内皮抑素在人子宫内膜异位症裸鼠模型中的治疗作用术

目的 建立人子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型,探讨内皮抑素治疗内异症的作用.方法 采用皮下种植方法,建立内异症裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,采用免疫组化法检测内皮抑素的不同给药方法裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平.结果 实验裸鼠共25只,加只成模,以内皮抑素按2 mg/(kg·d)分别自尾静脉注射(静脉注射组8只)及局部注射(局部注射组7只),对照组注射5只(局部注射)同体积PBS,比较3组异位病灶VEGF的表达.注射内皮抑素的两组异位病灶的VEGF表达均明显降低,差异均有显著性(P＜0.05),而两组之间比较,局部注射组VEGF的表达较静脉注射组低,差异有显著性(P＜0.05).结论 成功建立人子宫内膜异位症裸鼠皮下种植模型,通过不同给药途径内皮抑素对内异症裸鼠异位内膜VEGF分泌的抑制、局部给药效果好于全身用药,给今后内皮抑素应用于临床治疗子宫内膜异位症提供了实验依据.     

子宫内膜异位裸鼠模型的建立及血管生成的观察

目的建立子宫内膜异位(EMs)裸鼠模型,观察异位病灶血管生成情况。方法建立EMs裸鼠皮下种植和腹腔注射模型,观察异位病灶的形态特点,用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(VEGF)及微血管密度。结果皮下种植组10只,成模9只,腹腔注射组10只,成模8只。异位病灶呈现增生期子宫内膜特点,VEGF表达阳性,并有微血管形成。结论成功建立EMs裸鼠皮下种植及腹腔注射模型,异位病灶新生血管较多,该模型可用于人EMs血管生成及抗血管生成治疗的研究。     

VEGF在人子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义

目的 建立人子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型,检测血管内皮生长因子(VEGF)在正常在位内膜及裸鼠异位内膜的表达,探讨其在EMs发生发展中的作用.方法 分别采用皮下种植和腹腔注射的方法,建立EMs裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,并采用免疫组化法检测正常在位内膜及裸鼠异位内膜中VEGF蛋白表达水平.结果 实验裸鼠共20只,皮下种植组10只,8只成模,腹腔注射组10只,7只成模,异位病灶在光镜下呈现增生期特点;正常在位内膜10例,VEGF蛋白在异位内膜中的表达有增多趋势(t=2.632,P<0.05).结论 成功建立人EMs裸鼠皮下种植及腹腔注射模型,检测到VEGF表达较正常在位内膜增多,该模型可用于进行人EMs血管生成及抗血管生成治疗的研究模型.     

血管内皮生长因子与子宫内膜异位症相关性的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者在位内膜与异位内膜的表达及意义。方法应用免疫组织化学法检测30例内异症30份在位内膜、34份异位病灶中VEGF的表达。以17例正常妇女的子宫内膜组织作为对照,比较VEGF表达有无差别。结果无论在位与异位内膜,VEGF蛋白主要存在于腺上皮细胞胞浆中,可在整个月经周期中检测到,同时也分散存在于周围间质细胞中。与对照组相比,内异症组在位内膜分泌期VEGF表达显著增高(P<0.05),异位内膜VEGF表达显著增高(P<0.01)。腹膜内异症与腺肌样结节之间VEGF表达差异无显著性。结论内异症患者的在位内膜分泌期VEGF的表达,可能与内异症的组织发生有关;异位内膜VEGF表达,可能与内异症的发病有关。     

裸鼠人子宫内膜异位症模型建立与病灶血管形成相关检测

[目的]探讨裸鼠人子宫内膜异位症模型的建立方法,研究血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管生成与异位人内膜病灶病理组织发生的关系.[方法]分别采用皮下接种、腹腔放置与腹腔注射的方法,建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,连续切片观察病灶的血管生成,再使用S-P免疫组化染色法检测10例成模裸鼠的14处病灶中VEGF的表达及微血管密度(MVD).[结果]实验裸鼠共18只,皮下接种组10只,8例成模;腹腔放置组4例,1例死亡,2例成模;腹腔注射组4只,均无成模.连续切片结果发现于种植第4天组织内出现血管生长,异位人子宫内膜病灶的VEGF表达阳性率腺上皮动情前期10.1±3.2,动情后期12.5±5.4;间质动情前期4.9±2.5,动情后期5.2±3.7;MVD动情前期(80±15)/mm2,动情后期(84±23)/mm2,腺上皮表达VEGF有增多趋势.[结论]成功建立裸鼠皮下与腹腔人异体移植模型,同时发现异位人内膜于种植第4天出现血管生长.模型病灶种植后15d检测到血管增生与腺上皮VEGF的表达增高,可适宜进行抗血管生成治疗评估.     

