羟基喜树碱抗高转移性人肺癌细胞增殖和侵袭的研究

目的:研究10-羟基喜树碱抗人肺癌细胞增殖和侵袭的作用,并探讨其抗侵袭作用的机理。方法:10-羟基喜树碱作用于克隆化高转移人肺癌细胞(PGCL3),用细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、对重建基底膜的侵袭试验、趋化运动试验、对层粘连蛋白的粘附试验以及组织蛋白酶B活性测定观察细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:10-羟基喜树碱可降低PGCL3细胞增殖能力并呈剂量依赖性,IC_(50)为0.17μmol/L;0.25μmol/L和0.5μmol/L10-羟基喜树碱能抑制PGCL3细胞的侵袭能力(P<0.01)且有剂量依赖性。抗侵袭作用机理的分析结果显示上述浓度的药物对细胞的运动、粘附及组织蛋白酶B分泌均有明显的抑制作用(P<0.01);软琼脂集落形成率也显著降低。结论:10-羟基喜树碱有抗PGCL3人肺癌细胞增殖和侵袭作用。其抗侵袭机理是通过对侵袭各个基本环节的抑制实现的。     

桂皮酸诱导白血病肝癌肺癌细胞的分化和抗肺癌细胞侵袭作用

【目的】探讨桂皮酸对人早幼粒白血病细胞 (HL 6 0 )、人肝癌细胞 (BEL 740 2 )、人肺癌细胞 (PGCL3)分化和抗PGCL3细胞侵袭的影响。【方法】用组织学方法观察各种癌细胞分化的形态学表现 ;用硝基四氮唑蓝 (NBT)还原试验定量测定HL 6 0细胞的机能分化 ;用放射免疫测定法 (RIA)测定肝癌细胞AFP分泌量 ,用酶学方法测定该细胞的鸟氨酸氨基甲酰转移酶 (OCT)、酪氨酸 α 酮戊二酸转氨酶 (TAT)、碱性磷酸酶 (ALP)和γ 谷氨酰转肽酶 (γ GT)的比活力 ;用层粘连蛋白粘附测定法、纤粘蛋白趋化迁移测定法和重建基底膜侵袭测定法测定肺癌细胞的粘附、运动和侵袭能力。【结果】 1mmol/L和 2 5mmol/L桂皮酸处理使HL 6 0细胞形态向成熟方向分化 ,NBT反应显著增强 (P <0 0 1和P <0 0 5 )。 1mmol/L和 3mmol/L桂皮酸处理使BEL 740 2和PGCL3细胞出现分化改变 ,使BEL 740 2细胞AFP分泌量和γ GT比活力显著下降 (P <0 0 5和P <0 0 1) ,反映肝癌细胞分化的OCT、TAT和ALP 3种酶的比活力则显著升高 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,使PGCL3细胞软琼脂集落形成率下降 ,细胞的粘附能力下降 (3mmol/LP <0 0 1) ,运动和侵袭能力均显著降低 (P <0 0 0 1)。【结论】桂皮酸具有诱导HL 6 0、BEL 740 2和PGCL3细胞分化并有抗PGCL3细胞     

桂皮酸、丁酸钠、维甲酸和β-胡萝卜素对高转移人肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响

该文选用栓皮酸、丁酸钠、维甲酸和β-胡萝卜素处理克隆化高转移人肺巨细胞癌（PGCL3）细胞，结果发现桂皮酸、丁酸钠和维甲酸均能明显抑制PGCL3细胞增殖；反映肿瘤细胞浸润和转移能力的粘附、运动和侵袭实验的结果也显示桂皮酸、丁酸钠和维甲酸对PGCL3细胞的上述三种能力都有抑制作用；而β-胡萝卜素对PGCL3细胞的增殖、运动和侵袭能力的影响则随剂量不同而异，0．1μmol／Lβ-胡萝卜素对细胞增殖无明显影响，10μmol／Lβ-胡萝卜素则有明显抑制细胞增殖作用，这两种浓度都对细胞的粘附、运动和侵袭能力有明显抑制作用，而1μmol／Lβ-胡萝卜素处理反而明显促进细胞增殖和运动，因此应用β-胡萝卜素进行防癌，应持慎重态度。     

