机采血小板献血前快速法筛查丙氨酸氨基转移酶后血液检测结果对比分析

目的 对比分析机采血小板献血前是否开展丙氨酸氨基转移酶(ALT)筛查的血液检测结果,为实际工作提供理论依据.方法 收集统计广州2012-2015年机采血小板献血后检测不合格数据,分析机采血小板采血前是否开展ALT初筛后血液检测结果对比.结果 机采血小板献血前是否开展ALT快速筛查的ALT不合格率比较,差异有统计学意义(x2=798.335 6,P<0.05).结论 机采血小板献血前ALT的筛查工作对于避免血液浪费具有重要的现实意义.     

偏瘫患者的针灸治疗心得

1侧偏瘫是脑卒中患者的主要功能障碍之一,该病致残率较高,严重影响了患者的生活能力和生活质量。在现代康复治疗技术中,除采用运动疗法和作业疗法外,针灸仍作为一项主要的治疗手段,被广泛地应用于临床的康复治疗中。在患者发病的不同时期,采用不同的针灸治疗方法,通过5年的临床观察,取得了较好的临床效果,得到了患者的认可。     

HPLC法测定清火栀麦口服液中脱水穿心莲内酯和栀子苷含量

目的建立高效液相色谱法测定清火栀麦口服液中脱水穿心莲内酯和栀子苷含量的方法。方法采用依利特C18（4.6mm×200mm,5μm）色谱柱,脱水穿心莲内酯的流动相为甲醇-水（55∶45）,检测波长为250nm;栀子苷的流动相为乙腈-水（13∶87）,检测波长为238nm。结果脱水穿心莲内酯在0.24～1.20μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率=97.69%,RSD=1.63%;栀子苷在1.68～6.72μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率=101.09%,RSD为2.66%。结论HPLC法能准确、快速地测定清火栀麦口服液中脱水穿心莲内酯和栀子苷的含量。     

pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26I真核表达载体构建及其在NIH3T3细胞中表达

目的 构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1M26I重组表达载体,为进一步研究DJ-1M26I基因的功能及建立转基因动物模型奠定基础.方法 采用突变试剂盒将第26位氨基酸进行突变,分别构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1M26I重组表达载体,采用脂质体转染的方法分别将pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1M26I质粒转染NIH3T3细胞并用G418压力筛选稳定克隆,对获得的2种转染细胞在DNA水平、转录水平和蛋白质水平鉴定.结果 pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1 M26I质粒转染NIH3T3细胞经G418筛选后,经PCR检测分别获得1个和3个阳性细胞克隆,RT-PCR及western blot方法进行DJ-1-His基因表达检测,结果均证明外源插入基因的表达,MTT实验结果初步证明转染DJ-1 M26I基因的NIH3T3阳性细胞组增殖速率低于正常NIH3T3细胞组(P＜0.05).结论 成功构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1 M26I重组表达质载体.     

TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型的建立

目的 建立TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型.方法 构建pEGFP-TNNT3(R69H)转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pEGFP-TNNT3(R69H)注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠.用PCR和Southern blot方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PCR及Western blot的方法检测TNNT3基因表达.结果 8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎82枚,出生40只子代鼠,经PCR和Southern方法检测得到5只转基因阳性小鼠.对其子代小鼠进行RT-PCR、Western blot检测结果显示,TNNT3在转基因小鼠心脏和骨骼肌中表达量明显增多.结论 通过显微注射法使外源基因pEGFP-TNNT3(R69H)在小鼠基因组中整合,成功建立了TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型.     

激肽释放酶转基因大鼠模型的建立

目的建立KLK1转基因大鼠模型。方法腹腔注射PMSG-HCG（150-150IU/kg）超排不同周龄（4-8周）SD大鼠比较超排效果的差异，以可用于注射胚胎数作为评判标准确定最佳超排周龄。构建pBC-klk1转基因构件，经酶切、纯化后通过显微注射方法导入SD大鼠受精卵原核并移植到同期受孕的SD受体母鼠输卵管内。出生后仔鼠用PCR和Southern方法检测鼠尾DNA鉴定基因型，通过RT-PCR和免疫组化方法检测klk1基因表达。结果4-8周SD大鼠超排后分别获得受精卵14±14.8、30±15.2、13.3±13.7、13±14.7、8±5.7，5周龄大鼠超排效果最好，与其他周龄大鼠相比有显差异，P〈0.05；显微注射1538枚卵，移植685（44.53%）枚卵于31只受体输卵管中，12（12/31，38.7%）只怀孕，共产仔62只，经PCR检测获得6只阳性鼠，Southern检测3只阳性。对Southern检测阳性转基因大鼠子代进行RT-PCR检测和免疫组化分析证明klk1基因在肾脏、胰腺和乳腺内表达。结论成功建立klk1基因表达的转基因大鼠模型，该模型是高血压病研究的理想动物模型。     