子宫内膜异位症SCID小鼠动物模型的构建

目的 构建子宫内膜异位症 (内异症) 裸鼠及SCID小鼠动物模型, 比较在位及异位来源的人子宫内膜组织对移植效果的影响, 为内异症的药物治疗研究提供有利的动物模型基础.方法 取性成熟BALB/c-nu/nu裸鼠及SCID小鼠各30只, 通过皮下移植法, 将在位及异位子宫内膜移植到下腹部皮下, 定期观察异位病灶的大小, 术后6周取出病灶, 病理学检查.结果 裸鼠及SCID小鼠均可建立成功的内异症动物模型.其中SCID小鼠的建模成功率较裸鼠更高 (86.7%vs 66.7%) .在位子宫内膜组种植的成功率明显高于异位子宫内膜组 (100%vs84.2%) .结论 SCID小鼠在位内膜皮下种植方法可成功建立内异症动物模型.     

靶向siRNA阻断Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜异位症裸鼠模型异位子宫内膜VEGF和MMP-9表达的影响

目的利用siRNA载体介导的RNA干扰技术靶向沉默β-catenin以阻断Wnt/β-catenin信号通路,观察对子宫内膜异位症裸鼠模型异位子宫内膜血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路促进异位内膜组织粘附、侵袭和转移的作用。方法采用人子宫内膜异体移植方法构建子宫内膜异位症裸鼠模型。将18只子宫内膜异位症裸鼠随机分为3组(n=6):siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,前两组每日分别腹腔注射100μL siRNA转染复合物(含β-catenin siRNA3μg和转染试剂7.5μg)和阴性对照转染复合物(含阴性对照si RNA3μg和转染试剂7.5μg)1次,共注射5次。末次腹腔注射后24 h断颈处死裸鼠,观察盆、腹腔病灶形成情况,取异位病灶标本。Real time PCR和免疫组织化学检测异位内膜组织β-catenin、VEGF和MMP-9 mRNA和蛋白的表达。结果实验裸鼠共20只,18只成模成活。Re...     

恩度对子宫内膜异位症裸鼠模型治疗效果的研究

目的:探讨重组人血管内皮抑制素恩度抑制异位内膜生长的作用机制,进而为子宫内膜异位症(EMS)的临床治疗提供理论依据.方法:将35只裸鼠随机分为正常组(n=10)和实验组(n=25).实验组25只小鼠采用皮下种植方法建立子宫内膜异位裸鼠模型,造模成功的再随机分为对照组(n=11)和恩度组(n=11).恩度组腹腔注射恩度2 mg·(kg·d)-1,对照组每日给予同等剂量的PBS液.用药2周后,观察小鼠血清细胞因子(VEGF、TNF-α)的水平及进行免疫组化检测异位内膜VEGF的表达.结果:对照组的细胞因子水平高于正常组和恩度组(P<0.05),且VEGF的表达高于恩度组.结论:恩度明显抑制VEGF等细胞因子水平,降低其在异位内膜组织中的表达,从而抑制异位内膜血管生长,达到抑制异位病灶的生长.     

