依那普利对大鼠肾间质纤维化中肾小管上皮细胞凋亡的作用

目的：观察依那普利对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨依那普利抗肾间质纤维化的 作用机制。方法：将24只SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=8)、模型组(n=8)和依那普利治疗组(n=8)。对模型组和依 那普利治疗组大鼠行左侧输尿管结扎术,建立单侧输尿管梗阻(unilateral urethral obstruction,UUO)模型。术后14 d处 死大鼠,留取梗阻侧肾组织分别进行HE和Masson染色,观察各组大鼠肾组织病理改变,用脱氧核糖核苷酸末端转移 酶介导的缺口末端标记法[terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated (dUTP) nick end-labeling,TUNEL]染色检查肾小 管上皮细胞凋亡,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测Fas相关死亡结构域(Fas-associated death domain,FADD)、凋亡蛋 白酶活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1,APAF-1)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的 蛋白表达。结果：HE染色、Masson染色显示模型组肾间质损伤指数、肾间质纤维化指数均较假手术组明显增高(均 P<0.05),依那普利治疗组肾间质损伤指数、肾间质纤维化指数均较模型组明显降低(均P<0.05)。TUNEL染色显示模 型组肾小管上皮细胞凋亡计数较假手术组明显增多(P<0.05),依那普利治疗组肾小管上皮细胞凋亡数较模型组明显减 少(P<0.05)。免疫组织化学及蛋白质印迹法显示模型组肾组织FADD,APAF-1和CHOP的蛋白表达均较假手术组明显 增多(均P<0.05),依那普利治疗组肾组织FADD,APAF-1和CHOP的蛋白表达均较模型组明显降低(均P<0.05)。结论： 依那普利可通过抑制UUO大鼠的肾小管上皮细胞凋亡而起到抑制肾间质纤维化的作用。     

姜酮在博来霉素诱导小鼠肺纤维化中的保护作用及机制研究

目的 观察并探究姜酮(zingerone, ZO)在博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化中的疗效及潜在分子机制。方法 将40只雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为4组,依次为:对照组、模型组、低剂量ZO治疗组和高剂量ZO治疗组。给予小鼠单次气管内注射BLM (5mg/kg)建立肺纤维化模型。低剂量ZO治疗组和高剂量ZO治疗组小鼠给予不同浓度ZO灌胃处理。HE染色及Masson染色观察肺病理损伤及纤维化状况;试剂盒检测肺组织氧化应激水平;碱水裂解法检测肺组织羟脯氨酸的含量;Western blot法检测肺组织中collagen Ⅰ、α-SMA及NRF2的蛋白表达状况。结果 与对照组比较,模型组小鼠出现了明显的肺病理损伤及纤维化,同时氧化应激明显升高而NRF2蛋白表达明显降低;ZO预处理可明显减轻BLM所致的小鼠肺纤维化和氧化应激,同时上调NRF2蛋白表达。结论 姜酮具有减轻博来霉素小鼠肺纤维化的潜力,其机制与NRF2的激活有关。     

右美托咪定对盲肠结扎穿孔术诱导的脓毒症大鼠急性肺损伤保护作用及其与磷酸化JAK激酶2/酪氨酸磷酸化通路的关系

目的:探讨右美托咪定对盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导的脓毒症大鼠急性肺损伤保护作用及其与磷酸化JAK激酶2(p-JAK2)/酪氨酸磷酸化(p-STAT3)通路的关系。方法:30只健康成年雄性无病原体Wistar大鼠,随机分为对照组、模型组和DEX组,每组10只。通过ELISA法检测大鼠肺组织中的炎症细胞因子水平。通过组织学HE染色和TUNEL细胞染色分析大鼠肺组织损伤。通过市售检测试剂盒分析血清氧化应激水平。通过qRT-PCR检测肺组织凋亡相关基因的mRNA表达。通过蛋白印迹分析检测p-JAK2和p-STAT的蛋白表达。通过体内注射的FITC-BSA的光密度测量大鼠血管通透性。结果:模型组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1)水平较对照组升高(均P<0.05),而白细胞介素-10(IL-10)水平较对照组降低(P<0.05),DEX组TNF-α、IL-6、和MCP-1水平较模型组降低(均P<0.05),IL-10水平升高(P<0.05)。模型组HE染色和TUNEL染色评分较对照组升高(均P<0.05),...     