瑞替普酶溶栓联合疏血通治疗急性ST段抬高型心肌梗死的临床观察

目的 应用瑞替普酶溶栓联合疏血通注射液治疗急性ST段抬高型心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI）患者,评价其再通率、疗效和安全性.方法 将89例经瑞替普酶溶栓的STEMI患者随机分为两组,治疗组联合疏血通治疗,对照组单纯溶栓治疗.比较两组患者溶栓后的再通率、疗效情况,和出血不良反应的发生率.结果 治疗组和对照组总再通率比较无显著改变（P＞0.05）,但治疗组胸闷、胸痛等自觉症状改善明显,硝酸酯类药物用量有不同程度减少,心电图示前抬高的ST段下降幅度较大;治疗组总有效率较对照组显著升高（P＜0.05）;两组患者出血的发生率比较无显著改变（P＞0.05）.结论 瑞替普酶溶栓联合疏血通治疗STEMI患者疗效确切,安全可靠.     

β-连环蛋白在结肠癌细胞及肿瘤球细胞中的表达

目的：研究信号通路β-连环蛋白在人结肠癌ccl187细胞及其肿瘤球细胞中的表达状况。方法：培养ccl187细胞及其肿瘤球,分别提取ccl187细胞和肿瘤球细胞的总RNA,应用半定量RT-PCR和Westernblot方法分别检测β-连环蛋白在ccl187细胞及其肿瘤球中的mRNA水平及蛋白水平的表达。结果：半定量RT-PCR结果显示ccl187细胞和肿瘤球细胞中β-连环蛋白转录水平分别为41.6%和42.6%（P〉0.05）。半定量Western blot结果显示ccl187细胞和肿瘤球细胞中β-连环蛋白的含量分别为36.7%和73.4%（P〈0.05）。结论：信号通路β-连环蛋白在人结肠癌ccl187细胞及其肿瘤球细胞中转录水平基本一致,但肿瘤球细胞中β-连环蛋白被积累,含量显著高于ccl187细胞。     

血浆N末端B型钠尿肽原水平对ACS患者近期预后判断的价值

目的 探讨血浆N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)水平对急性冠脉综合征(ACS)患者近期预后判断的价值.方法 选择ACS患者90例,其中不稳定型心绞痛29例(UAP组)、非ST段抬高型心肌梗死30例(NSTEMI组)、ST段抬高型心肌梗死31例(STEMI组),同期选择健康体检者30例作为对照组,比较各组血浆NT-proBNP水平,随访观察ACS患者3个月内主要不良心脏事件(MACE)发生情况,并分析血浆NT-proBNP水平对MACE的预测价值.结果 ACS患者血浆NT-proBNP水平显著高于对照组(P均＜0.05).STEMI组MACE的发生率(48.39％)显著高于UAP组(10.34％)、NSTEMI组(13.33％)(P均＜0.05).血浆NT-proBNP水平预测3个月内MACE发生的ROC曲线下面积为0.85(95％ CI为0.75 ～0.91,P＜0.01).当血浆NT-proBNP＞ 385 pg/mL时,其预测ACS患者3个月内MACE发生的敏感性为67.5％、特异性为92.8％.结论 血浆NT-proBNP水平可作为ACS近期预后评估的重要指标.     

细胞因子诱导杀伤细胞分化过程中的原子力显微镜观察

目的:利用原子力显微镜(AFM)观测细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)分化过程.方法:流式细胞术检测CIK表型变化,MTT法检测CIK细胞毒活性,免疫磁珠法分离CIK,AFM动态观测CIK细胞表面形态变化.结果:CIK在培养d15～d18数量达到并维持于最高水平.培养d16CIK细胞中CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞群较d10均有不同程度的增加,分别占到(65.17±0.11)%和(17.25±0.04)%.成熟的CIK对多种肿瘤细胞均显示了较强的体外杀伤能力,利用AFM观测其细胞膜表面重要指标即平均粗糙度、峰数、平均峰值高度、平均低谷高度、表面积差值均高于培养d10细胞,P<0.01.结论:成熟CIK细胞膜表面生物蛋白分子明显增加,其细胞膜形态和功能变化密切相关.