七叶皂苷钠诱导人单核白血病SHI-1细胞凋亡的研究

目的研究七叶皂苷钠对人急性单核白血病细胞株SHI-1细胞的抑制增殖及诱导凋亡的作用。方法 SHI-1细胞经不同浓度的七叶皂苷钠处理后,MTT法分析七叶皂苷钠对SHI-1细胞增殖的抑制作用,AnnexinⅤ/PI染色流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,DNA凝胶电泳观察凋亡特异性DNA降解梯形条带,半定量PCR检测凋亡特异性酶Caspase-3 mRNA表达水平。结果MTT法显示七叶皂苷钠能显著抑制SHI-1细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。经不同浓度的七叶皂苷钠处理24h,AnnexinⅤ/PI染色显示AnnexinⅤ阳性的凋亡细胞率明显上升,DNA琼脂糖凝胶电泳分析出现凋亡特异性的DNA降解梯形条带,半定量PCR显示Caspase-3 mRNA表达水平随药物浓度增加而升高(P<0.05)。结论七叶皂苷钠对SHI-1细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,可能是其抗白血病作用途径之一。     

菱角提取物诱导 HL-60 细胞凋亡的机制探讨

目的 探讨菱角提取物对人早幼粒细胞性白血病细胞株 HL-60 细胞增殖和凋亡的影响及凋亡的分子机制。方法 采用 MTT 法检测菱角提取物对 HL-60 细胞的增殖抑制作用;吖啶橙染色和 DNA 琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化;比色法测定 Caspase-3、9 蛋白活性。结果 菱角提取物能抑制 HL-60 细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性。菱角提取物可诱导 HL-60 细胞凋亡并显示一定的剂量依赖关系。与对照组比较,菱角提取物可明显降低 HL-60 细胞线粒体膜电位,上调 Caspase-3、9 蛋白活性。结论 菱角提取物可抑制 HL-60 细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位、激活 Caspase-3、9 蛋白继而诱导 HL-60 细胞凋亡有关。     

抑制PI3K通路增强CAHB对Jurkat细胞的凋亡作用

目的 探讨CAHB单独使用及与LY294002联合应用对Jurkat细胞体外作用的影响.方法 分别用不同剂量的CAHB(0、5、10、20、40mmol/L)诱导Jurkat细胞,用MTS法检测Jurkat细胞的增殖抑制效应,流式细胞术分析Jurkat细胞凋亡情况;取40mmol/L浓度的CAHB加入PI₃K抑制剂LY294002,流式细胞术分析Jurkat细胞凋亡情况.结果 CAHB对Jurkat细胞生长有显著的抑制作用,并能显著诱导Jurkat细胞发生凋亡,其作用呈明显剂量、时间依赖性.PI₃K抑制剂LY294002能显著增强CAHB对Jurkat细胞的凋亡作用.结论 CAHB能抑制Jurkat细胞增殖,并诱导其凋亡.抑制PI₃K通路能增强CAHB对Jurkat细胞的凋亡作用.     

苣荬菜挥发油对人白血病Jurkat细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究苣荬菜挥发油对人白血病 Jurkat 细胞增殖和凋亡的诱导作用。方法 通过超临界 CO₂ 流体萃取工艺从苣荬菜中提取挥发油;采用不同质量浓度的挥发油和柔红霉素处理 Jurkat 细胞,MTT 法测定苣荬菜挥发油抑制 Jurkat 细胞增殖的剂量-效应关系;TUNEL 法、流式细胞术分析其细胞凋亡率。结果 苣荬菜挥发油对 Jurkat 细胞增殖的抑制作用随着药物质量浓度增加和作用时间延长而更加明显,药物质量浓度与细胞增殖抑制率极显著相关。且200、20 μg/mL 剂量组与对照组相比均差异显著 (P＜0.05),200 μg/mL 剂量组与柔红霉素组有显著差异 (P＜0.05)。TUNEL 法、流式细胞术分析结果表明,苣荬菜挥发油能诱导 Jurkat 细胞凋亡,且这种作用存在剂量-效应关系。结论 苣荬菜挥发油可抑制 Jurkat 细胞的增殖并诱导其凋亡。     

