤根据特征性的病理形态学改变、免疫表型特点及EBER原位杂交阳性能准确诊断。     

淋巴结外T细胞性淋巴瘤EB病毒感染和CD56表达关系的研究

目的：研究淋巴结外 Ｔ 细胞性淋巴瘤（ Ｔ－ ｃｅｌｌ Ｌｙｍ ｐｈｏｍ ａ, Ｔ Ｃ Ｌ）中 Ｅｐｓｔｅｉｎ－ Ｂａｒｒ 病毒（ Ｅ Ｂ病毒）感染情况及其同 Ｃ Ｄ５６ 表达关系。方法：对１５ 例淋巴结反应性增生和３３ 例淋巴结外 Ｔ 细胞性淋巴瘤应用原位杂交法检测 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ 和免疫组织化学法检测表面抗原 Ｃ Ｄ５６ 的表达。结果：淋巴结外 Ｔ细胞性淋巴瘤中 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ和 Ｃ Ｄ５６ 表达率分别为 ６３．６％ （２１／３３）和２４．２％ （８／３３）,淋巴结反应性增生中 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ 和 Ｃ Ｄ５６ 阳性表达率分别为 ０％ （０／１５）和２６．７％ （４／１５）。 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ 和 Ｃ Ｄ５６ 表达无相关性（ Ｐ＞ ０．０５）。结论：表明 Ｅ Ｂ病毒高度感染淋巴结外 Ｔ细胞性淋巴瘤,可能是其发生的一个重要因素,但 Ｅ Ｂ病毒感染同 Ｃ Ｄ５６ 表达无关。     

经导管动脉化疗栓塞中化疗药物剂量对肝癌患者T细胞亚群的影响

目的：探讨经志管动脉化疗栓塞术（TACE）中化疗药物剂量对肝癌患者肝细胞癌（HCC）患者T导胞亚群的影响。方法：36例不能动手术切除的HCC患者随机分成A、B两组，分别进行选择性TACE。A组（n=18)给予小剂量化疗药物：肿瘤直径小于5cm者给予丝裂霉素（MMC）2－4mg；在5-8cm之间者给予MMC4－6mg及表阿霉素（EPI）10mg；大于8cm者给予MMC6－8mg、EPI10mg及卡铂（CBP)100mg。B组（n=18)给予常规剂量化疗药物（MMC10mg、CBP300mg及EPI40mg）。术前和术后1周用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群（包括CD ^3 、CD^4 、CD^8 、NK、CD^4 /CD^8 、CD^4 CD45^ 、CD4^ CD29^ 、CD8^ CD28^ 、CD8^ CD38^-)。结果：治疗前两组间各细胞亚群均无显著差异；A组患者治疗后CD ^3 、CD^4 、CD^8 、NK、CD^4 /CD^8 、CD^4 CD45^ 、CD4^ CD29^ 、CD8^ CD28^－无显著变化。但CD4^ CD45^＋显著下降（P＜0．05），CD8^ CD28^ 明显增高（P＜0．001）；B组CD4^ 、CD4^ CD29^ 和CD^4 /CD8^ 比值显著下降（P＜0．05），CD8^ 、CD8^ CD28^-显著增高（P＜0．05）。结论：常规剂量化疗药物TACE 可明显抑制细胞免疫功能，而小剂量化疗药物TACE可以提高患者细胞免疫功能。     

Nasal NK/T cell lymphoma mimicking an latrogenic lateral nasal wall infection: a diagnostic dilemma

Extra nodal NK/T cell lymphoma, 'nasal type' is a rare clinicopathological entity. The prevalence of nasal lymphoma is estimated at 0.17-1.5% for all non -Hodgkin's lymphomas (NHL), of which 45% originate from the NK/T cell. It is more commonly encountered in Asian countries. The main clinical features are nasal congestion and epistaxis due to local aggressive destruction. It has a distinct immunophenotypic profile of CD2+, CD56+ and CD3-. The tumor often shows polymorphic lymphoreticular infiltrates and necrosis. We present a case of a 50-year-old male who presented with lateral nasal wall infection following endoscopic sinonasal surgery and later proven to be extranodal NK/T cell 'nasal type' lymphoma with immunophenotypic features.     