全蝎软膏治疗兔耳增生性瘢痕效果评价

目的观察并探讨全蝎软膏对兔耳增生性瘢痕的治疗效果及组织中Smad 7蛋白表达的影响。方法将16只新西兰大白兔随机分为空白对照组、模型组、积雪苷霜软膏组和全蝎软膏组,每组4只。除空白对照组外,其他3组分别进行兔耳增生性瘢痕造模术,术后立即使用积雪苷霜软膏和全蝎软膏对积雪苷霜软膏组和全蝎软膏组进行连续用药治疗,对照组和模型组用磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)处理,每日2次并拍照记录;分别在治疗后的第35天取模型组、治疗组和空白组动物相应耳组织进行病理、酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和Smad 7蛋白检测。结果与空白对照组相比,模型组兔耳术后形成增生性瘢痕,全蝎软膏组治疗后无瘢痕出现,而积雪苷霜软膏组出现轻微瘢痕。苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)结果显示,经积雪苷霜软膏和全蝎软膏治疗后组织纤维化程度均减轻。ELISA检测结果表明,全蝎软膏组与积雪苷霜软膏组相比,Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的表达量均显著降低(P0.05)。免疫印迹结果显示模型组组织中Smad 7蛋白水平显著降低,而全蝎软膏和积雪苷霜软膏治疗后均可显著升高Smad 7蛋白表达(P0.05),但全蝎软膏治疗效果更明显。结论与积雪苷霜软膏相比,全蝎软膏对增生性瘢痕的疗效更显著,可有效减少组织内胶原蛋白的沉积并通过上调Smad 7蛋白的表达调控转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)细胞通路而抑制增生性瘢痕的形成。     

直接肾素抑制剂阿利吉仑对肾纤维化小鼠上皮-间质转化的调节作用

目的：探讨直接肾素抑制剂阿利吉仑对单侧输尿管结扎引起的小鼠肾纤维化中上皮-间质转化（EMT）的调节作用,阐明阿利吉仑抗肾纤维化的作用机制。方法：24只雄性ICR小鼠分为假手术组、模型组和阿利吉仑干预组,采用单侧输尿管结扎方法制作小鼠肾纤维化模型。HE染色观察小鼠肾间质纤维化的病理组织形态,Masson染色观察小鼠肾间质纤维化中胶原蛋白的表达情况,免疫组织化学染色法观察胞浆中α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,免疫印迹法检测小鼠肾组织中E钙黏蛋白（E-cad）、α-SMA和Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）的表达水平。结果：通过单侧输尿管结扎方法成功制备小鼠肾纤维化模型。HE染色和Masson染色,与模型组比较,阿利吉仑干预组小鼠肾纤维化程度明显降低,胶原蛋白表达明显减少。免疫组织化学染色,阿利吉仑干预组小鼠肾小管间质纤维化区域胞浆内α-SMA阳性显色较模型组明显减少。免疫印迹法,模型组小鼠肾组织中α-SMA和Col Ⅰ蛋白表达水平升高,分别是假手术组的1.79倍和1.95倍;E-cad蛋白表达水平降低,为假手术组的37.23%,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;阿利吉仑干预组小鼠肾组织中α-SMA和Col Ⅰ蛋白表达水平降低,E-cad蛋白表达水平升高,分别是模型组的63.72%、65.54%和2.1倍,组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：阿利吉仑能够通过上调E-cad的表达同时下调α-SMA、Col Ⅰ的表达抑制小鼠肾纤维化中EMT,进而发挥抗纤维化的作用。     

