~（99m）Tc－新半乳糖白蛋白体外受体介导结合特性的研究

本文报道￣９９ｍＴｃ－新半乳糖白蛋白（￣９９ｍＴｃ－ＮＧＡ）与大鼠肝细胞膜进行体外结合试验。结果表明：￣９９ｍＴｃ－ＮＧＡ系与肝细胞膜上的高亲和力低容量（Ｋ＿１：８．４０８９×１０￣９Ｌ／ｍｏｌ；Ｒ＿１：１．７３５０×１０￣（－１２）ｍｏｌ／ｍｇ）和低亲和力高容量（Ｋ＿２：２．０８２７×１０￣８Ｌ／ｍｏｌ；Ｒ＿２：６．９５３０×１０￣（－１２）ｍｏｌ／ｍｇ）２个结合位点相结合，其结合表现出高特异性、可饱和性及对细胞膜蛋白浓度的线性依赖性，具备受体介导结合的基本特征。￣（９９ｍ）Ｔｃ－ＮＧＡ是一个很有希望的肝受体显像剂。     

α1受体激动对浦肯野纤维延迟后除极的双相效应

用乙酰毒毛旋花子甙元（ＡＳ）２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ中毒诱发绵羊心室浦肯野纤维产生延迟后除极（ＤＡＤ）作为模型，在心得安５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ作用下观察苯肾上腺素（ＰＥ）１０－７ｍｏｌ／Ｌ、３×１０－７ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ等不同浓度对ＤＡＤ幅值的影响。６０ｍｉｎ持续灌流中，前２０ｍｉｎＤＡＤ幅值分别增加８％、９％和１０％（每一浓度ｎ＝８，Ｐ＜０．０５）；随后４０ｍｉｎ内，ＤＡＤ幅值呈剂量依赖性减小，ＰＥ１０－７ｍｏｌ／Ｌ减值６．９±０．２％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０５），ＰＥ３×１０－７ｍｏｌ／Ｌ减值１３．９±０．１％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０１），ＰＥ１０－６ｍｏｌ／Ｌ减值１８．６±０．２％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０１）。ＰＥ的作用可被哌唑嗪５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ所阻断，提示ＰＥ作用经α１受体兴奋引起。     

示波极谱法测定人发中镁

在３％乙二胺、１．０×１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ铬黑Ｔ、５；０×１０￣（－２）ｍｏｌ／ＬＫＯＨ及０．１５ｍｏｌ／ＬＮａＦ溶液中用示波极谱法测定人发中镁，检出限为０；００５ｍｇ／Ｌ线性范围为０．０１ｍｇ／Ｌ～０．６ｍｇＩＬ，变异系数为３．７％～４．３％，样品加标回收率为９５．８％～１０４．１％。方法简便快速，仪器设备便宜，适于基层运用。     

促性腺激素释放激素类似物那法瑞林对人乳腺癌细胞BCaP—37生？…

目的：观察促性腺激素释放激素（ＬＨＲＨ）类似物那法瑞林对体外培养的人乳腺癌细胞ＢＣａＰ－３７生长的影响。方法：培养的ＢＣａＰ－３７细胞。经下列条件作用４ｄ后进行细胞计数：（１）加入１０＾－５￣１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ的那法瑞林;（２）加入１０＾－７￣１０＾－１０ｍｏｌ／Ｌ的雌二醇（Ｅ２）;（３）在含１０＾－８ｍｏｌ／ＬＥ２的条件下,加入１０＾－５￣１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ的那法瑞林或他莫昔芬;（４）加入１     

关附甲素对心肌慢反应动作电位的影响

关附甲素（ＧＰＡ）８．６μｍｏｌ／Ｌ使缺Ｏ＿２、高Ｋ￣＋和酸中毒的豚鼠乳头肌动作电位幅值（ＡＰＡ）和最大除极速率（Ｖ＿（ｍａｘ））下降，ＡＰＤ＿９０显著缩短，ＥＲＰ／ＡＰＤ＿９０比值增大，ＧＦＡ２６μｍｏｌ／Ｌ可使高Ｋ￣＋除极所致的慢反应ＡＰＡ和Ｖ＿（ｍａｘ）降低，ＧＦＡ５０μｍｏｌ／Ｌ时使兔窦房结动作电位０相去极化速率（ＭＲＤ）、舒张期去极化速率（ＲＤＰ）和平均复极化速率（ＭＲＲ）降低，自发活动频率（ＳＦＦ）减慢，并使舒张期去极化时间（ＤＤＴ）及动作电位时程（ＡＰＤ）延长。     

