大鼠阴道涂片的观察

目的:通过SD大鼠阴道涂片观察,及时准确判断大鼠的性周期,提高其受孕速度,缩短实验标本的收集时间.方法:观察36只SD雌性大鼠阴道涂片,并记录图像,进行分析.按普通自由交配法和涂片干预交配法分两组(各组n=18)进行交配,计算其受孕速度.结果:普通自由交配组雌鼠受孕速度高于涂片干预交配组[(3.9±1.5)d/只比(2.3±1.2)d/只,P＜0.05].结论:根据阴道涂片判断各雌鼠所处的性周期阶段,安排处于动情前期或动情期的雌鼠进行交配,能够有效提高整体受孕速度.     

转基因植物乳杆菌对雌性大鼠生殖发育的影响

目的 探讨转基因植物乳杆菌对连续传代雌性大鼠生殖发育的影响.方法 将雌雄SD大鼠分组,6只雌性一笼,6只雄性一笼.对照组与实验组,分别为一笼雌和一笼雄.对4周龄SD大鼠进行灌胃,对照组予以非转基因植物乳杆菌,实验组予以转基因植物乳杆菌,连续灌胃4周后进行雌雄配对,对子一代、子二代、子三代进行同样的灌胃实验8周.比较两组雌性大鼠不同时间点身长、尾长、体质量、肛殖距、卵巢质量、激素水平.结果 对照组与实验组子一代、子二代、子三代雌性大鼠灌胃同时间点比较,身长、尾长、体质量、肛殖距差异无统计学意义(P＞0.05).无论是对照组还是实验组,灌胃同时间点子一代、子二代、子三代雌性大鼠身长、尾长、体质量、肛殖距均有不同程度的增加,但差异无统计学意义(P＞0.05).子一代、子二代、子三代雌性大鼠比较,对照组与实验组初级卵泡、次级卵泡、黄体计数、雌二醇、孕酮、阴道开口时间差异无统计学意义(P＞0.05).无论是对照组还是实验组,子一代、子二代、子三代雌性大鼠初级卵泡、次级卵泡、黄体计数、雌二醇、孕酮均有不同程度的增加,阴道开口时间均有不同程度的减少,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 转基因植物乳杆菌对连续传代雌性大鼠生殖发育无明显影响.     

芹菜素对动脉粥样硬化大鼠氧化应激和炎性反应的影响

目的研究芹菜素对动脉粥样硬化大鼠氧化应激和炎性反应的影响。方法将实验用大鼠120只随机分为正常对照组、模型组、芹菜素(20、40、80 mg/kg)预处理组和辛伐他汀(1.8 mg/kg)预处理组。除正常对照组外,其余各组大鼠采用高脂饲料喂养加注射VD3的方法制备大鼠早期动脉粥样硬化模型,造模过程中芹菜素预处理组和辛伐他汀预处理组每天灌胃给药1次,而正常对照组和模型组以等量生理盐水灌胃。12周后,测定各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)、活性氧簇(ROS)的含量以及血浆中炎症细胞因子[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)]的水平,通过HE染色观察主动脉形态学变化并进行主动脉病变分级。结果与模型组比较,芹菜素40、80 mg/kg预处理组大鼠血清中SOD、CAT活性显著升高(P<0.05或P<0.01),MDA、NOS、ROS含量显著降低(P<0.05或P<0.01),芹菜素80 mg/kg预处理组GSH-Px活性显著升高(P<0.01);芹菜素40、80 mg/kg预处理组血浆中CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),且芹菜素80 mg/kg预处理组IL-10水平显著升高(P<0.01)。主动脉病理性形态学变化显著改善,主动脉病变分级显著降低,以芹菜素80 mg/kg预处理组效果最为显著(P<0.01)。结论芹菜素具有抑制动脉粥样硬化大鼠氧化应激损伤和炎性反应的作用。     

