邻苯二甲酸二丁酯对青春期雄性大鼠的生殖毒性研究

目的评价邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对青春期雄性大鼠生殖毒性和作用机制。方法用DBP剂量分别为1 000、500、250 mg/(kg.d)灌胃染毒雄性Wistar大鼠(28日龄)8周,并停止染毒后恢复8周。观察临床症状,记录动物体重,进行血Zn和激素测定、生殖能力检查和解剖及组织病理学等指标。结果1 000 mg/(kg.d)剂量组动物体重5周后出现显著下降(对照组的70%)、持续到停止染毒恢复期的第5周。1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周时动物血清睾酮水平降低(对照组的80%~90%),停止染毒后第4周起恢复正常;1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周时动物血清E2水平升高(对照组的170%~200%);1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周时动物血清FSH水平升高(对照组的120%~150%);1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周后精子计数减少(对照组的12%~66%),1 000 mg/(kg.d)剂量组染毒8周后交配成功率0(0/8),500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周后交配成功率88%(7/8);1 000 mg/(kg.d)剂量组睾丸系数与对照组比较明显减小,停止染毒后未见恢复;组织病理学发现1 000 mg/(kg.d)剂量组生精上皮严重损伤,生精细胞脱落,曲细精管的损伤度为97.8%,与对照组差异有统计学意义。结论DBP对雄性青春期大鼠具有明显的生殖毒性,具有干扰生殖内分泌激素水平的作用,使睾酮水平降低,雌激素和FSH水平升高,同时引起睾丸萎缩、生精上皮变性、生殖细胞脱落等损伤。本实验中DBP对Wistar大鼠的最低可观察毒性作用剂量水平(lowest observed adverse effect level,LOAEL)为250 mg/(kg.d)。     

甲氧滴滴涕对雌性大鼠血清雌激素水平及卵巢抗氧化系统功能的影响

目的:观察甲氧滴滴涕(MXC)对雌性大鼠血清雌激素水平、子宫指数(子宫质量mg/体质量g)及卵巢抗氧化系统的毒性.方法:雌性SD大鼠经口染毒MXC,随机分为50,100,200 mg/(kg·d)3个染毒组和溶剂芝麻油组(对照组). 阴道脱落细胞涂片法观察大鼠动情周期的变化;用放射免疫法测定各实验组大鼠血清雌二醇水平,测定大鼠体质量及子宫指数;分光光度法测定其卵巢超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力以及丙二醛(MDA)的含量.结果:各剂量MXC染毒组大鼠动情周期数明显低于对照组. 50 mg/(kg·d)组大鼠子宫指数较对照组增加. 卵巢GSH-Px活力和SOD活力显著下降(P＜0.05),而MDA含量明显升高(P＜0.01).结论:MXC可致雌性大鼠动情周期紊乱,对卵巢的抗氧化系统产生一定影响.     

利谷隆对大鼠L ey dig细胞睾酮合成影响及其机制研究

目的：探讨利谷隆对SD大鼠体外培养睾丸间质细胞（Leydig细胞）睾酮合成的影响及其可能的机制。方法采用SD大鼠睾丸间质细胞体外原代培养体系,利谷隆染毒剂量为0、50、100、200μmol／L。放射免疫法测定睾酮水平,实时荧光定量PCR（Real‐time qPCR）检测Leydig细胞的细胞色素 P450侧链裂解酶（P450scc）、3β‐羟基固醇脱氢酶（3β‐Hsd）的 mRNA表达, ELISA检测利谷隆染毒24 h后Leydig细胞P450scc、3β‐Hsd蛋白表达情况。结果利谷隆染毒各组睾酮水平下降,其中100、200μmol／L组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）,并有剂量依赖趋势。与对照组比较,利谷隆染毒各组 P450scc和3β‐Hsd mRNA表达降低,差异有统计学意义（P＜0．05）,有剂量依赖趋势。利谷隆染毒各组3β‐Hsd的蛋白表达降低,与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0．05）;但P450scc蛋白表达与对照组比较,利谷隆染毒各组差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论利谷隆可导致大鼠Leydig细胞睾酮分泌量下降,其可能是通过抑制P450scc和3β‐Hsd基因的表达,从而影响睾酮合成所致。     