江浙蝮蛇毒对体外培养人滑膜细胞凋亡的影响

目的 探讨江浙腹蛇毒 (AHV) 诱导类风湿性关节炎 (RA) 患者滑膜细胞凋亡的作用及对相关蛋白 Caspase-3 表达的影响。方法 AHV 处理培养的滑膜细胞后，采用 MTT 比色法检测 AHV 对滑膜细胞增殖的抑制作用，并采用流式细胞仪 (FCM) 检测细胞凋亡率，以免疫组织化学法检测 Caspase-3 蛋白的表达。结果 MTT 的检测结果显示 5 μg/mL AHV 处理组滑膜细胞增殖抑制率达 67.2%，且与时间、剂量具有正相关关系 (P＜0.05)，AHV 体外作用滑膜细胞 24 h 的 IC₅₀ 为 3.508 μg/mL。流式细胞仪结果显示，与对照组相比，AHV 各剂量组凋亡率明显增加 (P＜0.05)，并与剂量呈正相关。AHV 体外作用滑膜细胞 24 h 时出现了明显的 Caspase-3 蛋白表达，其蛋白表达率明显高于对照组。结论 AHV 对滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用，细胞凋亡率明显增加可能与 AHV 诱导滑膜细胞 Caspase-3 活化相关。     

毛酸浆内酯诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制研究

[目的] 探讨毛酸浆活性成分毛酸浆内酯（PPB）诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制。[方法] 采用噻唑蓝法（MTT法）检测PPB对MCF-7细胞及人外周血单核细胞（hPBMC）增殖的影响;克隆形成实验考察PPB对MCF-7细胞克隆形成的影响;MTT法考察泛半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）抑制剂Z-VAD-fmk对PPB诱导MCF-7细胞死亡的作用;Western Blot法考察PPB处理后凋亡相关蛋白PARP、Caspase-7/8/9、Cytochrome c、Bax、Bcl-2、Fas及FADD的表达水平。[结果] PPB时间、剂量依赖性抑制MCF-7细胞生长,且对hPBMC无明显细胞毒性;PPB呈剂量依赖性地抑制MCF-7细胞克隆形成;PPB处理后,凋亡特征性蛋白PARP、原型Caspase-7蛋白表达量显著减少,而Cleaved PARP、Cleaved Caspase-7显著增加;同时内源性凋亡途径相关蛋白Bax、Cleaved Caspase-9、Cytochrome c表达量显著上调,而Bcl-2及Caspase-9原型形式显著下调。外源性凋亡相关蛋白Fas、Cleaved Caspase-8及FADD表达量上调,而Caspase-8原型形式显著下调;加入Z-VAD-fmk可显著逆转PPB诱导的MCF-7细胞死亡。[结论] 毛酸浆活性成分PPB可以诱导MCF-7细胞发生内源性和外源性凋亡。     

AKT抑制剂GSK2141795诱导人肝癌细胞株Huh7凋亡的剂量和时间效应

目的 观察不同药物浓度和作用时间下蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶AKT抑制剂GSK2141795对人肝癌细胞株Huh7凋亡的影响及其剂量和时间效应。方法 分别使用终浓度为0、0.3、1、3、10、30 μmol/L的GSK2141795处理Huh7细胞24 h,同时选择终浓度为10 μmol/L的GSK2141795分别处理Huh7细胞0、2、6、12、24和48 h。利用蛋白质印迹法检测Huh7细胞中AKT、磷酸化AKT^S473（p-AKT^S473）的蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qPCR和蛋白质印迹法分别检测细胞中凋亡相关分子Bad、Bcl-2、Caspase-9的表达水平。结果 蛋白质印迹分析结果显示,在0～10 μmol/L范围内,随着GSK2141795终浓度的增加,Huh7细胞中AKT蛋白表达水平逐渐降低,p-AKT^S473蛋白表达水平逐渐升高;在0～24 h范围内,随着GSK2141795作用时间的延长,Huh7细胞中AKT蛋白的表达水平呈降低趋势、p-AKT^S473蛋白的表达水平呈升高趋势;48 h时AKT蛋白和p-AKT^S473蛋白的表达水平较0 h均升高。流式细胞术检测结果显示,随着GSK2141795浓度的增加和作用时间的延长,Huh7细胞的凋亡比例逐渐增加。qPCR及蛋白质印迹分析结果提示Huh7细胞中凋亡效应分子Bad、Caspase-9表达水平逐渐增加,凋亡拮抗分子Bcl-2表达水平逐渐降低。结论 AKT抑制剂GSK2141795能有效抑制AKT蛋白表达,并能通过下游Bad-Bcl-2通路诱导Huh7细胞凋亡,其药物效应呈一定的浓度和时间依赖性。此外,长时间使用GSK2141795刺激Huh7细胞,AKT蛋白表达可再次升高,提示存在负反馈信号环路。     