核仁素在糖尿病性心肌病中的表达

目的：探讨核仁素在糖尿病性心肌病中的表达情况。方法：实验分为对照组和II型糖尿病性心肌病模型组 (模型组);模型组采用高脂高糖饲料持续喂养(第5,6周于小鼠腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素)构建,第8周末测定小鼠 血糖,第20周末测定两组小鼠空腹血糖值并计算心脏质量与体质量的比值,观察心肌形态学病理改变,采用免疫组织 化学法和Western印迹检测心肌核仁素的表达水平。结果：糖尿病模型组小鼠较对照组空腹血糖值明显升高(P<0.05); 模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱,出现断裂及溶解;免疫组织化学染色及Western印迹显示模型组小鼠心肌核仁 素蛋白水平较对照组明显升高(P<0.05)。结论：核仁素可能在糖尿病性心肌病的发生和发展中起着一定的作用。     

重组人血管内皮抑制素对兔耳增生性瘢痕VEGF和TIMP-1表达的影响

目的探讨重组人血管内皮抑制素作用于兔耳增生性瘢痕后对瘢痕中血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)表达的影响。方法新西兰大白兔16只,建立兔耳增生性瘢痕动物模型。模型建立成功后,将其随机分为实验组和对照组,每组8只。实验组瘢痕局部注射0.1 mL 5 mg/mL的重组人血管内皮抑制素,隔日1次,共5次;对照组局部注射0.1 mL生理盐水,隔日1次,共5次。在药物干预30 d后观察瘢痕大体变化并留取标本,用RT-PCR方法检测VEGF和TIMP-1 mRNA表达水平的变化,用免疫组织化学方法检测瘢痕组织中TIMP-1蛋白表达水平的变化。结果药物干预30 d后实验组兔耳瘢痕中VEGF和TIMP-1 mRNA表达量分别为0.279 0±0.030 7、0.244 4±0.057 4,对照组分别为0.657 0±0.161 1、0.730 2±0.103 8,实验组表达水平均低于对照组(P<0.05)。实验组兔耳瘢痕中TIMP-1蛋白阳性表达水平低于对照组(P<0.05)。结论重组人血管内皮抑制素能抑制兔耳增生性瘢痕组织形成,其机制可能与抑制VEGF和TIMP-1表达有关。     

α- 硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制

目的 观察α- 硫辛酸（ALA）对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其可能的作用机制。 方法 复制糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组（DM 组）、糖尿病硫辛酸组（ALA 组）,并设置正常对照组（NC 组）。实验6 周后处死全部大鼠,测定相应生化指标和相关氧化应激指标;HE、Masson 染色观察肾组织的形 态变化;免疫组织化学和Western blot 检测大鼠肾组织中核转录共抑制因子（SnoN）、转化生长因子（TGF-β1）、 Collagen I、Collagen IV 表达水平。结果 ① DM 组大鼠肾重/ 体重、血糖、血总胆固醇、三酰甘油、24 h 尿蛋白均高于NC 组,ALA 组除了血糖外以上其余指标均低于DM 组。② DM 组总抗氧化物酶活性（T-AOC）、 总超氧化物歧化酶活性（T-SOD）、过氧化氢酶活性（CAT）低于NC 组,丙二醛含量（MDA）增多;ALA 组T-AOC、T-SOD、CAT 活性高于DM 组,MDA 含量降低。③病理检查显示,DM 组大鼠出现肾纤维化 改变,ALA 组肾纤维化病变明显改善。④免疫组织化学和Western blot 结果显示：与NC 组相比,DM 组大 鼠SnoN 蛋白水平降低,TGF-β1、Collagen I 和Collagen IV 增高;与DM 组相比,ALA 组SnoN 蛋白水平升 高,TGF-β1、Collagen I 和Collagen IV 降低。结论 α- 硫辛酸可以增强DM 大鼠肾脏的抗氧化能力,上调 SnoN 蛋白的表达,从而抑制TGF-β1 信号通路而减少细胞外基质沉积,对糖尿病大鼠肾脏起到保护作用。     