内皮抑素抑制裸鼠异位子宫内膜生长的实验研究

目的 研究内皮抑素（ES）对裸鼠异位子宫内膜病灶的抑制作用。方法 利用腺病毒AdEasy-1系统及AAV293细胞构建携带ES基因的重组腺病毒Ad-ES；建立人子宫内膜裸鼠皮下种植模型，将Ad-ES、空载腺病毒Ad-Track及生理盐水分别局部注射至三组裸鼠皮下病灶，观察病灶的形态学特点，检测病灶中微血管密度（MVD）及TUNEL标记法检测细胞凋亡。结果 重组腺病毒Ad-ES经测序、PCR鉴定构建成功，病毒滴度为2.06×1010 pfu/mL；成功建立子宫内膜裸鼠皮下种植模型，Ad-ES治疗组病灶体积较其它两组明显缩小（P<0.05），HE染色后，光镜下可见腺体萎缩明显，部分结构不完整，间质伴有不同程度的坏死，且细胞发生了明显凋亡。结论 ES可诱导细胞凋亡、抗血管生成，从而达到抑制裸鼠异位子宫内膜病灶生长的作用，抗血管生成可能作为治疗子宫内膜异位症的方法。     

消异汤抑制大鼠子宫内膜异位症血管内皮生长因子形成的研究

目的:观察消异汤对大鼠子宫内膜异位症模型血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)形成的影响。方法:采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将40只大鼠随机分为模型组、炔诺酮组、中药低剂量组、中药高剂量组,干预21 d后免疫组织化学SP法观察VEGF在大鼠异位内膜组织中的表达。结果:与模型组大鼠比较,余各组异位子宫内膜体积和VEGF(P0.05)的表达明显降低。结论:消异汤可抑制模型大鼠异位内膜的生长与血管生成,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一。     

VEGF及TSP在异位子宫内膜组织中表达的研究

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）及血小板反应素（TSP）在异位子宫内膜中的作用。方法采用S—P免疫组化的方法及原位杂交的方法分别检测VEGF及TSP在30例子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织（内异症组）及14例非内异症患者在位内膜组织（对照组）的表达。结果异位内膜组织VEGF表达增加，TSP表达无明显变化。结论VEGF可能参与异位子宫内膜的形成及某些生物学行为。     

抗血管生成抑制裸鼠异位子宫内膜的生长

目的:研究抗血管生成对裸鼠异位子宫内膜病灶的抑制作用?方法:利用腺病毒AdEasy-1系统及AAV293细胞构建携带内皮抑素(ES)基因的重组腺病毒Ad-ES,体外感染脐静脉内皮细胞ECV-304,诱导其凋亡;建立人子宫内膜裸鼠皮下种植模型,将Ad-ES?空载腺病毒Ad-Track及生理盐水分别注射至裸鼠皮下病灶,观察病灶的形态学特点,检测微血管密度(MVD),TUNEL法检测血管内皮细胞及腺细胞凋亡?结果:Ad-ES经测序?PCR鉴定构建成功,滴度为2.06×1010 pfu/ml;ECV-304感染Ad-ES后,流式细胞术及Hoechest 33258染色均检测到细胞凋亡;成功建立人子宫内膜裸鼠皮下种植模型,Ad-ES治疗组病灶体积较其他两组明显缩小(P < 0.05),HE染色后,光镜下可见腺体萎缩明显,部分结构不完整,间质伴有不同程度的坏死,TUNEL法检测到细胞凋亡明显增加,MVD减少?结论:内皮抑素可诱导血管内皮细胞凋亡?抗血管生成,并可抑制裸鼠异位子宫内膜病灶的生长,抗血管生成可能作为治疗子宫内膜异位症的方法?     

内皮抑素基因治疗子宫内膜异位症裸鼠模型异位病灶中Bcl-2、PCNA的表达

目的：探讨内皮抑素基因治疗子宫内膜异位症裸鼠模型异位病灶中B细胞淋巴瘤，白血病-2（Bcl-21蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达。方法：将成模的子宫内膜异位症裸鼠模型60只随机分成3组：内皮抑素组（n=20）、空病毒组（n=20）、PBS组（n=20），应用免疫组化法检测裸鼠模型异位病灶中Bcl-2和PCNA的表达。结果：3组中的腺体均萎缩，但是内皮抑素组的腺体萎缩及血管减少较空病毒组和PBS组明显。给予治疗后，Bcl-2和PCNA均在腺体中表达，Bcl-2在内皮抑素组的阳性表达率明显低于在空病毒组的阳性表达率及在PBS组的阳性表达率，有显著性差异（P〈0．05），Bcl-2在空病毒组与PBS组的阳性表达率无差异（P〉0．05）；PCNA在内皮抑素组的阳性表达率明显低于在空病毒组的阳性表达率及在PBS组的阳性表达率，有显著性差异（P〈0．05），PCNA在空病毒组与PBS组的阳性表达率无差异（P〉0．05）。结论：内皮抑素能够治疗子宫内膜异位症。     