膜联蛋白5对雄性SD大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响

目的 研究注射膜联蛋白5后雄性SD大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450 cholesterol side-chain cleavage enzyme,P450scc)和3β-羟类固醇脱氢酶(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)表达的改变,初步探讨膜联蛋白5影响睾酮分泌的机制.方法 将20只SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组又分为7.5μg/kg组、15μg/kg组和30μg/kg组,每组5只.对照组大鼠腹腔注射等量的pH 8.0Tris-HCl,实验组腹腔注射不同剂量的膜联蛋白5,1次/d,连续20d.用RT-PCR方法分别检测对照组和各实验组SD大鼠睾丸组织中睾酮合成相关的StAR、P450scc和3β-HSD mRNA的表达变化,并用Western blot方法检测以上3种物质蛋白质水平的变化.结果 与对照组相比,在mRNA水平上,7.5μg/kg组和15μg/kg组大鼠睾丸组织P450scc mRNA表达分别增加了25.9%[(0.68±0.04) vs (0.54±0.03),P<0.01]和27.8%[(0.69±0.04) vs (0.54±0.03),P<0.01];3β-HSD mRNA表达分别升高了32.9%[(1.05±0.07) vs (0.79±0.10),P<0.01]和53.2%[(1.21±0.07) vs (0.79±0.10),P<0.01];而30μg/kg组表达差异无统计学意义;在蛋白水平上,15μg/kg组大鼠睾丸组织P450scc蛋白表达提高了34.2%[(0.37±0.04) vs (0.28±0.02),P<0.01],7.5μg/kg组和15μg/kg组的3β-HSD表达也分别增加了14.7%[(1.53±0.10) vs (1.34±0.05),P<0.01]和24.4%[(1.67±0.14) vs (1.34±0.05),P<0.01];而StAR的表达无论在转录水平还是在蛋白水平上,较对照组差异均无统计学意义.结论 膜联蛋白5可通过调节P450scc与3β-HSD的表达来调节睾酮合成.     

环境雌激素辛基酚和壬基酚对雌性大鼠生殖系统的损伤作用

目的:研究环境雌激素辛基酚和壬基酚对雌性大鼠生殖系统的毒性,并探讨辛基酚和壬基酚的联合毒性作用.方法:将70只成年雌性大鼠,随机分为7组,每组10只.采用灌胃染毒.分别设为染毒组和对照组.染毒组分为:OP低剂量(80 mg/kg OP)、OP高剂量(320 mg/kg OP);NP低剂量(50 mg/kg NP)、NP高剂量(200 mg/kg NP)、联合染毒低剂量(80 mg/kg OP 50 mg/kgNP)、联合染毒高剂量(320 mg/kg OP 200 mg/kg NP)6个染毒实验组.染毒60天后,研究雌鼠体内性激素水平的变化,子宫的一氧化氮合酶NOS活力以及卵巢组织的病理改变.结果:随着辛基酚和壬基酚接触剂量的增高,各剂量组一氧化氮舍酶NOS比较均无统计学意义(P>0.05),但染毒组呈现一定的下降趋势.各染毒组大鼠血清FSH、LH、E2与对照组比较有统计学意义(P<0.05).呈下降趋势.联合染毒低剂量组与辛基酚低剂量组比较,联合染毒高剂量组与壬基酚高剂量组比较.血清FSH均低于后者,以上差异均有统计学意义(P<0.05).病理组织学观察可见卵巢组织出现明显的病理学改变.结论:辛基酚、壬基酚及其联合作用对雌性大鼠生殖系统造成影响,其机制可能是血清FSH、LH、E2下降,促性腺激素的和类固醇激素的抑制,造成排卵抑制及生殖功能障碍.     

