散发性结直肠癌组织中hMSH2和hMLH1的表达及其意义

[摘要] 目的 检测错配修复基因hMSH2和hMLH1在散发性结直肠癌组织和正常结直肠组织中的表达,探讨其在结直肠癌发病过程中的意义。方法 采用免疫组化SP法检测结直肠癌和正常结直肠组织中hMSH2和hMLH1的表达。结果 部分结直肠癌组织中有不同程度的hMSH2 和（或）hMLH1蛋白表达缺失,与正常结直肠组织相比差异有显著性（P<0.05）;hMSH2 和 hMLH1蛋白表达缺失与肿瘤组织的分化程度相关（P<0.05）,而与患者性别、年龄、浸润深度、肿瘤组织大小、Dukes分期以及淋巴转移均无明显关系（P>0.05）。结论 结直肠癌组织中hMSH2和（或）hMLH1的缺失可能与部分散发性结直肠癌的发生相关;hMSH2和hMLH1缺失与肿瘤组织的分化程度相关,提示错配修复功能的缺陷可能导致肿瘤恶性程度的加重。     

胃癌微卫星不稳定性和hMSH2基因表达的研究

目的　通过研究胃癌及其癌前病变中微卫星不稳定性与错配修复基因hMSH2蛋白表达 ,来揭示微卫星不稳定性在胃癌演化过程中可能作用机制 ,并探讨导致胃癌中微卫星不稳定性的基因机制。方法　用PCR方法检测 5个微卫星位点MSI表现 ;并通过免疫组化SP法检测hMLH1、hMSH2错配修复蛋白的表达。结果　胃癌组、慢性胃炎组中MSI的阳性率分别为 5 8 82 %(30 5 1) ,2 1 0 5 %(12 5 7)。肠型胃癌与弥漫型胃癌的MSI阳性率间差别有显著性意义 (P <0 0 5 )。在所有标本中仅检测到 1例hMSH2表达缺失 ,异常表达的病例为胃乳头状腺癌。结论　MSI在散发性胃癌的发生及发展过程中均起到了一定作用 ,hMLH1启动子区异常甲基化是导致胃癌MSI的重要因素。     

错配修复基因启动子甲基化和蛋白表达在葡萄胎的发生及恶变中的作用

目的探讨错配修复基因hMLH1和hMSH2启动子甲基化和蛋白表达在葡萄胎的发生及恶变中的作用.方法用甲基化敏感性核酸内切酶HpaⅡ酶切-PCR法,分析正常早孕人流绒毛、部分性葡萄胎(PM)、完全性葡萄胎(CM)和侵蚀性葡萄胎(IM)hMLH1和hMSH2启动子甲基化情况;免疫组化检测hMLH1和hMSH2原位蛋白表达.结果在正常早孕绒毛、PM、CM和IM组织中,hMLH1和hMSH2均表达于细胞滋养细胞,合体滋养细胞大多表达阴性,极少数为弱阳性.正常早孕绒毛组织均未发现hMLH1和hMSH2启动子甲基化,而hMLH1和hMSH2表达全部阳性,阳性率为100%,与PM、CM组织相比,启动子甲基化和蛋白表达均存在显著性差异(P＜0.05).IM中hMLH1和hMSH2启动子甲基化发生率分别为80.0%(12/15)和73.3%(11/15),与PM、CM相比无显著性差异(P＞0.05);IM hMLH1蛋白表达阳性率为54.5%(6/11),与PM、CM相比无显著性差异(P＞0.05);而hMSH2蛋白表达阳性率为36.4%(4/11),明显弱于CM,两者比较有显著性差异(P=0.044).CM和IM组织中hMSH2启动子甲基化与其蛋白表达间存在相关性(P值分别=0.001和0.039).结论hMLH1和hMSH2的高表达对正常细胞滋养细胞基因组的稳定性起着重要的作用;hMLH1和hMSH2启动子甲基化的发生和蛋白表达的缺失参与了葡萄胎的发生.     