桂皮酸诱导高转移人肺癌细胞去恶性的研究

本文作者选用桂皮酸处理克隆化高转移人肺巨细胞癌（PGCL3）细胞，发现肿瘤细胞在形态、增殖速度、分裂指数、软琼脂集落形成能力和凝集反应等方面均出现向正常细胞表型逆转，证明栓皮酸具有抑制PGCL3细胞增殖及诱导分化的作用。我们还进行了反映肿瘤细胞浸润和转移能力的粘附、运动和降解侵袭实验，结果显示桂皮酸对PGCL3细胞的上述三种能力都有明显的抑制作用，表明桂皮酸在诱导PGCL3细胞向成熟方向分化的同时，还使肿瘤细胞的浸润和转移能力减弱。     

白藜芦醇对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、迁移及侵袭的影响

目的 研究白藜芦醇对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、迁移及侵袭的影响.方法 采用MTr法和软琼脂集落形成实验测定白藜芦醇对MDA-MB-231细胞生长的影响;采用Transwell小室迁移、侵袭实验检测白藜芦醇对细胞迁移、侵袭能力的影响.结果 白藜芦醇浓度在25～200μmol/L时,作用6,12,24,48,72 h后,抑制MDA-MB-231细胞增殖,抑制作用呈时间和浓度依赖性(P＜0.01).白藜芦醇抑制MDA-MB-231细胞在软琼脂中的集落形成能力随着白藜芦醇浓度的增大集落形成率减小.25、50、100、200 μmol/L的白藜芦醇作用24 h可以明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力(P＜0.01).结论 白藜芦醇能有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长,并通过抑制细胞对细胞间基质的降解作用抑制其侵袭和迁移能力.     

虎仗提取物白藜芦醇诱导胃癌细胞HGC27凋亡

目的 :观察虎仗提取物白藜芦醇对胃癌细胞HGC2 7细胞周期和增殖的影响及凋亡诱导作用 .方法 :采用MTT法和软琼脂集落形成实验观察白藜芦醇对细胞增殖的影响 ,Annxin V&PI染色及流式细胞仪检测观察白藜芦醇对细胞周期的影响及诱导凋亡的作用 .结果 :MTT实验发现白藜芦醇作用HGC2 7细胞 2 4h后 ,细胞存活率显著下降 (P <0 .0 1)并呈剂量依赖性 ,软琼脂集落形成实验发现HGC2 7细胞在0 .5mmol/L白藜芦醇作用下无细胞集落的形成 ,Annxin V&PI染色及流式细胞仪检测发现白藜芦醇可引起HGC2 7阻滞于G1期 ,并可诱导HGC2 7发生凋亡 (8.39% ) .结论 :白藜芦醇可抑制胃癌细胞HGC2 7增殖并可诱导细胞发生凋亡 .     

反义技术封闭增殖细胞核抗原对骨肉瘤细胞生物学行为的影响

为探讨用反义技术治疗骨肉瘤的可能性，将针对增殖细胞核抗原(PCNA）mRNA的不同剂量的反义寡核苷酸（ASODN）导入人骨肉瘤Saos-2细胞株，用^3H-TdR掺入法，免疫组化及双层软琼脂培养法检测其对肿瘤细胞增殖。PCNA表达及成瘤能力的影响。结果表明，ASODN能显著抑制Saos-2细胞增殖及PCNA表达，抑制作用呈剂量依赖性，30μmol/L浓度即可完全抑制PCNA表达，软琼脂培养无集落形成。表明通过反义技术抑制PCNA基因表达可对骨肉瘤细胞恶性表型产生逆转作用，开辟了骨肉瘤基因治疗的新途径。     

透明质酸促进人肺腺癌A549细胞体外增殖、黏附和侵袭

目的 研究透明质酸（hyaluronan，HA）对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖、黏附和侵袭能力的影响。方法 体外培养的A549细胞被随机分为3组：对照组（C组）：无血清培养基（free serum medium，FSM）培养；HA1和HA2组：分别用含不同浓度HA（HA1组：10μg／ml，HA2组：20μg／ml）的FSM培养，一段时间后，以MTT实验和软琼脂细胞集落形成实验比较A549细胞增殖能力，用平板黏附模型和Boyden小室模型比较A549细胞黏附侵袭能力。结果 和C组相比，HA1和HA2组细胞增殖数量、软琼脂细胞集落、黏附于平板和穿过Boyden小室隔膜的细胞数皆显著增加，差异有统计学意义（P〈0．01）（呈剂量依赖）。结论 HA能呈剂量依赖性地增强A549细胞体外增殖、黏附和侵袭能力。     