硼酸对去卵巢大鼠雌激素样作用的观察

目的:评价硼酸的体内雌激素样效应.方法:40只SD大鼠行双侧去卵巢后,随机分为5组,阴性对照组(蒸馏水),低、中、高剂量硼酸组(4 mg/kg、25 mg/kg及75 mg/kg)及阳性对照组(0.10 mg/kg 雌二醇),连续给药3 d后处死大鼠,测定子宫脏器系数及血清总雌二醇水平.结果:阳性对照组子宫脏器系数及血清雌二醇水平均高于阴性对照组(P均＜0.05).高剂量硼酸组大鼠子宫脏器系数高于阴性对照组(P＜0.05);硼酸各剂量组血清雌二醇水平与阴性对照组相比,差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论:硼酸能够诱导去卵巢大鼠子宫增重,具有雌激素样效应.     

当羊骨片对维甲酸致骨质疏松大鼠股骨OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的:观察当羊骨片对维甲酸致骨质疏松大鼠股骨骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达的影响.方法:6月龄雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、维甲酸模型组、仙灵骨葆组 (312mg/kg)和当羊骨片低、中、高剂量组(250、500、1000mg/kg),每组10只.维甲酸灌胃建立骨质疏松大鼠模型,各用药组大鼠灌胃给予相应剂量的药物.RT-PCR法检测股骨上段OPG、RANKL mRNA的表达.结果:当羊骨片中、高剂量能显著升高模型大鼠股骨OPG mRNA表达(P＜0.01),降低模型大鼠股骨RANKL mRNA表达及RANKL/OPG比值(P＜0.01).结论:当羊骨片可能通过调控OPG、RANKL基因表达,对维甲酸致骨质疏松大鼠有一定的保护作用.     

维生素E对二(口恶)英染毒小鼠肝脏细胞色素P450酶基因转录的影响

目的研究维生素E对2,3,7,8-四氯代二苯并二噁英(TCDD)染毒小鼠肝脏细胞色素P450酶1A1、1A2、1B1基因转录的影响。方法设计了5个实验组,将45只小鼠随机分为5组,5组动物给予TCDD和维生素E的水平依次为:TCDD0 ng/kg和VE0 mg/kg、TCDD100 ng/kg和VE0 mg/kg、TCDD100 ng/kg和VE20 mg/kg、TCDD100 ng/kg和VE100 mg/kg、TCDD100 ng/kg和VE500 mg/kg。喂食4周后取其肝脏,用real-time PCR法测小鼠细胞色素P450酶1A1、1A2、1B1基因mRNA水平。结果TCDD染毒小鼠肝脏细胞色素P450酶1A1、1A2 mRNA水平与对照组相比有升高的趋势,而细胞色素P450酶1B1 mRNA水平明显降低。染毒并给予维生素E20 mg/kg组,其肝脏CYP4501A1的mRNA水平有降低趋势,随着维生素E剂量的增加,YP450 1A1的mRNA水平反而有升高的趋势,当维生素E剂量为500 mg/kg时,其肝脏CYP450 1A1的mRNA明显高于TCDD染毒组。CYP450 1A2的mRNA水平随着维生素E剂量的增加有降低的趋势,在TCDD染毒并给予维生素E500 mg/kg组,其肝脏CYP450 1A2的mRNA水平明显低于TCDD染毒组。而肝脏CYP450 1B1的mRNA水平在染毒并给与维生素E500 mg/kg组,与染毒组相比有上调趋势。结论TCDD能影响或部分影响小鼠细胞色素P450酶1A1、1A2、1B1的基因转录,而维生素E能在一定程度上缓解TCDD的作用。     