芹菜根提取物对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察芹菜根提取物对四氯化碳(CCI4)所致大鼠急性肝损伤的作用.方法 50只Wistar大鼠随机分为5组:阴性对照组、模型对照组、阳性对照组、芹菜根高、低剂量给药组,高、低剂量组分别灌胃3、1.5 g/kg芹菜根提取物,阳性对照组灌胃200mg/kg联苯双酯滴丸,阴性对照组及模型对照组以等体积生理盐水灌胃,共7 d.第7天,模型对照组、阳性对照组和各给药组ip CCl4溶液1 mL/kg,正常组注射等体积生理盐水.测定各组大鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT),肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的量,并观察肝组织病理改变.结果 芹菜根提取物能显著降低CCI4所致大鼠血清AST、ALT量的升高及肝组织中MDA的量,增强肝组织中SOD活性.结论 芹菜根提取物对CCI4所致的大鼠急性肝损伤具有一定的保护作用.     

KISS-1和GPR54基因在雌性性早熟大鼠下丘脑中的表达

目的研究KISS-1和GPR54基因在雌性性早熟大鼠下丘脑中的表达,探讨其在性早熟发生中的作用。方法将雌性26日龄SD大鼠50只随机分为实验1组、实验2组、对照1组、对照2组、对照3组。实验组皮下注射N-甲基-D,L-天冬氨酸(NMA)每天2次直至阴道开放,对照组注射生理盐水,观察大鼠阴道开放时间及性周期,测量子宫指数、卵巢指数、卵巢黄体出现率、子宫壁厚度、黄体生成素(LH)浓度。采用Real-Time RT-PCR方法,检测KISS-1和GPR54基因在雌性性早熟大鼠下丘脑中的表达。结果实验组大鼠阴道开放及首次发情间期出现的时间较对照组提前(P<0.05)。随着青春期发育,各项观测指标均逐渐升高(P<0.05),在相同的性发育阶段,实验组和对照组各项观测指标无明显差异(P>0.05)。结论 KISS-1和GPR54基因的表达与性发育阶段密切相关,提示KISS-1与GPR54基因在真性性早熟的启动和发展过程中起重要作用。     

可食用黄酮芹菜素对小鼠精子质量亚急性影响的研究

目的探讨芹菜素对雄性小鼠精子运动参数和活动率的影响。方法将200只SPF级昆明种雄性小鼠按体质量随机分为4组:阴性对照组(0.01 mL/g生理盐水)、低剂量组(252 mg/kg芹菜素)、中剂量组(504mg/kg芹菜素)和高剂量组(1 008 mg/kg芹菜素),每组50只。阴性对照组定时给予生理盐水,各剂量组以不同浓度的芹菜素灌胃,每天1次,连续灌胃7、14、21、28和35 d,分批处死小鼠,取材,测定精子活动率及运动参数。结果 21 d各剂量组a级精子百分率低于阴性对照组(P<0.05),低剂量组的VSL低于阴性对照组,低剂量组BCF高于阴性对照组(P<0.05)。芹菜素28 d高剂量组LIN和STR低于阴性对照组(P<0.05)。结论芹菜素对小鼠精子活动率影响最为明显。     

性周期筛选合笼与非筛选合笼制备大鼠妊娠模型的比较

目的比较制备大鼠妊娠模型时在合笼前进行阴道涂片性周期筛选与不筛选两种方法对大鼠受孕率、受孕速度(合笼次数)的影响。方法 26只SD雌性大鼠随机分为阴道涂片性周期筛选合笼组(涂片组)、不筛选合笼组(自由组),筛选组雌鼠在合笼前进行阴道涂片性周期筛选,筛选处于动情期或动情前期的雌鼠进行合笼;自由组不进行性周期筛选,直接合笼;实验中大鼠分组、合笼均采用单因素完全随机方法。结果两种合笼方法对大鼠受孕率和受孕速度差异不显著(P0.05)。结论鉴于两种合笼方法在制备大鼠妊娠模型的受孕率及受孕速度方面无差异,同时为了减少人为干预对雌鼠的刺激和影响,建议在制备大鼠妊娠模型时考虑采用自由合笼法。     