羊栖菜多糖SFPS-B1诱导SGC-7901细胞凋亡及对细胞［Ca2+］i和pH值的影响

目的 研究羊栖菜多糖 SFPS-B1 诱导人胃癌细胞 SGC-7901 凋亡作用及对细胞［Ca²⁺］_i 和 pH 值的影响。方法 采用 MTT 法检测 SFPS-B1 对细胞增殖的影响;采用荧光显微镜观察细胞凋亡形态;采用激光共聚焦显微镜观察 SFPS-B1 对 SGC-7901 细胞［Ca²⁺］_i 和 pH 值的影响。结果 SFPS-B1 对 SGC-7901 细胞增殖有抑制作用,可使细胞体积缩小、出现凋亡小体。药物作用后细胞［Ca²⁺］_i 明显上升,pH 值明显降低。结论 SFPS-B1 具有抑制人胃癌 SGC-7901 细胞增殖并诱导凋亡作用,对细胞［Ca²⁺］_i 和 pH 值的影响在其诱导 SGC-7901 细胞凋亡中发挥了作用。     

亚麻木酚素对肺癌A549细胞的抑制作用及其机制

目的 观察亚麻木酚素（SDG）对肺癌A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法 在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的SDG（5、10、20、40 μmol/L）,MTT观察细胞增殖情况;Transwell小室评价细胞侵袭能力;Hochest染色观察细胞凋亡情况;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）活性;Real Time PCR、Western Blotting检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和蛋白表达。结果 SDG呈时间-浓度依赖性抑制A549细胞的增殖（P＜0.05）。细胞侵袭能力明显下降、凋亡比率和Caspase-3活性明显升高、MMP-2 mRNA和蛋白的表达显著下降（P＜0.05）。结论 SDG呈时间和剂量依赖性抑制A549细胞的增殖和侵袭,其机制可能与其促凋亡、抑制MMP-2的表达有关。     

艰难梭菌毒素A对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的： 研究艰难梭菌毒素A对人肝癌细胞株（SMMC-7721）增殖和凋亡的影响。方法： 克隆分析及四甲基偶氮唑盐（MTT）法用于细胞增殖的分析;透射电镜及单细胞凝胶电泳用于凋亡细胞形态学变化及DNA片段的观察;流式细胞术检测凋亡细胞数及Bcl-2和P53蛋白的表达。结果： 0.018～4.690 mg/L的毒素A明显抑制SMMC-7721细胞的克隆形成,并以时间和浓度依赖方式抑制SMMC-7721细胞的增殖;SMMC-7721细胞与4.690 mg/L毒素A共同培养48 h,透射电镜观察到典型的凋亡形态学变化,单细胞凝胶电泳显示细胞DNA的损伤;流式细胞仪分析结果显示：0.073～4.690 mg/L毒素A诱导6.8%~41.8%细胞凋亡;0.293～4.690 mg/L毒素A降低Bcl-2、增高p53蛋白的表达。结论： 艰难梭菌毒素A对SMMC-7721细胞有明显的增殖抑制活性,此作用通过诱导细胞凋亡产生。     

天花粉多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其Caspase-3和Caspase-8活化对凋亡的影响