大黄素对大鼠腹腔巨噬细胞生物合成白三烯B4的影响

研究不同浓度大黄素对大鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）生物合成白三烯Ｂ_４（ＬＴＢ_４）的影响。结果表明大黄素在５×１０￣（－７）～５×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内（ｎ＝４），可抑制大鼠腹腔ＭΦＬＴＢ_４的生物合成，量效关系良好（ｒ＝０．９５９１，ｎ＝４）；大黄素对大鼠腹腔ＭΦ生物合成ＬＴＢ_４的抑制率范围为２８．４±６．７％～８８．０±５．３％。大黄素５×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ，相当于氟灭酸１×１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ抑制作用；ＬＴＢ_４的半数抑制率（ＩＣ_（５０））为１．２×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ。总之ＥＭＯ的抗炎机制与抑制ＭΦ生物合成ＬＴＢ_４有关。     

示波极谱直接测定人发中的铅

在０．１０ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）盐酸－０．４０ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）六次甲基四胺－５．０×１０￣（－３）ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）邻菲啉－５．０×１０￣（－３）ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）硫氰酸钾底液中用示波极谱法测定铅的方法，峰电位为－０．７０Ｖ（ＶＳ，ＳＣＥ）左右，线性范因为０．０４－１．６μｇ·ｍｌ￣（－１），检出限为０．００８μｇ·ｍｌ￣（－１）。该方法简便、快速、选择性好，直接应用于人发中铅的测定；变异系数为２．４－５．９％；样品加标回收率为９７．４－１０５％。     

黄腐酸和超氧阴离子对软骨细胞内钙离子浓度的影响

目的：为探讨病区黄腐酸（ＦＡ）和活性氧自由基可能引起大骨节病，我们测定了在ＦＡ和超氧自由基（）作用下，软骨细胞内钙离子浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ）随时间的变化。方法：应用萤光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ测定细胞内钙离子浓度并用下式计算：［Ｃａ￣（２＋）］ｉ＝Ｋｄ（Ｆ－Ｆ＿（ｍｉｎ））／（Ｆ＿（ｍａｘ）－Ｆ）。结果：作用４５ｍｉｎ后，［Ｃａ￣（２＋）］ｉ从１．６２×１Ｏ￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ升达１．１８×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ；ＦＡ作用４ｈ后，［Ｃａ￣（２＋）］ｉ从３．７８×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ升达５．５１×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ。结论：说明ＦＡ与·有相似的促进［Ｃａ￣（２＋）］ｉ升高的作用，［Ｃａ￣（２＋）］ｉ的升高将造成软骨细胞损伤，而软骨坏死是大骨节病的重要病理特症之一。     

人源性抗EB病毒IgG/VCA抗体在SCID小鼠中的诱导

将人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）和腹腔淋巴结淋巴细胞（ＰＬＮＬ）移植入严重联合免疫缺陷疾病（ＳＣＩＤ）小鼠腹腔，２个月后，小鼠血清内产生人源性ＩｇＧ和抗ＥＢ病毒壳抗原ＩｇＧ抗体（ＩｇＧ／ＶＣＡ）。比较结果显示，用Ｂ９５－８细胞作为ＶＣＡ来源所诱导的实验组１０只小鼠，ＩｇＧ／ＶＣＡ阳性率为７０％（７／１０），对照组为１７％（２／１２）。ＩｇＧ／ＶＣＡ的几何平均滴度（ＧＭＴ）和血清ＩｇＧ浓度，在１４只ＳＣＩＤ－ＰＬＮＬ小鼠中为１∶１０８和（９６．２±５６．４）μｇ／Ｌ；在８只ＳＣＩＤ－ＰＢＬ小鼠为１∶７．８和（１３．８４±６．０）μｇ／Ｌ。该结果提示，ＳＣＩＤ－ＰＬＮＬ小鼠较ＳＣＩＤ－ＰＢＬ小鼠更适合用于人源性特异ＩｇＧ的诱导。     

离体贤灌流FK506肾素性机理的初步研究

利用离体大鼠肾灌流模型研究了ＦＫ５０６的肾毒性，ＦＫ５０６的灌流浓度分别为１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ、及１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ。结果显示：１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ的ＦＫ５０６灌流后肾灌流阻力、灌流量及肾小球滤过率均有明显改变，１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ及４５ｍｉｎ三指标分别上升或下降２２．２％￣３２．５％，与基础值及对照组相比均有显著性差异（Ｐ〈０．０１￣Ｐ〈０．００１）。结果同时显示短期灌     

