蜂毒素对胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖抑制作用及机制

目的 研究蜂毒素影响人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的机制.方法 使用不同浓度(1、2、4、8、16、32μg/ml)蜂毒素处理SGC-7901细胞不同时间(12、24、36、48、72 h)后,采用MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;透射电镜观察细胞超微结构的改变;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞特征性DNA条带;流式细胞仪法检测细胞凋亡和细胞周期;免疫组化观察Bcl-2基因和Bax基因表达情况;RT-PCR检测Bcl-2、Bax、p53 mRNA的表达.结果 蜂毒素对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用随着其作用时间的延长和浓度的增加而明显增强,作用48 h后,其IC50为2.43 μg/ml;透射电镜现察显示蜂毒素组细胞呈凋亡表现,核固缩、碎裂,染色质浓缩,边集;蜂毒素(4、8μg/ml)组培养48 h后DNA琼脂糖凝胶电泳可见典型的梯状条带,而对照组细胞DNA未见梯状条带;流式细胞DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰",2、4、8μg/ml浓度蜂毒素作用人胃癌细胞后的细胞凋亡率分别为(5.69±0.74)%、(10.58±1.32)%、(29.57±1.58)%.Bax、p53基因mRNA和蛋白表达降低、Bcl-2 mRNA和蛋白表达升高,并随蜂毒素浓度增加而加强.结论 蜂毒素能诱导人胃SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,且有一定的量效关系,其作用机制可能与调控Bcl-2、Bax、p53基因表达有关.     

茉莉酸甲酯诱导人肝癌细胞HepG2凋亡作用机制的实验研究

目的探讨茉莉酸甲酯诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡的作用机制.方法琼脂糖凝胶电泳检测HepG2细胞凋亡,RT-PCR检测HepG2细胞中Bcl-2、BaxmRNA表达,免疫细胞化学检测HepG2细胞Bcl-2、Bax蛋白表达.结果MeJA作用HepG2细胞48h后：DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显典型＂梯＂状条带;细胞Bcl-2mRNA表达水平明显下降（P〈0.05）而BaxmRNA表达水平明显增高（P〈0.05）;Bcl-2蛋白在胞浆中表达水平明显降低（P〈0.01）而Bax蛋白表达水平显著增加（P〈0.01）.结论茉莉酸甲酯通过降低抑凋亡相关基因Bcl-2mRNA及蛋白的表达,上调促凋亡相关基因BaxmRNA及蛋白的表达,从而诱导HepG2细胞凋亡的发生.     

健脾解毒方治疗裸鼠胃癌及其诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的:研究健脾解毒方诱导胃癌细胞凋亡的作用并探讨其部分机制。方法:建立裸鼠人胃癌MKN-45细胞皮下移植瘤模型,随机分为空白对照组、替加氟组、健脾解毒方组、联合用药组4组,每组12只;给药14 d后观察各组对裸鼠胃癌的治疗作用及其对荷瘤裸鼠生存期的影响;TUNEL法检测各组胃癌细胞凋亡情况;分别采用实时荧光定量PCR方法和免疫组化S-P法检测健脾解毒方干预后Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达情况。结果:与空白对照组相比,健脾解毒方组凋亡指数显著升高、Bcl-2 mRNA水平及Bcl-2蛋白表达显著降低、Bax的mRNA和蛋白表达明显上调、Bcl-2/Bax显著下降,健脾解毒方组和联合用药组均能明显抑制瘤体生长(P0.01),延长荷瘤鼠的生存期(P0.01)。联合用药组在抑制胃癌细胞生长和诱导胃癌细胞凋亡方面的作用均优于单纯化疗药组和单纯健脾解毒方组(P0.05或P0.01)。结论:健脾解毒方能抑制裸鼠胃癌细胞生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。     

抗癌生物活性肽对实验性裸鼠肿瘤组织中p53和Bcl-2表达的影响

目的探讨抗癌生物活性肽(ACBP)作用于荷胃癌裸鼠后对肿瘤中p53和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨ACBP可能的作用机制。方法成功建立荷胃癌裸鼠模型后将鼠随机分为2组,各组10只。对照组给予生理盐水;实验组腹腔注射活性肽0.4 mL(50 mg/L)。连续处理35 d,停药4 d后处死裸鼠,取肿瘤,应用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法检测突变型p53蛋白及Bcl-2蛋白的表达情况。结果 p53和Bcl-2蛋白在对照组肿瘤中阳性表达较强,在活性肽组中的表达均比对照组的表达弱,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ACBP对荷瘤裸鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,可能是通过影响p53和Bcl-2的表达实现的。     