5F对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞PTEN、MMP-9表达的影响

目的研究Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(以下简称5F)对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞毒性、侵袭能力及PTEN、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 MTT法检测5F对PGCL3细胞增殖抑制的影响;用Transwell小室法检测5F对PGCL3细胞侵袭能力和趋化性运动能力的影响;RT-PCR和Western blot方法检测5F对PGCL3细胞侵袭转移相关基因PTEN、MMP-9表达水平的影响。结果 5F对PGCL3细胞的增殖、侵袭及运动能力均有明显的抑制作用(均P<0.05)。5F作用于人PGCL3细胞24h,能明显上调PTEN mRNA和蛋白的表达,下调MMP-9mRNA和蛋白的表达。结论 5F能抑制PGCL3细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能是通过上调PTEN和下调MMP-9表达水平而实现的。     

蛞蝓有效提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响

目的:筛选蛞蝓有效提取物,并观察蛞蝓有效提取物EL-3对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法:体外培养人肺癌A549细胞和中国仓鼠肺上皮CHL细胞;MTT比色法测定细胞活性;软琼脂集落形成法检测细胞锚定非依赖性生长能力。结果:以不同提取方式获得的6种蛞蝓提取物对人肺癌A549细胞增殖活性具有抑制作用,其中以EL-3抑制作用最强,其IC50值为9.4μg/mL,可作为蛞蝓有效提取物;EL-3选择性抑制A549细胞活性,其选择指数是43.6;EL-3能有效抑制A549细胞锚定非依赖性生长,呈浓度依赖性。结论:EL-3具有选择性抑制A549细胞增殖作用。     

中药复合物得力生注射液可提高顺铂对肺癌PGCL3细胞株的治疗效果

Objective:To investigate the effect of Delisheng Injection(得力生注射液 DLS),a Chinese medicinal compound,DLS combined with cis-platinum(DDP),an active agent used in lung cancer chemotherapy,on a human highly metastatic giant lung carcinoma cell line PGCL3.Methods:The suspended PGCL3 cells at10~5/mL cultured in 96-well tissue culture plates were divided into 4 groups:DLS treatment group(2 μL/mL,5 μL/mL,10 μL/mL,25 μL/mL),DDP treatment group(1 μg/mL,2 μg/mL,5 μg/mL,15 μg/mL),combined DLS with DDP treatment group(DLS:DDP 2 μL/mL:1 μg/mL,5 μL/mL:2 μg/mL,10 μL/mL:5 μg/mL,25 μL/mL:15 μg/mL)and a control group.The cytotoxicity of DLS with different concentrations(2 μL/mL,5 μL/mL,10 μL/mL,25 μL/mL)on PGCL3 cells was determined by 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide(MTT) assay.Effect of DLS on adhesion of PGCL-3 cells was tested by cell-matrigel adhesion assay.Chemotactic movement model of transwell camerula was used to determine the effect of DLS on invasion and migration of PGCL-3 cells.Results:Compared with the control group,DLS(2 μL/mL,5 μL/mL,10 μL/mL,25 μL/mL) could significantly decrease cell proliferation,adhesion,invasion and migration abilities(P0.05).Cell adhesion,invasion and migration abilities were significantly decreased after combination treatment of DLS:DDP(2 μL/mL:1 μg/mL,5 μL/mL:2 μg/mL,10 μL/mL:5 μg/mL,25 μL/mL:15 μg/mL) compared with DDP single-agent treatment(1 μg/mL,2 μg/mL,5 μg/mL,15 μg/mL,P0.05),respectively.Conclusions:DLS single-agent has a satisfying inhibition effect in PGCL3 cell line and DLS might enhance the inhibition effect of DDP on cancer metastasis.Our research provided a experimental basis about the treatment on highly metastatic lung caner.     

