非小细胞肺癌合并孤立性肾上腺转移瘤预后及影响因素分析

目的:分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)合并孤立性肾上腺转移瘤患者预后及其影响因子。方法:回顾分析中山大学附属第三医院2001-01-01-2010-12-31收治的NSCLC合并孤立性肾上腺转移瘤患者住院及随访资料,用Kaplan-Meier法及Cox模型分析生存情况,筛选临床基线、治疗方式、病理类型、原发灶及转移瘤特征等预后影响因素。结果:NSCLC合并孤立性肾上腺转移的患者共计22例,总体中位生存时间11个月(9.4~12.6个月),1年生存率51.4%(29.6%~73.2%)。10例患者接受了肺部病灶及肾上腺转移瘤切除术,12例患者采取保守治疗,手术组与保守治疗组中位生存时间分别为9和12个月,差异无统计学意义,P=0.209。单因素分析显示,不同ECOG评分患者间存在生存差异,各分值对应中位生存期为0分14个月,1分11个月,2分8个月,3分6个月,P=0.024。多因素分析显示,仅ECOG评分进入Cox比例风险方程,P=0.033,RR=1.95。结论:ECOG评分及病理类型可能是孤立性肾上腺转移NSCLC患者预后的影响因素。对于ECOG评分差、合并N2纵隔淋巴结转移者,手术治疗应慎重考虑。     

肺癌组织p16基因启动子区甲基化的研究

DNA甲基化可以引起染色体结构、DNA构型和稳定性及DNA与蛋白质分子相互作用方式的改变，从而控制基因表达。研究发现，基因缺失和启动子区异常甲基化是p16基因失活的主要原因。我们联合应用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR，MSPCR)、逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化方法检测肺癌组织中p16基因的异常改变，以了解p16基因在肺癌发生发展中的作用。     

肺癌组织中p16基因mRNA表达及其临床意义

目的　检测肺癌组织中p16基因mRNA的表达情况 ,探讨p16基因在肺癌发生发展过程中的作用。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测肺癌组织中p16基因mRNA的表达。结果　肺良性疾病组织、癌周正常肺组织p16基因mRNA表达高于肺癌组织 ,差异有显著性 (P分别 <0 .0 5 ) ;小细胞肺癌p16基因mRNA阳性率 (10 0 %)高于非小细胞肺癌 (4 6.0 %)P <0 .0 5 ;临床Ⅰ、Ⅱ期p16基因mRNA阳性率 (75 .0 %)高于临床Ⅲ、Ⅳ期 (3 4.1%) ,P <0 .0 5 ;无淋巴结转移的病例p16基因mRNA阳性率 (73 .3 %)高于有淋巴结转移的病例 (3 3 .3 %) ,P <0 .0 5 ;高、中分化病例组p16基因mRNA表达阳性率 (5 4.5 %)与低分化病例组 (4 4 .0 %)之间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　p16基因的异常改变可能参与了非小细胞肺癌发生发展过程 ,p16基因mRNA的表达检测作为一种辅助指标。     

P-糖蛋白,GST-π,TopoⅡ在食管癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨P-gp、GST-π、TopoⅡ在食管癌组织中的表达及意义.方法采用免疫组织化学方法研究了P-gp、GST-π、TopoⅡ在食管癌组织中的表达情况.结果P-gp、GST-π在食管癌组织中的表达升高,表达率分别为58.02%和72.84%,P-gp的高表达与淋巴结转移、癌肿浸润深度有关(P＜0.05).GST-π的高表达与细胞分化程度有关(P＜0.05).TopoⅡ在食管癌组织中的表达降低,表达率为61.73%,TopoⅡ的表达降低与临床病理参数无关(P＞0.05).结论食管癌组织中存在着P-gp、GST-π、TopoⅡ表达水平的变化,临床检测P-gp、GST-π、TopoⅡ对食管癌化疗方案的制定、判断预后有重要的指导意义.     