两种心脏停搏液对缺血心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的:观察St.Thomas和河豚毒素(Tetrodotoxin,TTX)两种心脏停搏液对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响.方法:Wistax大鼠24只,建立Langendorff-Neely离体心脏灌注模型,分为3组(n=8):对照组、STH-2组、TTX组.用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(Apoptosis index,AI),免疫组化测定凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53的表达,Western blot检测Bcl-2蛋白表达.结果:STH-2组AI(11.20±0.79)%高于TTX组(6.92±1.10)%和对照组(1.34±0.23)%(P＜0.01).TTX组Bcl-2的PEI为(22.63±1.10)%高于STH-2组(13.51±0.67)%和对照组(2.52±0.58)%(P＜0.01);STH-2组Bax的PEI为(8.04±0.57)%高于TTX组(6.05±0.46)%和对照组(2.14±0.57)%(P＜0.01).TTX组Bcl-2/Bax为3.78±0.41高于STH-2组1.75±0.15(P＜0.01).TTX组Bcl-2的相对蛋白含量为(86.1±0.98)%高于STH-2组(53.2±1.76)%和对照组(23.7±2.61)%(P＜0.0).p53蛋白在各组均未见明显阳性表达.结论:与STH-2比较,TTX能减少缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡数,其抗凋亡的机制可能与上调Bcl-2表达,下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值有关.     

百里醌联合5-氟尿嘧啶对胃癌HGC-27细胞增殖和凋亡的影响

目的观察百里醌(TQ)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导对胃癌HGC-27细胞发生增殖和凋亡的影响。方法于2015年9月—2017年8月在武汉大学中心实验室进行实验,以TQ 50μmol/L(TQ组)、5-Fu 75μg/ml(5-Fu组)及TQ 50μmol/L+5-Fu 75μg/ml(联合组)刺激胃癌HGC-27细胞24 h后,CCK-8检测其对增殖的影响,Hoechst染色、流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法分析凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果 CCK-8结果显示,百里醌可抑制胃癌HGC-27细胞的增殖,联合组对细胞的抑制率高于5-Fu组及TQ组(F=767.05,P<0.01)。Hoechst结果显示,联合组的凋亡率明显高于5-Fu组。流式细胞仪检测显示,对照组的凋亡率为(2.26±0.17)%,TQ组、5-Fu组及联合组的凋亡率分别为(3.76±0.44)%、(6.24±0.19)%及(9.76±0.25)%,联合组的凋亡率高于TQ组和5-Fu组(F=449.58,P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示,联合组的促凋亡蛋白Bax表达量均较(TQ组或5-Fu组)升高(F=58.803,P<0.01),且抑凋亡蛋白Bcl-2较TQ组或5-Fu组降低(F=67.203,P<0.01)。结论百里醌联合5-氟尿嘧啶可抑制胃癌HGC-27细胞增殖并促进其凋亡,百里醌可增加胃癌HGC-27细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性。     

肾缺血预处理对兔未成熟心肌Bcl-2, Bax,Fas蛋白表达的影响

目的:探讨肾缺血预处理(RIP)对兔未成熟心肌细胞凋亡和Bcl-2, Bax, Fas蛋白表达的影响. 方法:24只幼兔采用Langendorff离体心脏灌注模型,随机分为正常对照组(C)、心脏缺血/再灌注组(I/R)和肾缺血预处理组(RIP),每组8只,测定各组未成熟心肌细胞凋亡和Bcl-2, Bax, Fas蛋白表达. 结果:RIP组与I/R组比较,心肌细胞凋亡率明显减少[(4.19±1.13)% vs (12.30±2.10)%, P<0.01],DNA片段梯光密度明显减少(57 350±1765 vs 135 200±3370, P<0.01), Bcl-2表达增多(33 525±1026 vs 12 385±860, P<0.01), Bax(8640±768 vs 32 472±1128, P<0.01)和Fas(8936±912 vs 32 100±1260, P<0.01)表达明显减少. 结论:RIP可减少缺血再灌注后兔未成熟心肌细胞凋亡和影响Bcl-2, Bax, Fas蛋白的表达.     

