树Qu的人工哺育

为探索和建立人工哺育树鼩的可行方法,将5对成年树鼩配对后饲养在繁殖笼内,喂与由标准动物粉状饲料、奶酪、新鲜蔬菜和水果构成的混合食物.新生树鼩出生后立即从母笼移出至孵育箱,每日人工喂与专门配制的牛奶制品.三周后将小树鼩从孵育箱移出,经喂与转换食物约10 d,过度到自食成年食物.结果7个月内5对成年树鼠句在共产11窝31只仔树鼩.在27只出生后人工喂养的仔树鼩中,25只健康存活至进入动物实验,人工喂养成活率为92.6%.树鼩平均产仔间隔52±8.9 d;平均窝产仔数2.8±0.4只.人工哺育树鼩的成功为提供树鼩应用于医学实验研究,尤其是与肝癌、肝炎有关的研究,开拓了广阔的前景.     

低浓度酒精对成年大鼠空间位置的记忆及海马CA1区BDNF表达的影响

目的探讨低浓度酒精摄取对成年大鼠空间位置记忆的影响,并通过免疫组织化学方法检测低浓度酒精摄取后海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。方法成年雄性SD大鼠给予连续3d Morris水迷宫训练,然后动物随机分为实验组和对照组。实验组动物给予5%(V/V)酒精为唯一饮料喂养,对照组动物以自来水代替酒精。在给与酒精喂养后的3,7,14,21,30d行Morris水迷宫行为观察。动物在水迷宫行为学观察后,取脑、冰冻切片,用ABC法行BDNF免疫组织化学反应,用Motic 3．2图像分析系统测定免疫反应阳性产物的平均灰度值。结果给予低浓度酒精喂养3d与7d后,动物找到平台的潜伏期[分别为(8．93±1．38)s,(9．66±1．04)s]与对照组[分别为(8．24±2．94)s,(10．07±O．71)s](P＞0．05),酒精喂养14,21,30d后,动物找到平台的潜伏期[分别为(9．19±1．81)s,(10．45±0．97)s,(12．37±1．81)s]明显短于对照组[分别为(17．14±3．66)s,(18．83±1．25)、s,(21．41±2．73)s],差异有显著性(P＜0．05)。BDNF的免疫组化反应显示低浓度酒精喂养3d时BDNF在海马CA1区的表达平均灰度值(145．3±14)与对照组(143．8±12)相比差异无显著性(P＞0．05)；而低浓度酒精喂养7d、14d与21d时,海马CA1区BDNF的表达平均灰度值(分别为125．6±17,127．4±15,130．7±14)明显低于对照组(分别为147．5±13,142．7±10,145．8±16)(平均灰度值与阳性产物的多少成反比)(P＜0．05)；酒精连续喂养30d后,海马CA1区BDNF的表达平均灰度值(146．2±11)接近于对照组(144．5±14),差异无显著性(P＞0．05)。结论短期内低浓度酒精摄取有助于成年大鼠空间位置记忆的保持,其机制可能与低浓度酒精摄取上调BDNF在海马CA1区的表达有关。     

树[鼠句]的基本实验操作方法

目的对树[鼠句]抓取和保定、采血、灌胃基本实验技术方法进行探讨,逐步规范树[鼠句]实验技术。方法选用成年树[鼠句]进行抓取和保定,分徒于法和器具法（自制捕捉保定袋）,对130只树[鼠句]采用尾静脉、股动（静）脉两种采血方法;采取人用8号胃管可对树[鼠句]绎口灌胃给药。结果所采用徒手、器具的方法抓取和保定树[鼠句]均能有效地控制动物,不会发生动物死亡或很少逃逸;两种方法都顺利采集到所需血量,股动（静）脉单次最大采血量可达2mL而不损伤动物;12只树[鼠句]连续灌胃10d,成功率100％。结论自制的捕捉保定袋经济实用,摸索的几种树[鼠句]实验技术方法具有操作简便、安全、快捷等优点。     

