鼠肝大部切除术后肠粘膜细胞免疫的实验研究

目的　探讨肝大部切除术后空、回肠粘膜固有层细胞免疫能力的变化。方法　 48只SD大鼠随机分 8组 ,第 1组 :假手术 6h组 (n =6) ;第 2组 :切除肝脏 70 %后 6h组 (70 %HP 6h组 ) (n =6) ;第 3组 :假手术 12h组 (n =6) ;第 4组 :70 %肝切除后 12h组 (70 %HP 12h组 ) (n =6) ;第 5组 :假手术 2 4h组 (n =6) ;第 6组 :70 %肝切除后 2 4h组 (70 %HP2 4h组 ) (n =6) ;第 7组 :假手术 72h组 (n =6) ;第 8组 :70 %肝切除后 72h组 (70 %HP 72h组 ) (n =6)。冰冻切片后经免疫组化染色 ,观察大鼠 70 %肝切除后空、回肠粘膜固有层CD3 、CD4 和CD8 的数量变化。结果　 70 %肝切除 2 4h后 ,T淋巴细胞总数CD3 及CD4 和CD8 亚群的数量下降 ,提示 70 %肝切除后肠粘膜固有层T淋巴细胞免疫功能降低。结论　这可能为肠道细菌移位的原因之一     

兔骨髓间充质干细胞的分离、体外培养、鉴定及成脂诱导

目的分离、体外培养、鉴定兔的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)及诱导分化为脂肪细胞.方法采用健康幼龄日本大耳白兔,麻醉致死后冲洗骨髓收集骨髓液,采用直接贴壁法分离培养MSCs,对MSCs进行形态学观察,同时通过流式细胞分析术对CD34、CD44、CD45、CD90 4种表面抗原进行鉴定.取第5代MSCs,加入50μmol/L抗坏血酸盐2磷酸盐,50μmol/L消炎痛和0.5μmol/L地塞米松诱导其分化.结果第2代MSCs经流式细胞技术鉴定出细胞的CD34(-)、CD45(-)、CD44(+)、CD90(+)符合MSCs的表面抗原.第5代骨髓间充质干细胞,成脂诱导10 d后油红O染色显示有大量脂质沉积并相互融合,细胞由长梭形变为多边形.结论本研究证实了体外培养的细胞为间充质干细胞且成分单一,具有干细胞特性,能分化为脂肪细胞,可作为一个细胞资源,为组织工程和动物模型研究细胞分化机制.     

T细胞疫苗免疫诱导大鼠肝移植免疫耐受的作用探讨

目的　探讨供体抗原特异性T细胞疫苗诱导大鼠肝移植免疫耐受的作用。方法　分别用LOU/C大鼠脾细胞和LEW大鼠脾细胞免疫BN大鼠 ,获取被免疫BN大鼠的脾细胞制备成针对LOU/C大鼠的T细胞疫苗 (LCTCV)和针对LEW大鼠的T细胞疫苗 (LTCV)。分别用制备的T细胞疫苗免疫正常的BN大鼠 (0 .2ml/次 ,1次 /周 ,连续 3次 ) ,于第 3次免疫后第 5天以被疫苗免疫BN大鼠作为受体 ,以LOU/C大鼠作为供体进行原位肝移植 ,设单纯移植组作为对照。观察移植后大鼠的平均存活时间 (MST) ,并对肝移植物进行组织病理学观察 ;于移植后第 7天以受体BN大鼠的脾细胞作为反应细胞 ,以LOU/C大鼠的脾细胞作为刺激细胞进行单向混合淋巴细胞反应 (MLR)。结果　单纯移植组MST为 (8.4 3± 1.99)d ,　LTCV免疫组为 (11.2 9± 1.98)d ,与单纯移植组比较P <0 .0 5 ,LCTCV免疫组为 (17.4 3± 4 .12 )d ,与LTCV免疫组比较P <0 .0 1;观察移植后第 7天组织病理学改变 :单纯移植组呈明显的急性排斥反应病理征象 ,　LTCV免疫组仅出现轻度的炎性细胞浸润和细胞水肿 ,　LCTCV免疫组肝移植物结构基本正常 ,未发现明显的病理损害 ;MLR结果表明 :单纯移植组每分钟脉冲数值为(16 0 0 2± 2 330 ) /min、在LTCV免疫组为 (10 0 2 2± 1348) /min ;比单纯移植组明显     

CO2气腹对正常大鼠脑组织S-100、NSE mRNA和蛋白水平的影响

目的研究在不同CO2气腹压及不同时段下大鼠血和脑脊液S-100蛋白(S-100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的变化对中枢神经系统的影响。方法Wistar大鼠建立气腹模型,光镜和电镜观察大鼠脑组织胶质细胞和神经元细胞组织学变化;抗体夹心法检测血液和脑脊液中S-100、NSE水平变化,RT-PCR技术和免疫组织化学的方法观察脑组织中S-100、NSEmRNA和蛋白水平表达的变化。结果CO2气腹后,A5-1组与对照组比较,海马区胶质细胞和神经元细胞均无明显变化,A10-2组胶质细胞和神经元细胞在光镜下呈轻度水样变,电镜下线粒体轻度肿胀;血液和脑脊液中S-100、NSE在CO2气腹压力后逐渐增加,但差异无统计学意义(P>0.05),S-100和NSE在血液和脑脊液中水平变化分别呈正相关(P<0.05);S-100、NSEmRNA在CO2气腹后逐渐增加,但与对照组比较差异无统计学意(P>0.05);脑组织S-100、NSE表达阳性面积随气腹时间及压力增加而逐渐增加,在A5-1组和A10-2组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在10mmHg2h范围,CO2气腹对正常大鼠中枢神经系统无损害,CO2气腹在这一范围内应用对中枢神经系统是安全的。     