中国人原发性食管癌微卫星DNA序列的不稳定性研究

目的检测微卫星DNA序列的不稳定性在中国人原发性食管癌中的表达并探讨其与食管癌临床病理特征之间的关系。方法应用PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染色技术,检测63例中国人原发性食管癌组织中做卫星DNA序列的不稳定性。结果食管癌中微卫星DNA序列不稳定性的发生率为41．2％;微卫星DNA的不稳定性与肿瘤的病理类型有关,而与临床分期、病理分级、淋巴结转移、癌组织的侵袭性等无关。结论中国人食管癌组织中存在微卫星DNA序列的不稳定性,可能是食管癌发生过程中的早期事件．并且可能更多的参与了食管小细胞癌的发生。     

不同平面胸交感神经链切断治疗手汗症的前瞻性随机对照研究

目的探讨胸腔镜下R2—4及R2—3交感神经链切断术治疗手汗症术后患者满意度差异性及相关因素分析。方法2008年8月至2010年8月116例严重手汗症患者行手术治疗,患者随机分为两组,行胸腔镜下R214交感神经链切断术称为R2—4组,行胸腔镜下R3—4交感神经链切断术称为R3—4组。所有患者均在气管内静吸复合麻醉、胸腔镜下行双侧交感神经链切断术,术后通过电话问卷方式对患者进行随访,评价手术疗效、副作用。结果所有患者术后手汗症状得到解决,术后两组患者生活质量评分表得分均明显降低,但两组患者之间术前及术后1个月、6个月和12个月评分均无明显差异（P=0．859,0．056,0．229,0．367）。单因素分析表明严重代偿性多汗与患者满意度在术后1个月、6个月和12个月均呈负相关（P=0．000,0．000,0．000）。术后1个月仅患者家族史与满意度相关fP：0．019）,术后6个月及术后12个月患者年龄、性别、病史、体重指数和不同切除平面均与患者满意度不相关fP〉0．05）。结论胸腔镜下R2—4及R2—3交感神经链切断术均是治疗手汗症安全有效的方法。降低交感神经链切除平面或减少切除范围不能增加患者满意度;术后严重代偿性多汗与术后患者满意度成负相关,家族史可能和术后患者满意度相关。     

p21活化激酶6削弱非小细胞肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的分子机制

 目的：探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA（miRNA）与非小细胞肺癌侵袭及迁移的关系,并了解PAK6下游分子信号机制。方法：通过生物信息学数据库预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Western blotting及实时定量荧光PCR（real-time PCR）检测A549细胞中PAK6的表达量,萤光素报告酶实验检测预测miRNA对PAK6的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响。转染目标miRNA及siPAK6,Western blotting检测A549细胞基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达量。结果：生物信息学预测miR-23a可能是调控PAK6的靶向miRNA。Western blotting检测转染miR-23a组PAK6表达量下降69％,而转染miR-23a抑制剂组PAK6表达量上升52％,差异均有统计学意义。萤光素报告酶实验结果显示,转染miR-23a后野生型PAK6组萤光素酶活性下降52％,而突变组差异无统计学意义（P＞0.05）。Real-time PCR检测3组PAK6 mRNA的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。体外迁移及侵袭实验示,转染miR-23a组迁移细胞数减少73％,侵袭的细胞数减少59％。Western blotting检测发现,转染siPAK6组MMP-9的表达下降85％（P＜0.01）,转染miR-23a组MMP-9的表达下降76％（P＜0.01）。结论：miR-23a通过PAK6-MMP-9信号途径引起非小细胞肺癌细胞迁移及侵袭能力的下降。     

