黑线仓鼠及其白化突变系TYR、TYRP1的基因表达水平比较分析

目的本研究旨在研究TYR、TYRP1基因在黑线仓鼠与白化突变系皮肤组织中的表达情况,探索其与白化毛色性状的产生是否具有相关性。方法以黑线仓鼠和白化突变系皮肤组织为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术,分别得到黑线仓鼠与白化突变系TYR和TYRP1基因的相对表达量。结果黑线仓鼠皮肤中的TYR和TYRP1基因的mRNA相对表达量分别是白化突变系皮肤组织中的2.5倍和5.3倍。结论表明黑线仓鼠皮肤中TYR、TYRP1的基因表达水平存在表达差异,白化突变系TYR、TYRP1基因发生表达下调,揭示出了TYR、TYRP1基因的表达量与白化突变系白化性状的产生有关。     

黑线仓鼠及其白化突变系酪氨酸酶基因的克隆与序列分析

目的对黑线仓鼠及其白化突变系酪氨酸酶基因进行比较研究,揭示黑线仓鼠白化突变系白化性状产生的分子机理。方法根据小鼠与大鼠的酪氨酸酶基因保守区设计3对引物,利用RT-PCR方法 , 从黑线仓鼠及其白化系皮肤总 RNA中扩增得到酪氨酸酶的cDNA基因,并对其二者进行克隆测序。结果成功获得了黑线仓鼠及其白化突变系的酪氨酸酶基因,对二者的序列比较分析结果表明,二者的编码区没有差异。 结论黑线仓鼠白化突变系白化性状产生的原因与已知小鼠的白化性状产生原因不同,并不是由酪氨酸酶基因编码区突变造成的,其白化性状产生的机理有待进一步的研究。     

黑线仓鼠及其白化突变系血液生理生化值的测定与分析

目的 测定黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化参数,比较两者的差异,为医学实验研究提供参考.方法 用眼球取血的方法采集动物全血,分别制备抗凝血和血清,应用全自动生化分析仪和全自动血细胞分析仪进行测定.用SPSS10.0软件包对测定结果进行分析.结果 测定了黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化正常值范围,并与其它动物的数据进行了比较.结论 确定了黑线仓鼠与其白化突变系的血液生理生化正常值范围,两者在多项指标上存在差异.而且,黑线仓鼠及其白化突变系的血小板计数均高于小鼠,约高出3倍,这一差异可能有利于两者作为血液凝集实验模型的研究.     

黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因的克隆与序列分析研究

目的将黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因编码区进行序列比对分析,试揭示黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因编码区之间是否存在变异。方法根据小鼠与大鼠的同种型肌张力异常蛋白变体X1段基因设计6对引物,采用RT-PCR的方法,从黑线仓鼠及其白化系皮肤中扩增得到cDNA基因,并对其二者进行克隆测序。结果将由RT-PCR方法获得的基因序列进行比对后可知,二者编码区共有17处差异,氨基酸差异共24处,但无关键核酸蛋白出现变异现象。结论黑线仓鼠白化突变系白化性状产生,并不是由肌张力异常蛋白变体X1的这段基因编码区突变造成的,其白化性状产生的机制尚需要进一步的研究。     

旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系细胞因子变化比较分析

目的：比较旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后两种动物免疫状态的变化,建立适合感染寄生虫的动物模型。方法用旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后,通过检测血细胞生理值、脾脏 IL-2蛋白浓度和脾脏 IL-6基因表达水平,分析两种动物在感染旋毛虫前后免疫应答水平及免疫调控状态的变化。结果黑线仓鼠在感染旋毛虫后免疫细胞及细胞因子的水平高于白化突变系,反应程度更加剧烈。结论黑线仓鼠是旋毛虫感染的较为适宜的模型动物。     

黑线仓鼠白化突变系的生物学特性与应用

黑线仓鼠白化突变系是我们在驯育野生黑线仓鼠时,对发现的6只该鼠白化突变体,通过6年半人工繁育建成的、目前国内外唯一的黑线仓鼠白化品系。培育过程中我们对其遗传、解剖、生理及生长发育等生物学特性进行了观察,并作了医学生物学的试验应用。遗传研究表明,黑线仓鼠的白化性状属单一隐性遗传,是由位于染色体上一个隐性基因控制的,测定试验结果符合孟德尔分离法则。白化型黑线仓鼠染色体G带核型与正常型黑线仓鼠类相同(2n=22)。     