点阵CO_2和脉冲染料激光联合治疗对兔耳增生性瘢痕的影响

目的:探讨点阵CO2和脉冲染料激光联合照射对兔耳增生性瘢痕的影响。方法:采用32只雄性新西兰大白兔建立兔耳增生性瘢痕模型,随机分为4组,A组:点阵CO2激光治疗组;B组:脉冲染料595nm激光治疗组、C组:点阵CO2激光和脉冲染料595nm激光联合治疗组;D组:对照组。观察瘢痕生长情况,比较治疗前后瘢痕增生指数,免疫组织化学SP法检测瘢痕组织中胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的水平。结果:瘢痕厚度:A、B、C组在治疗后均较D组下降(P<0.05);瘢痕增生指数:与D组比较,A、B、C组均显著下降(P<0.05),与C组比较,A、B组均显著升高(P<0.05);胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ水平:与D组比较,B、C组显著下降(P<0.05),A组胶原蛋白Ⅰ水平显著下降、胶原蛋白Ⅲ水平显著升高(P<0.05)。结论:点阵CO2激光和脉冲染料激光联合照射有利于兔耳增生性瘢痕的治疗,其机制与抑制胶原蛋白合成和改善胶原结构有关。     

TGF-β1/Smad3信号通路在电针抑制兔耳增生性瘢痕中的作用机制

目的探讨电针抑制兔耳增生性瘢痕的作用机制。方法 64只新西兰大耳白兔,随机选择16只做空白组,剩余的兔子参照李荟元文献制备增生性瘢痕兔耳模型,造模成功后,随机分为模型组、电针组、手针组,每组各16只,空白组和模型组无特别处置,手针组给予针刺刺激,电针组在手针组基础上再予电针刺激,并观察各组瘢痕的颜色、硬度、厚度的变化,于手术后第28、35天每组各随机选取8只兔子处死,切取兔耳瘢痕组织,观察各组HE染色、VG染色、瘢痕增生指数以及RT-PCR法检测TGF-β1、Smad3的mRNA表达水平的变化,比较各组治疗后的变化。结果针刺1周和针刺2周后,与模型组比较,在HE染色和VG染色方面,电针组瘢痕的成纤维细胞数量和胶原纤维密度的降低程度显著(P0.05),真皮层排列相对规则;在瘢痕增生指数方面和TGF-β1、Smad3的m RNA蛋白表达量方面,电针组明显下降(P0.05)。从治疗时间上看,针刺治疗1周和2周后,各自本组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论电针可以明显抑制增生性瘢痕增殖和降低TGF-β1、Smad3的mRNA蛋白表达,因此,通过调节TGF-β1/Smad3信号通路表达是其发生作用的机制。     

慢性缺血性创面修复过程中细胞凋亡和增殖调控的实验研究(摘要)

目的观察外用重组人表皮细胞生长因子衍生物(rhEGF)对兔耳慢性缺血性创面愈合的影响;观察兔耳慢性缺血性创面愈合过程和兔耳增生性瘢痕形成过程中细胞增殖与细胞凋亡调控及rhEGF对此的影响·方法建立慢性缺血性兔耳溃疡模型和兔耳增生性瘢痕模型·实验分为正常对照组、实验组A组、对照组B组、实验组C组和对照组D组共5组,其中A组和B组建立在慢性缺血性兔耳溃疡模型基础上,C组和D组建立在兔耳增生性瘢痕模型墓础上·在建立模型后不同时间点切取A组和B组溃疡组织标本,C组和D组瘢痕组织标本·所有标本均行HE常规染色和免疫组化染色,观察…     