错配修复基因hMLH1、hMSH2及p53在肺癌组织中的表达及意义

目的探讨人类错配修复基因hMLH1、hMSH2及D53在肺癌组织中的表达及意义。方法运用免疫组织化学sP法对56例肺癌组织中hMLH1、hMSH2及p53的表达进行检测。结果56例肺癌组织中hMLH1的阳性表达率为35％，hMSH2阳性表达率为28．6％，分化程度高者阳性率显著高于分化程度低者（P〈0．01），有淋巴结转移者hMLH1及hMSH2阳性率低于无淋巴结转移者（P〈0．05），不同病理组织学类型之间hMLH1及hMSH2表达无显著差别（P〉0．05）；56例肺癌组织中，p53阳性率为51．8％，分化程度低者p53阳性率高于分化程度高者（P〈0．05），有淋巴结转移者p53阳性率高于无淋巴结转移者（P〈0．01），不同病理组织学类型之间p53阳性率无差别（P〉0．05）；hMLHI及hMSH2阴性表达者的p53阳性率高于hMLH1及hMSH2阳性表达者（P〈0．05）。结论hMIH1及hMSH2基因的缺陷及p53的表达与肺癌的发生发展过程并与分化程度及有否淋巴结转移有关。     

大肠腺瘤及其癌变错配修复基因hMLH1和hMSH2表达与细胞增殖的关系

目的探讨错配修复基因hMLH1和hMSH2表达在大肠癌发生中的作用及其与细胞增殖间的关系.方法采用免疫组织化学染色法对63例大肠腺瘤、20例腺瘤癌变和20例大肠癌的hMLH1和hMSH2、PCNA和Ki-67表达进行检测.结果大肠腺瘤、癌变和大肠癌中hMLH1、hMSH2阳性表达率逐渐降低,与正常大肠粘膜相比相差显著(P＜0.01),腺瘤不典型增生分级增加其阳性率亦逐渐降低.腺瘤不典型增生Ⅱ、Ⅲ级、腺瘤癌变和大肠癌中hMSH2-者,其PCNA LI显著低于hMSH2 者(P＜0.05);hMSH2表达缺失的大肠癌,其Ki-67 LI较阳性者显著降低(P＜0.05).3组大肠病变hMLH1阳性与阴性表达组间,其PCNA LI和Ki-67 LI无差异显著性.结论提示错配修复基因突变或功能缺失与大肠癌的发生有关,可能系大肠癌发生过程中的早期事件,并对大肠肿瘤细胞增殖活性有所影响.     

无hMLH1/hMSH2生殖系突变的遗传性非息肉病性结直肠癌3家系报道

目的:考察遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系hMLH1/hMSH2生殖系突变的情况.方法:选择13个符合Amsterdam标准的HNPCC家系中的先证者,利用DNA 测序检测hMLH1/hMSH2基因突变情况.对其中不携带hMLH1/hMSH2生殖系突变的HNPCC 家系,利用免疫组化检测hMLH1/hMSH2基因表达、PCR-SSCP检测先证者肿瘤组织的微卫星不稳定性(MSI).结果:13个HNPCC家系的先证者中有3例检测不到hMLH1/hMSH2的生殖系突变.3例无hMLH1/hMSH2突变的先证者中,肿瘤组织的微卫星不稳定检测均为MSI-H,免疫组化检测hMLH1/hMSH2基因表达正常.结论:3个严格符合Amsterdam标准的HNPCC家系中未发现hMLH1/hMSH2基因系突变,提示可能存在其他基因突变导致该3个家系HNPCC肿瘤发生.     

口腔粘膜白斑和鳞状细胞癌中错配修复基因hMLH1、hMSH2的表达

目的：探讨错配修复基因hMLH1、hMSH2在口腔粘膜白斑、口腔鳞状细胞癌中的表达。方法：运用免疫组织化学SP法检测26例正常口腔粘膜、27例口腔粘膜白斑和56例口腔鳞状细胞癌中hMLH1、hMSH2蛋白的表达。结果：正常口腔粘膜、口腔粘膜白斑和口腔鳞状细胞癌中hMLH1蛋白表达的阳性率分别为15.38%（4/26）、48.15%（13/27）和41.07%（23/56）,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）;hMSH2蛋白表达的阳性率分别为23.08%（6/26）、55.56%（15/27）和50.00%（28/56）,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：hMLH1、hMSH2表达异常可能与口腔粘膜白斑癌变及口腔鳞状细胞癌的发生发展有关;检测hMLH1、hMSH2蛋白对口腔粘膜白斑的恶变潜能及口腔鳞状细胞癌的诊断具有指导意义。     