喂养不耐受对极低出生体重儿肠道菌群的影响

目的：观察喂养不耐受对极低出生体重儿肠道菌群的影响。方法：选择30 例喂养不耐受的住院极低出生体重儿为观察组,同时选择30 例喂养耐受的极低出生体重儿为对照组,于生后2 d、出现喂养不耐受后2 d和喂养不耐受消失后5d分别留取患儿大便标本,采用实时荧光定量PCR技术检测标本中的肠道乳酸杆菌及双歧杆菌。结果：喂养不耐受组中乳酸杆菌的数量分别为[（4.15±0.25）cfu/g,(5.39±0.53) cfu/g,(7.32±0.80) cfu/g],对照组分别为[（4.17±0.27）cfu/g,(7.84±0.35) cfu/g,(7.61±1.35) cfu/g],双歧杆菌的数量分别为 [（4.35±0.23）cfu/g,(5.01±0.48) cfu/g,(7.12±1.22) cfu/g],对照组分别为[（4.37±0.22）cfu/g,(8.52±0.23) cfu/g,(7.40±1.33) cfu/g]。两组于出现喂养不耐受后2 d,两种细菌数量比较差异具有统计学意义（P＜0.05）,而喂养不耐受出现之前和消失后5d两组细菌数量比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：喂养不耐受对极低出生体重儿肠道菌群的变化有明显影响。喂养不耐受使肠道双歧杆菌和乳酸杆菌数量降低。     

雌性树鼩的麻醉和生殖器官解剖与卵母细胞形态特征的观察

对雌性树鼠句的麻醉、生殖器官解剖与卵母细胞形态特征进行观察 ,为制备转基因树鼠句奠定基础。方法 :用 1%的戊巴比妥钠 (10 ml/ kg体重 )肌内注射对树麻醉 ,比较在不同环境温度下对麻醉效果的影响。对雌性树鼠句生殖器官解剖结构、卵母细胞形态行征等进行观察。结果 :1在 2 5～ 2 8℃、18～ 2 0℃下麻醉的持续时间分别为 80 min、130 min;2雌性树鼠句的子宫为双角子宫 ,卵巢外有包膜 ;3卵母细胞富含色素 ,卵母细胞的透明带与质膜的韧性较山羊强。结论 :在 2 5～ 2 8℃下 ,用 1%的戊巴比妥钠 (1μl/ g体重 )对树鼠句麻醉时间比较适中 ,便于…     

应用环孢素A探讨树鼠句对乙型肝炎病毒的易感性

目前尚无理想的乙型肝炎动物模型。80年代以来苏建家等相继报告ＨＢＶ可实验性暂时性地感染树鼠句[1～3]。Ｇｏｔｅ等用环孢素Ａ成功地建立了慢性土拨鼠肝炎动物模型[4,5]。为了验证树鼠句对ＨＢＶ感染的敏感性,并试图在其潜伏期内采用免疫抑制的方法建立慢性ＨＢＶ感染动物模型,特进行以下实验。1　材料与方法11　实验动物　健康成年树鼠句24只,由中科院昆明动物所提供,雌雄不拘,体重86～112ｇ,单只笼养,室温24℃左右,相对温度65%～70%,实验前驯养3周。12　主要试剂　美国ＺＹＭＥＤ生物技术公司施作榕教授赠送;鼠抗人ＨＢｓＡｇ单克隆抗体,生物素标记羊抗鼠ＩｇＧ抗体,兔抗人ＨＢｃＡｇ抗体,生物素     

