雄性Fmr1基因敲除小鼠血液生理生化指标及性激素水平的比较研究

目的比较雄性Fmr1基因敲除小鼠和FVB小鼠血液生理生化值和血清性激素水平，探讨Fmr1基因对动物生长发育和生殖生理等方面的影响。方法分别测定血液生理指标、血清生化指标、血清电解质和血清E2、LH、FSH、T和PRL的含量，并进行统计学处理和分析。结果雄性Fmr1基因敲除小鼠与FVB小鼠比较，血液生理指标中MCV和PCT有显著差异（P〈0．05），而RBC、HCT、HGB、MCH和WBC等无显著差异（P〉0．05）；血清生化指标中除TBIL、[IP^3＋]、[Mg^2＋]（P〈0．05）和AIP、BUN（P〈0．01）外，TPROT、GLB、A／G、BUN、CREAT、[K^＋]、[Na^＋]等项均无显著差异（P〉0．05）。性激素水平E2、LH值差异无显著性（P〉0．05），FSH、T、PRL差异极显著（P〈0．01）。结论Fmr1基因可影响动物的某些生理生化及激素水平。     

饲喂雌鼠大豆异黄酮对后代雌性生殖性状的影响

目的测定ALK3／α-MHC和C57BL／6小鼠的生理生化正常值及其脏器重量等。方法采用全自动生化分析仪及血细胞分析仪分别8～9周龄C57BL／6、ALK3雌、雄小鼠的常用血液学指标及生化指标值进行检测：并测定了各小鼠的脏器。结果C57BL／6和ALK3／α-MHC小鼠血液的PIT、HGB差异显著（P〈0．05）。C57BL／6和ALK3／α-MHC雌、雄之间小鼠丙氨酸转氨酶（ALT）、肌酸激酶（CK）差异显著;乳酸脱氢酶（LDH）差异极显著。脏器系数无显著差异。结论ALK3／α-MHC血常规、血清生化指标和脏器指标的测定数据,将为从事生物医药研究等的科研人员提供参考。     

Fmrl基因敲除小鼠血清雌性激素含量的比较研究

目的测定不同周龄和超排前后雌性Fmrl基因敲除FVB小鼠和背景FVB小鼠血清生殖激素雌二醇（R）、孕酮（P）、促黄体生成激素（LH）和促卵泡生成激素（FSH）含量，比较不同周龄和不同状态下敲除基因动物的血清性激素水平，研究敲除基因对动物的发育和生殖生理等方面的影响。方法用放射免疫分析法测定上述动物不同周龄和超排前后血清E2、P、LH和FSH的含量，测定Fmrl基因敲除小鼠不同周龄时的超排卵数，进行统计学分析。结果6周龄的雌性Fmrl基因敲除小鼠与FVB小鼠比较，LH、FSH值差异无显著性（P〉0．05），E2的P值差异有显著性（P〈0．05）。lO周龄的两组动物间血清生殖激素水平和超排卵数均差异无显著性（P〉0．05）。lO周龄Fmrl基因敲除小鼠的超排卵数与6周龄动物比较差异有显著性（P〈0．05）。结论敲除Fmrl基因对动物雌性激素的分泌有影响，该基因与动物的生殖生理有一定的关联。     

Fmr1基因敲除对小鼠生理发育和繁殖性能的影响

目的对清洁级FVB.KO和FVB的生理发育指标和繁殖性能进行分析比较,探讨Fmr1基因敲除对小鼠生理发育和繁殖性能的影响。方法挑选10周龄清洁级FVB.KO和FVB各20只(雌雄各半),采取1∶1同居,全部同胞兄妹近交繁殖,测定新生仔鼠生理发育指标和品系繁殖性能。结果 FVB.KO在耳廓分离、体毛长出、门齿萌发、眼睑开裂等生理发育指标上和FVB比较接近,在平均每窝产仔数和离乳率等方面偏低,在雌雄比例上有显著差异。结论 Fmr1基因敲除对小鼠生理发育和繁殖性能影响较小,对后代雌雄比例可能有一定的影响。     