P物质对大鼠离体垂体LH和FSH分泌的影响

本文应用组织培养枝术和下丘脑—腺垂体顺序灌注方法,研究了P物质(Substance p,sp)对Sprague-Dawley雌性大鼠离体腺垂体LH和FSH分泌的影响。动物按阴道涂片分为动情期组和间情期组,并分别设立对照组和实验组。实验结果发现,实验组(于下丘脑培养液中加入SP5μg/1μl),自组织培养后第三天起,垂休养液是中LH和FSH含量明显下降。在动情期培养的腺垂体LH含量下降较间情期组更明显,有显著差异。提示,SP对垂体LH生成有明显抑制作用。     

基础医学

9月0378维生.素E对小鼠神经元超微结构的影响及其抗衰老作用/赖树云…刀老年学杂志一1993,13(6)一350~352 15只昆明种雌性小白鼠饲喂正常饲料加维生素E(VE)(90mg/天·kg)作实验组,33只昆明雌性小白鼠只喂正常饲料作对照组。用定量体视学方法观察两组在幼年期、性成熟期和老年期     

糖尿病肾病大鼠肾脏内皮素-1与血管紧张素Ⅱ交叉作用的初步探讨

目的　初步探讨糖尿病肾病大鼠肾组织中内皮素 1(ET 1)与血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )间的相互关系。方法　Wistar大鼠摘除右肾后 ,静脉注射链脲佐菌素致成糖尿病肾病 ,分成如下 4组(每组 6只 ) :糖尿病模型组 (缓冲液灌胃 ) ,波生坦干预组 (10 0mg/kg/d灌胃 ) ,依那普利干预组 (10mg/kg/d灌胃 ) ,波生坦及依那普利联合干预组 (两药剂量同上混合灌胃 )。此外 ,尚设对照组 (6只 ,右肾摘除后仅给大鼠静脉注射缓冲液 )。 2 0周时处死大鼠 ,留取左肾组织 ,用RT PCR及免疫组化方法分别检测肾组织血管紧张素Ⅱ、血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1R)、内皮素 1及内皮素 A受体 (ETaR)的mRNA及蛋白质表达。结果　糖尿病模型组大鼠肾组织血管紧张素原 (AⅡ )、AT1R及ET AR表达与对照组比较均上调 (mRNA表达上调分别达 1 2 5倍、1 94倍及 2 5 6倍 ,蛋白质表达上调分别达2 5 2倍、3 84倍及 3 30倍 ,P <0 0 1或P <0 0 5 )。波生坦、依那普利及两药联合干预后 ,大鼠肾组织中上述上调的指标均被显著抑制 (mRNA抑制率为 38 2 %～ 5 4 8% ;蛋白质抑制率为 5 5 3%～6 9 7% ,P <0 0 1)。三个治疗组间血管紧张素原 (AⅡ )、AT1R及ET ARmRNA和蛋白质表达的抑制率均未见显著差异 (P >0 0 5 )。各组大鼠 preproET 1mRNA和内皮素 1蛋     

低浓度臭氧对小鼠生殖生理的影响

目的观察低浓度臭氧对小鼠生殖生理的影响。方法试验组小鼠和对照组小鼠分别在15w紫外灯照射产生的低浓度臭氧环境下和正常无臭氧环境下连续饲养7周，阴道涂片镜检观察雌性小鼠的动情周期。7周后，观察雄性小鼠的精子畸形率、早期精细胞微核率；利用放免试剂盒测定雄性及雌性小鼠血清中性激素的水平；并取睾丸、卵巢制作组织切片，观察是否有组织病理学改变。结果试验组雌性小鼠体重与对照组雌性小鼠差异无统计学意义，试验组雄性小鼠体重比对照组雄性小鼠轻；试验组雌性小鼠的动情周期与对照组雌性小鼠差异无统计学意义；试验组小鼠的精子畸形率、早期精细胞微核率和血清性激素水平与对照组小鼠差异无统计学意义；试验组和对照组的睾丸、卵巢组织切片均未发现异常。结论本实验中紫外灯照射产生的低浓度臭氧对昆明小鼠的生殖生理基本没有影响。     