盐酸氯胺酮和戊巴比妥钠对树[鼠句]的麻醉效果

目的观察盐酸氯胺酮和戊巴比妥钠对树[鼠句]产生的麻醉效果,以及麻醉产生的副作用,建立安全、可靠的实验树购麻醉技术方法。方法选用成年树[鼠句]共110只,60只腹腔注射盐酸氯胺酮溶液（40mg／kg）;50只腹腔注射戊巴比妥钠（剂量50mg／kg）,观察麻醉效果。结果盐酸氯胺酮对树[鼠句]麻醉诱导期为2．78±1．28min,麻醉期为10．12±2．13min,麻醉期间有大量唾液分泌：戊巴比妥钠对树[鼠句]的诱导期为4．84±2．15min,麻醉期为51．95±12．94min,麻醉持续时间长,动物平静,体温下降极显著。结论一定剂量的盐酸氯胺酮和戊巴比妥钠均能对树购产生麻醉效果,并安全可靠;盐酸氯胺酮显效快、麻醉维持时间短,戊巴比妥钠则麻醉维持时间长,动物非常安定。     

注射维生素E对早产儿视网膜病大鼠模型的影响

1 材料和方法 新生SD大鼠60只（第四军医大学实验动物中心）,体质量（3．4±1．1）g,鼠龄1d．分为对照组、模型组和干预组,每组20只,各组均由一只母鼠喂养．对照组在正常环境下饲养14d,模型组在750～800mL／L O2的吸氧箱中饲养7d,然后再置于正常环境下饲养7d．干预组与模型组饲养条件相同,在放入吸氧箱的7d内每日给大鼠腹腔注射维生素E,75mg／kg．采用视网膜铺片法观察视网膜血管．实验开始后7d,各组大鼠分别取5只脱颈处死后,取出鼠眼,置于40g／L甲醛溶液中固定30min,沿角膜缘剪开眼球,去除晶状体及玻璃体,     

羊膜间充质干细胞静脉移植治疗脊髓损伤的实验

目的:探讨羊膜间充质干细胞静脉移植对脊髓损伤修复的影响。方法:90只成年SD大鼠按改良Allen′s打击方法建立脊髓损伤模型,随机分为3组:对照组、假移植组和移植组,每组30只。于脊髓损伤后1周经尾静脉移植Brdu标记的羊膜间充质干细胞。3组大鼠分别于损伤后第1 d、3 d、1周及移植后1 d、3 d、1周、2周、4周采用BBB评分法对行为学进行评价。并于移植后1 d、3 d、1周、2周、4周分批处死,切片观察Brdu标记的细胞能否迁移到损伤区。结果:脊髓损伤后第1 d,3组实验动物后肢运动功能BBB评分皆为0分;细胞移植1周后移植组动物BBB评分为5.6±0.6,对照组和假移植组动物BBB评分分别为5.3±0.4和5.2±0.6;细胞移植2周后移植组、假移植组和对照组BBB评分分别为11.3±0.9、6.4±0.5和6.5±0.8;4周后3组实验动物评分分别为13.4±0.9、8.3±0.6和8.5±0.7;在损伤部位出现了Brdu标记的羊膜间充质干细胞。结论:经静脉移植的羊膜间充质干细胞能够迁移到损伤区并对脊髓损伤有一定的修复作用。     

老年鼠海马自由基与学习记忆关系的研究

目的　探讨老年鼠海马自由基与学习记忆的关系。方法　测试 116只雄性Sprague Dawley大鼠在水迷宫中的学习记忆成绩 ,其中老年鼠 4 6只、青年鼠 36只和成年鼠 34只 ,大鼠海马透析测定各组海马中的羟自由基和超氧化物歧化酶 (SOD)的含量 ,进行海马CA1和CA4段形态学检查 ,探讨自由基对海马细胞和学习记忆的影响。结果　老年鼠海马SOD活性 (U·g-1·min-1)为 4 10± 5 0 ,青年鼠为 880± 6 2 ,成年鼠为 86 0± 6 0。老年鼠比青年鼠和成年鼠海马自由基显著增加 (P <0 0 0 1) ,老年鼠海马细胞数目比对照组显著减少 (P <0 0 0 1) ,导致学习记忆成绩下降 (P <0 0 1)。结论老年鼠学习记忆能力的下降与自由基显著增加和海马神经元数量下降成正相关。     

