猫儿眼植物酸对人BEL-7402细胞抑制作用的实验研究

目的:分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人BEL-7402细胞抑制作用机制。方法:采用流式细胞仪、噻唑蓝(简称MTT)法和锥虫蓝染色法对猫儿眼植物酸抗肿瘤细胞作用进行分析。结果:MTT法显示,给予0.1,1.0和10.0mg/L猫儿眼植物酸48h,其对人BEL-7402细胞的抑制率分别为52%,54%和57%;锥虫蓝染色法显示,给药后48h,猫儿眼植物酸对细胞生长抑制率分别为72%,81%和84%;凋亡率分别为24%,26%和33%。结论:猫儿眼植物酸对人BEL-7402细胞生长具有显著的抑制作用,其效果随给药浓度的增加和作用时间的延长而递增。     

猫儿眼提取物对荷瘤小鼠肝癌细胞毒性及免疫功能的影响

目的:探讨猫儿眼提取物对荷瘤小鼠肝癌细胞的毒性作用和对免疫功能的影响,并以5-氟尿嘧啶为标准对照。方法:实验于2003-07/10在兰州军区总医院实验动物科完成。选BALB/c小鼠120只,于皮下接种肝癌瘤液0.01mL/g体质量。随机分为4组,每组30只。接种肝癌瘤液24h后,模型组给予等量蒸馏水;5-氟尿嘧啶组每天腹腔注射5-氟尿嘧啶100mg/kg体质量;甘肃猫儿眼提取物1组每天口服甘肃猫儿眼提取物10g/kg体质量;甘肃猫儿眼提取物2组每天口服甘肃猫儿眼提取物20g/kg体质量。连续给药10d后,分别取40只(每组取10只)对荷瘤小鼠瘤体、胸腺和脾脏质量以及免疫功能的影响进行测定分析。结果:120只小鼠均进入结果分析。①甘肃猫儿眼提取物对肝癌细胞增殖的抑制作用:5-氟尿嘧啶组和甘肃猫儿眼提取物2组肝癌细胞的抑制率分别为24.6%和64.7%;甘肃猫儿眼提取物1组肝癌瘤质量比对照组增长了4.7%。②甘肃猫儿眼提取物对肿瘤组织的毒性作用:对照组肝癌细胞生长活跃,核分裂像较多见;5-氟尿嘧啶组、给药组肝癌瘤体均见部分坏死,或在坏死灶边缘出现纤维组织增生,间质水肿。③甘肃猫儿眼提取物对肝癌荷瘤小鼠免疫功能的影响:与对照组比,甘肃猫儿眼提取物2组小鼠碳粒廓清指数提高了59.4%,胸腺和脾脏的质量分别增加了51.9%和33.0%,血清溶血素值增高了31.2%。结论:猫儿眼提取物比5-氟尿嘧啶对肝癌细胞增殖具有更明显的抑制作用,且剂量高抑制作用强,其作用与提高荷瘤小鼠免疫功能有关。     

决明子不同部位提取物的调血脂作用

目的：决明子不同部位提取物对高血脂动物总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平的调节作用。 方法：实验于2003—05／2006—04在兰州大学生命科学学院和甘肃政法学院公安分院实验中心完成。①选用普通级20周龄大耳白兔50只，雌雄不拘，体质量1．8～2．0kg。按随机数字表法将动物分为5组，每组10只：水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、对照组和模型组。对照组动物喂堆础饲料50g／（kg&;#183;d），其余各组均喂等量由质量分数0．8基础饲料，质量分数0．15蛋黄粉，质量分数0．005胆固醇，质量分数0．05猪油组成的高脂饲料进行建模。建模成功后，水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组灌胃相应决明子提取物5．4g／（kg&;#183;d），由兰州大学生命科学学院完成决明子提取，将决明子（购自甘肃省医药材公司），加蒸馏水回流煮沸，过滤、滤液浓缩后，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取。分成乙酸乙酯层，正丁醇层和水层3个部分，即为相应的提取物；对照组和模型组灌胃等量蒸馏水。连续给药28d。②于建模前、建模后、给药后14，28d用日立7020全自动生化分析仪测定总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆同醇水平。③采用DUNNETF单因素方差分析对数据进行统计处理。 结果：日本大耳白兔50只均进入结果分析。①建模后，动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆同醇比建模前显著升高（P＜0．01），建模成功。②给药14d后，水提取物组动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇含量比建模后分别降低了42．5％，58．3％，42．5％（P＜0．01）；乙酸乙脂提取物组分别降低了45．8％，66．7％，45．0％（p＜0．01）；正丁醇提取物组分别降低了．56．7％，75．0％，52．9％（p＜0．01）。给药组之间，正丁醇提取物组血总胆固醇，三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇含量比水提取物组分别降低了24．6％．40．0％，28．3％（P＜0．01）；比乙酸乙酯提取物组分别降低了20．0％，25．0％，25．0％（P＜0．01）。③给药28d后，水提取物组血总肌刚醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平比建模后分别降低了68．3％，69．2％，75．0％（P＜0．01）；乙酸乙脂提取物组分别降低了77．5％，85．0％，78．8％（P＜0.01）；正丁醇提取物组分别降低了85．8％，90．8％，80．7％（P＜0．01）给药组之间，正丁醇提取物组血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白肌固醇水平比水提取物组分别降低了55．3％，70．1％，50．0％；比乙酸乙酯提取物组分别降低了37．0％，39．0％，41．2％（P＜0．01）。 结论：决明子提取物具有降低高脂血症模型兔血脂水平的作用，且正丁醇捍取物的降血脂作用优于水提取物和乙酸乙脂提取物。     