丹参酮ⅡA对小鼠Lewis肺癌Bax/bcl-2比值的影响

目的：观察丹参酮ⅡA（TanⅡA）对肺癌组织Bax/bcl-2比值的影响,进而对丹参酮ⅡA的抗癌机制进行探讨。方法：建立Lewis肺癌小鼠模型,将动物随机分为生理盐水组、TanⅡA组、TanⅡA＋环磷酰胺（CTX）组和CTX组共四组。腹腔连续注射给药。用免疫组化方法测定Bax、Bcl-2的表达水平,计算Bax/bcl-2比值。所有数据用SPSS13.0处理。结果：盐水组、TanⅡA组、TanⅡA＋CTX组、CTX组各组Bcl-2阳性表达率分别为（59.83±3.38）%、（45.89±5.31）%、（25.26±4.09）%和（30.93±4.13）%。各组Bax阳性表达率分别为（31.96±8.50）%、（39.66±3.81）%、（52.24±5.25）%和（46.58±4.10）%。各组Bax/bcl-2比值分别为0.54±0.16、0.87±0.13、2.12±0.42、1.53±0.25。与盐水对照组比较,各组结果具有统计学差异,其中TanⅡA＋CTX组各项指标均优于单纯TanⅡ组及CTX组。结论：TanⅡA通过上调Bax、下调Bcl-2的表达、诱导肿瘤细胞凋亡,且TanⅡA与CTX合用具有协同的作用,机制可能与TanⅡA可增强Bax表达、下调Bcl-2表达,提高Bax/Bcl-2比值而增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性有关。     

奥曲肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤凋亡的影响

目的探讨生长抑素类似物奥曲肽（OCT）对裸鼠人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法建立人肝癌细胞株BEL-7402裸鼠移植瘤模型,实验组皮下注射OCT100μg/kg.d-1,对照组给予相同容积的无菌生理盐水皮下注射,免疫组织化学染色检测OCT作用后裸鼠人肝癌BEL-7402组织中Bcl-2、Bax表达情况的改变,透射电镜观察OCT作用后裸鼠人肝癌BEL-7402组织超微结构的改变。结果 OCT作用后,移植瘤组织中凋亡抑制基因Bcl-2阳性表达率比对照组明显下降（P〈0.05）,凋亡促进基因Bax阳性表达率比对照组显著升高（P〈0.05）。电镜下可见OCT组移植瘤细胞表面微绒毛减少或消失,凋亡细胞多见等改变。结论 OCT能引起人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤组织中凋亡基因Bcl-2及Bax的表达发生改变,诱导组织细胞发生凋亡;OCT能引起裸鼠人肝癌BEL-7402组织超微结构发生典型的凋亡改变。     

夏枯草提取物对Jurkat细胞凋亡的影响

目的:探讨夏枯草提取物对人T淋巴瘤白血病Jurkat细胞株凋亡的影响及其机制.方法:取对数牛长期Jurkat细胞配制成2.0×105个mL-1密度的单细胞悬液,接种到96孔板,培养24 h,加入不同质量浓度的夏枯草提取物.以生理盐水处理为空白对照,继续培养48 h,分别采用四甲堆偶氮唑蓝(MTT)法测定夏枯草提取物对Jur-kat细胞的生长抑制作用;琼脂糖凝胶电泳法观察Jurkat细胞凋亡;用免疫细胞化学法检测夏枯草提取物对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响.结果:夏枯草提取物对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,半数抑制率(IC50)为(53.59±3.10)mg/L;琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯彤凋亡条带.免疫细胞化学显示:与宅自对照相比,夏枯草提取物处理组Bcl-2蛋白表达减弱((12.31±1.21)% vs(40.76±1.64)%),而Bax蛋白表达增强((18.14 ±0.39)% vs(4.77±0.16)%).结论:夏枯草提取物可以抑制Jurkat细胞增殖和诱导Jurkat细胞凋亡,且这一作用可能与下调Bcl-2蛋白表达及上调Bax蛋白表达有关.     

泸州地区孕产妇及其新生儿头发中总汞含量调查分析与评价

目的 :对泸州地区孕产妇及其新生儿头发中总汞含量调查与分析。方法 :用冷原子吸收法对泸州地区 12 3对孕产妇及其新生儿头发中总汞含量进行调查和检测。结果 :新生儿头发中汞含量显著高于孕产妇 (F =16 .935 ,P <0 .0 0 1) ,孕产妇及其新生儿头发中汞含量呈正相关 (r=0 .348,P <0 .0 0 1)。结论 :孕产妇及其新生儿头发中总汞含量都低于国家规定的发汞标准且新生儿发汞含量显著高于母亲 (P <0 .0 0 1)     

探讨使用化妆品对孕产妇及其新生儿发铅、发镉含量的影响

目的 :探讨使用化妆品对孕产妇及其新生儿头发中重金属含量的影响。方法 :对在泸州医学院附属医院分娩的 1 81名产妇进行问卷调查 ,其中孕期及孕前期使用化妆品的有 1 2 5名 ,未使用化妆品的有 5 6名。然后采用火焰原子吸收法对 1 81名孕产妇及其新生儿头发中铅、镉含量进行测定。结果 :使用化妆品的孕产妇及其新生儿发铅、发镉都高于不使化妆品组 (P <0 .0 5 ) ;使用化妆品组新生儿发铅发镉含量与其母亲的含量呈明显的正相关关系 (P <0 .0 0 1 )。结论 :孕期使用化妆品可能引起孕产妇及其新生儿头发中铅、镉含量增加 ,从而影响人们的健康。     