胃泌素释放肽及其受体在兔耳增生性瘢痕组织中的表达及与瘢痕组织内巨噬细胞浸润相关性研究

目的:研究胃泌素释放肽(GRP)及其受体(GRPR)在兔耳增生性瘢痕组织中的表达情况,并探讨其表达与瘢痕组织内巨噬细胞浸润的相关性。方法:18只新西兰大鼠随机分为对照组、瘢痕A组和瘢痕B组,瘢痕A组在每个兔耳建立直径0.6 cm创面1个,瘢痕B组在每个兔耳建立直径1.0 cm的创面1个,对照组兔耳不建立创面。分别在创面建立1个月(增生期)、2个月(消退期)和3个月(成熟期),每组取3只兔耳瘢痕组织检测GRP、GRPR、巨噬细胞表面标志物(F4/80)以及巨噬细胞浸润数目。结果:GRP、GRPR、F4/80 mRNA表达水平和巨噬细胞浸润数目在增生期、消退期和成熟期兔耳增生性瘢痕组织均显著高于对照组(均P<0.05),且其在瘢痕A组中均低于瘢痕B组(P<0.05)。GRP、GRPR、F4/80 mRNA表达水平和巨噬细胞浸润数目在兔耳瘢痕组织中随时间延长而降低。在兔增生性瘢痕组织内,GRP和GRPR mRNA表达水平与F4/80 mRNA表达水平、巨噬细胞浸润数目均呈正相关(P<0.05)。结论:GRP和GRPR在兔耳增生性瘢痕组织内表达升高,并且其表达升高与创面大小有...     

红花注射治疗对兔耳增生性瘢痕中TGFβ1的表达变化

目的观察红花对兔耳增生性瘢痕(HS)及其转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响。方法取27只新西兰大白兔兔耳腹侧建立HS模型,每耳2块。术后第45天开始对HS行注射治疗,每周1次,连续注射4次。设立正常皮肤组、阳性对照组、生理盐水组、低浓度红花(125 g/L)组、高浓度红花(500 g/L)组。注射完成后第2、4、6周分别测量HS厚度及硬度并切取8只兔耳HS及皮肤,采用免疫组织化学方法检测每块组织TGFβ1蛋白的表达(TGFβ1蛋白面密度),RT-PCR方法检测每块组织TGFβ1mRNA的表达。结果注射后4、6周,高浓度红花组HS厚度及硬度均较其他HS组低(P<0.05);注射后2、4、6周,高浓度红花组TGFβ1蛋白面密度值及TGFβ1mRNA的表达均较其他HS组低(P<0.05);低浓度红花组TGFβ1mRNA的表达在注射后4、6周均较阳性对照及生理盐水组低(P<0.05)。结论红花能促进兔耳HS的软化、变薄,并能抑制兔耳HS的TGFβ1的表达,尤以高浓度红花组明显。红花抑制兔耳HS的机制可能与TGFβ1的表达被抑制相关。     

六味地黄汤对5/6肾切除大鼠肾组织中细胞外基质的影响

目的观察六味地黄汤对慢性肾衰大鼠肾组织细胞外基质的影响,探讨其防治肾间质纤维化的可能机制。方法用5/6肾切除大鼠复制慢性肾衰模型,分空白对照组、假手术组、模型组和六味地黄汤组。术后8周,检测各组肾功能指标;HE染色观察肾脏组织病理变化,Masson染色检测肾脏中胶原纤维沉积;免疫组化法检测ColⅠ、ColⅢ、FN在肾组织中的表达;Western blot法检测PDGF-A、PDGF-B在肾组织中的蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐明显升高(P<0.01);与模型组比较,六味地黄汤组24 h尿蛋白(P<0.01)、血尿素氮(P<0.01)和血肌酐(P<0.05)均明显降低。模型组HE和Masson染色显示大鼠肾间质纤维化明显,大量胶原纤维沉积,六味地黄汤组肾间质纤维化程度明显减轻,少量胶原纤维沉积。免疫组化法显示,与假手术组比较,模型组肾组织中ColⅠ、ColⅢ、FN蛋白水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,六味地黄汤组肾组织中ColⅠ、ColⅢ、FN蛋白水平均明显降低(P<0.05)。Western blot法显示,与假手术组比较,模型组肾组织中PDGF-A、PDGF-B蛋白水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,六味地黄汤组肾组织中PDGF-A、PDGF-B蛋白水平均明显降低(P<0.01)。结论六味地黄汤可能通过下调PDGF-A、PDGF-B表达,从而减少肾组织中细胞外基质的积聚而抑制肾间质纤维化。     