小鼠卵巢一氧化氮、内皮素在动情周期不同阶段内毒素应激中的变化

目的观察小鼠在动情周期不同阶段腹腔注射（ip）内毒索（LPS）时卵巢一氧化氮（NO）和内皮素（ET）含量的变化及与血浆E2和P含量变化的关系。方法用阴道涂片法确定小鼠动情周期，分别用RIA法和分光光度法检于动情周期不同阶段ipLPS时卵巢NO、ET的变化及与E2和P变化的关系。结果卵巢NO含量分别于动情期（此时E2含量较高）、动情后期（此时P含量较高）及动情问期（此时E2和P含量均低）受LPS处理后均升高，但于动情间期的升高程度更加明显；卵巢ET含量分别于动情期和动情问期受LPS处理后升高，但于动情后期受LPS处理无明显变化。结论内毒素诱导的NO、ET的升高与动情周期有关，E2或／和P能通过部分或完全拮抗内毒素诱导的NO或／和ET的升高，从而对内毒素导致的机体损伤产生保护性作用。     

NOD/SCID雌性小鼠动情周期的观察

目的：观察NOD/SCID小鼠动情周期及卵巢切除术后阴道涂片的变化。方法：连续观察9天NOD/SCID鼠,每日进行两次阴道涂片,计算动情周期时间及发生率。卵巢切除后,阴道涂片并观察阴道涂片变化。结果：NOD/SCID小鼠动情周期为4-6天。有规律动情的小鼠占80%。阴道口状态与动情周期无明显相关。卵巢切除术后,阴道涂片呈动情后期或动情间期改变。结论：采用阴道脱落细胞涂片法可判断NOD/SCID雌性小鼠的动情周期及特点,NOD/SCID雌性小鼠卵巢切除手术有效。     

高铁喂饲与大鼠生殖内分泌关系的研究

将5周龄sprague-Dawley品系雌性大鼠随机分成4组(I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),每组20只。Ⅰ组喂饲250mgFe/kg的基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组喂饲在日粮中添加FeSo_4.7H_2O,使含铁量分别为350,450,650mg/kg日粮。共饲养13周。实验表明:肝铁总贮存量随日粮中铁含量增加成比例增加;血清铁含量则随日粮中铁含量增加而增加,但在更高的基础水平上伴随发情周期卵巢激素的自然波动而起伏。日粮中不同水平铁处理对发情周期,黄体生成素(LH)、雌激素(E)、孕酮(P)含量的变化无明显影响。     

免疫性卵巢早衰小鼠生殖能力的研究

目的：探讨补肾复方左归丸对免疫性卵巢早衰（POF）小鼠动情周期、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）、受孕率的影响。方法：以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性卵巢早衰模型。设左归丸低、中、高不同剂量进行治疗,以泼尼松、己烯雌酚为阳性对照,观察动情周期、受孕率,ELISA法检测外周血清FSH、E2水平。结果：模型组小鼠动情周期紊乱,FSH增高,E2降低,受孕率低下。左归丸各剂量组动情周期时间延长,但仍有规律性变化。FSH升高及E2降低均不明显,受孕率也低下。结论：模型组卵巢功能损伤、破坏。左归丸能改善、保护卵巢功能,但对受孕率改善不明显。     