肝细胞异型增生的产生及其与肝细胞癌发生关系的实验研究

82只实验树鼩分为四组:A组26只,感染了HBV并同时给予AFB_1;B组34只,未感染HBV但给予AFB_1;C组13只,只感染了HBV;D组9只,既未感染HBV,又未接触AFB_1.实验158周.A组发生LCD16例(61.53%),其中9例发生HCC(56.25%).B组出现LCD18例(52.94%),其中3例发生HCC(16.66%).C组出现LCD 6例(46.15%);D组无LCD产生.82只树鼩有40只出现LCD,其中12只发生HCC(30%).而无LCD的42只,只有1例(C组)产生HCC(2.38%).LCD阳性组发生HCC的相对危险性为LCD阴性组的12.6倍.感染了HBV的树鼩,其LCD发生率显著高于未感染者(P<0.05);而在未感染HBV的动物中,摄入AFB_1的,其LCD发生率也同样比未摄入者高(P<0.05).表明HBV和AFB_1都能诱发LCD;LCD是HCC的癌前病变.     

恒古骨伤愈合剂对骨质疏松骨折树鼩雌二醇和骨代谢的影响

目的 观察恒古骨伤愈合剂对骨质疏松骨折树血清雌二醇和骨代谢指标的影响.方法 骨质疏松骨折树随机分为用药组和对照组, 用药组实验树按体重100 g每2 d灌服恒古骨伤愈合剂0.3 mL, 对照组实验树按相同剂量灌服生理盐水.实验树灌服90 d, 心脏采血分离血清, 应用ELISA试剂盒检测血清中E2、OC、PINP、CTX、TRACP-5b的含量.结果 用药组实验树血清E2含量 (145.16±21.76) 显著高于对照组 (30.78±4.22) , P<0.05, 血清OC (1546.67±219.07) 、PINP (10.02±1.76) 、CTX (176.47±24.56) 、TRACP-5b (1249.06±194.87) 分别显著低于对照组 (2792.96±387.23) 、 (28.74±4.05) 、 (324.67±41.32) 、 (2106.36±322.99) , P<0.05.结论 恒古骨伤愈合剂能够引起骨质疏松骨折树雌二醇和骨代谢指标的变化, 说明有一定的疗效.     

乙肝病毒X基因转基因树鼩模型的建立和病理学研究

目的:探索以精原细胞作为载体建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型的可行性.方法:首先构建带乙肝病毒pcDNA3.1- HBx基因的表达载体;然后以脂质体2000包被之.将此复合物以微量注射器注入8只雄性树鼩之睾丸组织中,1周后重复注射1次.注射后6周,使处理过的雄树鼩与雌性树鼩交配.在仔树鼩出生后1个月,取其肝组织作活检,并以多聚酶链式反应(PCR)对其DNA表达进行鉴定,观察其内是否存在乙肝病毒X基因.结果:处理的8只雄性树鼩中,6只具有生育能力,产仔树鼩11只.其中,1只仔树鼩乙肝病毒X基因阳性(阳性率9.09%).基因测序结果证实为乙肝病毒X基因.病理检查结果显示仔树鼩肝组织的改变包括:肝细胞坏死、慢性炎细胞在汇管区的浸润.结论:以精原干细胞作为载体,建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型是可行的.     