促红细胞生成素及其受体在慢性环孢素A肾毒性大鼠肾组织中的表达

目的探讨慢性环孢素A(CsA)能否导致贫血,以及促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在慢性CsA肾毒性大鼠肾组织中的表达变化。方法 SD大鼠给予CsA15mg/(kg·d)皮下注射4周建立慢性CsA肾毒性模型(CsA毒性组),对照组1mL/(kg·d)皮下注射橄榄油。采用全自动生化分析仪检测两组大鼠的肾功能,血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)水平,三色(Masson Trichrome)染色确定肾小管间质纤维化程度;免疫组织化学染色和蛋白质印迹法分别检测肾组织EPO及EPOR蛋白的表达;TUNEL染色和电子显微镜观察细胞凋亡。结果与对照组相比,CsA毒性组大鼠肾功能低下,肾小管间质发生纤维化,凋亡细胞增多(P<0.01);同时CsA毒性组大鼠有贫血发生,表现为Hb和Hct水平的下降(P<0.01)。免疫组织化学染色和蛋白质印迹分析结果表明,EPO在CsA毒性组肾组织中的表达减少,而EPOR的表达增加(P<0.01)。直线相关分析提示,EPO蛋白表达与肾小管间质纤维化(r=-0.729,P<0.001)和TUNEL阳性细胞数(r=-0.841,P<0.001)呈负相关。结论慢性CsA肾毒性大鼠肾组织中EPO蛋白表达减少,从而导致贫血;CsA诱导肾小管上皮细胞凋亡与EPO蛋白表达减少有关。     

5-氟尿嘧啶对增生性瘢痕的作用研究

目的：探讨5‐氟尿嘧啶（5‐FU ）对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法建立兔耳外伤性皮肤早期瘢痕增生模型。将12只兔随机平均分为3组,设立生理盐水注射对照组（A组）、局部注射5‐FU组（B组）和局部涂抹5‐FU软膏组（C组）,观察各组瘢痕改变情况。60 d后空气栓塞法随机处死兔子,切取含创面的兔耳组织,分别进行苏木精‐伊红（HE）染色及Masson染色观察组织形态学变化及组织中细胞及胶原等的改变。Real‐time PCR及ELISA法检测TGF‐β、PDGF、bFGF和INF‐γ的表达水平。结果 HE和Masson染色显示,与A组和C组比较,B组真皮层变薄,成纤维细胞和胶原纤维数量较少,胶原纤维排列规则,无胶原结节或者胶原结节不明显。B组和C组TGF‐β、PDGF、bFGF、INF‐γmRNA表达水平和蛋白水平均显著低于A组,且B组效果好于C组。结论5‐FU对增生性瘢痕有治疗作用,瘢痕组织局部注射5‐FU比局部涂抹5‐氟尿嘧啶软膏更为有效。     

褪黑素对实验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制

目的 观察褪黑素(MLT)对实验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制.方法 普通级纯种新西兰大耳白兔随机分为3组,正常组:饲喂普通饲料;模型组:饲喂高脂饲料(普通饲料+1％胆固醇+5％猪油);褪黑素组:饲喂高脂饲料的同时MLT灌胃10 mg/(kg·d)治疗.纯种大耳白兔适应性饲养一周后,采用高脂饮食诱导造模,同时给予褪黑素药物治疗.于12周后处死进行采血,检测血清中血脂等指标.取动脉进行油红染色,检测脂质斑块形成情况;取心脏组织,包埋后HE染色观察心肌组织的形态变化;Masson染色检测心肌组织中胶原纤维的变化;Western blot法检测p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白及肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、肌球蛋白轻链(MLC)、肌球蛋白轻链磷酸化(p-MLC)的表达水平.结果 动脉油红染色结果显示模型组出现大量脂质斑块,证明造模成功.血脂结果显示模型组总胆固醇(TCH)、三酰甘油(TG)浓度明显上升,而褪黑素组相对模型组下降.油红染色HE染色结果显示MLT能改善心肌组织形态的紊乱情况,Masson染色结果显示MLT能缓解心肌组织胶原纤维的堆积.Western blot结果显示MLT能下调p38的磷酸化水平以及MLCK蛋白的表达水平,以及下调MLC的磷酸化表达水平(P＜0.05).结论 MLT可能通过降低MAPK通路中相关蛋白p38的磷酸化调控MLCK蛋白的表达,从而降低MLC的磷酸化水平对动脉粥样硬化兔心肌组织起到保护作用.     