甘肃猫儿眼甲基酯类化合物对人LGC-7910细胞毒性作用

目的：观察甘肃猫儿眼甲基酯类化合物对人LGC-7910细胞毒性作用及其对细胞增殖的影响，为甘肃猫儿眼甲基酯类化合物的应用和开发提供实验依据。 方法：实验于2006-06在甘肃政法学院公安分院实验中心完成。①体外培养人LGC-7910细胞48h，分为3组：甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组：给予不同浓度（0．2，0．8和3．2mg／L）甘肃猫儿眼甲基酯类化合物；5-氟尿嘧啶组：给予10mg/L 5-氟尿嘧啶；对照组：加等量的磷酸盐缓冲液。②用MTT法检测细胞生长抑制情况，用流式细胞仪测定细胞分裂周期中各期细胞数及凋亡率，用电镜扫描法观察细胞形态结构。③采用DUNNETT单因素方差分析对数据进行统计处理。 结果：①MTT法测定甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组（0．2，0．8，3.2mg／L）和5-氟尿嘧啶组对人LGC-7910细胞增殖抑制率分别为32．6％，65.7％，80．7％，46．5％，与对照组比较，差异有显著性（P〈0．01）。5-氟尿嘧啶组、3．2mg/L甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组与0.8mg／L甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组比较。差异有显著性（P〈0．05）。②流式细胞仪测定，甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组（0．2，0．8，3．2mg/L）和5-氟尿嘧啶组有61．6％，66.3％，70．6％，61.2％，滞留于G0G1期，在G2M期的细胞有11．9％，7．5％，4．8％，15．4％；凋亡率分别为11．6％，15．7％，26．2％，13．4％。③电镜扫描显示，对照组细胞膜完整，表面有很多微绒毛，甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组细胞表面微绒毛断裂，出现孔洞。膜破裂，线粒体结构损伤，细胞出现凋亡、死亡。 结论：甘肃猫儿眼甲基酯类化合物对人LGC-7910细胞具有明显的细胞毒作用，其机制与抑制分裂，破坏细胞形态和线粒体结构，诱导细胞凋亡有关。     

决明子不同部位提取物的调血脂作用

目的:决明子不同部位提取物对高血脂动物总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平的调节作用。方法:实验于2003-05/2006-04在兰州大学生命科学学院和甘肃政法学院公安分院实验中心完成。①选用普通级20周龄大耳白兔50只,雌雄不拘,体质量1.8～2.0kg。按随机数字表法将动物分为5组,每组10只:水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、对照组和模型组。对照组动物喂基础饲料50g/(kg·d),其余各组均喂等量由质量分数0.8基础饲料,质量分数0.15蛋黄粉,质量分数0.005胆固醇,质量分数0.05猪油组成的高脂饲料进行建模。建模成功后,水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组灌胃相应决明子提取物5.4g/(kg·d),由兰州大学生命科学学院完成决明子提取,将决明子(购自甘肃省医药材公司),加蒸馏水回流煮沸,过滤,滤液浓缩后,分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取。分成乙酸乙酯层、正丁醇层和水层3个部分,即为相应的提取物;对照组和模型组灌胃等量蒸馏水。连续给药28d。②于建模前、建模后、给药后14,28d用日立7020全自动生化分析仪测定总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平。③采用DUNNETT单因素方差分析对数据进行统计处理。结果:日本大耳白兔50只均进入结果分析。①建模后,动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇比建模前显著升高(P<0.01),建模成功。②给药14d后,水提取物组动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇含量比建模后分别降低了42.5%,58.3%,42.5%(P<0.01);乙酸乙脂提取物组分别降低了45.8%,66.7%,45.0%(P<0.01);正丁醇提取物组分别降低了56.7%,75.0%,52.9%(P<0.01)。给药组之间,正丁醇提取物组血总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇含量比水提取物组分别降低了24.6%,40.0%,28.3%(P<0.01);比乙酸乙酯提取物组分别降低了20.0%,25.0%,25.0%(P<0.01)。③给药28d后,水提取物组血总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平比建模后分别降低了68.3%,69.2%,75.0%(P<0.01);乙酸乙脂提取物组分别降低了77.5%,85.0%,78.8%(P<0.01);正丁醇提取物组分别降低了85.8%,90.8%,80.7%(P<0.01)。给药组之间,正丁醇提取物组血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平比水提取物组分别降低了55.3%,70.1%,50.0%;比乙酸乙酯提取物组分别降低了37.0%,39.0%,41.2%(P<0.01)。结论:决明子提取物具有降低高脂血症模型兔血脂水平的作用,且正丁醇提取物的降血脂作用优于水提取物和乙酸乙脂提取物。     