子宫内膜异位症病人异位和在位内膜ER和PR的表达

目的检测雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）在子宫内膜异位症（EMS）病人异位内膜和在位内膜中的表达,探讨二者在EMS发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学PV-9000法分别检测84例EMS病人的异位内膜和44例EMS病人的在位内膜组织中ER和PR的表达,以32例子宫肌瘤病人正常子宫内膜作对照。结果EMS异位内膜组织中ER、PR的表达及ER/PR比值明显低于正常内膜组织和EMS在位内膜组织,差异均有统计学意义（F=5.92～11.43,q=3.01～3.52,P〈0.05）;而EMS在位内膜组织ER、PR表达及ER/PR比值明显高于正常内膜组织,差异亦均有显著性（q=2.98～3.14,P〈0.05）。结论ER、PR在EMS异位内膜和在位内膜中的异常表达,可能与EMS的发生发展有关。     

PTCD在诊治阻塞性黄疸中的应用及体会

对阻塞性黄疸病人,术前进行经皮肝穿刺胆道引流术(PTCD)能达到胆道减压,减轻全身黄疸的目的,为该类病人术前准备提供一项行之有效的方法。本文报告12例,其定位诊断符合率为100％,定性诊断符合率为75％,结合实践提出了进行PTCD的适应证选择和预防并发症的切实措施。     

河南省大学生血清和头发中铜锌含量的测定

本文报道了采用原子吸收分光光度法对261名河南省大学新生血清和头发中铜、锌含量的测定结果。其中,血清铜含量和铜/锌比值女性高于男性(P<0.05),血清锌及头发中铜和锌含量均无显著性别差异。根据测定结果作者还提出了本地区青年组人群血清和头发中铜、锌水平与铜/锌比值的正常参考值。     

败血症大鼠肺纤维连接蛋白含量与分布的变化

作者对25只盲肠结扎后败血症大鼠体内的纤维连接蛋白(Fn)进行了研究。血浆Fn(pFn)用免疫火箭电泳法,组织中(肝、肺)可浸出的Fn含量用ELISA和Fn在肺中的定位分布用间接免疫荧光法检测。结果发现,盲肠结扎后22h肝中Fn含量明显减少(P<0.05),肺组织中Fn含量与炎症轻重有关,炎症轻微处Fn含量比正常及假手术对照明显减少(P<0.05),炎症严重处Fn明显增加(P<0.05)。但此时pFn增高。肺中的Fn抗原主要集中在微血管周围,其分布与嗜中性白细胞的浸润一致。作者认为,上述变化与败血症时肺功能衰竭的发生有一定关系。     

LL和ESWL治疗输尿管结石的疗效和安全性分析

目的:探讨体外冲击波碎石技术(ESWL)和输尿管镜钬激光碎石术(LL)治疗输尿管结石的疗效和安全性.方法:210例输尿管结石患者随机分为研究组(n=106)和对照组(n=104),研究组采用LL术治疗,对照组采用ESWL术治疗,观察两组患者的临床疗效、手术时间、住院时间、下床活动时间以及不良反应发生情况.结果:研究组患者总有效率为92.5%(98/106),明显高于对照组,组间比较差异具有统计学意义(P<0.01).与对照组相比,研究组患者手术时间、住院时间、下床活动时间明显缩短,不良反应发生率(9.4%,10/106)明显降低,组间比较差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05).结论:采用LL术治疗输尿管结石临床疗效较好,且操作简单、创伤小、术后恢复快、不良反应少、安全性高.     

化脓性脑膜炎患儿脑脊液中Glu与GABA含量的变化及其意义的探讨

测定了１７例化脓性脑膜炎（化脑）和２２例对照患儿脑脊液（ＣＳＦ）中谷氨酸（Ｇｌｕ）和γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）含量的变化。结果发现：化脑患儿ＣＳＦ中Ｇｌｕ，ＧＡＢＡ含量及Ｇｌｕ／ＧＡＢＡ值均增高，且化脑重组Ｇｌｕ／ＧＡＢＡ值高于化脑轻型组。提示化脑时ＣＳＦ中Ｃｌｕ和Ｇｌｕ／ＧＡＢＡ值的增高程度与中枢神经系统功能障碍的程度有关。