白化黑线仓鼠的繁殖

白化黑线仓鼠(Cricetulus barabensis)是我们驯育黑线仓鼠时发现的该鼠白化突变体,通过遗传选育建立了黑线仓鼠白化突变系,迄今国内外未见报道。为进行该品系的生物学特性研究,提供医学生物学应用的必要基础资料,我们对其繁殖性能作了观察。     

一种新的皮肤黑色素细胞及肥大细胞缺乏的小鼠模型

目的分析Kit基因突变的W-4Bao白斑小鼠的表型特征。方法遗传试验观察突变小鼠的大体表型,多巴染色法观察黑色素细胞,甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞。结果突变基因杂合子小鼠腹部三角形白斑,肢端、尾端白化;皮肤组织内黑色素细胞及肥大细胞无明显差异。突变纯合子小鼠全身被毛白色,眼周、耳廓、背部局部被毛末端灰黑色,黑眼;皮肤组织内多巴阳性黑色素细胞、肥大细胞较对照组明显减少几近完全缺失。结论Kit基因错义突变不仅导致了W-4Bao杂合子及纯合子小鼠黑色素细胞缺乏,同时影响了肥大细胞的发育。     

白化黑线仓鼠的培育研究

在驯育过程中,我们发现了6只黑线仓鼠白化个体,经过三年半人工繁育建立了目前国内外唯一的白化黑线仓鼠种群.原种增殖采取杂合子,白化间互交,以及子代与亲代回交方式,用目睹试配与定期同居的交配方法进行繁殖扩大种群.驯育期间我们观察了动物的性周期、妊娠判断、繁殖力和幼仔的的生长发育.黑线仓鼠(Cricetulu barabensis)俗称中国地鼠是分布于我国北方的小型野生啮齿类.早在本世纪初我国就应用于医学实验。40年代末,斯万德克(Schwentker)将其引到美国,经过几年的研究获得实验室繁殖成功,现已广泛应用于遗传、肿瘤和糖尿病等的研究。目前国内亦有一些单位进行驯育。虽然黑线仓鼠在国外已培育成纯品系、糖尿病品系,但迄今未见有白他黑线仓鼠报道。我们在驯育过程中于1984年4～6月发现一对野生原种杂合子鼠繁育了2胎仔鼠(其中有白化个体6只),经过三年半人工繁育建立了目前国内外唯一的白化黑线仓鼠种群.     

白化黑线仓鼠的生长发育

观察了白化黑线仓鼠的生长发育过程。初生幼仔无毛、眼闭，生后４ｄ长出绒毛，耳壳脱出，１３ｄ开眼、采食，２０ｄ可独立生活。２个月左右达到性成熟。记录了１４０只白化黑线仓鼠从出生至１００日龄的体重、体长、尾长和足长的增长情况，测定了６月龄白化黑线仓鼠脏器的重量系数，结果均与正常黑线仓鼠相似。     

体外构建色素化皮肤类似物模型

目的 探寻构建色素化皮肤类似物的方法.方法 以包皮组织作为细胞来源,采用消化法获得角质形成细胞、黑素细胞;采用组织块法获得成纤维细胞,以鼠尾胶原为支架,构建色素化皮肤类似物.HE染色、Fontana Masson染色检测构建的色素化皮肤类似物的大体结构及其中黑色素细胞的分布和状态,以透射电镜观察类似物的超微结构.结果 构建的色素化皮肤类似物结构完整,细胞状态良好,与皮肤结构相似.结论 成功构建了色素化皮肤类似物模型.     

11例黄褐斑面部皮损组织病理及超微病理

目的:比较黄褐斑患者面部皮损及临近非皮损的组织病理及超微病理学特点。方法:选择11例门诊确诊的黄褐斑患者,对皮损和临近非皮损取活检,分别进行苏木素-伊红、Fontana-M asson染色、HMB45、NK I/beteb免疫组化染色和电镜观察。计算机图像分析技术量化分析。结果:同邻近正常皮损相比,黄褐斑皮损表皮全层色素明显增加,基底层黑素细胞数量无改变。真皮载色素细胞增加。超微结构显示黄褐斑皮损黑素细胞内线粒体、高尔基体、粗质内质网、核糖体及成熟黑素小体数量增加,角质形成细胞内有大量吞噬的Ⅲ期、Ⅳ期黑素小体。结论:黄褐斑皮损的色素增加,可能与多种因素引起的黑素细胞功能活跃和黑素颗粒在表皮内转运增加有关。     