树鼩形觉剥夺性近视模型的建立及观察

目的 建立树嗣性成熟期及成年早期形觉剥夺性近视(FDM)模型,探讨年龄在近视发生发展中的作用及以视网膜形态变化为主的局部视网膜机制与近视的关系.方法 4月龄和5月龄树鼩各30只,随机分为空白对照组、遮盖组.遮盖组右眼遮盖作为实验眼,左眼开放作为自身对照眼.用自制半透明眼罩建立形觉剥夺近视模型,然后撤出干预因素,分别于遮盖3周、6周测量各组屈光度及眼轴长度;于遮盖6周观察视网膜厚度及视网膜各层细胞数目变化情况.结果 4月龄和5月龄树鼩遮盖右眼3周后,遮盖眼远视度数均有所降低,但与自身对照眼相比差异无统计学意义(P＞0.05);而遮盖6周后:两组的屈光度和眼轴与对照眼比较均有明显差异(P＜0.05);在遮盖期间,形觉剥夺眼眼轴不断增长,近视度数也逐渐增加,二者有很好的直线负相关关系;并且4月龄组所诱导出的近视程度高于5月龄组(P＜0.05).形觉剥夺可引起各层视网膜普遍变薄,有核细胞层、感光细胞层、内核层、神经节细胞层中胞核数减少,排列稀疏紊乱.结论 形觉剥夺可以诱导性成熟期及成年早期树鼩的近视形成及视网膜形态发生变化.     

孕期摄食限制所致IUGR子代大鼠高脂饮食下肾脏结构与功能改变

目的:探讨高脂饮食对孕期摄食限制所致宫内发育迟缓(IUGR)子代大鼠肾脏结构功能的影响。方法:Wistar孕鼠随机分为对照组(CN)和摄食限制(FR)组,自孕11d至足月产分别给予自由进食和摄食限制(每天食物摄入量为正常对照组的50%)。仔鼠断奶后给予高脂饮食至20周,麻醉处死动物,检测子代大鼠肾重、肾脏指数(肾重/体重);观察肾脏组织病理学变化;取血清,检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平;RT-PCR检测肾脏组织肾素-血管紧张素系统(RAS)组分的mRNA表达。结果:高脂饮食下,FR组雌性及雄性子代大鼠SCr含量较正常对照组均显著升高(P<0.01),肾脏出现肾小球增生、硬化、间质炎性细胞浸润等病理组织学改变,血浆AngⅡ均显著下降(P<0.01);雌性PRA下降(P<0.01),雄性无变化;肾脏RAS mRNA表达不一,且存在性别差异。结论:高脂饮食下,孕期摄食限制所致IUGR子代大鼠成年后出现肾损伤表型,高脂饮食下存在IUGR子代肾脏损伤易感的现象。     

树鼩独立换气笼具的设计

目的设计研究一种满足于树鼩感染性疾病动物模型实验生物安全要求的独立换气专用隔离笼具。方法根据树鼩的生物学特性、实验生物安全要求及有关实验动物笼具标准进行设计。结果该笼舍完全适用于感染性疾病实验树鼩的饲养和实验操作。结论该笼具能达到维护实验动物福利,保证实验动物质量,保障人身健康,保护环境的要求,对于使用树鼩开展人类重大传染病研究具有广泛的应用价值和市场前景。     

糖尿病树鼩与人类糖尿病骨骼肌微血管超微病变的比较

目的：比较树鼩糖尿病模型与人类糖尿病骨骼肌微血管超微病变的异同点。方法：将高糖高脂喂养诱导树嗣糖尿病成模7周后的骨骼肌标本，以及伴糖尿病肾病和(或)糖尿病视网膜病变的糖尿病患者骨骼肌标本，经常规电镜制样处理后，分别对骨骼肌微血管超微病变进行观察。结果：树鼩骨骼肌微血管超微结构与人类基本相似，但前者微血管三层结构明显较人类薄。糖尿病树鼩骨骼肌微血管病变主要表现为内皮层向管腔突起，使管腔狭窄，但基底膜改变不明显；人类糖尿病骨骼肌微血管超微病变表现为内皮明显肿胀增厚，管腔狭窄明显，可有内皮破损现象，管壁可见血浆蛋白样物质附着，最突出的改变为基底膜的广泛性增厚。结论：实验性糖尿病树鼩在高血糖状态的早期阶段，骨骼肌微血管超微病变主要发生在内皮层，微血管基底膜无明显改变；而糖尿病患者骨骼肌微血管超微改变与树鼩最大的不同点在于，其微血管基底膜改变非常显著，呈广泛性增厚，这可能与其病程较长有关。     