维生素C对邻苯二甲酸二丁酯雄性大鼠生殖毒性的保护作用

目的 观察邻苯二甲酸二丁酯(di-butylphthalate，DBP)所致雄性生殖毒性效应，并探讨维生素C(vitamin C，Vit C)对DBP所致SD雄性大鼠生殖功能受损的干预调节作用。 方法 将60只SD雄性大鼠随机分组，分别为正常对照组，DBP低、中、高剂量组(DBP 100、500、1 000 mg/kg体重)，VitC对照组(30 mg/kg体重)与VitC与DBP高剂量联合干预组。灌胃干预21 d，检测大鼠脏器重量及血液生化各项指标，大鼠精子活力、浓度、畸形率，以及检测血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平。 结果 与正常对照组相比，DBP高剂量组大鼠睾丸减轻，睾丸脏体比下降，部分血生化指标异常，精子活力下降、畸形率升高，血清T、LH、FSH水平显著下降，差异有统计学意义(均P＜0.05)；与DBP高剂量组相比，VitC干预组大鼠睾丸组织损伤有不同程度的恢复，精子活力、畸形率，以及血清T、LH、FSH水平差异有统计学意义(均P＜0.01)。 结论 DBP可致大鼠睾丸萎缩，精子活力下降，精子畸形率增高；DBP可致血清T、LH、FSH水平降低。VitC可提高血清LDH水平和T、LH、FSH水平，改善DBP所致大鼠精子活力下降，降低精子畸形率，为进一步开展DBP生殖毒性的预防干预提供理论依据。      

丙烯酰胺对大鼠睾丸的毒性作用及其对增殖细胞核抗原蛋白表达的影响

目的 观察丙烯酰胺(AA)对大鼠睾丸的毒性作用及其对增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组(双蒸水)、4 mg/kg AA染毒组、12 mg/kg AA染毒组和36 mg/kg AA染毒组.连续灌胃30 d后,取睾丸行苏木精-伊红染色,观察睾丸组织形态学变化;TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况;化学发光法检测血清中睾酮和雌二醇含量;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测睾丸组织PCNA mRNA表达;免疫组织化学法和Western blotting技术检测睾丸组织PCNA蛋白表达.结果 12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠体质量明显低于对照组(P＜0.05).12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠睾丸组织生精细胞减少,生精上皮萎缩,管腔出现空泡,凋亡细胞显著增多.各染毒组大鼠血清睾酮水平均显著低于对照组(P＜0.05);12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠血清雌二醇水平显著低于对照组(P＜0.05).与对照组比较,12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠睾丸组织PCNA mRNA和蛋白表达均明显降低(P＜0.05).结论 AA染毒可引起雄性大鼠性激素分泌减少,睾丸组织发生病理学改变,凋亡细胞增多,PCNA蛋白表达减少,打乱生精细胞增殖与凋亡的动态平衡,导致生殖系统发生不同程度的功能障碍.     

60Co-γ射线致大鼠睾丸间质细胞结构及睾酮合成功能的损害

目的探讨不同剂量60Co-γ射线致大鼠睾丸间质细胞结构及睾酮合成功能急性损伤的程度。方法雄性SD大鼠60只,采用随机数字表法平均分为5组(n=12):正常对照组(A组);60 Co-γ射线双侧睾丸局部照射组有4个剂量组:剂量4 Gy+4 Gy(B组);剂量6 Gy+6 Gy(C组);剂量2 Gy+10 Gy(D组);剂量6 Gy+8 Gy(E组),分次照射时间间隔为24 h。照射完成48 h后应用ELISA法检测循环血中促黄体激素(luteinizing hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)水平;应用光学显微镜观察睾丸间质细胞的结构变化;应用RT-PCR技术检测睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)和细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc)的mRNA水平。结果 60Co-γ射线照射组(B、C、D、E组)较正常组(A组)血清LH显著升高(P<0.05),T显著降低(P<0.05);光镜下见照射致睾丸间质细胞缩小,数目减少,细胞质减少,细胞核皱缩,染色质浓集、深染;睾丸组织中StAR、P450scc的mRNA水平显著低于正常组(P<0.05)。结论 60Co-γ射线对睾丸间质细胞结构及合成睾酮功能有明显损伤作用,且损伤程度不仅与照射总剂量呈正相关性,也与单次照射的最大剂量有关。     