甲苯胺蓝在组织染色中应用范围的拓展

目的 推广甲苯胺蓝在组织染色中的应用.方法 取大鼠皮肤、肺脏、气管、大脑及脊髓等组织,4%甲醛固定后常规切片,分别进行甲苯胺蓝染色,镜下观察各组织细胞的特点.结果 经甲苯胺蓝染色,除神经元的尼氏体清晰显示外,皮肤的朗格汉斯细胞与黑素细胞及梅克尔细胞,肺脏的Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞及巨噬细胞,气管的纤毛细胞和杯状细胞均得到不同程度区分,大脑皮质的分层也更加清晰.结论 甲苯胺蓝染色可应用于皮肤、肺脏、气管、大脑及脊髓组织,拓展了传统应用范围.     

壬二酸对人黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素合成功能的影响

目的 建立体外培养的正常人表皮黑素细胞系，检测壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素合成的影响。方法 体外人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B．。细胞培养，TRP-1染色观察壬二酸作用后，细胞形态的变化；测定壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑色素瘤B16细胞酪氨酸酶活性及黑素含量变化观察壬二酸的脱色素作用。结果 壬二酸作用于人表皮黑素细胞后，可见细胞树突明显减少；壬二酸作用于B16细胞后，细胞形态无明显改变。壬二酸抑制人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞的酪氨酸酶活性，细胞黑素合成减少，而且具有浓度依赖性。结论 壬二酸对体外培养的人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞的酪氨酸酶活性及黑素生成都有抑制作用，可临床应用于治疗色素性疾病。     

熊果苷制剂对豚鼠皮肤安全性及脱色作用的研究

目的研究不同浓度的熊果苷制剂外用对豚鼠皮肤的敏感性、刺激性及黑素细胞和黑素颗粒的变化,为临床治疗黄褐斑及炎症后色素沉着提供安全和治疗依据。方法选用不同浓度的熊果苷制剂涂抹豚鼠皮肤,通过皮肤敏感试验、刺激试验、皮肤色素值测定和组织病理学检查等方法,观察豚鼠皮肤的形态学和组织学的变化。结果豚鼠皮肤对不同浓度的熊果苷制剂无过敏反应;而刺激反应不同,3%、5%和10%浓度的熊果苷制剂对皮肤没有刺激,15%的熊果苷制剂可引起皮肤轻微潮红,无水肿,为弱刺激性;20%的熊果苷制剂引起皮肤潮红、水肿,具有中等刺激性。豚鼠皮肤颜色的变化随着熊果苷浓度的增加色素值明显减少,其中3%、5%、10%浓度的熊果苷制剂使用3、4周后色素值的变化与单霜相比具有统计学意义。组织病理显示:3%、5%、10%浓度的熊果苷制剂对黑素细胞数量无影响,黑素颗粒随着浓度的增加逐渐减少,15%和20%的熊果苷制剂使黑素细胞数量明显减少,黑素颗粒减少。结论 3%、5%、10%熊果苷制剂外用对豚鼠皮肤是安全且有效的。     

308 nm激光联合胡椒碱在白癜风动物模型中的应用研究

目的 探讨308 nm激光联合胡椒碱对豚鼠表皮中黑素细胞的影响,观察联合疗法对实验动物的安全性和疗效.方法 豚鼠背部分别以联合疗法组、308 nm激光组、胡椒碱组、阳性对照组及空白对照组作用.5周后对不同观察组脱色区皮肤进行色素生成肉眼观察和皮肤活检.观察治疗前后病理切片中黑素颗粒的改变及黑素细胞数目.结果 治疗5周后,肉眼观察除空白对照组外,4组均能促进豚鼠皮肤色素沉着.联合治疗组多巴阳性黑素细胞数及黑素颗粒均较其他3组不同程度增多(P＜0.05),与阳性对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 308 nm激光联合胡椒碱对豚鼠背部皮肤有明显增色作用,具有促进黑素增值和黑素合成的功能.     

宁夏啮齿动物种类与地理分布

目的了解宁夏啮齿动物的种类与地理分布。方法夹夜法和鼠笼诱捕法。结果宁夏啮齿动物8科25属38种,小家鼠、褐家鼠和草兔分布广泛,达乌尔黄鼠、黑线仓鼠、灰仓鼠、五趾跳鼠、子午沙鼠和长爪沙鼠在全区大部分地区均有分布,其它种类分布相对局限。结论基本掌握了宁夏啮齿动物的种类和地理分布,为今后开展啮齿动物防制提供了参考。