生活环境条件对中国树鼩血激素水平和心理行为的影响

目的 探索生活环境条件（居住环境条件和动物之间相互作用的因素）对中国树鼩血激素水平和心理行为的影响。方法 采用空间大小不等的笼具饲养中国树鼩，或给予利血平，分别在15、30、60、120、180d时用乙醚吸入麻醉，从心脏采血，用放射免疫法检测血液中睾酮（testosterone,T）、雌二醇（estradiol,E2）、内皮素(endothelin,ET)、肾上腺素（adrenaline,A）和去甲肾上腺素（noradrenaline,NA）水平。结果 1. D1组、X1组饲养15、30、60、120、180d时检测，与D1组比：X1组T水平分别降低了7.99%、10.58%、14.85%、23.68%、34.33%（P<0.01），ET水平分别升高了3.96%、5.63%、6.06%、7.66%、11.69%（P<0.01），A水平升高了35.10%、48.18%、53.25%、75.29%、90.08%（P<0.01），NA水平升高了10.63%、31.53%、43.70%、44.03%、46.68%（P<0.05，P<0.01）。2. X1组，X2组饲养15、30、60、120、180d时检测,与X1组比：X2组T水平分别升高了12.26%、30.80%、18.16%、13.06%、18.41%（P<0.01），A水平升高了23.27%、22.35%、24.47%、18.69%、17.07%（P<0.01），NA水平升高了25.93%、13.14%、7.87%、6.26%、5.87%。3.利血平各组A、NA水平均显著降低（均P<0.01）。 4. X1组，X2组的动物均出现猝丧、食欲降低、睾丸萎缩、阴茎外露下垂等应激症状。利血平组中国树鼩均出现性情温顺，活动显著减少，食欲降低，停喂利血平，放入大笼饲养，动物逐渐恢复到正常生活状态。结论 居住环境条件和动物之间的相互作用均能引起中国树鼩血激素水平变化和心理行为的改变。     

乙肝DNA疫苗pVAX-PS对树(鼠句)的免疫保护作用

目的:以树(鼠句)为实验对象研究乙肝DNA疫苗接种后所产生的免疫应答及对乙肝病毒攻击的保护作用.方法:以PCR法从adr亚型乙肝患者血清的病毒基因组中扩增含乙肝病毒的PreS2+S基因,插入pVAX1载体构建乙肝DNA疫苗pVAX-PS,并以此为候选疫苗,从股四头肌接种免疫树(鼠句).免疫接种方式为肌注2次,间隔2周.用ELISA法分析DNA免疫诱导的抗体水平及阳转率.DNA免疫后部分树(鼠句)用乙肝患者(HBsA+,HBeAg+,HBcAb+)血清进行病毒攻击实验,通过检测乙肝感染的各种血清学指标及肝组织病理的变化来评价DNA疫苗的免疫保护作用.结果:DNA疫苗免疫2周后开始检出HBsAb,6周后达到峰值,8周后所有免疫接种树(鼠句)抗体阳转;与阴性对照组相比,DNA疫苗免疫使乙肝病毒攻击所致的各项血清学指标阳转率明显降低,肝脏病理性损伤明显减轻.结论:乙肝DNA疫苗pVAX-PS免疫树(鼠句)后诱发明显的体液免疫应答,并对乙肝病毒感染提供有效的保护作用.     

BDNF在树鼩中枢神经系统的表达

目的观测脑源性神经营养因子（6rain-derived neurotrophic factor,BDNF）在树鼩中枢神经系统的表达.方法用RT—PCR技术探讨从胎儿、新生到成年过程中,观察树鼩中枢神经系统海马和脑干BDNF的表达变化.结果 BDNF在胎儿、新生和成年树鼩的海马和脑干均有表达,成年树鼩海马中的表达量显著高于胎儿和新生树鼩,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 BDNF在成年树鼩仍有较高的表达量.