生长抑素逆转三苯氧胺对性激素内环境影响的实验研究

目的:探讨八肽生长抑素奥曲肽(OCT)对三苯氧胺(TAM)所致实验性大鼠性激素内环境失衡的逆转作用.方法:Wistar雌鼠接受致癌剂二甲基苯蒽8周后随机分为对照组和治疗组,治疗组采用OCT,TAM或二者联合治疗14周.应用酶免疫分析法测定血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的水平.结果:血清E2和P含量在TAM组均明显高于对照组(P＜0.05),而OCT TAM组与对照组无明显差异(P＞0.05);PRL含量在OCT组、TAM组和OCT TAM组(1.40ng/ml)均显著低于对照组(2.85ng/ml)(P＜0.05,P＜0.01).结论:OCT在体内可以拮抗TAM对内源性雌激素的影响,从而减少因性激素内环境不平衡所致的副作用.     

大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠抵抗素基因表达的影响

目的探讨大豆异黄酮(SIF)改善高脂高蔗糖膳食诱导大鼠胰岛素抵抗(IR)状态的作用及可能机制。方法选用高脂高蔗糖饲料诱导的IR雄性SD大鼠,根据胰岛素抵抗指数(IRI)随机分为模型对照组和3个SIF组(50mg/kg·bw、150mg/kg·bw及450mg/kg·bw)。各组给予相应受试物1月后,酶法检测各组动物空腹血糖、放免法检测空腹血胰岛素、酶免法检测血抵抗素含量,实时定量RT-PCR法检测肾周脂肪组织抵抗素基因的mRNA水平。结果与模型对照组比较,450mg/kg·bwSIF组能明显降低大鼠肾周脂肪组织抵抗素基因mRNA的表达及血清抵抗素的含量。150mg/kg·bwSIF和450mg/kg·bwSIF组能显著降低空腹血胰岛素水平及IRI。3个SIF组的血糖与对照组比较差异无统计学意义。IRI与血清抵抗素水平存在着明显的正相关(r=0.355,P<0.05)。结论SIF可能具有通过下调抵抗素基因mRNA表达及降低血清含量而提高胰岛素敏感性的作用。     

寿胎丸对邻苯二甲酸二乙酯染毒孕鼠免疫功能及氧化应激的影响

目的 探讨寿胎丸对邻苯二甲酸二乙酯（DEHP）染毒孕鼠免疫功能及氧化应激的影响。方法 将36只性成熟雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组,每组12只。确认妊娠后,分别予对照组玉米油10 mL/kg+生理盐水10 mL/kg、模型组DEHP500 mg/kg+生理盐水10 mL/kg、中药组DEHP 500 mg/kg+寿胎丸10 mL/kg灌胃,至妊娠第19天处死孕鼠。剖腹取出胎鼠,记录各组胎鼠体质量、孕鼠活胎数、死胎数;检测血清白介素-6（IL-6）、白介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、雌二醇、孕激素水平;记录各组胎盘外观、色泽、质量情况,取胎盘组织做病理切片;检测胎盘组织中总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠孕中后期体质量增加缓慢,胎鼠质量显著降低（P<0.05）,血清IL-2、IL-6、TNF-α水平降低,雌二醇水平升高（P<0.05）,胎盘T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT水平显著降低,ROS、MDA水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,中药组大鼠孕中后期体质量明显增加,胎鼠质量增加（P<0.05）;血清IL-2、IL-6升高,雌二醇降低（P<0.05）,TNF-α有升高趋势（P>0.05）,胎盘T-AOC、GSH-Px、CAT水平升高,MDA值明显降低（P<0.05）,SOD升高,ROS降低（P>0.05）。孕激素各组皆无统计学差异（P>0.05）。HE染色结果显示,模型组胎盘组织海绵滋养层明显疏松杂乱,出现较多空泡。中药组胎盘组织结构完整,迷路带、海绵滋养层、巨细胞滋养层均清晰可见,各层中细胞分布均优于模型组。结论 寿胎丸可调节孕鼠免疫功能,机制可能与其拮抗DEHP的雌激素样作用,调节血清免疫因子含量有关;寿胎丸可能通过纠正DEHP引起的胎盘组织内氧化应激失衡状态,减少胎盘组织损伤,改善妊娠结局。     