SPF级SCID-BG小鼠与BALB／c裸小鼠、SCID小鼠部分免疫指标的测定与比较

目的测定SPF级SCID-BG小鼠、BALB／c裸小鼠和SCID小鼠的部分血液生理生化指标和脏器重量,分析SCID-BG小鼠相较于其他两种小鼠在免疫方面的优缺点。方法（1）随机抽取28、56、112日龄的SCID．BG小鼠、BALB／c裸小鼠和SCID小鼠各30只（雌雄各半）,活体称体质量,依次剖取脾脏、胸腺等脏器进行称重比较;（2）将小鼠摘除一侧眼球采血,测定部分血常规和血液生理生化值进行比较。结果（1）脏器：SCID-BG小鼠脾脏和胸腺的重量明显低于BALB／c裸小鼠和SCID小鼠,112日龄雄性SCID-BG小鼠脾脏与SCID小鼠差异有显著性（P〈0．05）;（2）血常规：SCID-BG小鼠白细胞水平明显低于BALB／c裸小鼠和SCID小鼠;（3）血液生化：SCID-BG小鼠免疫球蛋白水平远远低于BALB／c裸小鼠,和SCID小鼠接近。结论从脏器、血常规和血液生化角度发现,SCID-BG小鼠各项免疫指标均低于BALB／c裸小鼠和SCID小鼠,且品系内不同性别闻差异无显著性。     

hTIM4-EGFP小鼠血液生理生化指标测定

目的测定自主建立的转基因小鼠hTIM4-EGFP的血液生理生化指标。方法分别测定12周龄各8只雌性和10只雄性的同窝阴性小鼠与转基因hTIM4-EGFP小鼠的22项血液生理指标和12项血液生化指标,利用统计学方法分析组间差异。结果转基因组与野生组在10项生理指标(WBC、RBC、HGB、HCT、MCH、RDW、PLT、NEUT、LYM%、NEUT%)和4项生化指标(ALT、AST、TG、P)间存在差异;转基因组在MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、NEUT、NEUT%、ALP、CHO指标中存在雌雄差异。对照组在RBC、HCT、MCV、LYM、NEUT、LYM%、NEUT%、AST、ALT、P指标中存在雌雄差异。结论人源化Tim4基因敲入的C57BL/6小鼠的部分血液生理生化指标与野生型存在差异,该测定为hTIM4-EGFP小鼠的研究应用提供了基础数据。     

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之一--采血部位对血液生化值的影响

目的探讨从大鼠不同部位采血对其血液生化值的影响。方法采用全自动生化仪对不同部位采血动物血液中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红索（TBil）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素（Urea）、肌酐（Cre）、葡萄糖（Glu）、总胆固醇（CHO）等生化值进行测定。结果（大鼠）腹主动脉及颈外静脉均与后腔静脉血液生化值在总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）上存在明显差异，表现为前者血清中总蛋白、白蛋白明显高于后者；大鼠眶静脉与股静脉血液生化值在多项指标上亦存在明显区别。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中，对采血部位应进行规范与统一。     

EGFP转基因小鼠血液生理生化指标的测定

目的测定转基因C57BL/6-Tg（ACTB-EGFP）1Osb/J小鼠血液生理生化正常值。方法采用全自动生化测定仪对5-6周雄性、6-7周雌性EGFP小鼠的血液常规及生化值进行测定。结果EGFP转基因雄雌小鼠血常规比较,雌雄鼠的血红蛋白（Hb）、血小板（PLT）之间比较差异非常显著（p〈0.01）,单核细胞计数（MO）、红细胞宽度（RDW）之间比较差异显著（p〈0.05）;血液生化值雄雌小鼠比较,白蛋白（Alb）、甘油三酯（TG）差异非常显著（p〈0.01）,其它指标差异不显著。     

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之四--血样存放温度对生化值的影响

目的探讨不同存放温度对所测定血液样本生化值的影响。方法采用全自动生化仪对存放于不同温度条件下动物血液中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBil）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素（Urea）、肌酐（Cre）、葡萄糖（Glu）、总胆固醇（CHO）等生化值进行测定。结果血样不同温度存放相同时间，血清生化值出现不同程度变化。其中，存放温度对TP、ALB、ALT、CHO及TBil影响最为明显。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中，对制备的血液样本存放温度应进行规范与统一。     

