微生物检验中革兰氏阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测结果分析

目的 通过对骨创伤患者分泌物所分离的克雷伯菌属、大肠埃希菌和其他肠杆菌科超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床微生物检验,研究该酶介导的耐药性能及其在临床上的应用.方法 收集骨创伤患者分泌物分离的耐氨苄西林的克雷伯菌属、大肠埃希菌40株,以NCCLs推荐的初筛,Etest法操作,表型确证试验.结果 其中有14株即35%的细菌被确认产出ESBLs,其中9株确认试验与Etest均阳性,产ESBLs的克雷伯菌属检出率为50%,大肠埃希菌的检出率为30.4%,其他肠杆菌科细菌检出率为33.3%.结论 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌属于产出超广谱β-内酰胺酶的重要菌株,但是其他肠杆菌科细菌的检出率也在上升,尤其是不能忽略检测阴沟杆菌.头孢噻肟(CTX)是本地区超广谱β-内酰胺酶筛选的最佳底物.     

产生ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的分布及耐药性分析

目的:了解本医院培养病原菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况,为临床有效地选用抗生素提供依据。方法:采用双纸片扩散法对2010~2013年临床分离的2783株大肠埃希菌和1510株肺炎克雷伯菌进行ESBLs筛选,并用确证试验加以确认。结果:ESBLs总检出率为41.99%,其中大肠埃希菌为40.57%,肺炎克雷伯菌为43.18%。经χ2检验,不同年度大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的总检出率差异有显著性。2010~2013年,不同年度大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs的阳性率呈逐年上升的趋势。确证试验中,头孢他啶、头孢他啶/棒酸检测出ESBLs的总阳性率为30.65%,使用头孢噻肟、头孢噻肟/棒酸检测出ESBLs的总阳性率为37.66%。经χ2检验,两组不同底物检出率之间存在显著性差异。结论:对临床分离的肠杆菌科细菌进行ESBLs检测是非常必要的,在首选头孢类抗生素的同时,要考虑产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的可能性。     

下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌的耐药性基因型分析

目的:观察下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌耐药菌株耐药基因分型,并探讨耐药菌株的流行状况及发生耐药的机制。方法:按常规方法进行细菌分离、培养和菌种鉴定。采用微量液体稀释与K-B法,分别对常用抗生素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药性进行检测。采用纸片法确证产超广谱β-内酰胺酶菌株,并应用PCR技术进一步扩增TEM型、SHV型β-内酰胺酶的基因型。结果:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对AMP、AMP/SB、PIP、CF、CFZ、CRM、CPD、CAX、CAZ、CTX、CPE和AZT的耐药率高达90%以上。产ESBLs肺炎克雷伯菌中产TEM型、SHV型、TEM和SHV型β-内酰胺酶基因的百分率分别为26.92%、30.76%、7.69%,大肠埃希菌百分率分别为46.15%、5.12%、10.25%。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对多种不同种类抗生素耐药,且具有多重耐药的特点。产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌携带TEM或SHV型β-内酰胺酶基因,其中肺炎克雷伯菌以产SHV型β-内酰胺酶为主,大肠埃希菌则以产TEM型β-内酰胺酶为主。     

医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性

目的：了解我院产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamase,ESBLs）肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率及其耐药特征，为临床合理使用抗生素提供依据。方法：对我院2003年1月～2005年12月住院病人分离的肺炎克雷伯菌122株、大肠埃希菌313株，采用NCCLs推荐的纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测,用K—B法做药敏试验。结果：435株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中检出产ESBLs菌139株，总检出率31．95％，其中肺炎克雷伯菌检出率33．61％、大肠埃希菌检出率31．31％；ESBLs检出率有逐年上升趋势；呼吸道标本ESBLs检出率最高，占59．71％；产ESBLs菌对抗生素的耐药率显著高于不产ESBLs菌（P〈0．005），并对氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素呈多重耐药，对含β-内酰胺酶抑制剂的复合抗生素耐药率有增高趋势，均对亚胺培南敏感。结论：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的ESBLs检出率逐年增加，应及时对ESBLs菌进行检测，以指导临床用药。亚胺培南可作为ESBLs菌治疗的首选药。     

ICU产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的探讨医院重症监护病房产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性。方法采用BD Phoenix100全自动微生物分析仪对莒县中医医院重症监护病房产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行细菌鉴定和药物敏感试验。结果产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均呈现多重耐药,大肠埃希菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的耐药率分别为1.8%、5.5%和20.0%,其余14种抗生素的耐药率在54.6%~100.0%;肺炎克雷伯菌对亚胺培南无耐药现象,其余16种抗生素的耐药率在56.0%~100.0%。结论重症监护病房分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多重耐药严重;同样是产ESBLs菌株,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对相同抗生素的敏感率明显不同。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的耐药表型和基因型研究