抗人SOCS1单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定

目的锏备高效价的抗人SOCS1单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以重组GST-SOCS1融合蛋白免疫BALB／c小鼠,取其脾细胞与Sp2／0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗SOCS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA及Westernb1ot鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、Ig亚类及相对亲和力。结果筛选到一株可稳定分泌抗人SOCS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。Westernb1ot显示在相对分子量为6．0×10^4处出现特异性反应带。杂交瘤细胞培养上清效价为1：1280,腹水效价为1;102400,Ig亚类为IgG1,相对亲和力达1．17×10^7L／mol。结论成功制备出能特异性识别人SOCS1的单克隆抗体,为进一步研究人体细胞因子信号传导的负反馈调节及SOCS1在微生物感染中的免疫调节作用奠定了基础。     

THE DEVELOPMENT OF MONOCLONAL ANTIBODY AGAINST rhTNF AND ITS CURATIVE EFFECTS ON E. Coli INFECTED MICE

INTRODUCTIONTumornecrosisfactor(TNF),producedbymacrophagesandotherimmunocompetentcellsduringinfection,hasbeenidentifiedasapolypeptidecytokine(1)'TNFplayedanimportantroleinvariouspatho-physiologicalprocesses,andmediatedseveraldisorderswhenproducedinexcess(2).AhigherTNFlevelinpatientswithsepticshockusuallycausetissueinjury(1)-Recently,antagoniststoTNFa,suchasantibodyagainstTNFa(3~5),haveshowntobebeneficialinthetreatmentofbacteriainfection.Therefore,thereisaneedfordevelopmentofanti-TN…     

A human monoclonal antibody HMD4 against ovarian carcinoma associated antigen.

Lymphocytes from regional lymph nodes of patients with ovarian carcinoma were immortalized by fusing them with a nonsecreting cell line of murine myeloma (Sp2/0-Ag14). The fusion rate was 0-87.5%. By early cloning and recloning, a hybrid cell line, named HMD4, was established. It has stably secreted human IgG for more than 15 months. Chromosome analysis showed the characteristics of human-mouse hybridoma. The cells of HMD4 were injected into the abdominal cavities of nude mice and 2-3 weeks later large quantities of ascites were obtained. Human IgG of lambda light chain was detected and purified from the ascites. The specificity of HMD4 human McAb was tested by ABC or PAP immunoperoxidase stainings of paraffin-embedded tissue sections, cryostat sections, cell smears of various tissues and different cancer cell lines. 60.5% (26/43) of epithelial ovarian cancers was positive, while nonepithelial ovarian cancers, most cancers from other organs and almost all nonmalignant and normal tissues were negative. The molecular weight of the antigen recognized by HMD4 was 55 KDa determined by Western blotting. The problems of maintaining the IgG secreting function of human-mouse hybridoma and its screening were also discussed.

     

抗卵巢上皮癌人单克隆抗体HMD_4的制备及其特性的研究

本文报道用人-鼠杂交技术制备出一株分泌人IgG型单克隆抗体的人-鼠杂交瘤细胞系,通过早克隆化和反复再克隆化等使该株细胞已稳定分泌15月以上。染色体核型分析符合人-鼠杂交瘤特征。免疫印迹和免疫组化等方法证实该抗体可识别分子量为55KDa的卵巢上皮癌相关抗原,命名为HMD_4。本文还对如何保持种间杂交瘤分泌功能和人单抗筛选中如何克服内源性Ig问题进行了讨论。     

基因重组人粒细胞集落细胞刺激因子单克隆抗体的制备及特性

采用高效免疫方法，利用rhG－CSF免疫BALB／C小鼠，经过两次融合制备了3株抗rhG－CSF的单克隆抗体，分别命名为1H11、2B3、2C3；抗体类型均为IgG2a。免疫印迹试验证明为特异性抗G－CSF的单克隆抗体；单抗相加试验和单抗竞争试验表明3株单抗针对G－CSF两具不同的抗原决定簇；中和试验表明2B、2C3识别的位点与G－CSF刺激NFS－60细胞增殖活性有关。     

分泌抗人聚白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其应用

Two hybridomas which secrete monoclonal antibody (McAb) against polymerized human serum albumin (PHSA) were obtained by the fusion of SP2/0 myeloma cell with immune murine spleen cells. One of the McAb was identified as mouse IgG1, the other was IgM. The titers of these purified McAb was 1:16 364 with passive hemagglutination assay (PHA). After labelling with 125I by chloramine-T method, a solid phase radioimmune assay for detecting the PHSA has yielded in 21 positive results, out of 126 HBsAg positive sera, but 53 HBsAg negative sera were all negative. At present we have not seen any report of PHSA present in circulation. PHSA may be as a bridge bind receptor between HBV and hepatocytes and then initiate infection. The appearance of PHSA in HBsAg positive sera could be the result of the damage of the liver during virus infection. More work should be done for this explanation.     