新疆汉族和维吾尔族妇女子宫内膜异位症中 VEGF和TGF-β1的表达

目的:检测血管因子 VEGF和 TGF-β1 在汉族和维吾尔族妇女子宫内膜异位症中的表达 ,以探讨血管因子在子宫内膜异位症发病中的作用。 方法:应用免疫组化法检测血管内皮生长因子 (VEGF)和转化生长因子(TGF-β1 )在无异位症妇女的正常子宫内膜与卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜、异位内膜中的表达。 结果 :VEGF和 TGF-β1 在异位症患者异位、在位内膜中的表达较无异位者增强 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ;维汉族妇女内异症患者的异位内膜中 VEGF与 TGF-β1 的表达差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) :VEGF的表达与 TGF-β1的表达呈正相关 (P <0 .0 1)。结论:VEGF与 TGF- β1 在子宫内膜异位症中的表达明显高于无异位症者 ,可能在子宫内膜异位症的发生发展中起重要作用     

肝细胞生长因子在子宫内膜异位症的表达及其与血管内皮生长因子的关系

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在子宫内膜异位症(内异症)发生发展过程中的作用及HGF与血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法应用免疫组织化学技术检测33例异位子宫内膜组织和10例正常子宫内膜组织中的HGF和VEGF的表达及微血管密度(MVD)。结果异位内膜HGF表达的平均光度值为0.264±0.026,正常内膜HGF表达为0.219±0.017,两者比较有显著性差异(P<0.05);异位内膜中HGF的表达与VEGF表达呈正相关(r=0.408,P<0.05)。结论HGF在异位内膜的血管生成中具有重要作用;HGF和VEGF在子宫内膜异位症的发生发展中发挥协同作用。     

少腹逐瘀丸对子宫内膜异位症大鼠TNF-α和VEGF mRNA表达的影响

目的探讨少腹逐瘀丸对子宫内膜异位症大鼠异位子宫内膜组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响。方法采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组及少腹逐瘀丸高剂量组、低剂量组,并设假手术组。给药30 d后,以免疫组化法检测大鼠在位以及异位内膜组织中TNF-α的表达,以RT-PCR法检测VEGF mRNA表达。结果少腹逐瘀丸能降低子宫内膜异位症大鼠TNF-α的表达(P<0.05),显著降低VEGF mRNA的表达(P<0.01)。结论少腹逐瘀丸通过降低TNF-α和VEGFmRNA的表达,抑制子宫内膜细胞的异位黏附、种植和生长,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一。     

PEDF与VEGF在子宫内膜异位症发生发展中的作用

目的：探讨色素上皮衍生因子（Pigment epithelium derived factor,PEDF）与血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）在子宫内膜异位症（内异症）患者子宫在位内膜,异位内膜及正常对照组内膜组织中的表达,并探讨二者在内异症患者的新生血管生成过程中的作用。方法：采用免疫组织化法检测34例内异症患者异位内膜,及在位内膜组织中PEDF与VEGF表达的蛋白含量,并与对照组进行比较。结果：研究组在位及异位子宫内膜组织均有PEDF和VEGF的蛋白表达,PEDF的蛋白表达异位内膜高于在位内膜,高于同期对照组正常内膜。VEGF的蛋白表达异位内膜低于在位内膜,对照组正常内膜低于在位内膜,差异有统计学意义（P〈0.05）。PEDF在对照组分泌期内膜表达低于增生期,而对照组分泌期内膜VEGF的表达高于增生期,二者均呈现出周期性变化。但研究组在位内膜,异位内膜PEDF及VEGF的表达失去了周期性变化,差异无统计学意义。结论：内异症患者PEDF在异位内膜的表达比在位宫内膜及对照组正常子宫内膜高,VEGF在位内膜的表达比异位内膜及对照组正常子宫内膜高。根据r-AFS分期法,PEDF在III、IV期患者在异位内膜的表达比I、II高,VEGF表达高低与r-AFS分期无明显关系。二者在EMT患者的在位内膜,异位内膜上的表达,可能参与内异症异位病灶的形成,而且二者与内异症患者的新生血管生成可能有关。     