邻苯二甲酸二丁酯和二(2-乙基已基)酯对大鼠尿液中超氧化物歧化酶酶活力和丙二醛含量的影响

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)一次性单独及一次性联合染毒对雄性SD大鼠尿液超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量影响。方法选取60只体质量200 g左右SD雄性大鼠,测量其体质量并随机分为10组,分别是阴性对照组(芝麻油)、DBP单独染毒组(低剂量:30 mg/kg;中剂量:100 mg/kg;高剂量:300 mg/kg)、DEHP单独染毒组(低剂量:50 mg/kg;中剂量:150 mg/kg;高剂量:450 mg/kg)以及DBP和DEHP联合染毒组(低剂量:DBP 30mg/kg+DEHP 50 mg/kg;中剂量:DBP 1 00 mg/kg+DEHP 1 50 mg/kg;高剂量:DBP 300 mg/kg+DEHP 450 mg/kg),每组6只。采用灌胃的方式进行一次性染毒,灌胃量为2 ml。染毒后收集24、48、72、96 h尿液,并测定其尿液中SOD酶活性和MDA含量。结果 DBP、DEHP单独和联合染毒均能在不同程度上降低大鼠24 h尿液中SOD酶活力,增加24 h尿液中MDA含量,但对大鼠48、62、96 h尿液中SOD酶活力和MDA含量的影响则无显著性差异;各组大鼠随着饲养天数的增加尿液中SOD酶活力有所回升,MDA含量有所下降。结论 DBP、DEHP单独和联合染毒均能在短期内对大鼠肾脏造成显著的氧化损伤,且联合染毒效应更高。     

大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及瘦素基因表达的影响

目的:观察大豆异黄酮(SIF)对高脂膳食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠血清瘦素水平及白色脂肪组织瘦素mRNA表达的影响,并探讨SIF提高胰岛素敏感性的可能机制.方法:选用高脂饲料诱导的IR雄性SD大鼠,根据其胰岛素抵抗指数(IRI)随机分为模型对照组(水)和3个SIF组(50 mg/kg,150 mg/kg及450 mg/kg).各组经口灌胃给予相应受试物1个月,空腹过夜后取材,用酶法检测各组动物空腹血糖、用放射免疫法检测空腹血胰岛素、用酶联免疫法检测血清瘦素含量,以实时定量RT-PCR法检测肾周脂肪组织瘦素基因的mRNA水平.结果:与模型对照组比较,SIF 150 mg/kg和450 mg/kg组能显著降低空腹血胰岛素水平及IRI,SIF450 mg/kg组能明显降低大鼠体重及肾周脂肪组织瘦素基因mRNA的表达、提高血清瘦素的含量.结论:SIF可能具有改善瘦素抵抗的作用,并进而提高胰岛素的敏感性.     

VEGF及TRPC6的表达与糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的相关机制

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）与瞬时受体电位阳离子通道蛋白6（TRPC6）有无相关性及其相互作用的可能机 制。方法随机取正常SD大鼠8只作为正常对照组,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）65 mg/kg建立糖尿病肾病大鼠模型40只,并随 机分为5 组,每组8 只。正常对照组及糖尿病肾病组不干预,其余4 组分别给予SU5416 10 mg/kg、5 mg/kg（2 次/周）以及 LY294002 2 mg/kg、1 mg/kg（1次/d）腹腔注射干预8周。检测大鼠血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白生化指标变化情况,观察糖尿病 肾病大鼠肾脏组织的病理改变,同时采用Realtime PCR及Western blot观察VEGF、Nephrin、TRPC6 mRNA表达及蛋白质的变 化。结果与正常对照组相比,糖尿病肾病组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白升高,Nephrin 的表达下降,VEGF及 TRPC6的表达升高（P<0.05）。SU5416干预后24 h尿蛋白及尿素氮下降,Nephrin表达升高,VEGF表达无明显变化,TRPC6表 达下降（P<0.05）。LY294002 干预后24 h 尿蛋白下降,Nephrin 及VEGF表达无明显变化,TRPC6 表达下降（P<0.05）。结论 VEGF对TRPC6的调控作用可能是通过PI3K/Akt 通路实现的。抑制VEGFR-2和/或者阻断PI3K/Akt 信号通路可阻断VEGF 对TRPC6的这种调控作用。     