目的:研究天花粉多糖(polysaccharide of snakegourd root)对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用、诱导凋亡的作用以及Caspase-3、Caspase-8活化对凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)法观察不同浓度天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用;DAPI染色后荧光显微镜进行细胞凋亡核形态学观察;通过DNA琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析,FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡率,分光光度比色法测定天花粉多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中Caspase-3、Caspase-8活性变化。结果:MTT结果显示,天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制作用。10.0μmol/L以上浓度的天花粉多糖作用2 d,DAPI染色可见核浓缩及边缘现象,DNA电泳出现特征性的凋亡条带。1.0、5.0、10.0和20.0μmol/L天花粉多糖处理的MCF-7细胞2 d,细胞凋亡率分别为(5.2±1.3)%、(13.1±4.7)%、(27.6±6.8)%和(43.8±9.8)%;10.0μmol/L天花粉多糖处理MCF-7细胞1、2、3 d,Caspase-3活性在2 d达最高(2.32±0.12)U/μg,而Caspase-8活性则在1d达最高(1.92±0.11)U/μg,两者与对照组相比均有统计学显著性差异(P<0.05)。结论:天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制和诱导凋亡作用,其诱导凋亡的机制可能与Caspase-3、Caspase-8活化有关。     

Growth inhibition and apoptosis inducing mechanisms of curcumin on human ovarian cancer cell line A2780

Curcumin,aphenolicpigmentextractedfrom curcuma,isthemajoreffectivecomponentofthat traditionalChinesemedicineandusedasadietarycoloringagentandanaturalcondiment.Recentre searchreportshaveshownthatcurcumincouldse lectivelyinhibittheproliferationandinducetheap optosisofmanytumorcells,buttheinvolvedmech anismsstillunclear(1,2).Thephenomenonthatcurcu mininducesapoptosisoftumorcellscouldbeseen innumerouscancers,however,theeffectsofcurcu minonhumanovariancancercellshavenotbeenre portedyet.Inthisresear…     

丙戊酸诱导耐药白血病细胞凋亡及其机理的研究

目的 观察丙戊酸(VPA)对白血病细胞尤其是耐药白血病细胞的体外抗肿瘤作用,探讨细胞内谷胱甘肽(GSH)水平及抗氧化酶系活性与VPA诱导细胞凋亡之间的关系.方法 采用体外细胞培养,通过MTT细胞活力测定,Caspase-3,8,9活性检测、细胞形态学观察、细胞周期分析及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,观察VPA对白血病细胞的抗肿瘤作用;通过检测VPA作用前后细胞内总谷胱甘肽(tGSH)与GSH水平、谷胱甘肽还原酶(GSH-Rd)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性改变,以及GSH合成酶抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(BSO)、GSH 前体N-乙酰-半胱氨酸(NAC)和过氧化氢酶(CAT)对VPA诱导凋亡的影响,分析谷胱甘肽-氧化还原(GSH-redox)系统在VPA诱导细胞凋亡中的作用.结果 VPA对所有受试细胞株均有增殖抑制作用,其IC50接近VPA抗癫痫有效血药浓度.VPA作用后细胞内Caspase-3,8,9活性增强,细胞出现凋亡形态学改变.VPA可使阿霉素耐药株K562/AO2及糖皮质激素(Gc)耐药株Jurkat细胞周期阻滞于Go/G1期,在VPA作用下,Jurkat和K562/AO2细胞内tGSH和GSH均降低,以GSH降低为主,GSH-Rd和GSH-Px的活性亦显著降低.NAC和CAT减弱VPA诱导的凋亡,而BSO增强VPA诱导的凋亡.结论 VPA抑制耐药白血病细胞增殖、诱导细胞周期阻滞与凋亡,这些作用与细胞内GSH-Rd、GSH-Px活性降低、GSH水平下调所导致的细胞内氧化应激反应激活有关.     

