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目的探讨阿尔茨海默病(AD)凋亡相关蛋白的表达情况。方法取3月龄和6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,利用Western印迹的方法检测APPswe/PSΔE9小鼠和对照小鼠脑组织中bcl-2、caspase-9以及caspase-3的表达情况。结果与同月龄的对照小鼠相比,APPswe/PSΔE9转基因小鼠中,bcl-2表达水平明显降低,而caspase-9和caspase-3表达水平明显升高。结论凋亡相关蛋白的异常表达可能在AD的发生发展过程中起到一定作用。 相似文献
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目的 了解北京市复治结核病患者非北京基因型菌株谱系及耐药情况,为复治非北京基因型结核病患者有效防治提供科学依据。方法 采用RD105基因缺失法对复治患者所分离的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)进行检测,筛查出非北京基因型菌株,使用可变数目串联重复序列基因分型实验分析非北京基因型菌株的遗传特征,再使用比例法药敏实验及全基因组测序分析其耐药情况。结果 134例复治结核病患者所分离的MTB中,北京基因型为 125例(93.3%),非北京基因型为9例(6.7%)。9例非北京基因型MTB呈现9种不同的基因型,均不成簇,为独特型。9例非北京基因型MTB均为谱系4,其中,亚谱系L4.4有4株,亚谱系L4.5有5株。耐药预测结果显示,9例非北京基因型中,6例为全敏感菌株(66.7%),1例单耐异烟肼,耐药突变位点为ahpC_c.-48G>A,1例同时耐异烟肼与乙硫异烟胺, 耐药突变位点为fabG1_c.-15C>T,1例单耐氟喹诺酮,耐药突变位点为gyrA_p.Asp94Asn与gyrA_p.Ala90Val。全基因组测序预测耐药结果与比例法药敏结果完全一致。结论 复治结核病患者非北京基因型菌株主要为谱系4,呈明显的多态性。耐药突变位点均为常见突变位点。 相似文献
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H5N1接种恒河猴和食蟹猴后外周血细胞变化的分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 测定H5N1型禽流感病毒感染恒河猴、食蟹猴后,其外周血细胞的变化,为H5N1模型猴提供基础数据及研究参考.方法 健康合格食蟹猴、恒河猴各4只,经滴鼻方式接种H5N1病毒107TCID50,确认发病后,在不同时间点进行血细胞及T淋巴细亚群的分析.结果与接种HSN1病毒前比较,接种后白细胞总数(WBC)在第6天时有所降低,至第9天时回升;红细胞总数(RBC)在第3天有所降低,之后回升;淋巴细胞比例及数量分别在第6天、第9天升高并达到最高值.至第9天时,CD4+T细胞数明显高于接种前,CD8+T细胞数上升显著,导致CD4+/CD8+T细胞比例下降,甚至在2只食蟹猴出现了比例倒置.结论 实验用猴感染H5N1后,可导致WBC,CD+,CD8+T等血液细胞的变化,应作为H5N1模型动物的检测指标. 相似文献
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在内分泌组织的病理诊断和研究中,由于常规的HE染色不能够很好的显示垂体、肾上腺的组织形态,经常需要对垂体、肾上腺进行特殊染色以显示各组织学形态.垂体特染方法很多,但试剂配制繁琐,染色步骤多,而肾上腺的特殊染色则通常需要用特殊固定液对组织进行早期固定,因此我们尝试用Azan改良方法对垂体及肾上腺进行染色并进行比较.结果表明Azan改良法不仅能很好显示腺垂体和神经垂体各类细胞的组织形态,同时还能清晰显示肾上腺各部分的组织形态,此方法有步骤少、细胞形态清晰、容易诊断等优点,该方法操作方便、容易掌握. 相似文献
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目的 明确SARS-CoV Spike蛋白来源的不同B细胞免疫多肽在SARS-CoV感染h-ACE2C57转基因小鼠过程中的作用.方法 用不同B细胞表位多肽S471-503,S604-625,S1164-1119及S597-625单独或联合免疫h-ACE2C57转基因小鼠,检测血清抗体滴度,当血清中的抗体达到有效滴度时,用SARS-CoV感染小鼠,感染后4 d处死小鼠,观察SARS-CoV感染靶器官肺组织的组织形态学变化,应用RT-PCR的方法检测肺组织中SARS-CoV病毒表达量的差异.结果 S471-503,S604-625,S1164-1119这三种多肽联合免疫组的小鼠,肺组织的病理性改变要比0.9%NaCl免疫的对照组轻,PCR结果显示SARS-CoV表达情况减弱,S597-625与S604-625相比,其N端增加了7个氨基酸残基,但S597-625多肽单独免疫小鼠其肺组织病理性改变与对照组相比,程度却出现了抗体依赖的增强作用(antibody dependent enhancement,ADE),RT-PCR结果也显示病毒的表达量有所增强.结论 我们的研究表明,Spike蛋白S1结构域27个氨基酸残基的B细胞线形免疫原S597-625抗体的ADE作用是独立于Fcγ受体之外的.这种非经典ADE作用可以提供更多的研究价值.疫苗是有效抵抗各种感染的工具之一,在我们的研究中,这种ADE现象可以减弱或是平衡掉其他中和抗体的作用.因此,对ADE现象进行认真系统的阐述是非常有必要的,它关系着疫苗安全性问题以及新疫苗在生产过程中的工艺实施问题. 相似文献
