磁珠双阳性分选法在阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓CD34+CD59+细胞体外扩增的应用

应用磁珠双阳性分选法在体外扩增阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患的CD34 CD59 细胞，为实现PNH患进行临床自体骨髓移植(ABMT)或自体外周血干细胞移植(APBSCT)奠定基础。流式细胞术分选虽然经常用于细胞纯化，但难于满足大规模临床细胞分选的需要。本研究利用免疫磁珠系统，应用隔夜孵育法去除第一次分选时CD34 细胞吸附的磁珠，经过两次磁珠双阳性分选，从PNH患骨髓中分离出足够数量的CD34 CD59 细胞，用于体外培养扩增。结果显示：磁珠双阳性法分选的CD34 CD59 细胞与磁珠—流式细胞术二步分选法比较，在细胞生存、增殖、扩增及形成造血集落形成单位(CFU)的能力上均无显性差异。结论：磁珠双阳性分选法可能推广应用于其它双阳性或多阳性细胞的分离纯化，尤其是造血干／祖细胞的分离纯化。     

甲状腺功能与良、恶性乳腺疾病

甲状腺激素影响着组织的发育和生长,可能还会改变雌激素,催乳激素及化学致癌物的代谢作用,从而防御瘤细胞的生长发育。还有一种假设认为甲状腺激素可拮抗雌激素对乳腺组织的激增效应。据说甲状腺机能亢进即是一种防御措施,它通过增加性类固醇激素结合蛋白、降低雌激素对乳房组织的活性以及增加雌酮-雌二醇的代谢作用以减弱雌激素等作用来抵抗乳腺癌的发生。相反,甲状腺机能低下时,乳房上皮组织可能对雌激素、催乳激素和致癌物趋于敏感,进而卵巢也对促性腺激素的刺激更敏感,从而导致雌激素分泌增加。因而,甲状腺机能低下被认为是对乳腺癌的生长,转移     

SARS冠状病毒核壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备严重急性呼吸道综合征(SARS)冠状病毒(CoV)核壳(N)蛋白单克隆抗体,为寻求SARS早期诊断的方法及深入研究SARS疾病提供有力的工具。方法以重组SARS—CoVN蛋白免疫小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法制备单克隆抗体。通过间接酶联免疫分析、间接免疫荧光、免疫双向扩散等方法鉴定抗体的特异性、亲和力、类型及亚类、配对效果等。结果共获得15个阳性克隆,其中10个与天然SARS-CoV呈阳性反应。10株单抗的相对亲和常数在108～109mol／L^-1之间;10株中有1株为IgG2b。、1株为IgG3,其余均为IgG1;10株单抗中有8株与12种肺炎相关的病原体无交叉反应,1株与流感病毒A、B,副流感病毒有交叉反应,1株与流感病毒A、B有交叉反应;10株单抗中的5株可形成5种配对,其中两种配对用于检测重组SARS病毒N蛋白,灵敏度可达1μg/L。结论获得了特异性针对SARS冠状病毒N蛋白的单克隆抗体,并初步建立了检测SARS-CoVN蛋白的酶联双抗体夹心法,为SARS的早期诊断、蛋白质组学的研究奠定了基础。     

ER和PR在甲状腺乳头状癌的表达及意义

目的 探讨雌激素受体（ER）、孕激素受体(PR)在甲状腺乳头状癌中的表达以及ER、PR与肿瘤生物学特征的关系。方法 取新鲜甲状腺乳头状癌标本69例,结节性甲状腺肿7例,用免疫酶组织化学方法检测ER、PR的表达。分析受体与肿瘤生物学特征的关系。结果 在甲状腺乳头状癌中ER和PR的表达率分别为52.17%和46.38%,结节性甲状腺肿没有ER和PR表达,ER和PR的表达与患者性别、肿瘤大小以及MACIS评分无关,但是PR和肿瘤浸润甲状腺包膜以及淋巴结转移成正相关（P＜0.05）,ER与患者年龄成负相关。结论 甲状腺乳头状癌中ER、PR的表达高于结节性甲状腺肿,甲状腺乳头状癌中PR的表达反应肿瘤浸润甲状腺包膜和淋巴结转移情况,ER表达随着患者年龄增加而减少。     

