两种方法测定灯盏花素经Caco-2细胞模型的转运

目的研究灯盏花素经Caco-2细胞模型转运的特性。方法用培养于Transwell上的Caco-2单层细胞模型研究灯盏花素双向转运;采用生物活性测定及HPLC的方法测定介质中灯盏花素或灯盏乙素的转运量。结果两种方法测定结果显示灯盏花素与灯盏乙素的双向转运Papp具有高度一致性,两者Papp(A-B)均小于1×10-6cm.s-1,流出率ER均大于2。结论采用生物活性法测定灯盏花素Papp具可行性。灯盏花素在Caco-2细胞单层吸收上存在明显外排,这可能是其生物利用度极低的重要原因。     

用生物测定法研究肉苁蓉多糖在体外的吸收转运

 目的 用生物测定法考察肉苁蓉多糖（CDPS）在Caco-2细胞模型的吸收转运。方法 用培养于Transwell上的Caco-2细胞模型研究CDPS的吸收转运；采用生物活性测定法测定CDPS在接受侧介质中的含量。结果 Caco-2细胞单层极性与完整性符合实验要求，CDPS在1.87 ~ 40 mg·L-1内，与RAW264.7细胞NO分泌呈明显量效关系，转运量随供侧（AP侧）浓度的增加而增大，不同浓度CDPS P_app( A-B)均小于1 × 10-7 cm·s-1。结论 采用生物活性测定CDPS的P_app具可行性，该药属吸收不良药物，口服吸收率应小于1％。     

Caco-2细胞模型验证指标的选择与评判

 目的建立Caco-2细胞模型并探讨验证该模型指标的选择与评判。方法在所建立的Caco-2单层细胞模型上,通过测定跨上皮细胞膜电阻(TEER),比较膜两侧碱性磷酸酶(ALP)活性,计算几种公认的标记物在单层模型转运参数等对Caco-2细胞单层可靠性进行评价。结果TEER在细胞单层形成过程中稳定增长,膜两侧培养液中ALP活性差异逐步加大,细胞旁及跨细胞转运标记物均呈现可预见的低或高表观渗透系数(P_app)值,P-gp标准底物非索非那定双侧转运流出率(ER)大于2。结论建立的Caco-2细胞模型在完整性、细胞极性、通透性以及P-gp表达等方面均符合胃肠吸收化合物机制研究的要求。     

桑叶中降糖活性成分筛选及其药效学研究

目的:筛选桑叶中α-葡萄糖苷酶(α-GS苷酶)抑制活性最佳组分,并进行体内降糖活性研究。方法:采用柱层析法对桑叶水提物进行分离,利用体外细胞实验筛选出α-葡萄糖苷酶抑制活性最佳组分,并采用链脲霉素诱导的大鼠高血糖动物模型进行跟踪验证。结果:细胞实验结果表明,桑叶提取物中生物碱的α-葡萄糖苷酶抑制活性最强。体内试验中,与模型组比较,生物碱给药组糖尿病大鼠的血糖有明显降低。结论:桑叶中的生物碱具有显著的降血糖的作用(P0.05)。     

9种中药提取物细胞毒性及其与人结肠腺癌细胞系单层细胞旁通透性的相关性研究

目的了解9种中药提取物对Caco-2细胞毒性与对其细胞单层细胞-细胞间通透性的相关性。方法用MTT法测定9种中药提取物24 h及48 h的细胞毒,并计算IC50值。采用TranswellTM培养板构建Caco-2细胞单层,细胞电阻仪测定受试物对其TEER值的影响,找到影响细胞单层紧密连接的临界剂量,以此剂量与细胞毒参数行相关分析。结果 24、48 h细胞毒参数(IC50)与临界剂量(最大无毒剂量、最小有毒剂量)相关系数均>0.84,相关性检验P值均<0.01。最大无毒剂量与IC50的比值列阵显示,《小品方》甘草饮最小,三七醇提物最大。结论 9种中药提取物对Caco-2细胞毒与该细胞单层细胞旁通透性高度相关,采用细胞毒参数来预估中药提取物在Caco-2单层细胞模型供侧起始最大浓度具可行性。     

中药规范化药理实验室建设的探讨

本文分析了近年来国内学者关于中医药实验室规范化建设建议及思考，结合中药药理学科特点，探讨了适合中药药理实验室的规范化建设的行之有效的方法，提出中药规范化药理实验室的建设尤其应重点关注全面质量管理和创新。     

中药规范化药理实验室建设的探讨

本文分析了近年来国内学者关于中医药实验室规范化建设建议及思考,结合中药药理学科特点,探讨了适合中药药理实验室的规范化建设的行之有效的方法,提出中药规范化药理实验室的建设尤其应重点关注全面质量管理和创新.     

开心散有效部位对小鼠学习记忆功能的影响

用药理研究指导植化分离，寻找中药复方开心散有效部位（KXS），探讨其益智作用及机理。采用氢溴东莨菪碱造模，用跳台法和水迷宫测试小鼠的学习记忆能力，测定小鼠大脑组织乙酰胆碱酯酶（AchE）和超氧化物岐化酶（SOD）活性以探讨其作用机理。跳台法测试表明模型组正确区时间（Ts）缩短，KXS能延长Ts，水迷宫实验结果显示，模型小鼠游泳时间明显延长，KXS能缩短游泳时间。KXS能逆转模型小鼠AchE活性的升高和SOD活性的降低。实验结果提示KXS对模型小鼠的学习记忆能力有一定的改善作用。     

利用改良等高线法评价甘草皂苷与桔梗皂苷合用的相互作用

目的：考查甘草皂苷与桔梗皂苷祛痰和抗炎作用的相互作用性质。方法：采用气管酚红排泌、二甲苯致耳肿胀及磷酯酶A2致足跖肿胀模型，运用改良的等高线法对两者合用的相互作用进行评价。结果：随着合用剂量的减少，相互作用评价结果呈现从拮抗到协同的趋势，在较低有效剂量范围内，表现为相加和协同的结果。结论：在固定配比下，合并效应与剂量大小密切相关。     

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之一--采血部位对血液生化值的影响

目的探讨从大鼠不同部位采血对其血液生化值的影响。方法采用全自动生化仪对不同部位采血动物血液中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红索（TBil）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素（Urea）、肌酐（Cre）、葡萄糖（Glu）、总胆固醇（CHO）等生化值进行测定。结果（大鼠）腹主动脉及颈外静脉均与后腔静脉血液生化值在总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）上存在明显差异，表现为前者血清中总蛋白、白蛋白明显高于后者；大鼠眶静脉与股静脉血液生化值在多项指标上亦存在明显区别。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中，对采血部位应进行规范与统一。