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目的探讨mir-34a在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法取3月龄和6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time RT-PCR对芯片结果进行验证;采用western blot的方法检测APPswe/PSΔE9小鼠和对照小鼠脑组织中bcl2蛋白的表达情况;通过构建mir-34a稳定转染细胞系和mir-34aknockdown研究mir-34a与bcl2之间的关系;通过构建bcl23’UTR-荧光素酶报告载体,验证bcl23’UTR序列中包含mir-34a的结合位点。结果mir-34a在模型小鼠中表达水平明显升高,并且其表达水平与bcl2蛋白水平呈负相关;通过体外实验,我们发现mir-34a过表达可以明显降低bcl2蛋白水平,反之,当我们抑制mir-34a的表达以后则可以增加bcl2蛋白水平;荧光素酶报告载体实验表明bcl23’UTR序列中包含mir-34a的结合位点。结论bcl2可能是mir-34a重要的功能靶点,mir-34a的过表达可能通过下调bcl2的蛋白水平,从而参与AD的发生。 相似文献
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SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜活检组织病理学观察 总被引:2,自引:2,他引:0
目的 使用消化内窥镜对SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜进行观察.方法 SHIV感染恒河猴,消化内镜检查并进行活检取材,对活检标本进行固定,石蜡包埋,常规HE染色镜检.结果 内镜大体观察胃黏膜和十二指肠黏膜基本上完整平滑,1例胃黏膜有弥漫性白斑,3例有小面积的出血;光镜下十二指肠黏膜完整未见脱落,固有层中有散在分布的慢性炎细胞,活检取材最深可达黏膜下层,未见其他特异性病理改变.结论 不同毒株,不同感染时间的SHIV感染恒河猴和对照恒河猴的十二指肠黏膜活检组织HE染色组织结构清晰,呈慢性炎症改变,病理形态上没有明显的差异. 相似文献
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目的对文献中的量表进行修改和细化后用于实验猴的神经功能动态量化观察,使其更适于灵长类脑卒中神经功能缺损的评价。方法成年食蟹猴12只,用自体股动脉抗凝血脑内立体注射的方法建立脑出血模型,造模后1周将动物随机分为对照组、干细胞治疗高剂量组和低剂量组,分别在出血灶周围注射生理盐水、脊髓间充质干细胞5×106/只和1×106/只,造模6h,1d,3 d,1w后及干细胞注射后1d,3d,1w,2w,3w,4w在每天的固定时间使用文献中的表格和/或改进的表格进行评分,比较造模前后和干细胞注射前后动物受损伤侧上肢神经功能缺损情况评价造模和干细胞治疗效果。结果造模手术前,所有动物的行为表现均正常,神经功能评分为0。造模手术后6h,用修改前后的表格评分均为31分左右。但从术后3d开始出现评分上的差异。用修改后的表格对动物的神经功能进行评分结果显示干细胞注射后1周开始到动物被安乐时,剂量组与对照组之间的神经功能评分出现显著性差异(P<0.05)。高、低剂量组间未见显著性差异。结论改进的表格克服了旧表格中分差大,评价标准模糊的缺点,提高了量表评价的敏感性,具有良好的临床相似性和可操作性。为建立标准化神经功能评价量表进行了有益尝试。 相似文献
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目的 探讨microRNA29c(miR-29c)在阿尔茨海默病中的作用.方法 采用了microarray芯片检测3月龄、6月龄APPswe/PSAE9双转基因阿尔茨海默病小鼠大脑中microRNA表达情况并利用实时定量 PCR验证结果 可靠性,通过microRNA靶基因数据库预测选出与阿尔茨海默病相关的靶基因,构建miR-29c表达载体,将其转染SH-SY5Y及HEK-293T细胞,在高表达miR-29c的SH-SY5Y及HEK-293T细胞系中验证miR-29c对靶基因的调控作用.将靶基因APP mRNA的野生及突变3'UTR序列克隆到双荧光素酶报告基因载体,用双荧光素酶报告检测系统检测miR-29c与靶基因的结合位点.结果 根据microRNA芯片结果 筛选出在3、6月龄APPSWE/PSI AE9双转基因小鼠大脑表达均有差异的miR-29c,通过实时定量 PCR证实miR-29c在3月、6月、9月龄小鼠中表达明显升高.通过microRNA靶基因数据库预测miR-29c可以调控阿尔茨海默病的把基因APP,利用Western blot检测到高表达miR-29c的SH-SY5 Y细胞及HEK-293T细胞中APP蛋白表达减少.将miR-29c表达载体与带有野生及突变APPmRNA的3'UTR的双荧光素酶报告载体共转染HEK-293T细胞,通过双荧光素酶检测系统检测未找到miR-29c与APP mRNA 3' UTR的结合位点.结论 miR-29c对APP表达的具有负向调控作用,但其调控位点可能不位于其3'UTR区城. 相似文献
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