骨形态发生蛋白-2/胶原/掺锶羟基磷灰石材料修复颅骨缺损

目的 制备骨形态发生蛋白-2( BMP-2)/胶原/掺锶羟基磷灰石材料并探讨其修复大鼠颅骨缺损的可行性和有效性.方法 扫描电镜观察Ⅰ型胶原制备单纯胶原、胶原/羟基磷灰石、胶原/掺锶羟基磷灰石、BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石4组骨修复材料表面结构.用BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石材料浸提液进行细胞毒性试验和体外溶血试验评价其生物相容性.在大鼠头颅制备颅骨极限骨缺损模型,分别植入4种骨修复材料.术后12周CT扫描观察骨缺损修复影像学.苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察骨缺损组织学变化,并在骨缺损及其周围新生骨部位行骨桥蛋白( OPN)和β-连环蛋白(β-catenin)免疫组织化学染色.结果 在扫描电镜下观察发现单纯的胶原材料为交织样物质结构,胶原/羟基磷灰石材料为交织晶体板状结构胶原/掺锶羟基磷灰石和BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石材料晶体结构为单晶体交织状.BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石材料浸提液对细胞相对增殖率(RGR)无显著影响(P＞0.05),材料的细胞毒性为1级.骨缺损CT扫描平均CT值分别为(98.5±10.2)、(208.4±19.5)、(418.4±27.1)、(476.8±30.5)hu,BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石材料缺损部位CT值最高.HE和Masson染色见BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石组骨质愈合完全,原骨缺损处多为红色成熟骨.胶原/掺锶羟基磷灰石组植入区内蓝色的新生骨较多.胶原/羟基磷灰石材料组,植入区在植入材料边缘新生骨形成,界限仍然清晰.单纯胶原组骨质未愈合,骨缺损处为淡蓝色条索状结构,中间未见骨形成.对比其他3组,BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石组存在大量棕色的OPN和β-catenin染色阳性新生骨组织,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 BMP-2/胶原/掺锶羟基磷灰石材料促进骨修复能力强于单纯胶原、胶原/羟基磷灰石、胶原/掺锶羟基磷灰石材料.     

散发性结直肠癌组织中hMSH2和hMLH1的表达及其意义

[摘要] 目的 检测错配修复基因hMSH2和hMLH1在散发性结直肠癌组织和正常结直肠组织中的表达,探讨其在结直肠癌发病过程中的意义。方法 采用免疫组化SP法检测结直肠癌和正常结直肠组织中hMSH2和hMLH1的表达。结果 部分结直肠癌组织中有不同程度的hMSH2 和（或）hMLH1蛋白表达缺失,与正常结直肠组织相比差异有显著性（P<0.05）;hMSH2 和 hMLH1蛋白表达缺失与肿瘤组织的分化程度相关（P<0.05）,而与患者性别、年龄、浸润深度、肿瘤组织大小、Dukes分期以及淋巴转移均无明显关系（P>0.05）。结论 结直肠癌组织中hMSH2和（或）hMLH1的缺失可能与部分散发性结直肠癌的发生相关;hMSH2和hMLH1缺失与肿瘤组织的分化程度相关,提示错配修复功能的缺陷可能导致肿瘤恶性程度的加重。     

源头分类对农村生活垃圾就地处理的影响研究

通过实地调研,对长沙周边农村生活垃圾的产生量、组成及其随季节和经济条件变化的特征等进行了研究。针对农村生活垃圾分类收集模式,对其分类成效和经济效益进行分析。结果表明,源头二次分类方式更优于源头一次分类方式。源头二次分类可减少85.9%的有机垃圾,而源头一次分类方式仅能减少38.89%。分类投放使收集后的二次分类和终端处理的垃圾量减小30%以上。     

沙眼衣原体热休克蛋白10基因的克隆及其在真核细胞中的表达

目的:从临床标本中获得构建真核表达重组质粒,利用脂质体体外转染Hela细胞获得cHSP10。方法:用PCR法从金标法检测为阳性的临床标本中扩增cHSP10基因片断,重组λpMD18-T克隆载体。将pMD18-T/cHSP10中的外源基因片断经酶切鉴定后,克隆入λpcDNA3.1(+)中,经序列分析和酶切鉴定后,运用脂质体将该重组体转染Hela细胞,间接免疫荧光法观察目的基因的表达。结果:PCR扩增得到的306bpcHSP基因全长,序列测定与GenBank(M58027)发布序列一致;构建得到cHSP10基因真核表达载体;该真核表达载体在Hela细胞表达cHSP10。结论:成功构建了cHSP10基因真核表达载体,该重组质粒能在Hela细胞中表达cHSP10。     