四物汤改善多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能实验研究

目的观察四物汤(Siwu tang,SWT)对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠动情周期、卵巢形态学及血清激素水平的影响。方法选取SPF级雌性Wistar大鼠25只,随机分为对照组、模型组、SWT低剂量组、SWT高剂量组和二甲双胍组,每组5只。除对照组外,各实验组大鼠均采用来曲唑1 mg/(kg·d)灌胃诱导建立PCOS大鼠模型。造模成功后,SWT低剂量组给予SWT 8.64 g/(kg·d)灌胃,SWT高剂量组给予SWT 25.92 g/(kg·d)灌胃,二甲双胍组给予二甲双胍200 mg/(kg·d)灌胃,对照组与模型组灌胃等量0.9%氯化钠注射液。各组均连续干预4周后,记录各组大鼠的动情周期,观察卵巢形态,检测血清激素水平。结果与对照组相比,模型组大鼠动情期显著缩短(P<0.05);黄体数量显著减少,囊肿数量显著增多(P<0.05);血清睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平显著升高,雌二醇(estradiol,E2)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平显著降低,LH/FSH比值明显升高(P<0.05)。与模型组大鼠相比,SWT低剂量组、SWT高剂量组和二甲双胍组大鼠动情期时间显著增加(P<0.05);黄体数量显著增加,囊肿数量显著减少(P<0.05);血清T水平及LH/FSH比值显著降低(P<0.05);SWT低剂量组、SWT高剂量组大鼠血清E2水平显著升高(P<0.05);SWT高剂量组大鼠血清FSH水平显著升高、LH水平显著降低(P<0.05)。结论SWT可增加PCOS大鼠动情时间,减少卵巢囊肿,增加黄体数量,还可降低PCOS大鼠血清T、LH水平及LH/FSH比值,升高E2、FSH水平;其治疗机制可能与通过调节血清激素水平改善PCOS大鼠卵巢功能有关。     

邻苯二甲酸二丁酯暴露对青春期雌性大鼠卵巢P450scc基因表达的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对青春期雌性大鼠的生殖毒性作用及作用机制.方法:21d龄SPF级雌性SD大鼠,随机分为DBP250 mg/kg、500 mg/kg、1 000 mg/kg3个染毒组和溶剂对照组(玉米油),连续8周灌胃染毒.染毒结束后,在动情前期对大鼠实施处死,取动脉血,利用放射免疫荧光法检测血清中孕酮(P)水平;取卵巢组织提取mRNA,实时荧光定量RT-PCR检测大鼠卵巢组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)mRNA表达水平.结果:各处理组间大鼠血清P水平有统计学差异(F=4.306,P=0.014),与对照组比较,DBP 1 000 mg/kg剂量组大鼠血清P水平降低(P＜0.05),与对照组比较,250mg/kg及500mg/kg剂量大鼠血清P水平无统计学差异.各处理组间大鼠卵巢P450scc mRNA表达水平有统计学差异(H=15.591,P＜0.01),与对照组比较,DBP 250 mg/kg、500 mg/kg、1 000 mg/kg剂量组大鼠卵巢P450scc mRNA表达水平降低(P＜0.01),各剂量组间卵巢P450scc mRNA表达水平比较无统计学差异(P＞0.05).结论:DBP可使青春期雌性大鼠卵巢P450scc表达降低,提示DBP对雌性大鼠产生生殖毒性.     

长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

目的探讨长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响。方法 6月龄雌性SD大鼠30只,分为正常饮食组、能量限制(CR)20%组和CR40%组,记录正常饮食(NC)组每日摄食量,并将此摄食量的80%和60%分别喂养CR20%组和CR40%组大鼠,监测大鼠体重及动情周期变化,12个月后取大鼠卵巢。卵巢组织切片由苏木精-伊红染色,观察卵泡储备数量和不同发育阶段的卵泡比例。结果 NC组体重持续上升,而CR20%组体重小幅增加,CR40%组体重持续下降。CR40%组大鼠的卵泡储备数量(105.7±9.5)和原始卵泡数(55.0±6.8)与NC组(51.2±5.4,18.3±3.7)相比差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001),原始卵泡比例(52.1%±2.9%)与对照组(35.8%±5.5%)相比差异有统计学意义(P<0.001),而成熟卵泡比例(6.8%±1.9%)和发育卵泡比例(41.2%±3.0%)与NC组(15.6%±6.2%,48.9%±4.2%)相比差异亦有统计学意义(P<0.001,P<0.05)。CR20%组卵泡储备数量和不同发育阶段的卵泡比例与NC组相比差异无统计学意义。结论长期能量限制可能通过抑制卵泡发育启动、减少发育卵泡和成熟卵泡的数量,从而减少卵泡的消耗,有益于生殖寿命延长。     