甘草酸诱导人乳腺癌细胞凋亡和细胞内Ca2+的相关性研究

目的 探讨甘草酸对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖抑制和诱导凋亡的作用,了解凋亡发生与细胞内Ca2 的相关性.方法 MTT比色法测定细胞增殖能力,末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP末端标记法、Annexin V流式细胞仪法和单细胞凝胶电泳(彗星试验)法检测凋亡细胞,Fura-2荧光负载方法测定[Ca2 ]i的变化.结果 从5 mmol/L甘草酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P＜0.01),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC50)为15.84 mmol/L.7.5 mmol/L和10.0 mmol/L甘草酸使细胞凋亡率显著升高(P＜0.05和P＜0.01).甘草酸处理组的[Ca2 ]i明显低于对照组(P＜0.05).甘草酸与BAPTA-AM组合处理组的凋亡率明显高于单纯的7.5 mmol/L处理组(P＜0.05和P＜0.01).结论 甘草酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导其凋亡的作用;其诱导凋亡可能与细胞内Ca2 水平下调有关.     

洛伐他汀对3种肺癌细胞株增殖的抑制作用

目的：观察洛伐他汀对肺癌细胞体外增殖的抑制作用。方法：采用MTT法，观察不同浓度的洛伐他汀分别作用24、48、72h对3种人肺癌细胞（A549，NCL—H460，PGCL3）生长增殖的影响。结果：洛伐他汀用药24、48、72h对3种肺癌细胞的生长增殖均有不同程度的抑制作用。洛伐他汀作用72h对3种肺癌细胞株（A549，NCL—H460，PGCL3）的IC50分别是39．6、28.3、35．6 μmol／L。结论：洛伐他汀能有效抑制肺癌细胞的体外增殖，并且呈时间依赖性和浓度依赖性。     

全反式维甲酸体外诱导分化对人骨肉瘤MG-63细胞侵袭转移的影响

目的观察全反式维甲酸（alltrans retinoic acid，ATRA）诱导分化对人骨肉瘤MG-63细胞侵袭转移的抑制作用。方法体外用ATRA诱导MG-63细胞分化，通过电镜观察瘤细胞的超微结构；3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑嗅盐（MTT）检测细胞的增殖能力；软琼脂集落形成实验、侵袭和运动实验观察MG-63细胞生长和侵袭能力的变化；Westernblot检测细胞增殖核抗原（proliferation cell nuclear antigen，PCNA）、细胞黏附分子44（cell differentiation44，CD44v6）蛋白的表达。结果经诱导剂处理后．细胞的生长明显受到抑制，细胞形态呈良性分化；肿瘤细胞的软琼脂集落形成率、穿膜运动能力均被显著抑制（P〈0．01）；与对照组相比随着作用时间的增加CD44v6和PCNA的表达均降低（P〈0．01）。结论ATRA对人骨肉瘤MG-63细胞有诱导分化作用，并且从细胞的黏附、运动、降解等多环节抑制肿瘤细胞的侵袭转移能力。     

苯丁酸钠对喉癌Hep-2细胞株的体外诱导分化作用

目的:探讨诱导分化剂苯丁酸钠(sodiumphenylbutyrate,PB)在体外对喉癌Hep-2细胞株的生长和分化的影响。方法:应用细胞生长曲线测定法、软琼脂克隆形成试验、细胞形态观察、划痕试验、MTT法、流式细胞术等对在体外经不同浓度PB处理过的Hep-2细胞进行检测,观察细胞分化程度及运动能力的改变。结果:PB在一定浓度范围内能明显抑制Hep-2细胞的生长,作用3d的半数抑制浓度(IC50)为5.32mmol/L,与剂量和时间呈依赖性关系;PB能诱导Hep-2细胞分化,使其克隆形成能力减弱,细胞运动能力下降,细胞突起增长,G1→S期阻滞。结论:PB可以诱导喉癌Hep-2细胞分化,并使细胞的运动能力下降,为其分化治疗喉癌提供了实验依据。     

蛋白激酶抑制剂PKC412对膀胱癌T24细胞生长增殖的影响

目的:观察蛋白激酶C(PKC)抑制剂N苯甲酰星孢菌素(PKC412)对膀胱癌T24细胞株生长、增殖、侵袭功能和细胞周期的影响.方法:用不同浓度PKC412(0.01,0.1,1.0,10 μmol/L)作用于对数生长期T24细胞24,48,72 h.采用软琼脂克隆形成试验测定T24细胞克隆形成抑制率,MTT法检测细胞生...     