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之三--血样存放时间对生化值的影响

目的探讨不同存放时问对所测定血液样本生化值的影响。方法采用全自动生化仪对存放不同时间动物血液中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBil）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素（Urea）、肌酐（Cre）、葡萄糖（Glu）、总胆固醇（CHO）等生化值进行测定。结果相同温度存放不同时间，血清生化值出现不同程度的变化。其中，存放时间对TP、ALB及CHO影响最为明显。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中，对制备后的血液样本，在一定温度下的存放时间应进行规范与统一。     

NKp46-Cre介导的YFP报告基因系统标记小鼠NK细胞的特异性和效率检测

目的: 检测NKp46-Cre介导的黄色荧光蛋白（YFP）报告基因系统在小鼠体内自然杀伤细胞的效率以及特异性。方法: 通过ROSA26R-YFP与NKp46-Cre小鼠杂交产生后代并且利用基因型鉴定的方法筛选出双阳性的基因型小鼠,流式细胞术检测小鼠体内免疫器官淋巴结,脾脏以及骨髓中的YFP的表达效率,然后用细胞表面抗体标记脾脏的淋巴细胞,分析淋巴细胞群体中YFP阳性细胞的百分比。结果:选取ROSA26R-YFP与NKp46-Cre小鼠杂交后代中基因型为ROSA26R-YFP（+/+）Cre（+/-）的小鼠为实验组,ROSA26R-YFP（-/-）Cre（-/-）的小鼠为对照组;流式细胞术分析免疫器官（淋巴结、骨髓、脾脏）YFP的阳性细胞的比例分别为0.589%±1.02%、1.89%±1.28%、4.53%±1.54%,对照组YFP的阳性细胞的比例分别为0.008%±0.003%、0.126%±0.08%、0.12%±0.004%;两种小鼠的非免疫器官（心脏）无明显YFP阳性的细胞0.009%±0.0002%、0.03%±0.012%;脾脏淋巴细胞系中各免疫细胞（T细胞、B细胞、NK细胞）YFP阳性百分比为89.4%±1.08%、0.89%±0.56%、0.82%±0.82%。结论:NKp46-cre介导的YFP报告基因系统标记NK细胞具有明显的特异性。     

不同背景的自发前列腺癌小鼠模型的病理比较

目的比较不同背景的前列腺癌小鼠(transgenic adenocarcinoma mouse prostate,TRAMP)模型的病理差异并初步探讨其意义。方法比较24周龄TRAMP和TRAMP×FVB小鼠的泌尿生殖系统的相对质量;利用HE染色比较24周的TRAMP和TRAMP×FVB小鼠的肿瘤病理进程的差异,采用免疫组织化学方法检测前列腺组织细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、血管性假血友病因子(von willebrand factor,vWF)和大T抗原(large tumor antigen,Tag)的表达。结果 TRAMP×FVB小鼠前侧前列腺(anterior prostate,AP)的病理等级与TRAMP小鼠比较差异无统计学意义,但背部前列腺(dorsalprostate,DP)、腹部前列腺(ventral prostate,VP)、旁侧前列腺(lateral prostate,LP)的病理等级要明显低于TRAMP小鼠;TRAMP×FVB小鼠PCNA和vWF的表达高于TRAMP小鼠;两种背景小鼠的Tag基因表达及转移情况无明显差异。结论 TRAMP×FVB小鼠前列腺癌的病理进程快于TRAMP小鼠,其病理进程的加快与微血管密度增加及处于增殖期肿瘤细胞数目的增加密切相关。     