除草剂阿特拉津对健康雌性小鼠血清性激素水平的影响及其意义

目的：观察阿特拉津（ATR）处理后小鼠血清中性激素水平的变化,探讨ATR对性激素相关疾病的可能影响。方法：将32只健康雌性C57小鼠随机分为对照组和5、25和125 mg?kg-1 ATR组,每组各8只,对照组小鼠给予橄榄油溶剂灌胃,其他组小鼠分别灌胃给予5、25和125 mg/kg ATR,每日1次,共28 d,收集小鼠血清。放射免疫法检测各组小鼠血清中性激素水平;HE染色观察各组小鼠卵巢组织形态学。结果：与对照组比较,25和125 mg/kg ATR组小鼠血清中雌二醇（E2）、睾酮（T）水平明显增高（P<0.05）,且随ATR剂量升高,E2和T水平逐渐增高;与对照组比较,25和125 mg?kg-1 ATR组小鼠血清中促黄体生成激素（LH）和促卵泡生成激素（FSH）水平显著降低（P<0.05或P<0.01）,且以125 mg?kg-1 剂量组降低最为明显(P<0.01);各组小鼠血清中孕酮（P）和垂体泌乳素（PRL）水平的差异无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,25和125 mg/kg ATR组小鼠卵巢中发育卵泡比例减少,大型闭锁卵泡比例增多,尤以125 mg/kg ATR组小鼠卵巢组织最为明显。结论：ATR可能通过增加血清中E2和T水平,下调LH和FSH分泌,从而干扰卵巢中卵泡的成熟。     

巴马司他对高血压小鼠模型血压及血清基质金属蛋白酶9水平的影响

目的探讨外源性基质金属蛋白酶9(MMP-9)抑制剂巴马司他对高血压小鼠血压及其血清中MMP-9水平和活性的影响。方法将36只高血压小鼠(高血压组)平均分为3个亚组,每组12只,连续3 d分别以巴马司他30 mg/kg(高剂量亚组)、10 mg/kg(低剂量亚组)和生理盐水(对照亚组)对小鼠腹腔进行注射,依次在最后1次注射后0 h、2 h、4 h、6 h对各组小鼠血清中MMP-9及其mRNA水平进行检测;应用明胶酶谱法检测各组小鼠血清中MMP-9活性。选择健康小鼠36只为健康对照组,检测血清MMP-9、mRNA水平,并与高血压组比较。结果(1)血压变化:与健康对照组比较,高血压组用药前血压较高,差异有统计学意义(P<0.05),用药后,与对照亚组及低剂量亚组比较,高剂量亚组血压降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)血清MMP-9浓度:与健康对照组比较,用药前高血压组MMP-9蛋白浓度显著高(P<0.01),用药后,组内比较:高剂量亚组和低剂量亚组小鼠血清中MMP-9蛋白表达水平均随着药物作用时间的延长而降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与低剂量亚组、对照亚组比较,高剂量亚组在2 h、4 h、6 h血清MMP-9浓度均较低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);低剂量亚组与对照亚组比较,2 h、4 h、6 h差异亦均有统计学意义(P<0.05)。(3)MMP-9 mRNA表达:与健康对照组比较,高血压组MMP-9 mRNA水平显著升高(P<0.05);用药后,高剂量亚组和低剂量亚组小鼠血清中MMP-9 mRNA水平均随着药物作用时间的增加而降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);对照亚组、低剂量亚组、高剂量亚组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。(4)MMP-9活性测定:随着巴马司他给药剂量的增加,Pro-MMP-9和Active-MMP-9活性呈减弱趋势。结论巴马司他能够降低高血压小鼠血压水平及其血清中MMP-9水平和活性。