Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞的作用研究

目的研究Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响。方法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,设Echistatin处理组和对照组,MTT法、流式技术及RT-PCR法检测人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果Echistatin可明显抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖,促进凋亡,降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结论Echistatin可作为防治增生性瘢痕的筛选药物。     

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度的作用

目的：观察三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度的作用。方法：体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞，分别以400μg／mL和800μg／mLPNS处理细胞，在激光共聚焦显微镜下观察细胞内钙离子浓度的变化。结果：随着给药浓度的增加，和空白对照组相比，各给药组的细胞内钙离子浓度均有所下降（P〈0．05），两给药组之间差异也具有统计学意义（P〈0．05）。结论：三七总甙能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度，并具有剂量依赖效应。     

大黄素抑制增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成及细胞周期的研究

目的 检测大黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用,探索大黄素防治瘢痕的机制.方法 进行人增生性瘢痕成纤维细胞的体外培养,将不同浓度的大黄素作用于细胞,以3H-脯氨酸掺入法检测成纤维细胞胶原合成的情况,并以流式细胞术检测成纤维细胞的细胞周期.结果 在不同浓度组大黄素的处理下,人增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成呈现出抑制的趋势;大黄素可以提高细胞G1期比例,而降低S期和G2期比例.结论 大黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成有显著的抑制作用,其机制和细胞周期阻滞在G1期从而抑制细胞增殖有关.     

氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响,初步探讨其治疗瘢痕的作用机制.方法:采用MTT比色法和3H-脯氨酸掺入法,观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.结果:氢化可的松(0.1 g/L)能够抑制体外培养成纤维细胞增殖(MTT值0.523±0.051 vs 0.347±0.036,P<0.05)及分泌胶原的功能[3H-脯氨酸掺入量(248±6) Bq vs (181±6) Bq,P<0.05],并呈剂量依赖性(r=-0.8208).结论:氢化可的松可通过抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成,从而达到治疗瘢痕的作用.     

壳多糖对不同来源成纤维细胞生物学特性的影响

目的:探讨壳多糖对异常瘢痕成纤维细胞生物学活性的作用.方法:以瘢痕疙瘩及增生性瘢痕成纤维细胞为研究对象,正常皮肤成纤维细胞为对照,用含0、0.01%、0.02%、0.04%、0.08%、0.16%、0.24%、0.48%壳多糖培养液对不同来源成纤维细胞体外培养72 h.MTT法检测不同来源成纤维细胞生长增殖情况,24 h 3H-脯氨酸标记法检测胶原的相对量,定量酶联免疫试剂盒检测TGF-β1、b-FGF、IL-8含量,同时观察细胞形态的变化.结果:不同浓度壳多糖呈剂量依赖性抑制不同来源成纤维细胞增殖及胶原、TGF-β1、b-FGF的分泌,同时促进IL-8的分泌,且对异常瘢痕组织的作用明显强于正常皮肤(P<0.05,P<0.01), 而瘢痕疙瘩和增生性瘢痕组间无明显差异.不同来源成纤维细胞无明显形态结构区别.结论:壳多糖可以抑制瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞的生长、增殖、合成及分泌胶原功能,有望在异常瘢痕的防治中发挥重要作用.     

三羟基异黄酮对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及侵袭作用的影响

目的 观察5,7,4'-三羟基异黄酮(Genistein)对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞生长及侵袭作用的影响,探讨其抗纤维化作用的机制.方法 以25、50、100μmol/L浓度Genistein处理体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,MTT法检测细胞增殖活性,3H-脯氨酸掺入法检测细胞胶原合成,Transwell小室趋化运动模型检测细胞侵袭能力.结果 Genistein作用后,瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖及胶原合成作用降低,细胞的侵袭能力显著下降.随着药物浓度增加,对细胞的这种抑制作用也增强.结论 Genistein具有体外抗瘢痕疙瘩成纤维细胞纤维化与侵袭的作用,可成为治疗病理性瘢痕及纤维化疾病的有效药物.     