非鼻咽部T细胞淋巴瘤与EB病毒的相关性

目的：探讨EB病毒（EBV）感染与非鼻咽部T细胞淋巴瘤的关系。方法：用单克隆抗体UCHL-1、L26及EB病毒编码的潜在膜蛋白-1（LMP-1），免疫组化染色确定肿瘤的免疫表型及EB病毒转化蛋白的表达。采用原位杂交方法检测EBV编码的EBERs。结果：21例非鼻咽部T细胞淋巴瘤EBERs5例阳性的（23．8％），其中给内淋巴瘤3例，肺和胃肠淋巴瘤各1例。阳性细胞约占肿瘤细胞的10％～70％。5例EBERs阳性病例中仅1例表达LMP-1，为结内淋巴瘤。结论：非鼻咽部T细胞淋巴瘤可能与EBV的感染有关，LMP-1的阳性率较EBERs低。     

两种不同来源的EBV LMP1基因在Balb/c 3T3细胞中的表达

【目的】研究来源于鼻咽癌细胞株SUNE1及EBV标准株B95 - 8细胞中两种EBVLMP1基因在真核细胞Balb/c3T3中的表达 ,为进一步研究EBVLMP1基因的核酸疫苗打基础。【方法】将两种不同来源EBVLMP1基因的真核表达质粒 ,经脂质体法转染Balb/c 3T3细胞后 ,用Westernblot、免疫组化及PCR的方法检测不同转染细胞中EBVLMP1蛋白的表达及核酸片段。【结果】PCR结果表明在两种不同来源LMP1转染细胞中均有EBVLMP1基因序列 ,并均能表达 6 3ku的蛋白质 ,经Westernblot和免疫组化结果证实均为EBVLMP1蛋白。【结论】来源于B95 8细胞及鼻咽癌细胞SUNE1的两种EBVLMP1基因均能在真核细胞Balb/c 3T3中表达。     

黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9表达及其与EBV感染的关系

目的 探讨MMP9在黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤的表达及其与EBV感染的关系.方法 用免疫组化SP法和原位杂交法检测59例黏膜NK/T以及成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER表达情况,统计MMP9表达与EBV感染的关系.结果 黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER阳性率分别为83.05%和72.88%,EBER阳性率与组织学类型有关(P＜0.01);MMP9和EBER表达与临床分期和生存期均无显著性关系(P＞0.05),MMP9表达与EBV感染无明显相关性(P＞0.05).结论 黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤发生与EBV感染密切相关,它可能通过间接上调MMP9等癌基因的表达而促进肿瘤的发生和发展.防治EBV感染有助于预防淋巴瘤的发生和发展.     

结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤裸鼠移植瘤模型LMP1蛋白检测及全长基因克隆分析

目的 研究LMP1基因和蛋白在结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤移植瘤模型传代组织中的稳定性和变异性。方法 利用PCR和Western Blot方法检测已建立的结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤裸鼠移植瘤模型传代组织以及供体肿瘤组织中LMP1的全长基因和蛋白表达，并将扩增测序的LMP1全长基因序列与野生型B95．8和缺失型CAO细胞株序列进行比较分析。结果 移植瘤模型传代组织均检测到LMP1基因和蛋白表达，LMP1全长序列与供体肿瘤组织同源性为99．76％。序列分析发现此LMP1基因与CAO细胞株基因序列相似，碱基序列既具相对保守性，又存在一定的特异性。结论 LMP1的基因和蛋白在结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤裸鼠移植瘤模型传代组织中稳定存在，提示可能与该淋巴瘤的维持与发展有关。该裸鼠移植瘤模型为深入研究LMP1与此类淋巴瘤相关性提供了重要的体内实验平台。