慢性血吸虫病并结直肠癌中hMSH2和hMLH1的表达

目的:探讨hMSH2/hMLH1蛋白表达与慢性血吸虫病并结直肠癌之间的相关性及其可能的作用机制.方法:应用免疫组化SP法检测67例慢性血吸虫病并结直肠癌患者癌变组织及癌旁正常组织中hMSH2/hMLH1蛋白的表达情况.结果:慢性血吸虫病并结直肠癌患者癌变组织中hMSH2/hMLH1蛋白表达丢失率为28.4%,而癌旁正常结直肠组织中表达丢失率为1.5%(P=0.000);在黏液腺癌中hMSH2/hMLH1蛋白表达明显减低(P<0.05);逐步回归法进行Logistic多因素分析结果显示组织学分型是hMSH2/hMLH1表达缺失的唯一危险因素(OR=3.333,95%C 1.096～10.141,P=0.034).结论:hMSH2/hMLH1蛋白缺失与结直肠癌组织学分型有关;hMSH2/hMLH1蛋白缺失在慢性血吸虫病并结直肠癌中起重要作用,微卫星不稳定性可能参与了慢性血吸虫肠病发展为结直肠癌的恶性转化过程.     

转染骨形态发生蛋白-2基因的人脐带间充质干细胞成骨研究

目的 观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因转染人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对其成骨分化和体内异位成骨的影响.方法 实验分为3组,空白组:10％胎牛血清+ DMEM培养基,对照组:10％胎牛血清+DMEM培养基+空慢病毒载体转染,实验组:10％胎牛血清+DMEM培养基+BMP-2+增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染,检测3组不同培养基培养后人脐带间充质细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性变化,蛋白印迹法检测骨桥蛋白(OPN)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)、BMP-2的蛋白表达变化.yon kossa染色观察hUCMSC钙结节形成.大鼠肌袋内植入BMP-2转染hUCMSC/COL1,通过CT三维重建及苏木素-伊红(HE)染色观察其体内成骨能力.结果 hUCMSC BMP-2转染良好,转染率可达到(90.95±4.35)％,实验组细胞在第5天,ALP活性就由(26.492 ±7.105) U/g·蛋白增加至(38.625±11.592) U/g·蛋白,在第14天,实验组的ALP的活性可以高达(49.732±13.068) U/g·蛋白,对比空白组和对照组都有明显增加(P＜0.05).对比空白组和对照组,实验组COL1、BMP-2和OPN蛋白呈现高表达(P＜0.05).转染BMP-2基因后,hUCMSC培养28 d可形成大量的钙结节.BMP-2转染hUCMSC/COL1在大鼠肌袋内可异位成骨.结论 转染BMP2基因可促进hUCMSC细胞成骨能力.     

沙眼衣原体热休克蛋白10基因真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达

目的从临床标本中获得沙眼衣原体（Ct）热休克蛋白（cHSP）10基因，构建真核表达重组质粒。利用脂质体体外转染Hela细胞，为研究cHSPl0生物学功能和Ct核酸疫苗的研制做准备。方法用PCR技术从40例金标法阳性的临床标本中扩增cHSP10基因片断，重组入pMD18-T克隆载体。将pMD18-T／cHSP10外源基因片断经酶切鉴定后。克隆入pcDNA3．1（＋）中，经过序列分析和酶切鉴定后，运用脂质体将该重组体转染Hela细胞。ELISA方法观察目的基因的表达。结果PCR扩增得到cHSP基因全长。大小为306bp，序列测定与GmxBank（M58027）发布的序列一致；构建得到cHSP10基因真核表达载体；该真核表达载体在Hela细胞表达cHSP10。结论成功构建cHSP10基因真核表达载体，该重组质粒能在Hela细胞中表达cHSP10，为进一步研究cHSP10生物学功能和Ct核酸疫苗的研制提供了实验基础。     

对高校教学区垃圾的分析与处理

分析了校内教学区垃圾现场样本的组成和物理性状,并对其产生和处理现状作了调查,提出了对该类垃圾进行资源回收利用的处理思路。