B细胞系特异性单克隆抗体ZCH－4－2E8的制备鉴定及其初步应用

本文报告一种识别Ｂ细胞系白血病相关抗原的鼠单克隆抗体ＺＣＨ－４２Ｅ８（ＩｇＧ１），免疫印迹试验示其所识别的抗原分子量为２４５ｋｄ。经多种细胞系、正常外周血细胞成分、骨髓单个核细胞、胚胎肝、脾、胸腺和１３８例急、慢性白血病细胞的鉴定结果表明，２Ｅ８为Ｂ细胞系特异性单抗，其反应谱与ＣＤ１９类似，但其尚能识别早至１８周龄的胚胎脾（Ｂ）细胞，阳性率为３１．９％（ＣＤ１９为０％）。作者认为：２Ｅ８是一种能用于分化早期Ｂ细胞系急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的诊断和急性未分化型白血病（ＡＵＬ）鉴别诊断的Ｂ细胞系特异性单抗。     

鼠抗早孕因子单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备鼠抗早孕因子（EPF）单克隆抗体,纯化并进行鉴定。方法用重组EPF免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术获得抗EPF杂交瘤细胞株,注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水型单抗,Protein-G亲和层析纯化后,SDS-PAGE电泳鉴定其纯度,用间接ELISA法测抗体效价,ELISA相加试验测定抗原表位,用Western blotting鉴定其特异性,并进行类及亚类、细胞染色体核型分析。结果筛选出2株具有较高活性和良好稳定性的分泌抗EPF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水的抗体效价均高于2×10^-5,2株单抗均为IgG类IgG1亚类,轻链类型均为κ,细胞核型分析符合杂交瘤细胞特征,特异性良好,2株单抗有不同的抗原表位。SDS-PAGE电泳显示纯化后抗体有较高的纯度,Western blotting表明其与EPF抗原有特异结合性。结论成功制备2株具有较高活性的鼠抗EPF单克隆抗体,为建立检测EPF方法奠定了良好的基础。     

抗重组人白细胞介素12单克隆抗体的制备及其生物学特性

以纯化的重组人白细胞介素12（rhIL-12）蛋白为抗原,制备具有生物活性的rhIL-12单克隆抗体（McAb）,并对其特性进行研究鉴定,为肿瘤及免疫相关性疾病的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。方法： 以纯化的rhIL-12p70免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术,用间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及多次克隆化,培养制备杂交瘤细胞系,用clutathione sepharose 4B进行纯化。采用间接ELISA及Western blotting等方法对McAb的Ig亚类（型）腹水效价及特异性进行鉴定。结果：建立了3株持续分泌rhIL-12p70　McAb的杂交瘤细胞株,3株细胞染色体数目均为100条左右,证实为杂交瘤细胞,所分泌的抗体为2株IgG1亚类及1株IgG2a亚类,轻链属k型,小鼠腹水效价测定分别为1∶5.9×106、1∶2.9×10⁷、1∶3.6×10⁷,亲和力依次为EM5>EM6>EV9。结论：成功地制备了3株能稳定分泌抗rhIL-12p70的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高。     

Anti-FD4 idiotypic antibody mimicking human gastric cancer-associated antigen.

Rabbits were immunized with the Fab fragment of a murine monoclonal antibody (McAb) PD4 against human gastric cancer to produce anti-PD4-idiotypic antibody (alpha PD4-Ab2). The alpha PD4-Ab2 could not only competitively inhibit binding of McAb PD4 to gastric cancer cell MGC803, but also induce delayed-type hypersensitivity (DTH) to MGC803 in mice. Spleen cells of mice immunized with alpha PD4-Ab2 were fused with myeloma cell SP2/0 to form hybridoma secreting Ab3 which could be bound to target cell MGC803. McAb C7-Ab3, one of the Ab3, could selectively react with a 40 kD tumor-associated antigen located on MGC803 cell membrane, as well as McAb PD4. The results indicate that alpha PD4-Ab2 possesses determinants (internal image antigen) similar to those on MGC803, and could mimic human gastric cancer-associated antigen.