联合检测MLH1、MSH2、MSH6、PMS2在结直肠息肉和结直肠癌中的表达差异及相关性研究

目的探讨错配修复基因(Mismatch Repair,MMR)MLH1、MSH2、MSH6、PMS2在结直肠息肉和结直肠癌中的表达差异及相关性研究。方法随机选取2017年9至2019年2月承德医学院附属沧州市人民医院经内镜切除的结直肠息肉标本127例及手术切除的结直肠癌标本84例,采用免疫组织化学法检测各标本中MLH1、MSH2、MSH6和PMS2蛋白的表达情况,以便探索MMR与结直肠息肉的关系,进一步了解MMR在结直肠息肉-结直肠癌的相关性,以便为早期诊断结直肠癌提供相关依据。结果在84例结直肠癌组织中,hMLH1蛋白的缺失率为23.8%,hMSH2蛋白的缺失率为13.0%,hMSH6蛋白的缺失率为15.5%,hPMS2蛋白的缺失率为29.8%,hMLH1缺失率显著高于hMSH2;在127例结直肠息肉标本中,hMLH1蛋白的缺失率为9%,hMSH2蛋白的缺失率为2%,hMSH6蛋白的缺失率为4.7%,hPMS2蛋白的缺失率为15.7%。结论错配修复蛋白的表达在部分结直肠息肉组织中出现缺失现象,与年龄无关(P0.05),与息肉大小及分化程度密切相关(P0.05),说明结直肠息肉与结直肠癌的发病以及发展存在一定的关系,结直肠息肉是否可以演变为癌?需要进一步研究论证。研究hMLH1、hMSH2、hMSH6和hPMS2四种基因在结直肠息肉和结直肠癌中的表达差异,为临床早期精准化诊断和个体化治疗提供了可能。     

食管癌组织中微卫星DNA序列不稳定性及错配修复基因hMLH1、hMSH2的表达的研究

目的：探讨中国人食管癌组织中微卫星DNA序列不稳定性及错配修复基因hMLH1、hMSH2的表达。方法：应用PCR－聚丙烯酰胺凝胶电泳－硝酸银色染色技术，激光捕获显微切割技术，检测食管癌组织中染色体微卫星DNA序列不稳定性；应用免疫组织化学方法检测hMLH1、hMSH2基因的表达。结果：92例食管癌组织中，发现微卫星DNA序列不稳定性占42．4％；DNA二倍体食管癌患的微卫星DNA序列不稳定性阳性率明显高于异倍体；在39例MIN阳性食管癌组织中，22例发生了hMLH1表达的缺失，16例发生了hMSH2表达缺失，53例MIN阴性食管癌组织中，hMLH1及hMSH2基因的蛋白均呈正常表达。结论：微卫星DNA序列不稳定性及错配修复基因hMLH1、hMSH2的缺失可能在食管癌的发生和发展过程发挥重要作用。     

错配修复蛋白表达水平与肾细胞癌预后

目的 研究错配修复基因hMLH1和hMSH2在不同肾组织中的表达水平及其对肾癌预后的预测。方法 采用免疫组织化学方法检测71例肾癌组织及其癌周正常组织，31例肾良性病变组织石蜡标本中hMLH1、hMSH2的表达水平，同时收集所有标本的详细病理学资料，将蛋白表达水平与病理结果进行对比。结果 hMLH1和hMSH2的表达水平在肾良性病变中均明显高于癌组织和癌周正常组织，在高分化肾癌中均明显高于低分化肾癌，1年内无复发组显著高于1年内复发组；hMSH2在无转移组中的表达显著高于有转移组，而hMLH1在有无转移组的表达差异无显著性意义。结论 hMLH1、hMSH2两种修复蛋白在肾癌和肾良性病变组织中的表达水平有明显差异，且与肿瘤分化程度和肿瘤复发密切相关；hMSH2与肾癌转移有关，hMLH1与转移的关系不明显。hMSH2和hMLH1蛋白表达水平对肾癌预后有一定的预测作用。     

基因hMSH2、hMLH1与p53突变型在散发性大肠癌患者的表达

目的:探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1与p53突变型在散发性大肠癌发生中的作用。方法:用聚合酶链反应和单链DNA多态性分析(PCR-SSCP)对45例散发性大肠癌患者肿瘤组织及正常组织基因hMSH2、hMLH1、p53进行检测。结果:45例散发性大肠癌患者中,发生hMSH2、hMLH1、p53基因突变分别为2、6、22例,分别占4.44%、13.33%和48.89%。hMLH1、hMSH2基因在突变型p53患者中的突变率为27.27%明显高于在p53未发生突变的患者中的突变率8.69%(P<0.05)。结论:一定比例的散发性大肠癌患者中存在MMR基因缺陷,其中hMLH1所起的作用大于hMSH2,散发性大肠癌中MMR基因突变与p53突变密切相关。     