气道上皮细胞衍生的胰岛素样生长因子触发偏移CD8~+T细胞极化

目的探讨气道上皮细胞衍生的胰岛素样生长因子(IGF1)对CD8+T细胞极化的影响。方法人气道上皮细胞株RPMI2650与鼠过敏原Der p1共培养72 h,用定量PCR及Western免疫印迹检测其IGF1表达情况。将前述上皮细胞、重组IGF1和IGF1抗体分别加入抗体激活的CD8+T细胞中培养,用流式细胞仪检测细胞凋亡。检测Der p1活化的上皮细胞及IGF1对CD8+T细胞p53基因甲基化及表达的影响。结果加入Der p1共同孵育后,RPMI2650细胞IGF1mRNA(23.1%±5.2%vs 5.2%±2.3%,P<0.01)和蛋白表达(33.4±6.4 vs 9.2±4.6,P<0.01)均明显增加。将CD3/CD28抗体激活的CD8+T细胞与Der p1活化的上皮细胞共培养,凋亡细胞增加的趋势被抑制(41.7%±8.2%vs5.2%±1.8%,P<0.01)。直接加入重组IGF1有同样效果,而IGF1抗体能阻断该效应。Der p1活化的上皮细胞能抑制活化CD8+T细胞p53基因mRNA(29.1%±5.9%vs 16.2%±4.3%,P<0.01)和蛋白表达(63.3±8.9 vs 26.9±5.6,P<0.01),加入IGF1抗体后这种作用消失。重组IGF1使CD8+T细胞p53基因甲基化增加。结论 Der p1蛋白能够诱发RPMI2650细胞产生IGF1,后者通过诱导p53基因甲基化抑制CD8+T细胞凋亡。     

手足多汗症患者中肺大疱及气胸的临床研究

目的：探讨手足多汗症患者中肺大疱及气胸的发生情况,为临床提供参考数据。方法行针形胸腔镜双侧T3～4交感神经链切断术的426例手足多汗症患者为研究对象,所有患者术前均无肺或胸膜疾病。术中观察并记录426例双肺肺大疱发生情况,并将其分为肺大疱组及无肺大疱组,分析BMI以及吸烟与肺大疱的发生关系,术后随访有肺大疱及无肺大疱者气胸的发生情况。结果肺大疱组24例、无肺大疱组402例,肺大疱发生率为5.6％。肺大疱组患者BMI明显小于无肺大疱组[（20.9±2.2）kg/m2 vs （22.2±2.7）kg/m2,P＜0.05）]。肺大疱组吸烟人数与无肺大疱组比较差异无统计学意义,但肺大疱组吸烟者的吸烟指数明显高于无肺大疱组（172.0±67.2 vs 75.7±50.9,P＜0.05）。吸烟指数为肺大疱的危险因素（OR 1.01,95％CI 1.003～1.018）,BMI为肺大疱的保护因素（OR为0.81,95％CI为0.665～0.985）。在吸烟且BMI≤18.5 kg/m2的患者中,肺大疱的发生率明显升高（OR为2.185,95％CI为1.144～33.198）。全组患者随访0.5～7.5年,无气胸发生。结论手足多汗症患者肺大疱的发生与低BMI及高吸烟指数相关,但肺大疱与气胸发生的相关性尚需经进一步研究证实。     

人卵巢恶性肿瘤组织染色体微卫星DNA序列的不稳定性及其临床意义

目的：检测人卵巢恶性肿瘤组织染色体微卫星DNA序列的不稳定性并探讨其与临床病理特征的关系。方法：应用PCR－聚丙烯酰胺凝胶电泳－硝酸银染色技术，检测60例原发卵巢恶性肿瘤组织染色体微卫星DNA序列的不稳定性。结果：21例卵巢恶性肿瘤组织存在微卫星的不稳定（35．0％），微卫星的不稳定与肿瘤的病理分级，淋巴结转移及组织学类型有关，与患者的年龄、临床分期无关。结论；微卫星DNA序列的不稳定性可能在卵巢癌恶性肿瘤尤其是特殊类型肿瘤的发生过程中起较为重要的作用，并且与卵巢恶性肿瘤的不良预后有关。