白藜芦醇诱导急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞凋亡

目的：探讨白藜芦醇抑制急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞增殖、引发S期阻滞和诱导凋亡的作用。方法：白藜芦醇体外处理培养的Jurkat细胞后,采用MTT法测定细胞活力,Wrigh-Giemsa染色、Hoechest 33258/PI荧光染色和透射电镜观察Jurkat细胞的形态学改变;流式细胞术分析细胞周期。结果：白藜芦醇0.2 mmol·L^-1处理组的抑制Jurkat细胞增殖率达64.01%,并具有剂量和时间依赖性。白藜芦醇处理细胞24 h后可见凋亡形态学改变,Hoechest 33258/PI染色显示白藜芦醇处理组细胞部分细胞核呈亮蓝色,随培养时间延长,亮蓝色荧光染色细胞数量逐渐增多。Wrigh-Giemsa染色和透射电镜观察发现部分细胞体积缩小、染色质浓缩及边集等现象的出现。流式细胞术检测表明,0.05 mmol·L^-1白黎芦醇处理48 h组62.57％的细胞被阻滞于细胞周期S期,亚二倍体细胞数量12.01%,未加药对照组细胞亚二倍体细胞数量2.05%。结论：白藜芦醇可以抑制Jurkat细胞的增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并诱导其发生凋亡     

昆明山海棠碱对Jurkat淋巴瘤细胞株的细胞周期和凋亡时相的影响

目的 探讨昆明山海棠(THH)碱对Jurkat T淋巴瘤细胞的细胞毒性、细胞周期和凋亡时相特异性的影响，以了解THH碱诱导细胞凋亡的机制。方法 台盼蓝染色法检测细胞生长和细胞活力；DNA染色法、TUNEL标记结合流式细胞术检测细胞周期和凋亡时相特异性。结果 THH碱能有效抑制Jurkat细胞增殖、细胞活力下降，细胞在增殖周期中被阻滞于G1期。THH碱首先能诱导S、C2／M期细胞凋亡，同时能诱导G1期细胞凋亡。结论 提示THH碱能抑制Jurkat细胞的DNA合成，抑制细胞增增殖，并可显著诱导各期相细胞发生凋亡。     

雷公藤甲素对白血病HL-60和Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨雷公藤甲素对人急性髓系白血病HL-60细胞、急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法、PI染色法、透射电镜观察不同浓度雷公藤甲素作用于两种细胞,对其生长增殖、凋亡、细胞周期及形态等方面的影响。结果:雷公藤甲素能显著抑制HL-60、Jurkat细胞的增殖,降低其存活率。给药24 h后,半数细胞抑制剂量(IC50)分别为(42.50±9.38)nmol/L和(60.91±9.77)nmol/L。能以剂量依赖方式诱导两种细胞凋亡,细胞周期分布G1期比例增加,S期比例降低(P<0.05),且伴有典型的细胞凋亡形态学改变。结论:雷公藤甲素能显著抑制HL-60、Jurkat细胞的生长增殖,并诱导细胞凋亡。     

8-溴-7-甲氧基白杨素诱导白血病Jurkat细胞凋亡

目的:研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-5-hydroxy-7-methoxychrysin,BrMC)诱导人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡作用。方法:体外培养Jurkat细胞。FITC标记annexinⅤ/PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率。ELISA法测定细胞组蛋白/DNA碎片。二氯荧光素二乙酯(2'7'-dichlorofluoresein diacetate,DCFH-DA)荧光探针FCM检测细胞活性氧。结果:BrMC以剂量依赖方式诱导annexinⅤ阳性细胞和组蛋白/DNA碎片增加(P<0.05)。BrMC促进细胞活性氧生成,10 mmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)预孵育能有效阻断Jurkat细胞活性氧生成,并减弱其诱导细胞凋亡效应。结论:BrMC具有诱导Jurkat细胞凋亡作用,其作用与促进细胞活性氧生成有关。     

薤白总皂苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响

目的观察薤白总皂苷对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的薤白总皂苷(25、50、100、250、500、1000μg/ml)于不同作用时间(24、48、72 h)处理宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法检测不同浓度的薤白总皂苷在不同作用时间下对HeLa细胞增殖率的影响;用100和200μg/ml的薤白总皂苷处理宫颈癌HeLa细胞48 h后,Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测HeLa细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,荧光定量PCR测定Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果薤白总皂苷对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间一剂量依赖性;薤白总皂苷(100和200μ/ml)处理能显著降低HeLa细胞线粒体膜电位,抑制HeILa细胞增殖,促进其凋亡(P<0.05,P<0.01);上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05,P<0.01)。结论薤白总皂苷有显著的抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与其降低HeLa细胞线粒体膜电位,上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性有关。