三七总皂甙对大鼠肝脏低温保存再灌注期间肝细胞凋亡的影响

目的　研究三七总皂甙 (PNGS)对大鼠肝脏低温保存再灌注期间肝细胞凋亡的影响及其机制。方法　采用大鼠离体肝脏再灌注模型 (IPRL) ,用Fura 2法测定低温保存 2h后肝细胞内钙离子浓度 ;经乳酸林格氏液 (LR)低温保存 2 4h的肝脏再灌注 30min后进行肝脏功能检测、氧自由基代谢产物、肝细胞凋亡、Bcl 2蛋白表达及形态学观察。LR和DMEM液中加入不同浓度PNGS。结果　大鼠肝细胞内钙离子浓度、MDA、SOD、肝细胞凋亡及Bcl 2蛋白表达阳性率等项指标各实验组明显好于对照组 (P <0 0 1) ,PNGS对大鼠肝细胞凋亡的保护作用显示出剂量依赖性 ,在 2 0 0～ 6 0 0mg范围内随剂量增加保护作用随之增强 (P <0 0 1) ,在 80 0～ 10 0 0mg范围内虽有增强 ,但无明显差别 (P >0 0 5 )。结论　PNGS减轻了大鼠肝脏在低温保存再灌注期间肝细胞凋亡 ,可能与通过抑制钙超载、抗氧自由基损伤、提高Bcl 2蛋白表达作用有关。     

肝移植术后他克莫司血药浓度与尿α1微球蛋白及微量白蛋白的相关性研究

目的选择能够早期反映同种异体原位肝移植术后他克莫司（FK506）对患者肾功能损伤的灵敏指标。方法回顾性分析我院自2000年2月至2005年5月的15例肾功能正常的肝移植患者的临床资料，重点分析其尿α1微球蛋白（α1-MG）和微量白蛋白（mAlb）以及血肌肝（Cr）和尿素氮（BUN）与FK506血药浓度之间的关系。结果15例肝脏移植患者，尿α1-MG及mAlb含量与FK506血药浓度呈正相关（r=0．939，P〈0．005；r=0．893，P〈0．05），血Cr及BUN与FK506血药浓度无相关性（r=0．490，P〉0．05；r=0．382，P〉0．05）。结论尿α1-MG和mAlb可作为反映肾功能损伤的早期的灵敏指标，有利于监测肝移植术后FK506的理想全血浓度，能够为临床早期诊断和治疗肾功能损伤提供参考指标。     

内镜下括约肌切开术在急性胰腺炎治疗中的地位

研究目的：为评价内镜下括约肌切开术在急性胆源性胰腺炎和急性特发性胰腺炎治疗中的效果,作前瞻性研究。病例和方法：１９８６～１９９６年共收治急性胰腺炎患者３２０例,其中１１８例因为病因不符合研究条件除外,１３７例符合条件的患者在秦内镜下括约肌药开术（住院７２ｈ内）,１２８例手术顺利（９例插入导管受阻）,６５例符合条件而未作插约肌切开术的患者作对照组。结果：未出现与内窥镜操作相关的死亡率,发病率为２．１     

血小板活化因子对梗阻性黄疸细胞免疫功能影响的实验研究(摘要)

血小板活化因子对梗阻性黄疸细胞免疫功能影响的实验研究（摘要）研究生严东旺导师张炳彦王炳煌郭永章（昆明医学院第二附属医院肝胆外科，昆明６５０１０１）关键词胆汁郁积，血小板活化因子，Ｔ淋巴细胞亚群，中性粒细胞，内毒素中图分类号Ｒ６５７４近年有研究表明，...     

胆道空肠扩大吻合与瓣膜成形Y型吻合术的临床应用(附43例报告)

我们从1979年初至1983年底,应用胆道空肠扩大吻合与瓣膜成形Y型吻合术治疗肝胆管结石等胆道疾患43例,均获得满意疗效,现报道如下。临床资料本组男27例,女16例。20岁以下2例,21～50岁31例,51～60岁10例。43例中肝胆管结石37例,返流性胆管炎2例,胆总管囊肿2例,胆总管良性狭窄1侧,胆道损伤1例。病理状况见表1。     

47例原发性肝癌自发破裂出血的诊治分析

目的探讨原发性肝癌(PHC)自发破裂出血的诊治特点及预后.方法回顾性分析1998年1月至2004年12月我院收治的47例PHC破裂出血患者的临床资料,并随访2 a.结果47例患者中,41例(87.23%)合并有肝硬化.行手术治疗44例(93.6%).其中行肝切除术者17例,有5例生存时间超过2 a;术后病人的死亡原因主要为肝功能衰竭(22例)、消化道出血(10例)和肾功能衰竭(5例).结论正确及时的诊断和治疗能够提高PHC自发破裂出血病人的生存率,手术切除肿瘤仍然是降低PHC破裂出血病人死亡率的主要手段.