十八烯酸对人肾癌A498细胞毒性作用的实验研究

目的探讨十八烯酸对人肾癌细胞A498细胞的毒性作用。方法从甘肃地产猫儿眼（Euphorbia kansui L）提取并制备十八烯酸。给予人A498细胞0．3、0．6、3．0mg／L十八烯酸培养,分别采用MTT法、克隆形成和流式细胞技术对十八烯酸对人A498细胞的毒性作用进行检测。结果给予人A498细胞0．3、0．6、3．0mg／L十八烯酸,细胞增殖抑制率随给药浓度增加而增加（分别为53．20％、66．26％、87．42％）,半数抑制浓度（IC50）为0．29mg／L;克隆形成抑制率随给药浓度增加而增加（分别为46．43％、61．31％、71．42％）,IC50为0．31mg/L;人A498细胞凋亡率别为11．16％、17．31％、26．22％。结论十八烯酸对人A498细胞具有明显的增殖抑制作用,能促进人A498细胞凋亡。     

沙樱桃黄酮对人肝癌细胞毒性作用研究

目的：探索沙樱桃黄酮对人肝癌细胞的毒性作用。方法：给予体外培养人肝癌细胞沙樱桃黄酮,用台盼蓝法和流式细胞仪检测其毒性作用。结果：台盼蓝法测定结果显示,给药后培养6小时,沙樱桃黄酮（0．1mg/L,0．5mg／L,5mg／L）组和5-氟尿嘧啶（5-Fu）组活细胞数比对照组分别减少了34．3％、43．9％、66．8％和51．2％,到18小时减少了36．4％、52．4％、85．3％和58．2％,差异有显著性（P〈0．01）。流式细胞仪检测结果显示,细胞周期中GOG1、S期DNA含量明显增加,G2M期显著减少,细胞凋亡率分别为15．4％、23．4％、26．6％。结论：沙樱桃黄酮对人肝癌细胞具有明显的毒性作用,其作用与抑制细胞分裂,促进细胞凋亡有关。     

胰岛素抵抗模型建立及其应用研究

目的 探讨胰岛素抵抗模型的建立方法和二苯乙烯对血糖的调节作用。方法 1.给予Wistar大鼠自制脂肪乳建立胰岛素抵抗动物模型。2. 给予HepG2 细胞胰岛素,建立胰岛素抵抗(HepG2/IR)细胞模型。3.分别给予模型大鼠和HepG2/IR细胞二苯乙烯,观察二苯乙烯对血糖的调节作用。结果 给予脂肪乳后,大鼠的血糖和TG、TC、LDL、HDL分别升高了72.87%和16.21%、139.93%、56..93%、18.32%,与建模前比,差异具有显著性意义（P<0.01）;给予二苯乙烯, 模型组动物血糖和血脂水平比给药前明显降低（P<0.05～0.01）;HepG2/IR葡萄糖消耗量比对照组(HepG2)明显增加。结论 给予Wistar大鼠自制脂肪乳或给予HepG2 细胞胰岛素,可建立胰岛素抵抗模型;二苯乙烯具有降低模型动物血糖和血脂、增加HepG2/IR葡萄糖消耗量的作用。     

苍耳子药物血清对H4细胞毒性作用的实验研究

目的 探讨苍耳子药物血清对人脑神经胶质瘤细胞(H4细胞)的毒性作用.方法 将日本大耳白兔分别于给药前灌胃生理盐水5 ml/ks(给药前对照组)及灌胃苍耳子药物血清3.6 g/kg(低浓度组)、7.3 g/kg(中浓度组)和15.0 g/kg(高浓度组),2h后从心脏抽血2 ml/kg,离心取血清冻存.对H4细胞给予给药前对照组血清、不同浓度苍耳子药物血清及5-氟尿嘧啶(阳性对照组)培养48 h后,用MTT法根据光密度值(OD)计算其对H4细胞的生长抑制率,用流式细胞仪检测其对H4细胞凋亡的影响.结果 对H4细胞分别给予低、中、高浓度苍耳子药物血清和5-氟尿嘧啶,细胞生长抑制率分别为43.21％、49.38％、69.13％和61.72％;其各OD值与给药前对照组OD值相比,差异均有统计学意义(P均＜0.01).流式细胞仪检测发现,在对H4细胞给予低、中、高浓度苍耳子药物血清后,H4细胞的凋亡率随给药浓度的增加而升高,分别为15.1％、22.6％和25.4％.结论 苍耳子药物血清对H4细胞分裂增殖具有明显的毒性和抑制作用.     

唇形科植物Thymbra capitata精油的化学成分及抗真菌活性

唇形科植物T.capitata(L.)Cav.用于防腐和防止皮肤感染。作者将生长在葡萄牙不同地区的22份该植物地上部分的样品用水蒸气蒸馏方法获得精油。用GC和GC-MS分析精油成分,结果显示,其主要成分香芹酚60％～65.8％,γ-萜品烯8.2％～9.5％,对繖花烃6.0％～7.5％。精油中氧化单萜66.6％～69.7％,单萜烃23.4％～