大肠癌中错配修复酶hMLH1、hMSH2及环氧化酶-2表达的研究

目的观察大肠癌中环氧化酶 2 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )、人类mut s同系物 1 (humanmut lhomologue 1 ,hMLH1 )、人类mut s同系物 2 (humanmut shomologue 2 ,hMSH2 )的表达。 方法应用COX 2、hMLH1、hMSH2多克隆抗体 ,采用免疫组织化学方法检测 78例大肠癌手术切除标本中COX 2、hMLH1、hMSH2蛋白的表达情况。结果在所检测的 78例大肠癌组织中 ,hMLH1表达的缺乏率为 2 9.4 9% ,hMSH2表达的缺乏率为 2 8.2 1 % ,COX 2表达阳性率为 74 .36 %。结论在大肠癌中hMLH1、hMSH2蛋白均有一定的缺乏率 ,一部分大肠癌中COX 2呈阳性表达 ,提示大肠癌的发生至少有 2种可能的途径即错配修复酶缺陷和COX 2过表达     

hMSH2、hMLH1的表达与胃癌临床病理及预后关系的研究

目的 探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1蛋白的表达与胃癌临床病理学特性、预后之间的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测40例胃癌中hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况，并对40例胃癌患者的3年存活情况进行随访。结论 40例胃癌标本中， hMSH2减低表达率为35%，hMLH1蛋白降低表达率为52.5%；淋巴结转移阳性的胃癌中，hMSH2、hMLH1蛋白表达明显减低（P<0.05）,并且hMSH2、hMLH1蛋白表达减低的胃癌患者生存率有降低趋势。结论 hMSH2、hMLH1蛋白可能与早期胃癌和胃癌淋巴结转移有关。     

hMSH2、hMLHl在胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1蛋白的表达与胃癌临床病理学特性之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测40例胃癌及50例胃炎组织中hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况,并研究其与胃癌临床病理之间的关系。结果:40例胃癌标本中,hMSH2减低表达率为35%,hMLH1蛋白降低表达率为72.5%;淋巴结转移阳性的胃癌中,hMSH2、hMLH1蛋白表达明显减低。结论:hMSH2、hMLH1蛋白可能与早期胃癌和胃癌淋巴结转移有关。     

遗传性非息肉病性结直肠癌患者hMLH1和hMSH2基因的突变规律

目的 探讨中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)患者hMLH1与hMSH2基因的突变特点.方法 对76个HNPCC家系先证者的DNA样本用PCR法扩增其hMLH1与hMSH2基因的35个外显子,再进行测序以确定突变类型.结果 (1)25个样本发现hMLH1或hMSH2基因突变,总突变率为33%(25/76);(2)检测到的22种突变中:hMLH1基因突变16个,hMSH2基因突变6个;(3)突变类型包括移码突变、无义突变、剪接区突变、错义突变,其中错义突变较多见(hMLH1基因错义突变11个、hMSH2基因5个).结论 中国人HNPCC家系hMLH1和hMSH2突变谱广泛,突变类型多样,hMLH1突变较hMSH2突变多见.     

青年大肠癌微卫星不稳定和hMLH1/hMSH2表达缺失在遗传性非息肉病性大肠癌初筛中的应用

目的 探讨青年大肠癌中微卫星不稳定发生率和hMLH1/hMSH2表达缺失率及其在遗传性非息肉病性大肠癌初步筛查中的作用.方法 对73例中国南方青年大肠癌患者(年龄≤40岁)进行微卫星不稳定和hMLH1/hMSH2蛋白免疫组化检测.结果 微卫星不稳定性发生率为56.16%,hMLH1和/或hMSH2表达缺失率为49.32%,二者皆随患者发病年龄的降低而迅速增加;二者对阳性病例的检出率相似.结论 中国人青年大肠癌DNA错配修复基因缺陷为频发事件,运用微卫星不稳定分析和hMLH1/hMSH2蛋白免疫组化检测可在青年大肠癌有效地进行HNPCC患者及家系的初步筛查.     

多重连接依赖的探针扩增技术检测中国人遗传性非息肉病性结直肠癌错配修复基因大片段缺失

目的了解中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系hMSH2和hMLH1基因大片段缺失特点。方法采用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术和GeneMapper分析技术检测17个HNPCC家系先证者hMSH2和hM-LH1基因种系大片段缺失。结果在3个家系中分别发现hMSH2基因第8外显子、1~6外显子和1~7外显子3种大片段缺失类型,未发现hMLH1基因大片段缺失。大片段缺失占hMSH2和hMLH1基因总种系病理性突变的19%。结论中国人HNPCC错配修复(MMR)基因大片段缺失发生率较高,hMSH2基因缺失可能更为常见。在分子遗传学检测中有必要开展MMR基因大片段缺失的检测。