二甲双胍对胎儿生长受限小鼠追赶生长时期胰岛素抵抗的干预效果

目的 探讨二甲双胍干预胎儿生长受限(FGR)小鼠追赶生长时期胰岛素抵抗的有效性.方法 采用孕期低蛋白饮食法建立FGR小鼠模型.FGR组和正常对照组(NC)新生雌鼠自断乳后分别喂予标准饲料(SF)和高脂饲料(HF),不同饲料喂养组又分为二甲双胍灌胃组(MF)和生理盐水灌胃组(NS),即:NC+SF+NS组、NC+SF+MF组、NC+HF+NS组、NC+HF+MF组、FGR+SF+NS组、FGR+SF+MF组、FGR+HF+NS组、FGR+HF+MF组.于仔鼠8周龄开始每组取6只观察阴道开口时间及动情周期变化.第12周在动情间期每组取6只小鼠禁食12 h,测体质量、身长,计算体质量系数(PI),采血取血清进行空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(Fins)、促卵泡生成素(FSH)、抗苗勒管激素(AMH)检测,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).第12周始每组取6只小鼠,与雄鼠2:1合笼交配,了解雌鼠生殖能力.组间比较采用单因素方差分析,组间差异采用Fisher精确概率检验,以FGR、HF及MF三个因素为分析指标,采用3×2析因实验分析,确定有无交互作用,以及交互作用的显著性水平.结果(1)析因分析:FGR因素及HF因素对PI指数、Fins、HOMA-IR、阴道开口时间、AMH均有交互相加作用的显著性影响(P<0.05);MF因素干预HF因素相关的体质量、PI指数、FPG、Fins、HOMA-IR及动情周期开始时间有显著性意义(P<0.05);除身长、FSH外,MF因素干预FGR因素相关的其余观察指标均有显著性意义(P<0.05).(2)组间比较:除体质量外,FGR因素对其余观察指标的影响差异均有统计学意义(均P<0.05);除FSH外,HF因素对其余观察指标的影响差异均有统计学意义(均P<0.05);除身长、FSH外,MF因素对其余观察指标的影响差异均有统计学意义(均P<0.05);另FGR+HF+NS组与NC+SF+NS组、FGR+SF+NS组与FGR+HF+NS组妊娠率的差异有统计学意义(P<0.05).结论 FGR小鼠存在青春期延迟、稀发排卵及成年期胰岛素抵抗,出生后高脂饮食促发FGR小鼠的追赶生长,追赶生长时期的二甲双胍干预对其胰岛素抵抗、生殖内分泌紊乱的改善具有有效性.     

喷洒过敌枯双农药的稻谷对大鼠致畸作用的研究

敌枯双农药属中等毒性,雌性大鼠和小鼠分别经口及腹腔注射的LD_(50)为253和501.5mg/kg。该药对大鼠和小鼠的致畸作用呈剂量效应关系,在高剂量的阳性对照组,即于妊娠第10d给小鼠和大鼠的剂量分别为50和2.5mg/kg,对母鼠的体重出现抑制,有大量的胚胎吸收,其吸收率分别为39.8和46.7％,仔鼠的畸胎发生率分别为56.3和6.8％。1ppm仅见母鼠的体重增长及仔鼠生长发育受抑制,未见仔鼠畸形。0.1ppm组和喷洒三次敌枯双农药的稻谷组的大鼠和小鼠的母鼠和仔鼠均无不良影响。