Afp-cre-lacZ转基因小鼠的构建

目的 研究甲胎蛋白(Afp)阳性细胞的增殖分化在组织生长修复,肿瘤发生过程中的作用,建立Afp-CreERT转基因小鼠细胞示踪系统.方法 采用DNA雄原核显微注射方法获得Afp-CreERT转基因小鼠,筛选出合适的品系后,使之与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交,获得Cre/lacZ双阳性的Afp-cre-lacZ转基因小鼠.结果 显微注射后,共出生小鼠56只,经PCR鉴定Cre阳性小鼠共4只,阳性小鼠传代后各为一系.筛选内源性Afp表达与Cre表达相对符合的品系作为Afp-CreERT转基因小鼠品系建系.Afp-CreERT转基因小鼠与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交,经PCR鉴定后获得Cre/lacZ双阳性的Afp-cre-lacZ转基因小鼠.经实时PCR,X-gal染色,免疫荧光染色鉴定后得到Afp-cre-lacZ转基因小鼠细胞示踪系统,同时证实该系统能够正确示踪Afp表达阳性的细胞,同时也能够应用于肝损伤小鼠模型中.结论 成功构建了Afp-cre-lacZ转基因小鼠细胞示踪系统,为研究这类细胞的谱系发生提供了工具.     

两种ErbB2/Neu阳性－PTEN缺失乳腺癌基因工程小鼠模型的建立及其生物学特征比较

目的： 建立两种ErbB2/Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型并比较其生物学特征。 方法：利用先前建立的由鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV） 启动子同时驱动活化型ErbB2/Neu基因和重组酶Cre表达的FVB/N-MMTV-NIC小鼠与Flox-PTEN小鼠交配;或将由内源性启动子驱动活化型ErbB2/Neu基因表达的FVB/N-ErbB2KI、FVB/N-MMTV-Cre及Flox-PTEN三种基因工程小鼠交配; PCR分别扩增Neu、Cre和PTEN基因,对其子代小鼠进行基因型鉴定;免疫组织化学法检测乳腺组织ErbB2/Neu和PTEN蛋白表达。对两种模型的成瘤时间、肿瘤数目、肺转移等生物学特征进行比较,观察肿瘤组织病理学形态,免疫组织化学法检测肿瘤细胞Ki-67表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡水平。 结果：经基因型鉴定和组织蛋白表达分析,获得了两种ErbB2/Neu阳性－PTEN纯合型缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型：一是由MMTV外源性启动子同时驱动活化型ErbB2/Neu和Cre表达,抑癌基因PTEN条件性敲除的NIC/PTEN-/-模型;二是由MMTV-Cre使内源性启动子驱动ErbB2/Neu基因表达,PTEN条件性敲除的ErbB2KI/PTEN-/-模型。NIC/PTEN-/-模型的平均成瘤时间低于ErbB2KI/PTEN-/-模型（30 d与368 d,P<0.01）;肿瘤数目、肺转移率均高于ErbB2KI/PTEN-/-模型（分别为10个与1～2个,75.0%与37.5%,均P<0.01）;两种模型肿瘤呈现不同的组织病理形态,肿瘤细胞凋亡水平相当（P>0.05）;NIC/PTEN-/-模型Ki-67阳性细胞百分率高于ErbB2KI/PTEN-/-模型（86.9%±2.8%与37.4%±7.2%,P<0.01）。 结论：两种不同表型的ErbB2/Neu阳性－PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠为探索ErbB2/HER2阳性乳腺癌的发生、发展规律及更有效的防治方案提供了理想的动物模型。     

绿色荧光蛋白转基因小鼠的生理生化常数

目的 测定绿色荧光蛋白转基因小鼠不同年龄段的生理生化、组织病理学等方面的指标,为该品种转基因小鼠应用于毒理学等领域研究提供理论依据.方法 定期测定不同周龄段(4～6周龄,6～8周龄,9～12周龄,13～14周龄)141只绿色荧光蛋白转基因(GFP)小鼠和100只对照组C57BL/6J小鼠的体重和摄食量,对上述两种动物定期取血,测定血生化及血液学指标.对动物进行大体解剖,计算主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺,性腺)的脏器系数并进行组织病理学检测.结果 ①体重和摄食量:4周龄的GFP小鼠,其体重明显低于对照组,差异具有显著性(P<0.01);4～5周龄的GFP小鼠,其摄食量明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.01).②血常规测定:6～8周龄,9～12周龄的GFP小鼠,其红细胞计数(RBC)明显低于对照组,差异具有显著性(P<0.01);9～12周龄,13～14周龄的GFP小鼠,其白细胞计数(WBC)明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.01).③血生化测定:6～8周龄,9～12周龄,13～14周龄的GFP小鼠,其尿酸(UA)值明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.01);6～8周龄,9～12周龄的GFP小鼠,其总蛋白(TP),白蛋白(ALB)明显低于对照组,差异具有显著性(P相似文献   