大蒜素抑制慢性肾衰竭大鼠炎症反应

【目的】探讨大蒜素对慢性肾衰竭大鼠的治疗作用及机制。【方法】将50只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组及大蒜素低、中、高剂量组,每组各10只。除假手术组,其余各组大鼠采用5/6肾切除法建立慢性肾衰竭模型。造模成功后,大蒜素低、中、高剂量组分别给予10、20、40 mg·kg^-1·d^-1大蒜素灌胃,假手术组与模型组给予等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续4周。应用全自动生化分析仪检测血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,采用苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色观察肾组织病理学变化,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肾组织Toll样受体(TLR)4、髓样细胞分化因子(MyD)88、核转录因子(NF)-κB蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法检测肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠血清SCr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高(均P<0.05),HE染色、Massion染色结果显示大鼠肾组织发生明显病理改变,肾组织中TLR4、My D88、NF-κB蛋白及mRNA表达水平显著升高(均P<0.05);与模型组比较,大蒜素低、中、高剂量组大鼠血清SCr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平下降(均P<0.05),HE染色、Massion染色结果显示肾组织病理改变减轻,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及m RNA表达水平下降(均P<0.05),且呈剂量依赖性。【结论】大蒜素可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,抑制肾组织炎症反应,进而延缓慢性肾衰竭进程。     

缬沙坦对哮喘小鼠气道重构及结缔组织生长因子表达的影响

目的观察缬沙坦对哮喘小鼠早期气道重构和结缔组织生长因子(CTGF)在气道内表达的影响。方法 40只小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组(2 mg/kg)、缬沙坦组(50mg/kg)4组,卵清蛋白致敏建立哮喘模型。肺组织切片行苏木精-伊红和Masson染色以测定平滑肌面积、基底膜胶原面积;RT-PCR检测结缔组织生长因子CTGFmRNA,免疫印迹和免疫组织化学方法检测其蛋白表达水平及组织细胞定位。结果平滑肌面积和胶原沉积面积哮喘模型组显著高于正常对照组,地塞米松组和缬沙坦组均显著低于哮喘模型组(P<0.01);CTGF mRNA灰度值和Western bloting蛋白相对表达量哮喘模型组显著高于正常对照组,地塞米松组和缬沙坦组均显著低于哮喘模型组(P<0.01)。CTGF蛋白表达水平与平滑肌面积、胶原沉积面积均呈正相关(r分别为0.602和0.579,P<0.01)。结论缬沙坦具有抑制哮喘气道重构的作用,其机制可能与其下调气道内CTGF表达相关。     

胆总管结扎和四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的研究

目的:比较胆总管结扎(BDL)与CCl_4诱导小鼠肝纤维化的生化指标、肝脏病理学指标及α-Sma的表达。方法:60只健康雄性Bal B/C小鼠,分为CCl_4肝纤维化模型组(20只)及其对照组(10只)和BDL肝纤维化模型组(20只)及其对照组(10只)。观察小鼠一般情况,生化方法测血清ALT、TBA水平。HE和Masson染色观察肝组织的病理变化及免疫组织化学染色观察肝组织α-Sma的表达。结果:血清生化指标显示两组模型血清的ALT酶活性都明显高于对照组,肝组织的病理指标Masson染色及免疫组化检测均显示模型组的蓝色染色坏死区域明显多于对照组。结论:两种处理方法均可诱导小鼠肝纤维化,且BDL较早引起肝功能及肝纤维化指标升高。