目的 检测临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况，了解产超广谱β-内酰胺酶临床分离菌的耐药特性，并探讨耐药性产生的基因背景。方法 通过对近两年（2004～2005）北京地区医院收集到的共295株大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌，进行产ESBEs菌株表型鉴定、PCR检测基因型、等电聚焦电泳鉴定等电点，并对这些菌株耐药的特性和基因型进行了探讨。结果 ESBLs的检出率为18．6％，其中大肠埃希菌的检出率为27．7％，肺炎克雷伯杆菌的检出率为8．57％。引起耐药的基因型主要为TEN型81．8％（45／55），其次CTX—M型74．5％（41／55），然后是SHV型20％（11／55）。大肠埃希菌以TEN型为主（88．4％），肺炎克雷伯杆菌以CTX—M为主（91．7％）。经等电聚焦电泳验证，少数菌株的耐药由TEN、SHV、CTX型酶之外的ESBLs引起。结论 产ESBLs菌在临床上较为普遍，大肠埃希菌以TEN型为主，肺炎克雷伯菌以CTX—M型为主，CTX—M型酶对肺炎克雷伯杆菌的头孢噻肟耐药性起重要作用。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶检测与分析

目的：掌握肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中超广谱β－内酰胺酶发生率及对多种抗生素耐药现状，比较三种检测方法。方法：按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）1999年版推荐的纸片扩散法的筛选试验和试验，同时以非NCCLS推荐的双纸片协同法检测超广谱β－内酰胺酶。结果：超广谱β－内酰胺酶发生率肺炎克雷伯菌35．8％，大肠埃希菌34．1％。超广谱酶林对多种抗生素耐药率高。确证试验与协同试验相符率高。结论：本院肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β－内酰胺酶发生率高，临床应慎用第三代头孢菌素和氨曲南。筛选法可疑株必须做确证试验。协同试验直观，便于观察，有一定的漏检率和误检率。纸片间距离问题不宜规定统一标准。     

两种超广谱β-内酰胺酶法检测174株肠杆菌科细菌的结果分析

目的 了解全自动微生物分析仪Vitek-32革兰阴性杆菌药敏卡检测肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-laetamases，ESBLs)的准确性，探讨Vitek-32在肠杆菌科细菌ESBLs检测中出现的一些问题。方法 用Vitek-32仪器法中的革兰阴性杆菌药敏卡(GNS—120)和NCCLS推荐的双纸片扩散ESBLs确证法对174株肠杆菌科细菌同时检测其ESBLs。结果 174株肠杆菌科菌Vitek-32仪器法检出产ESBLs菌39株，ESBLs检出率为22．4％，其中大肠埃希菌ESBLs检出率为27．9％，肺炎(产酸)克雷伯菌21．6％，阴沟肠杆菌21．5％；双纸片扩散ESBLs确证法检出产ESBLs菌47株，ESBLs检出率为27．1％。大肠埃希菌ESBLs检出率26．5％，肺炎(产酸)克雷伯菌27％，阴沟肠杆菌36．8％。结论 Vitek-32仪器法对大肠埃希菌、肺炎(产酸)克雷伯菌产生的ESBLs检测结果-s双纸片扩散法ESBLs确证法结果符合率高；阴沟肠杆菌不宜用Vitek-32仪器法检测。当肠杆菌科细菌对三代头孢菌素、四代头孢菌素出现中介、耐药或头孢西丁耐药，而Vitek-32仪器法ESBLs检测ESBLs为阴性时，应用NCCLS推荐的双纸片扩散法重新检测ESBLs，或进一步用三维试验法检测超超广谱β-内酰胺酶。     

医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamase,ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率及其耐药特征,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:对我院2003年1月～2005年12月住院病人分离的肺炎克雷伯菌122株、大肠埃希菌313株,采用NCCLs推荐的纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测,用K-B法做药敏试验。结果:435株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中检出产ESBLs菌139株,总检出率31.95%,其中肺炎克雷伯菌检出率33.61%、大肠埃希菌检出率31.31%;ESBLs检出率有逐年上升趋势;呼吸道标本ESBLs检出率最高,占59.71%;产ESBLs菌对抗生素的耐药率显著高于不产ESBLs菌(P<0.005),并对氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素呈多重耐药,对含β-内酰胺酶抑制剂的复合抗生素耐药率有增高趋势,均对亚胺培南敏感。结论:肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的ESBLs检出率逐年增加,应及时对ESBLs菌进行检测,以指导临床用药。亚胺培南可作为ESBLs菌治疗的首选药。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶菌的产生及耐药性分析

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因的产生和传递是肠杆菌科细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因之一，而ESBLs主要存在于大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中.为了解我院ESBLs的产生及耐药情况，我们对从标本中分离得到的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌作了ESBLs检测及分析，报道如下.     

阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的:了解本地区阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性。方法:收集154株临床分离无重复阴沟肠杆菌,通过改良三维实验检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:在154株菌中,18.83%的菌株单产ESBLs,22.73%的菌株单产AmpC酶,5.19%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,53.25%的菌株AmpC酶和ESBLs均不产生。产不同类型β-内酰胺酶其耐药性有所不同。结论:本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。高产AmpC酶菌株对一、二、三代头孢菌素、头孢西丁、酶抑制剂复合制剂等高度耐药,对头孢吡肟敏感,而产ESBLs菌株对三代头孢菌素、头孢吡肟均不同程度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂保持较高的敏感性,因此,产Ampc酶及ES-BLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

超广谱AmpC酶的研究进展

革兰阴性杆菌产AmpC酶是继产超广谱β-内酰胺酶之后出现的对β-内酰胺类抗菌药物的另一种主要耐药机制。最近在临床肠杆菌科中出现了一种新的AmpC酶——超广谱AmpC酶(ESAC),它由传统的AmpC酶通过氨基酸缺失、插入或置换得来,这些结构的改变增强了其对β-内酰胺类抗菌药物的水解活性。文章在传统AmpC酶研究的基础上,对ESAC的发现和流行情况、结构改变与功能的关系及产ESAC细菌对β-内酰胺类药物的耐药情况做一综述。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性,为临床合理选用抗生素提供依据。方法:2005年9月~2006年6月,收集临床分离产ESBLs大肠埃希菌63株,采用琼脂平皿稀释法进行MIC测定。结果:产ESBLs大肠埃希菌对碳青霉烯类和哌拉西林/他唑巴坦普遍敏感,对哌拉西林和喹诺酮类耐药率分别为98.41%和90.48%,对头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、头孢西丁、头孢噻肟和头孢曲松耐药率依次为34.92%、36.51%、44.45%、55.56%、82.54%和84.13%。结论:我院产ESBLs大肠埃希菌耐药明显。     

改良三维试验方法检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs实验研究

目的:评价酶提取物三维实验方法检测阴沟肠杆菌高产Am pC酶和超广谱β内酰胺酶ESBL s的可行性,探讨本地区阴沟肠杆菌产不同类型β内酰胺酶的流行状况。方法:应用改良酶提取物三维实验检测阴沟肠杆菌高产Am pC酶和ESBL s。结果:154株阴沟肠杆菌中,35株产Am pC酶,29株单产ESBL s,8株同时产两类酶,82株均不产生两种酶。结论:本地区阴沟肠杆菌产Am pC酶和ESBL s的流行处于一个相对较高的水平,改良的酶提取物三维实验可用于阴沟肠杆菌Am pC酶和ESBL s的检测。     

ChromID ESBLs显色培养基的临床应用评价

目的评价超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)显色培养基对患者标本中携带ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等细菌的快速筛选作用。方法将患者的肛拭子标本接种ESBLs显色培养基,对平板上生长的细菌做鉴定和双纸片增效确认实验。结果显色平板为紫红色的菌株中大肠埃希菌为98.3%,且100%为ESBLs确证阳性;显色平板为绿色的菌株中仅73.3%为肺炎克雷伯菌,90.1%为ESBLs确证阳性。119株中有24株无色细菌和5株棕色细菌,其中2株ESBLs确证为阴性。结论 ChromID ESBLs显色培养基能快速检测筛选ESBLs阳性的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌,对控制院内感染、指导临床合理使用抗菌药物有积极意义,但是鉴定到种需加以生化反应,ESBLs株必须附加试验进行确定。     

阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的了解医院阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae,ECL）的临床分布情况及其对常用抗生素的耐药率,为临床合理使用抗生素提供依据。方法对医院2010年4月~2011年8月检出的55株阴沟肠杆菌进行药敏和超广谱β-内酰胺酶（extended spectrumβ-lactamase,ESBLs）检测,抗生素敏感测定采用K-B琼脂扩散法,产ESBLs的检测采用双纸片确认法。结果 55株阴沟肠杆菌在临床的分布以痰液为主,占49.0%,感染主要发生在重症监护病房、泌尿外科和呼吸内科。阴沟肠杆菌对美罗培南（美平）和亚胺培南（泰能）无耐药,对头孢哌酮/舒巴坦有较低的耐药率,耐药率为7.27%,对头胞噻肟、氨苄青霉素和头孢唑啉有较高的耐药率,耐药率为80.0%、100%和100%。ESBLs阳性株耐药率在头胞噻肟、头孢吡肟、头胞他啶（复达欣）、庆大霉素和头孢西丁比ESBLs阴性株高,差异有统计学意义（P〈0.05）;在头孢哌酮/舒巴坦、丁胺卡那、哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星的耐药率,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论应加强对阴沟肠杆菌,特别是ESBLs阳性株耐药性的监测,根据药敏试验结果合理选用抗生素是非常重要。     

烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌分离率及耐药性分析

目的了解我院特别是烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌的流行情况,检测其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗和控制ESBLs菌感染及流行提供重要依据.方法通过中心化验室收集我院2000年3月～2001年2月住院患者送检标本中大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌共计258株,应用VITEK自动检测系统(GNS-506药敏分析卡)及双纸片扩散法筛选产ESBLs菌.根据VITEK自动检测系统药敏检测结果分析比较产ESBLs菌和非产ESBLs菌对15种抗生素的敏感性,并对其中38株产ESBLs阳性菌进行12种临床常用抗生素MIC检测.结果 258株入选菌株中产ESBLs阳性率分别为:大肠杆菌18.8%(29/154);肺炎克雷伯杆菌12.5%(13/104).按标本种类分析,分泌物标本培养产ESBLs阳性率最高,为25.5%,与其他标本培养的总阳性率间的差别有显著性意义;按病区分析,烧伤病区产ESBLs阳性率(大肠杆菌38.5%;肺炎克雷伯杆菌25.0%)与其他病区产ESBLs阳性率间差别有显著性意义.药敏结果:产ESBLs的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南、美洛培南及头孢西丁的敏感率较高,其次是氨基糖苷类抗生素,产ESBLs的肺炎克雷伯杆菌对哌拉西林/三唑巴坦敏感,对其他抗生素的敏感性下降.结论烧伤病区是产ESBLs菌的高发病区,产ESBLs菌对亚胺培南的敏感率最高,其次是美洛培南、头孢西丁和丁胺卡那.     

儿童社区获得性肺炎产超广谱β-内酰胺酶菌株分布及耐药性分析

目的了解儿童社区获得性肺炎的病原菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的检出率、病原菌分布情况及耐药特征。方法收集2012年7月至2013年12月入住本院儿科病房儿童社区获得性肺炎患儿痰标本培养,采用纸片扩散法及双纸片法检测产ESBLs菌株,并对产ESBLs菌株进行药敏试验及进行耐药性分析。结果在1 241份社区获得性肺炎患儿痰液标本中共培养出产ESBLs菌株77株,检出率为6.2%,其中肺炎克雷伯菌36株,占46.8%,大肠埃希菌41株,占53.2%。大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对头孢他啶的耐药率分别为26.8%、63.9%,对氨苄西林舒巴坦的耐药率分别为43.9%、80.6%,对哌拉西林他唑巴坦的耐药率分别仅为0、2.8%,而对头孢吡肟的耐药率分别为12.2%、44.4%,对头孢替坦、亚胺培南及美罗培南的耐药率均为0。结论临床上对于产ESBLs菌株感染的儿童社区获得性肺炎治疗应根据临床情况和药敏试验结果,选用β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂、头孢西丁、头孢替坦等头霉素类,或亚胺培南等碳青霉烯类抗生素进行治疗。     

肠杆菌属细菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的表达状况研究

目的 研究超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和高产AmpC酶在肠杆菌属细菌的表达状况以及ESBLs的基因型,了解肠杆菌属细菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制。方法 采用酶提取物三维及抑制试验检测121株肠杆菌属细菌高产AmpC酶和产ESBLs的情况;采用聚合酶链反应检测产ESBLs菌株的基因型。结果 在121株肠杆菌属细菌中,酶提取物三维及抑制试验共检出产ESBLs菌株29株（24.0%）,高产AmpC酶并产ESBLs菌株14株（11.5%）,高产AmpC酶并产ESBLs的菌株占总高产AmpC酶菌株的43.8%（14/32）。在25株PCR扩增阳性菌株中,TEM型为7株,SHV型10株,CTX-M-1组6株,CTX-M-13组7株,OXA组为阴性,其中有5株同时检测出两种ESBLs基因型。结论 除高产AmpC酶外,产ESBLs也是肠杆菌属细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要因素之一。肠杆菌属细菌产ESBLs的基因型包括TEM、SHV、CTX-M型,以CTX-M型为主。