血管内皮生长因子及其激酶插入区受体在卵巢子宫内膜异位症中的表达及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其激酶插入区受体(kinase insert domain receptor,KDR)在卵巢子宫内膜异位症(ovarian endometriosis,OEM)在位内膜和卵巢异位内膜及其周围卵巢组织中的表达及在OEM发病机制中的作用。方法:应用免疫组织化学S-P法测定VEGF和KDR在51例Ⅱ~Ⅲ期OEM患者的44份卵巢子宫内膜异位囊肿及其邻近卵巢组织、20份子宫内膜组织及18份非子宫内膜异位症(非内异症)患者增生期子宫内膜组织中的表达,并对表达结果进行分析。结果:VEGF和KDR主要分布于子宫内膜及异位内膜的腺上皮细胞质中。VEGF和KDR在卵巢异位上皮的阳性率分别为63.6%、54.6%,而在异位上皮邻近卵巢组织的阳性率分别为6.8%、15.9%,VEGF和KDR在异位内膜的阳性率均高于卵巢异位内膜邻近卵巢组织(P=0.000 1和P=0.008 4),且两者在异位内膜的表达呈正相关关系(P=0.000)。VEGF和KDR在OEM子宫内膜中的阳性率分别为80.0%、75.0%,而在非内异症子宫内膜中的阳性率分别为16.7%、27.8%,VEGF和KDR在在位内膜中的阳性率同对照组子宫内膜上阳性率的差异均有统计学意义(P<0.01)。两者在OEM卵巢异位内膜和在位内膜上的阳性率相似,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:VEGF与KDR在卵巢异位内膜中的阳性率明显高于邻近卵巢组织,提示VEGF与受体KDR协同表达可能与OEM血管生成有密切关系。VEGF、KDR在OEM在位内膜的阳性率高于非内异症组子宫内膜,且两者在OEM卵巢异位内膜和在位内膜上的阳性率相似,支持在位内膜决定论学说。     

沙利度胺联合达那唑对子宫内膜异位症裸鼠异位组织血管生成及血管内皮生长因子的影响

目的 探讨沙利度胺联合达那唑对子宫内膜异位症裸鼠异位组织血管生成及血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法 选择40只成功建立子宫内膜异位症模型的裸鼠,随机分为模型对照、沙利度胺组、达那唑组及联合用药纽,每组10只,分别给予生理盐水、沙利度胺30 mg/(kg·d)、达那唑1.0 mg/(kg·d)、沙利度胺30 mg/(kg·d)联合达那唑1.0 mg/(kg·d)腹腔注射,给药4周后处死,通过Ⅷ因子标记异位子宫内膜血管,检测异位内膜组织中微血管密度(MVD),链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法测定异位内膜VEGF蛋白的表达情况.结果 对照组、达那唑组、沙利度胺组和联合用药组的MVD依次降低(P＜0.05),分别为(21.3±1.5)个、(16±3.4)个、(12.2±1.1)个和(6.8±1.1)个.对照组、达那唑组、沙利度胺组和联合用药组VEGF蛋白的表达水平也依次降低(P＜0.05).结论 沙利度胺和达那唑可抑制裸鼠异位内膜的MVD以及VEGF的表达,从而抑制异位内膜组织的血管生成,两者合用时作用更明显.     

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的表达

目的探讨血管内皮生长因子（vescular　endothelial　growth　facror，VEGF）在子宫内膜异住症发生发展中的作用。方法SP法检测子宫内膜异位症76例异位内膜、64例在位内膜和72例正常子宫内膜组织中VEGF的表迭。结果VEGF蛋白在异住内膜组、在位内膜纽和对照纽表达强度依次减弱；增生期VEGF表迭异位内膜强于在位和对照组内膜，而分泌期异位和在位内膜强于对照组；异位内膜组和在位内膜组分泌期VEGF表迭强于增生期，差异有统计学意义，对照组增生期和分泌期表达强度均较弱，差异无统计学意义。结论VEGF在子宫内膜异位症发生发展中发挥重要作用。