抑癌基因p27对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的：探讨抑癌基因p27对增生性瘢痕的作用。方法：取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞（HTsFb），将构建的pcDNA3-p27真核表达质粒体外转染HTsFb，经G418筛选获得稳定性表达的细胞克隆，用MTT和^3H-TdR掺入法观察抑癌基因p27对HTsFb增殖及DNA合成的影响。结果：抑癌基因p27对HTsFb增殖及DNA合成均有显著抑制作用。结论：抑癌基因p27可能通过抑制成纤维细胞增殖及DNA合成抑制瘢痕增生。     

P物质对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的 观察P物质对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响，探讨P物质在增生性瘢痕发生发展中的作用机制。方法 采用细胞培养技术，建立成纤维细胞系，应用细胞计数、MTT法及电镜进行形态学对比研究人增生性瘢痕成纤维细胞对P物质的反应。结果 P物质促进人增生性瘢痕成纤维细胞的生长。结论 P物质在增生性瘢痕的发生发展中起着重要的促进作用.     

三七及三七总甙对NIH/3T3细胞增殖抑制作用比较

目的:初步观察三七总甙的抗肝纤维化活性作用。方法:用三七总甙及三七冻干粉作用于体外培养NIH3T3细胞(小鼠胚胎成纤维细胞),MTT法观察细胞增殖。结果:三七及三七总甙均能抑制NIH3T3细胞增殖,并呈一定浓度依赖性。与同浓度组三七比较,三七总甙效果尤为显著。结论:三七具有抗肝纤维化活性作用,其主要化学物质基础可能是三七总甙     

几丁糖作用后不同来源成纤维细胞分泌功能的变化

目的 :探讨几丁糖对异常瘢痕成纤维细胞生物学活性的作用。　方法 :以瘢痕疙瘩及增生性瘢痕成纤维细胞为研究对象 ,正常皮肤成纤维细胞为对照 ,用组织块法进行不同标本成纤维细胞体外培养。分别用 3 H 脯氨酸掺入法检测几丁糖对不同来源成纤维细胞合成及分泌胶原功能的影响 ,定量酶联检测试剂盒测定转化生长因子 β1(TGF β1 )、成纤维细胞生长因子 AB(FGF AB)、白细胞介素 8(IL 8)等。　结果 :几丁糖对不同来源成纤维细胞分泌胶原、TGF β1 、FGF AB等的功能均呈剂量依赖性抑制 ,对IL 8则增加 ,且对各组的影响无显著差异 (P >0 .0 5 )。　结论 :几丁糖可以抑制瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成及分泌功能 ,有望在异常瘢痕的防治中发挥重要作用     

川芎嗪抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成

目的：研究川芎唪治疗增生性瘢痕的机制。方法：对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,通过ＭＴＴ法检测成纤维细胞细胞的增殖生,用羟脯氨酸（ＨＰ）比色法测定细胞胶中成含量。结果：ＭＴＴ法显示川芎嗪增生性瘢痕成纤维细胞的增殖活性,可以减少成纤维细胞的胶原合成使细胞形态学发生改变。结论;川芎唪可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖及胶原合成。     

粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的：探讨粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用及其在瘢痕治疗中的意义。方法：采用瘢痕成纤维细胞培养和兔实验性瘢痕模型。观察粉防己碱对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响。结果：体外试验显示。粉防己碱各实验组^3H-TdR掺入率和^3H-脯氨酸掺入率均较对照组明显降低。呈剂量依赖关系。动物实验透射电镜表明,对照组瘢痕成纤维细胞中有丰富,高度发达的粗面内质网;粉防己碱治疗组瘢痕成纤维细胞内粗面内质网明显减少。提示其蛋白合成与分泌功能受抑。结论：粉防己碱对瘢痕成纤维细胞增殖,胶原合成与分泌功能具有抑制作用。     