FSH和LH在不同发育阶段大鼠睾丸中的表达

ＦＳＨ和ＬＨ在不同发育阶段大鼠睾丸中的表达陈雪雁李劲松陈克铨陈实平刘平王莎丽阎月明程凯金淑梅邹宇红（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室）促性腺激素（ＦＳＨ和ＬＨ）通常被认为只在垂体前叶合成和分泌，另有报导认为它们也能在性腺和乳腺中...     

在半固体培养基上制备单克隆抗体

最近,我们在半固体培养基上成功地建成了抗人体绒毛膜促性腺激素(hCG)及抗人体黄体生成素(hLH)两种单克隆抗体细胞株,制备了相应的单克隆抗体。其要点是将融合细胞悬浮于15ml IMDM培养基(含53.3％胎牛血清、2.66％HAT、8×10~6胸腺细胞/ml、133μg/ml脂多糖)中,再与25ml含2％甲基纤维素的IMDM培养基充分混匀,分装至直径35mm的塑料平皿中,每皿1.5ml,37℃,CO_2孵箱内培养。1周后,即可在每个平皿上看到近百个细胞集落。将各细胞集落挑至96孔板中再培养,并用ELISA检测,就可筛选出阳性克隆,进而建立单抗细胞株。与目前沿用的有限稀释法比较,半固体培     

人卵泡刺激素单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用(论著摘要)

人卵泡刺激素（ｈＦＳＨ）是脑垂体前叶促性腺细胞分泌的一种糖蛋白激素，是调节男女生殖机能的重要物质。制备抗ｈＦＳＨ单克隆抗体对于生殖生物学的基础研究及临床应用具有重要的意义。采用甲基纤维素半固体培养基法制备单抗。以常规方法进行初次免疫和加强免疫，融合前...     

在甲基纤维素半固体培养基上制备抗人黄体生成素McAb

自Khler和Milstein创建单克隆抗体(McAb)技术以来.该技术不断发展完善,其应用亦日益广泛。人黄体生成素(hLH)是脑垂体前叶促性腺细胞分泌的一种糖蛋白激素,是调节男女生殖机能的重要物质。目前,国外一些实验室已建成了hLH的单克隆抗体细胞株,并应用于临床诊断,但国内尚未见报道。本研究旨在建立自己的hLH McAb细胞株,以满足国内临床和计划生育科研工作的需要。     

红细胞分化相关蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

应用杂交瘤技术和电泳迁移超滞留技术筛选和制备红细胞分化相关蛋白单克隆抗体，以阐明此类蛋白的生物学功能。用杂交瘤技术制备了５８０株针对终末分化期红细胞，包括人胚肝中，晚幼红细胞和氯高铁血红素诱导分化的人红白血病细胞核蛋白的单克隆抗体。     

抗肿瘤坏死因子单克隆抗体对细菌感染小鼠的治疗效果

z肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor，TNF）是具有广泛生物学活性的多肽细胞因子，低水平时参与机体的免疫防御，高水平时会给机体造成严重损害，在感染性疾病的发生、组织损伤、炎症、致死性休克等许多方面起重要介质作用。本研究试图通过用抗一TNF单抗中和因细菌感染而过多产生的TNF来降低机体内TNF水平，以观察抗一TNF单抗的治疗效果。材料和方法一、实验材料昆明小鼠购自中国医学科学院实验动物研究所，大肠杆菌由本院细菌室提供，抗-TNF单克隆抗体及TNFELISA检测试剂盒（可测到10pg／ml的低限）均为自产。二、实验方法1．…