GLUT4-Cre转基因模型建立与Cre酶特异性表达

目的：建立骨骼肌和脂肪组织特异性表达Cre重组酶基因的转基因小鼠，以期在上述组织细胞中实现相关基因的条件性剔除。方法：选择人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因的启动子驱动Cre重组酶的特异性表达，利用基因重组技术，构建GLUT4-Cre转基因表达质粒。通过显微注射法将该质粒导入小鼠受精卵细胞核，获得的新生鼠经PCR和Southern杂交方法进行基因型的分析鉴定，常规方法培育、传代转基因鼠。用RT-PCR和免疫组化法对Cre酶在阳性转基因鼠体内mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果：获得5只阳性转基因首建鼠，其中3只已建系并稳定传代。在脑、脂肪组织中检测到Cre基因表达，而心肌、骨骼肌及肝脏组织中未检出转基因表达。结论：成功构建了在脑、脂肪组织中特异性表达Cre的转基因鼠，为研究与2型糖尿病、胰岛素抵抗等相关的条件性基因剔除小鼠模型的建立奠定了基础。     

胚胎冷冻技术应用于抗菌肽转基因小鼠的保种传代

目的研究胚胎冷冻在抗菌肽转基因FVB小鼠保种传代中的应用。方法对6~8周正常雌性FVB小鼠进行超排分别与雄性杂合子抗菌肽转基因FVB小鼠交配，收集2-cell胚胎，进行胚胎冷冻。1周后进行胚胎复苏移植，通过PCR方法对仔代鉴定。结果冻存胚胎140枚，复苏获得存活胚胎98枚，移植85枚，产仔38只，获得阳性后代12只。结论通过胚胎冷冻技术保种及复苏移植技术可对抗菌肽转基因小鼠进行传代。     

九味肝泰对小鼠感染乙型肝炎病毒后肝硬化模型的干预研究

目的 观察九味肝泰对小鼠感染乙型肝炎病毒(hepatitis B,HBV)后肝硬化动物模型的影响及其干预机制.方法 将48只BABL/cJ小鼠随机均分为模型组和九味肝泰组,采用高压水注射方法将HBV质粒(50μL)通过尾静脉注入小鼠体内,然后腹腔注射50%CCI4(5 mL/kg)制备HBV肝硬化动物模型,另设12只为空白对照组;九味肝泰组用10%九味肝泰0.5 mL/(10 g.d)灌胃干预性治疗21 d,对照组和模型组灌等体积生理盐水.检测成模后和治疗21 d血清转化生长因子-βl(TGF-βl)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)和肝组织中丙二醛(MDA)水平,并比较血清肝纤维化指标和肝功能.结果 干预性治疗21 d后,九味肝泰组血清肝纤维化指标中血清IV型胶原(cIV)、Ⅲ型胶原(PC-III)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)均明显降低,且TGF-βl和HBV DNA定量显著降低,肝功中谷草转氨酶(AST)、胆红素(TBIL)、谷氨酰转移酶(GGT)、谷丙转氨酶(ALT)和总胆汁酸(TBA)接近正常水平,肝组织中MDA明显降低,且静脉血GSH和SOD提高,与模型组和本组成模后比较,P<0.05.结论 九味肝泰在抑制HBV DNA复制、减轻肝组织纤维化和促进肝功能恢复方面有明确的干预作用.     

人慢性粒细胞白血病动物模型研究进展

目前制备人慢性粒细胞白血病动物模型的方法主要有3种，包括用慢性粒细胞白血病细胞种植免疫缺陷鼠(SCID或NOD／SCID)、用表达P210^bcr／abl逆转录病毒载体转染小鼠骨髓细胞并移植入正常鼠体内和构建bcr／ahl转基因鼠，所有这些慢性粒细胞白血病动物模型的研究有助于加深人们对慢性粒细胞白血病致病机理的认识，本文就目前人慢性粒细胞白血病动物模型的研究进展作一综述。