PDGF-AB对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨ＰＤＧＦ－ＡＢ促进伤口愈合的作用机理及其在瘢痕增生中的作用。方法：取体外培养的人正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＴＳＦＢ）测定生长曲线,用ＭＴＴ法观察ＰＤＧＦ－ＡＢ对其增殖影响的差异。结果：两种细胞生长曲线存在差异,ＰＤＧＦ－ＡＢ对两种成纤维细胞增殖均有明显刺激作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异。结论：ＰＤＧＦ－ＡＢ可能通过刺激成纤维细胞增殖促进伤口愈合,同时在瘢痕增生性疾病中起     

PDGF-AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩影响的差异

目的：研究血小板衍生生长因子(PDGF)—AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞一胶原网(FPLC)收缩影响的差异,探讨PDGF—AB促进伤口愈合的作用机制及其在瘢痕增生中的作用．方法：取体外培养的人正常皮肤(NsFb)及增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),建立成纤维细胞—胶原网模型,比较PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩影响的差异．结果：PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩均有明显促进作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异．结论：PDGF—AB可能通过刺激伤口收缩促进创面愈合,同时可能在瘢痕挛缩性疾病中起重要作用。     

Cyr61在增生性瘢痕及正常皮肤中的差异表达和意义

目的探讨Cyr61在增生性瘢痕成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞中表达差异及其意义。方法取自愿捐献的增生性瘢痕及正常皮肤标本,采用组织块法进行原代成纤维细胞培养。采用实时定量PCR法及细胞免疫荧光法检测Cyr61在两种细胞中的表达。结果在m RNA水平及蛋白水平上,Cyr61在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达均高于正常皮肤成纤维细胞。结论 Cyr61在增生性瘢痕形成过程中可能存在一定的作用,可能通过调节胶原代谢以及调节成纤维细胞增殖影响增生性瘢痕的形成。     

汉防抑制甲素对瘢痕成纤维细胞增殖作用的影响的实验研究

目的比较汉防抑制甲素与激素对瘢痕成纤维细胞增殖作用的差异，为汉防抑制甲素应用于临床提供依据。方法利用瘢痕成纤维细胞体外培养模型，采用MTT记数、流式细胞仪记数厦HE染色法，比较并分析了汉防抑制甲素与激素对瘢痕成纤维细胞增殖活力的影响。结果同在IC50时，两者对瘢痕成纤维细胞的抑制作用相似。均可使生长曲线压低，群体倍增时间延长，G2-M期细胞明显增多厦时相时间明显延长，此外汉防抑制甲素还可使S期明显延长。结论汉防抑制甲素具有与糖皮质激素相似的抑制瘢痕成纤维细胞增殖的作用。     

积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞增殖与Smad7蛋白的影响

目的研究积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及对Smad7蛋白的影响.方法用组织块法培养人瘢痕成纤维细胞.应用流式细胞术、免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot技术结合光密度扫描分析,观察积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期、凋亡和Smad7在细胞中的定位及其mRNA和蛋白含量的改变.结果积雪草甙可抑制瘢痕的成纤维细胞从S期进入M期,增加瘢痕成纤维细胞中Smad7 mRNA和蛋白的含量.结论积雪草甙抑制瘢痕的作用可能部分通过增加抑制性Smad7蛋白.     

rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构影响的实验研究

目的研究细胞因子rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响,以探讨细胞因子对增生性瘢痕的作用机理.方法对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,采用透射电子显微镜观察、分析,以研究细胞因子rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响以及病理改变.结果加入rhIFN-a后细胞表现为生长趋势及增殖活性被明显抑制,部分细胞见空泡样及残体样结构,线粒体肿胀,嵴溶解,并出现细胞凋亡现象.结论细胞因子rhIFN-a对成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用,促进成纤维细胞凋亡.提示rhIFN-a是成纤维细胞负性调节因子,在增生性瘢痕的治疗中有一定的应用价值.