HSP90在乳腺癌细胞株ZR-75-30中的表达及对粘附侵袭能力的影响

目的:研究热休克蛋白(HeatShockProtein,HSP)90在乳腺癌细胞株ZR-75-30中的表达及对该细胞粘附侵袭能力的影响,并探讨相关机制及意义。方法:体外培养ZR-75-30乳腺癌细胞株,以HSP90抑制剂Geldanamycin(GA)作用处理;免疫印迹技术(Western-blot)检测GA处理前后HSP90在乳腺癌细胞株ZR-75-30中的表达情况;噻唑兰比色(MTT)法检测GA对ZR-75-30细胞的增殖抑制作用;噻唑兰比色(MTT)法检测细胞对人工基底膜(Matrigel)的粘附能力变化;TranswellCham-ber法观察癌细胞侵袭、迁移能力的改变。结果:HSP90抑制剂GA对ZR-75-30细胞具有增殖抑制作用,呈时间剂量依赖关系;GA作用后HSP90在乳腺癌细胞株ZR-75-30中表达明显下降;HSP90抑制剂GA处理的乳腺癌细胞ZR-75-30的粘附率较未加GA的对照组下降明显(P<0.01);在GA未处理对照组侵袭、迁移实验穿膜细胞数分别为95.4±5.2,103±15.4与GA处理实验组穿膜细胞数46.2±4.9,52.4±8.4相比具有显著性差异(P<0.01)。结论:通过抑制HSP90在乳腺癌细胞株ZR-75-30中的表达,GA能明显减弱乳腺癌细胞株ZR-75-30增殖粘附侵袭能力,HSP90与乳腺癌细胞增殖侵袭转移能力相关。     

西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901生物学行为的影响

目的观察西咪替丁对人胃癌SGC-7901细胞的生长、凋亡、黏附及侵袭行为的影响。方法用四甲基偶氮唑盐（MTr）法检测不同浓度西咪替丁对胃癌SGC-7901细胞生长的影响;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;用吖啶橙（AO）染色后荧光显微镜观察药物作用后细胞的形态变化;透射电镜观察用药后细胞超微结构的改变;以matrigel为对象,检测西咪替丁对胃癌细胞与细胞外基质黏附作用的影响;利用millicell小室检测西咪替丁对胃癌细胞侵袭人工基底膜能力的影响。结果在0．5～5mmol／L浓度内,西咪替丁对SGC-7901的生长具有显著的抑制作用,并呈时间和剂量依懒性;0．5～10mmol／L西咪替丁作用后,可观察到典型细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪检测可见凋亡峰,G0／G1期细胞明显增多;0．0625～0．25mmol／L西咪替丁可抑制胃癌细胞和细胞外基质的黏附及对重组基底膜的侵袭。结论西咪替丁可改变细胞周期分布,诱导SGC-7901细胞凋亡,从而抑制细胞增殖。在无毒剂量下,可抑制SGC-7901细胞对细胞外基质的黏附与侵袭。     

肉桂酸对A_(549)人肺腺癌细胞增殖和核仁组成区的影响

目的 :探讨低毒性的食品添加剂肉桂酸对A54 9人肺腺癌细胞的抑制作用。方法 :应用 1mmol/L和 3mmol/L的肉桂酸作用于人肺腺癌A54 9细胞 ,观察细胞增殖情况 ,进行核仁形成率的测定。结果 :1mmol/L和 3mmol/L肉桂酸能使A54 9人肺腺癌细胞增殖受到明显抑制 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,同时细胞的核仁形成率明显下降 ,核仁内核仁组成区嗜银颗粒明显减少 (P <0 0 1,P <0 0 0 1)。结论 :肉桂酸是A54 9人肺腺癌细胞有效的抑制剂 ,在抗癌作用方面具有潜在的应用价值。